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红景天苷调节Nrf2/ARE信号通路对氧糖剥夺再灌注诱导的神经元铁死亡的影响
1
作者 韩婕 智勇 《河北医药》 CAS 2024年第1期30-33,38,共5页
目的 探讨红景天苷调节核因子-E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导的神经元铁死亡的影响。方法 将小鼠神经元细胞HT22随机分为对照组、模型组、红景天苷低剂量(20μmol/L)组、红景天苷高剂量(40... 目的 探讨红景天苷调节核因子-E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导的神经元铁死亡的影响。方法 将小鼠神经元细胞HT22随机分为对照组、模型组、红景天苷低剂量(20μmol/L)组、红景天苷高剂量(40μmol/L)组、红景天苷(40μmol/L)+ML385(Nrf2抑制剂,1μmol/L)组,除对照组外其余组细胞均进行OGD/R诱导。通过MTT和CCK-8法检测各组细胞活性和增殖能力;铁试剂盒检测细胞内铁浓度;商品化试剂盒检测各组细胞GPX4、SOD、MDA、ROS活性;透射电镜观察大鼠神经元超微结构的变化;Western Blot检测GPX4、COX2、ACSL4及NRF2/ARE信号通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组神经元细胞超微结构被破坏,线粒体缩小,嵴消失,外膜破裂,细胞活力和增殖率、GPX4、SOD活性、Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达显著降低,Fe^(2+)浓度、MDA、ROS活性、COX2、ACSL4蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,红景天苷低、高剂量组细胞超微结构明显改善,细胞活力和增殖率、GPX4、SOD活性、Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达显著升高,Fe^(2+)浓度、MDA、ROS活性、COX2、ACSL4蛋白表达显著降低(P<0.05)。与红景天苷高剂量组比较,红景天苷+ML385组显著逆转了上述指标变化。结论 红景天苷能够激活Nrf2/ARE信号通路抑制OGD/R诱导的神经元铁死亡。 展开更多
关键词 红景天苷 nrf2/ARe 氧糖剥夺再灌注 神经元 铁死亡
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：10
2
作者 尹曼雪 林玉婕 +3 位作者 黄文治 刘四军 周晓兰 吴庆光 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期67-74,共8页
目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导P... 目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导PC12细胞氧化损伤,并以终体积分数为15%的ASRCRS低、中、高剂量组进行干预。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;荧光倒置显微镜观察细胞形态;试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及活性氧(ROS)分布水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),血红素加氧酶-1(HO-1),SOD1蛋白的表达水平。结果:选择300μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激24 h作为氧化损伤造模的条件。与正常组比较,H_(2)O_(2)模型组细胞形态异常,细胞存活率显著降低(P<0.01);LDH,MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低,ROS在细胞内分布增加;Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),Keap1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ASRCRS不同剂量组均能改善细胞形态,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡;显著提高SOD酶活力(P<0.01),抑制LDH的释放(P<0.01)和ROS的生成,降低MDA含量(P<0.01);明显上调Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),显著下调Keap1蛋白表达水平(P<0.01)。结论:当归-川芎含药血清可能是通过上调Nrf2的蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路,增强细胞抗氧化损伤能力,抑制细胞凋亡,从而发挥保护H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的作用。 展开更多
关键词 当归 川芎 含药血清 氧化损伤 核转录因子e2相关因子2(nrf2)/抗氧化反应元件(ARe)信号通路
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参苓白术散调节Nrf2/ARE通路改善高尿酸血症型少弱精子症小鼠的生精功能 被引量：3
3
作者 江晓翠 田代志 +5 位作者 刘祺 姜兴宇 余何 蔚文垚 萧闵 曹继刚 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期22-30,共9页
目的:探讨参苓白术散对高尿酸血症(HUA)型少弱精子症异病同治的作用及机制。方法:将32只雄性昆明种(KM)小鼠随机分为空白组(n=6)、模型组(n=6)、参苓白术散高剂量组(n=7)、参苓白术散低剂量组(n=7)和非布司他组(n=6)。除空白组外,其余... 目的:探讨参苓白术散对高尿酸血症(HUA)型少弱精子症异病同治的作用及机制。方法:将32只雄性昆明种(KM)小鼠随机分为空白组(n=6)、模型组(n=6)、参苓白术散高剂量组(n=7)、参苓白术散低剂量组(n=7)和非布司他组(n=6)。除空白组外,其余各组连续腹腔注射氧嗪酸钾悬液(600 mg·kg^(-1))7 d。造模完成后,参苓白术散高、低剂量组分别给予参苓白术散20.14、10.07 g·kg^(-1)灌胃,非布司他组给予非布司他0.25 g·kg^(-1)灌胃,空白组和模型组给予同体积生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续14 d后取材。生化法检测血清尿酸(UA),睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);苏木素-伊红(HE)染色法观察睾丸组织病理学变化并进行生精功能评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA完整性;原位末端标记法(TUNEL)检测睾丸细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测睾丸组织Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测睾丸组织Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清UA显著升高(P<0.01),睾丸生精功能、精子密度和活动率均显著下降(P<0.01),精子拖尾率、睾丸细胞凋亡率均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,参苓白术散高剂量组小鼠上述指标均有明显改善(P<0.05,P<0.01),且睾丸组织Keap1、Bax、Caspase-3表达量明显降低,Nrf2、HO-1、Bcl-2表达量明显升高(P<0.05,P<0.01),Keap1 mRNA水平明显降低(P<0.05,P<0.01),Nrf2、HO-1 mRNA水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:参苓白术散能明显改善HUA型少弱精子症,其机制可能与Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路有关。 展开更多
关键词 参苓白术散 少弱精子症 高尿酸血症 异病同治 核因子e_(2)相关因子2(nrf2)/抗氧化反应元件(ARe)
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Nrf2 /ARE 信号通路对快速老化小鼠认知功能和神经炎症的影响
4
作者 徐玉珠 步玮 +2 位作者 杨玲 王锦阳 任慧玲 《河北医药》 CAS 2024年第21期3205-3211,共7页
目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对快速老化小鼠(SAMP8)认知功能和神经炎症的影响。方法选用4个月大的雄性抗快速老化系小鼠1(SAMR1)及SAMP8小鼠,颅脑海马区域注射慢病毒介导的Nrf2-ShRNA或对照的GFP,靶... 目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对快速老化小鼠(SAMP8)认知功能和神经炎症的影响。方法选用4个月大的雄性抗快速老化系小鼠1(SAMR1)及SAMP8小鼠,颅脑海马区域注射慢病毒介导的Nrf2-ShRNA或对照的GFP,靶向性下调目的基因Nrf2在小鼠体内的表达。小鼠随机分为4组:R1+GFP组、R1+Nrf2 ShRNA组、P8+GFP组、P8+Nrf2 ShRNA组,每组10只。新异物体识别实验、水迷宫实验和避暗实验等检测小鼠的认知能力,免疫组织荧光染色法检测微管结合蛋白2(MAP2)和目的基因Nrf2在小鼠海马区的表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测4组小鼠海马组织中Nrf2、白介素-6(IL-6)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果新异物体识别实验中,9个月龄快速老化SAMP8实验小鼠与同月龄的SAMR1小鼠相比,在分辨新物体的能力方面表现较差(P<0.05),而2组SAMP8小鼠相比,在瞬时的1 h测试时,2组小鼠对新物体的认知指数差异无统计学意义(P>0.05),然而在进行延迟记忆的24 h的时间测试时,P8+Nrf2 ShRNA组小鼠的认知指数出现明显下降(P<0.05)。在Morris水迷宫测试中,SAMP8组小鼠与同一年龄段的SAMR1组小鼠相比,逃避潜伏期延长(P<0.05),而2组SAMR1小鼠在逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),老化的SAMP8小鼠在空间探索实验中的穿越平台次数较SAMR1组明显降低,其中,P8+Nrf2 ShRNA组的小鼠穿越平台次数下降更为严重(P<0.05),而2组SAMR1组的小鼠相比,其穿越平台次数并无显著变化(P>0.05)。在避暗实验中,9月龄的SAMP8组小鼠比同月龄的SAMR1组小鼠电击次数增加,P8+Nrf2 ShRNA组小鼠的电击次数比P8+GFP组增加更明显,且此组小鼠的逃避潜伏时呈中等程度下降趋势(P<0.05)。在免疫组织荧光染色中,SAMP8小鼠的海马区MAP2阳性面积比SAMR1小鼠显著降低(P<0.05),相比于对照的P8+GFP组小鼠,试验组的P8+Nrf2 ShRNA小鼠在海马CA3区的MAP2表达强度和阳 展开更多
关键词 nrf2/ARe信号通路 阿尔茨海默病 炎性因子 认知功能
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基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性肝损伤小鼠抗氧化应激的作用机制 被引量：10
5
作者 许皖 李娜 +4 位作者 柳海艳 修琳琳 于雪 陈绍红 钟赣生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期37-44,共8页
目的:观察葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性肝病的改善作用,为临床用药提供科学依据,并为开展其他酒精性相关疾病的研究提供思路和借鉴。方法:采用一次性灌胃给予56%(V/V)红星二锅头酒(12 mL·kg^(-1))建立小鼠急性酒精性肝损伤模... 目的:观察葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性肝病的改善作用,为临床用药提供科学依据,并为开展其他酒精性相关疾病的研究提供思路和借鉴。方法:采用一次性灌胃给予56%(V/V)红星二锅头酒(12 mL·kg^(-1))建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,120只雄性ICR小鼠按体质量随机分成空白组、模型组、水飞蓟宾组、葛花组、枳椇子组、葛花-枳椇子1∶1组、葛花-枳椇子1∶2组、葛花-枳椇子2∶1组,每组15只。各给药组按10 mL·kg^(-1)预防性灌胃相应药物3 d,除空白组外,其余各组小鼠按12 mL·kg^(-1)分别灌胃给予二锅头酒,于酒后12 h处死小鼠,并观察药物对小鼠肝功能、抗氧化应激能力的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化响应元件(ARE)信号通路相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测相关各指标mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平,肝组织中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量显著升高(P<0.01);谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.01),Keap1 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),Nrf2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,葛花-枳椇子2∶1组小鼠ALT、AST和ALP水平显著减低(P<0.01),肝脏组织中MDA、ROS水平均显著减低(P<0.01),GSH、SOD水平均显著升高(P<0.01);肝脏脂肪变损伤均减轻,显著上调Nrf2 mRNA及蛋白表达(P<0.01),显著下调Keap1mRNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:葛花、枳椇子及其配伍组合对小鼠急性酒精性肝损伤有一定的预防作用,其机制可能与调控肝脏内Keap1/Nrf2/ARE信号通路,恢复并上调由乙醇所破坏的肝脏氧化平衡有关,从而有效遏制酒精性肝病的发展。 展开更多
关键词 葛花 枳椇子 急性酒精性肝损伤 抗氧化 Kelch样eCH相关蛋白1(Keap1)/核因子e2相关因子2(nrf2)/抗氧化响应元件ARe信号通路
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基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路的天然产物在神经保护方面的研究进展 被引量：5
6
作者 刘圆圆 彭婷 +1 位作者 姚娟 刘永琦 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期262-273,共12页
阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等神经退行性疾病的病理表现为异常蛋白质的聚集和积累、小胶质细胞激活和线粒体功能障碍等,最终导致神经元结构或功能逐渐丧失,并随着时间的推移而恶化,这些病理过程与活性氧(ROS)的产生有关,ROS会... 阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等神经退行性疾病的病理表现为异常蛋白质的聚集和积累、小胶质细胞激活和线粒体功能障碍等,最终导致神经元结构或功能逐渐丧失,并随着时间的推移而恶化,这些病理过程与活性氧(ROS)的产生有关,ROS会引起氧化应激并破坏蛋白质、脂质和DNA,引发细胞和组织损伤。Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路是维持机体氧化还原平衡、防御氧化应激损伤的主要机制,Nrf2通过与细胞质中Keap1的解离和核转移,激活ARE相关的一系列抗氧化基因的表达,以保护机体免受氧化损伤,因此Keap1/Nrf2/ARE信号通路激活剂的发现与研究对神经退行性疾病的防治具有重要意义。天然产物因有显著的生物活性、不良反应小等特点,是新药研发的宝库。研究表明,多种天然产物能够激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路,发挥神经保护作用。根据天然产物的结构特点,可分为黄酮类、萜类及挥发油类、多酚类和苯丙素类等。该文概述了Keap1/Nrf2/ARE信号通路调节疾病的内在机制,并总结了基于该信号通路的天然产物在神经保护方面的研究进展,以期为研发防治神经退行性疾病的临床药物提供参考和依据。 展开更多
关键词 Kelch样eCH相关蛋白1(Keap1)/核因子e_(2)相关因子2(nrf2)/抗氧化反应元件(ARe) 信号通路 神经退行性疾病 氧化应激 天然产物
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