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人参皂甙与免疫核糖核酸对癌基因表达的协同抑制作用 被引量:209
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作者 杨桦 金壮 +1 位作者 赫甡 马占宝 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第4期255-258,共4页
应用斑点杂交技术对癌细胞(Lc株)的两种癌基因(c-Ha-ras和cmyc)进行检测,证明这两种基因表达可被人参皂甙和免疫核糖核酸的协同作用所抑制。单独用人参皂甙处理细胞,两种癌基因无明显受抑制现象;单独用免疫核糖核酸作用2 h,然后除去作... 应用斑点杂交技术对癌细胞(Lc株)的两种癌基因(c-Ha-ras和cmyc)进行检测,证明这两种基因表达可被人参皂甙和免疫核糖核酸的协同作用所抑制。单独用人参皂甙处理细胞,两种癌基因无明显受抑制现象;单独用免疫核糖核酸作用2 h,然后除去作用因素,对两种癌基因表达亦无明显影响。但用免疫核糖核酸作用2 h,除去作用因素培养24 h之后再加入人参皂甙继续作用一定时间,则对两种基因的表达均产生明显的抑制作用并呈现时间和剂量效应。RNA的Northern blot分析表明转录物的结构在处理前后未发生改变。 展开更多
关键词 人参 免疫核糖核酸 基因 皂甙
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黄芪和当归对血管平滑肌细胞表型标志基因表达和细胞增殖的影响 被引量:25
2
作者 李琦 温进坤 韩梅 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2004年第2期147-150,共4页
为了观察黄芪和当归对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响 ,采用体外培养的血管平滑肌细胞 ,以碱性成纤维细胞生长因子诱导其表型转化和增殖 ,在此基础上 ,通过Northern和Western印迹法检测平滑肌细胞表型标志基因表达的变化 ,研究黄... 为了观察黄芪和当归对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响 ,采用体外培养的血管平滑肌细胞 ,以碱性成纤维细胞生长因子诱导其表型转化和增殖 ,在此基础上 ,通过Northern和Western印迹法检测平滑肌细胞表型标志基因表达的变化 ,研究黄芪和当归注射液对碱性成纤维细胞生长因子上述效应的抑制作用。结果发现 ,碱性成纤维细胞生长因子可明显下调分化型标志基因平滑肌α 肌动蛋白的表达 ,上调去分化型标志基因平滑肌胚胎型肌球蛋白重链和骨桥蛋白表达 ,诱导原癌基因c jun表达及促进血管平滑肌细胞DNA合成。黄芪和当归可上调分化型标志基因的表达活性 ,下调去分化型标志基因的表达 ,不同程度地抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞表型转化和DNA合成 ,有效抑制血管平滑肌细胞增殖 ,其作用机制可能与抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的c jun基因表达有关。二者相比 ,当归的作用大于黄芪。结果提示 ,黄芪和当归可从多位点上拮抗碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞表型转化及细胞增殖。 展开更多
关键词 中药学 黄芪和当归对血管平滑肌细胞的作用 northern印迹分析 细胞表型转化 细胞增殖
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胚胎及新生期蛋鸡和肉鸡垂体生长激素基因表达的比较研究 被引量:19
3
作者 赵茹茜 李四桂 +2 位作者 陈伟华 雷治海 陈杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期5-10,共6页
本文采用Northern杂交分析法研究了 14胚龄、18胚龄、1日龄、5日龄及 10日龄肉鸡和蛋鸡垂体生长激素的基因表达 ,同时采用放射免疫分析法 (RIA)测定了垂体内生长激素的含量。结果表明 :14胚龄时在肉鸡和蛋鸡垂体总RNA中均未检测出生长激... 本文采用Northern杂交分析法研究了 14胚龄、18胚龄、1日龄、5日龄及 10日龄肉鸡和蛋鸡垂体生长激素的基因表达 ,同时采用放射免疫分析法 (RIA)测定了垂体内生长激素的含量。结果表明 :14胚龄时在肉鸡和蛋鸡垂体总RNA中均未检测出生长激素mRNA(GHmRNA)。从 18胚龄开始可检测出一条 0 8kb的GHmRNA ,并且垂体GHmRNA水平的发育性变化在品种间呈现不同的规律 :蛋鸡从 18胚龄到 10日龄垂体GHmRNA水平不断升高 ,日龄间差异显著 (P <0 0 5)。肉鸡从 18胚龄到出壳 1日龄 ,GHmRNA水平有较大幅度的升高 ,但从 1日龄至 10日龄维持在 1日龄时的水平。 18胚龄肉鸡垂体GHmRNA水平显著高于蛋鸡 (P <0 0 5) ,并在 1日龄和 5日龄均维持在较高水平 ,与生长速度呈正相关 ;而 10日龄时垂体GHmRNA水平的品种差异发生逆转 ,蛋鸡GHmRNA水平反而高于肉鸡。垂体GH含量的发育性变化趋势与垂体GHmR NA水平相一致 ,10日龄时蛋鸡垂体GH含量显著高于肉鸡 (P <0 0 5) ,与生长速度呈相反的趋势。 展开更多
关键词 蛋鸡 肉鸡 生长激素 垂体 基因表达 胚胎发育期 新生期 品种 比较研究
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丁基苯酞对局灶型脑缺血再灌大鼠脑hsp70mRNA和c-fos时相表达的影响 被引量:21
4
作者 熊杰 冯亦璞 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期401-406,共6页
用原位杂交法和Northern印迹法,研究NBP对暂时性大脑中动脉阻断大鼠不同再灌期脑内hsp70mRNA和cfos的时相表达的影响。发现缺血后再灌1h,在缺血侧有较明显的hsp70mRNA表达。再灌3h,6h和1... 用原位杂交法和Northern印迹法,研究NBP对暂时性大脑中动脉阻断大鼠不同再灌期脑内hsp70mRNA和cfos的时相表达的影响。发现缺血后再灌1h,在缺血侧有较明显的hsp70mRNA表达。再灌3h,6h和12h,表达逐渐加强。在缺血前10min和再灌即刻ipNBP10mg·kg-1和20mg·kg-1均能明显降低再灌6h和12hhsp70mRNA的表达。cfos基因在再灌05h在缺血侧有清晰表达,再灌3h达峰值,再灌6h表达降低。ipNBP10mg·kg-1(缺血前10min)可明显降低再灌1h和3h时cfos的表达。Northern印迹法显示了同样的结果。提示NBP降低基因表达的作用可能是通过减轻缺血再灌引起的组织损伤来实现的。 展开更多
关键词 丁基苯酞 脑缺血 再灌注 基因表达 热休克蛋白
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精制血府胶囊对缺氧缺糖心肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响 被引量:21
5
作者 王伟 陈可冀 +2 位作者 史大卓 钟蓓 朱应葆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第11期670-672,共3页
应用血清药理学、反转录PCR(RT-PCR)、Northern杂交等方法比较研究了精制血府胶囊、血府逐瘀胶囊、硫氮酮对缺氧缺糖培养心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达及乳酸脱氢酶(LDH-L)、肌酸激酶(CK)... 应用血清药理学、反转录PCR(RT-PCR)、Northern杂交等方法比较研究了精制血府胶囊、血府逐瘀胶囊、硫氮酮对缺氧缺糖培养心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达及乳酸脱氢酶(LDH-L)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(GOT)释放的影响。结果表明:三种药物均可显著提高缺氧缺糖心肌细胞NOSmRNA的表达(P<0.01),且以精制血府胶囊最显著(P<0.01)。三种药物均可显著降低缺氧缺糖心肌细胞LDH-L、CK、GOT的释放(p<0.01)。精制血府胶囊和硫氮 酮抑制LDH-L的释放较血府逐瘀胶囊更为显著(P<0.01)。提示:三种药物均具有明显的心肌细胞保护作用,以精制血府胶囊和硫氮 酮为优,这种保护作用与其刺激心肌细胞生成一氧化氮(NO)有一定关系。 展开更多
关键词 精制血府胶囊 心肌细胞 一氧化氮合酶
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肿瘤坏死因子在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用及其机制 被引量:21
6
作者 申传安 柴家科 +1 位作者 姚咏明 盛志勇 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2002年第6期340-343,共4页
目的 :研究肿瘤坏死因子 (TNF)在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用 ,并探讨其可能的机制。方法 :大鼠背部 30 %总体表面积 度烫伤后 ,立即腹腔注射内毒素 (6 mg/ kg)制成烧伤脓毒症动物模型 ,随机分为 2、6、12和 2 4小时... 目的 :研究肿瘤坏死因子 (TNF)在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用 ,并探讨其可能的机制。方法 :大鼠背部 30 %总体表面积 度烫伤后 ,立即腹腔注射内毒素 (6 mg/ kg)制成烧伤脓毒症动物模型 ,随机分为 2、6、12和 2 4小时组 ,另设对照组 ,每组 15只。称重、有氧孵育大鼠伸趾长肌 ,利用高效液相色谱法测定肌组织总蛋白和肌纤维蛋白的降解率 ;并通过 Northern杂交检测伸趾长肌内泛素和 C2 m RNA的表达变化 ;放射免疫分析方法测定大鼠血浆内 TNFα含量变化。结果 :脓毒症大鼠伤后 12小时及 2 4小时较对照组伸趾长肌重量显著降低 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 1) ;脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白、肌纤维蛋白降解率在2小时较对照组即显著升高 (P均 <0 .0 1) ,12小时达高峰 ,分别升高 5 8%和 335 % ,2 4小时仍高于对照组(P均 <0 .0 1) ;脓毒症大鼠伸趾长肌内泛素 m RNA(2 .4 kb)和 C2 m RNA的表达在各时间点均较对照组显著升高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 1) ,其中 12小时升高最显著 ;脓毒症大鼠血浆内 TNFα浓度在各时间点均显著高于对照组 (P均 <0 .0 1)。伸趾长肌肌纤维蛋白降解率与血浆内 TNFα浓度呈显著正相关 (r=0 .96 4 8,P<0 .0 1)。结论 :体内 TNFα分泌增多是脓毒症大鼠骨骼肌蛋白 。 展开更多
关键词 烧伤 脓毒症 骨骼肌 蛋白代谢 肿瘤坏死因子 泛素 核糖核酸印迹 大鼠
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硒和维生素E对白血病细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响 被引量:13
7
作者 张敬 张军 +2 位作者 赵燕 石红军 蔡梅雪 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期324-326,共3页
目的 : 研究 Se和 VE对白血病细胞凋亡及 c- Myc基因表达的影响。方法 : 体外培养白血病细胞株 HL- 6 0、K5 6 2 ,培养时分别添加 Se(8μmol/L)和 VE(1 0 0 μmol/L)。利用 DNA凝胶电泳技术及 Northern杂交技术检测细胞凋亡和癌基因... 目的 : 研究 Se和 VE对白血病细胞凋亡及 c- Myc基因表达的影响。方法 : 体外培养白血病细胞株 HL- 6 0、K5 6 2 ,培养时分别添加 Se(8μmol/L)和 VE(1 0 0 μmol/L)。利用 DNA凝胶电泳技术及 Northern杂交技术检测细胞凋亡和癌基因表达。结果 : Se和 VE均能诱导白血病细胞 HL- 6 0和 K5 6 2细胞凋亡。VE(1 0 0 μmol/L)能够抑制 HL- 6 0细胞中 c- Myc基因的表达 ,结果有显著性 ;VE却不能抑制 K5 6 2细胞内 c- Myc基因的表达。相反 ,Se(8μmol/L)不能够抑制 HL-6 0细胞中 c- Myc基因的表达 ,却能抑制 K5 6 2细胞内 c- Myc基因的表达 ,结果有显著性。结论 : 抑制 c- Myc基因的表达 ,诱导白血病细胞凋亡是 Se、VE抑制白血病细胞增殖的重要途径之一。对于髓系和非髓系白血病细胞 ,Se与 VE对 c- Myc基因的表达的影响迥然不同 ,提示二者的作用机制是不同的。 展开更多
关键词 白血病 细胞凋亡 northern印迹 维生素E
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成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证 被引量:16
8
作者 高杰 杨彤涛 +4 位作者 裘秀春 鱼兵 韩建伟 范清宇 马保安 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期561-565,共5页
背景与目的:microRNA(miRNA)是一类非编码蛋白,并参与转录后调节的单链小分子RNA(约20~25个碱基),对基因表达具有重要调控作用,与肿瘤的发生存在着密切的关系。本研究拟克隆成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中miRNA,并对部分功能性基因进行验... 背景与目的:microRNA(miRNA)是一类非编码蛋白,并参与转录后调节的单链小分子RNA(约20~25个碱基),对基因表达具有重要调控作用,与肿瘤的发生存在着密切的关系。本研究拟克隆成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中miRNA,并对部分功能性基因进行验证。方法:以SOSP-9607细胞作为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200nt),多聚腺苷酸化和5′连接子连接后,通过RT-PCR进行反转录和扩增,克隆到pCR4-TOPO载体上得到大约109bpDNA片段,测序后经过生物信息学分析确定miRNA的表达情况。根据当前miRNA的研究现状,在克隆到的miRNA中选取部分功能性miRNA和新发现miRNA,合成相应探针后与从SOSP-9607细胞、HeLa细胞和成骨肉瘤组织中分离出的小片段RNA进行Northern印迹验证。结果:克隆测序后得到182个克隆体,经生物信息学分析发现有47个miRNA(25种),其中含有23种已知的miRNA和2种Nature杂志上预测的miRNA(miR-165和miR-166)。选取的三条实体瘤相关的miRNA(miR-21、miR-20a、miR-17-5p)以及两条预测的miRNA进行Northern印迹验证,miR-21、miR-20a、miR-17-5p在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中均表达,预测的miR-165和miR-166在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中亦均表达,但miR-166在HeLa细胞中没有表达。结论:克隆了SOSP-9607细胞中的miRNA,并验证了部分功能性miRNA的表达,提示miRNA与肿瘤发生可能有密切的关系。 展开更多
关键词 骨肉瘤 SOSP-9607细胞系 MICRORNA 筛选 克隆 northern blot
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糖皮质激素对大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响及其机制探讨 被引量:14
9
作者 申传安 柴家科 +1 位作者 姚咏明 盛志勇 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2002年第7期428-431,共4页
目的 :观察地塞米松对大鼠骨骼肌蛋白代谢的影响 ,并探讨其可能的机制。方法 :将大鼠随机分为5组 :1正常对照组 (A组 ) ;2皮下注射地塞米松 5 mg/kg组 (B组 ) ;3皮下注射地塞米松 15 mg/kg组(C组 ) ;4糖皮质激素受体拮抗剂 RU 384 86 (1... 目的 :观察地塞米松对大鼠骨骼肌蛋白代谢的影响 ,并探讨其可能的机制。方法 :将大鼠随机分为5组 :1正常对照组 (A组 ) ;2皮下注射地塞米松 5 mg/kg组 (B组 ) ;3皮下注射地塞米松 15 mg/kg组(C组 ) ;4糖皮质激素受体拮抗剂 RU 384 86 (10 mg/kg)灌胃组 (D组 ) ;5皮下注射地塞米松 (15 mg/kg)前 2小时 RU 384 86 (10 mg/kg)灌胃组 (E组 )。大鼠离体有氧孵育伸趾长肌 ,用高效液相色谱法测定总蛋白酪氨酸(Tyr)和肌纤维蛋白三甲基组氨酸 (3MH )降解率 ;用核糖核酸印迹法检测伸趾长肌泛素 m RNA的表达变化。结果 :B组大鼠伸趾长肌 Tyr及 3MH降解率均较 A组升高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 1) ;特别是 C组 Tyr和 3MH降解率较 A组分别升高约 4 9%和 12 3% (P均 <0 .0 1) ,且伴有泛素 m RNA表达显著升高 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;D组大鼠骨骼肌蛋白降解率较 A组无显著变化。 E组大鼠骨骼肌 Tyr和 3MH降解率较C组大鼠分别下降 2 2 %和 4 2 % ,泛素 m RNA的表达较 C组也显著降低 ,差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :地塞米松能通过糖皮质激素受体在基因水平增强能量依赖泛素蛋白酶体途径的活性 ,导致大鼠骨骼肌总蛋白、特别是肌纤维蛋白降解率升高 ,此作用能被糖皮质激素受体拮抗剂 RU 384 展开更多
关键词 骨骼肌 蛋白降解 糖皮质激素受体拮抗剂 泛素 核糖核酸印迹 大鼠
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拟南芥硫氧还蛋白M1型基因(AtTRX m1)与环境逆境之间的关系 被引量:14
10
作者 夏德习 管清杰 +6 位作者 金淑梅 李宇佳 梁涵 张欣欣 西内俊策 高野哲夫 柳参奎 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第1期21-26,共6页
硫氧还蛋白家族是约12 kD的小分子蛋白质,含有高度保守的活性反应位点WCG/PPC,催化硫醇—二硫键相互交换,调节细胞内的氧化还原作用。在本研究中,通过RT-PCR法获得目的基因拟南芥硫氧还蛋白M1型基因 (AtTRX m1, GenBank Accession No. A... 硫氧还蛋白家族是约12 kD的小分子蛋白质,含有高度保守的活性反应位点WCG/PPC,催化硫醇—二硫键相互交换,调节细胞内的氧化还原作用。在本研究中,通过RT-PCR法获得目的基因拟南芥硫氧还蛋白M1型基因 (AtTRX m1, GenBank Accession No. At1g03680)。通过Northern杂交分析拟南芥悬浮细胞系在 100 mmol/L NaCl、10mmol/L NaHCO3、50μmol/L ABA、10mmol/L H2O2 等逆境处理下mRNA表达水平的变化和硫氧还蛋白 M1 型转基因植株对NaCl、NaHCO3盐及ABA逆境的抗性分析,表明硫氧还蛋白M1型基因与生物环境胁迫有一定的相关性,尤其是氧化胁迫,能够增强植物对逆境的耐受力。从而为进一步研究硫氧还蛋白基因家族与逆境之间的相关作用奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥(哥伦比亚型) 硫氧还蛋白M1型基因 非生物逆境 转基因 northern杂交
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干旱胁迫下不同抗旱性小麦BADH表达及甜菜碱含量的变化 被引量:13
11
作者 李永华 王玮 +1 位作者 杨兴洪 邹琦 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期425-430,共6页
根据已发表的几种植物的甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的AA同源保守区设计了1对简并引物,通过RT PCR方法从小麦叶片中扩增出BADHcDNA的中间序列,共72 3bp ,编码2 4 0个氨基酸。Northern杂交表明,扬花期遭受轻度水分胁迫时,抗旱性较强(旱丰97... 根据已发表的几种植物的甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的AA同源保守区设计了1对简并引物,通过RT PCR方法从小麦叶片中扩增出BADHcDNA的中间序列,共72 3bp ,编码2 4 0个氨基酸。Northern杂交表明,扬花期遭受轻度水分胁迫时,抗旱性较强(旱丰970 3)与抗旱性较弱(山农2 15 95 3)的2小麦品种叶片中BADH基因的表达没有明显差异;灌浆期中度水分胁迫时,其表达水平明显增加,且旱丰970 3的表达量略高于山农2 15 95 3;乳熟期较严重土壤水分胁迫条件下,抗旱性强的品种BADH的表达量明显高于抗旱性弱的品种。3个生育期中,BADH活性和甜菜碱含量的变化与BADH表达呈现相同的趋势,均是先增加后降低,旱丰970 3的BADH活性与甜菜碱含量均高于山农2 15 95 3。这可能是旱丰970 3对干旱胁迫具有较强抗性的主要原因之一。 展开更多
关键词 小麦 干旱胁迫 BADH northern杂交 甜菜碱
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盐碱胁迫对水稻幼苗中基因差异表达的影响(英文) 被引量:13
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作者 谢国生 柳蔘奎 +1 位作者 高野哲夫 张端品 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期129-133,共5页
为了阐明已分离的盐碱适应性相关基因(Liuetal, 2000)的表达特性,以14d叶龄的水稻品种日本晴幼苗为材料,分别经NaHCO3 (60mmol/L,pH8. 50) )处理6h、12h、24h、48h, 及不同pH值(pH4. 50, 6. 50, 8. 50, 10. 50)的NaCl(100mmol/L), Na... 为了阐明已分离的盐碱适应性相关基因(Liuetal, 2000)的表达特性,以14d叶龄的水稻品种日本晴幼苗为材料,分别经NaHCO3 (60mmol/L,pH8. 50) )处理6h、12h、24h、48h, 及不同pH值(pH4. 50, 6. 50, 8. 50, 10. 50)的NaCl(100mmol/L), NaHCO3 (60mmol/L)和Na2CO3 (30mmol/L)处理24h, 以分析时间效应及浓度与pH值间的联合效应. 结果表明,与对照(H2O, pH6. 50)相比较,NaHCO3 (60mmol/L)处理6h、12h、24h、48h后,mitochondrialAT Pase6×103的转录本分别提高2. 73、0. 82、0. 01和1. 79倍;cAPX转录本在24h和48h较对照提高1. 17和1. 49倍;处理6h后CA和HSP90基因表达受显著抑制;UDPG-GT增强表达的滞后期为6h;thioredoxin受NaHCO3轻微抑制.不同pH值和24h处理条件下,NaHCO3和Na2CO3显著促进mitochondrialATPase6×103基因表达.CA基因表达受Na+、HCO-3 和pH的共同影响;而thioredoxin主要受Na+和pH的双重影响; cAPX也表现出类似趋势.UDPG-GT在Na2CO3处理中表达量最高,HSP90的表达随pH的升高而降低. 展开更多
关键词 水稻 盐碱胁迫 基因表达 northern杂交
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丹参、生地黄中miRNA在人体血液中分离、鉴定及表达分析 被引量:16
13
作者 王宇亮 王颖芳 +5 位作者 杨泽民 王光昀 韩彬 贾真 陈艳芬 胡旭光 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第19期121-124,共4页
目的:通过Northern印迹杂交(Northern blot)验证丹参、生地黄中微小核糖核酸(miRNA)的存在,及水煎服用后通过消化道可进入人体血液中。方法:根据已知丹参、生地黄miRNA序列设计合成10条(丹参4条,地黄6条)特异的LNA反义寡核苷酸探针,并... 目的:通过Northern印迹杂交(Northern blot)验证丹参、生地黄中微小核糖核酸(miRNA)的存在,及水煎服用后通过消化道可进入人体血液中。方法:根据已知丹参、生地黄miRNA序列设计合成10条(丹参4条,地黄6条)特异的LNA反义寡核苷酸探针,并用地高辛标记。在室温25℃条件下,用通用植物miRNA提取试剂盒和血液(液体样本)miRNA提取试剂盒,并按照试剂盒提供的操作步骤提取新鲜丹参、地黄以及服用丹参、生地黄水煎剂后人体血液的Total RNA,在变性条件下(15%的尿素变性)PAGE电泳分离小RNA,转膜、交联、杂交和检测。结果:Northern blot表明,丹参只有2种miRNA即miR156和miR157表达,生地黄miR5140,miR5139,miR 5138,miR 5137,miR 5142,miR 5141等6种miRNA均有表达。丹参处理组无miRNA表达,生地黄处理组中有miR5140,miR5137,miR5141等3种miRNA表达。结论:验证了丹参、生地黄中miRNA的存在,初步证明了生地黄经水煎后部分miRNA可通过消化道进入人体血液中,为研究miRNA在中药疗效的作用机制提供了新的思路和策略。 展开更多
关键词 丹参 生地黄 MIRNA northern blot
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p5CS基因在蒙农杂种冰草植株中的表达及耐盐性研究 被引量:12
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作者 王桂花 米福贵 +3 位作者 刘娟 董淑君 霍秀文 杨宏雁 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期33-36,共4页
为尽快培育出适宜我国干旱荒漠地区大面积推广的耐盐冰草新品种,试验以经PCR和Southern blot杂交检测的含有p5CS基因的蒙农杂种冰草植株为材料,用Northern blot检测目的基因在转化植株中的表达;并用1.5%NaCl盐溶液进行胁迫处理确定转化... 为尽快培育出适宜我国干旱荒漠地区大面积推广的耐盐冰草新品种,试验以经PCR和Southern blot杂交检测的含有p5CS基因的蒙农杂种冰草植株为材料,用Northern blot检测目的基因在转化植株中的表达;并用1.5%NaCl盐溶液进行胁迫处理确定转化植株的耐盐性。结果表明:转基因冰草植株与DIG标记探针杂交呈现明显的杂交带;盐胁迫下,游离脯氨酸含量增加较快,质膜透性、丙二醛含量增加较小,SOD活性较高。说明p5CS基因能够在冰草基因组的转录水平上表达,表达植株的耐盐性明显增加。 展开更多
关键词 P5CS基因 Nouthem blot 盐胁迫 耐盐性
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棉花纤维特异表达基因Gh F1的分离及鉴定 被引量:9
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作者 孙杰 李艳军 +1 位作者 李园莉 汪若海 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期259-263,共5页
采用mRNA荧光差异显示结合cDNA末端快速扩增技术,克隆了一个棉纤维特异表达基因的全长cDNA,命名为GhF1,该cDNA全长622 bp,含有一个编码66个氨基酸蛋白的开放阅读框。Southern杂交分析表明该基因在陆地棉(Gossypium hirsutumL.)中含有两... 采用mRNA荧光差异显示结合cDNA末端快速扩增技术,克隆了一个棉纤维特异表达基因的全长cDNA,命名为GhF1,该cDNA全长622 bp,含有一个编码66个氨基酸蛋白的开放阅读框。Southern杂交分析表明该基因在陆地棉(Gossypium hirsutumL.)中含有两个拷贝。Northern杂交分析表明该基因在棉花纤维细胞特异表达,在纤维发育过程中,GhF1转录产物的累积主要发生在纤维细胞发育的早期阶段。尽管未发现该基因与已知基因有任何同源性,但其分布的组织特异性和表达的发育阶段性暗示该基因在纤维伸长中起作用。 展开更多
关键词 棉花 纤维特异基因 northern杂交
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大鼠心脏血压超负荷诱导左心室HSP70基因表达 被引量:15
16
作者 黄生宁 杨鸿 +4 位作者 张晨晖 温进坤 唐朝枢 汤健 周爱儒 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期333-337,共5页
本工作应用热休克蛋白70(HSP70)核酸分子杂交方法,测定了大鼠腹主动脉缩窄后左心室HSP70mRNA的水平。结果表明:大鼠腹主动脉缩窄后4h,动脉血压已明显升高,并持续在高水平上;大鼠左心室重/体重比在第三天开始... 本工作应用热休克蛋白70(HSP70)核酸分子杂交方法,测定了大鼠腹主动脉缩窄后左心室HSP70mRNA的水平。结果表明:大鼠腹主动脉缩窄后4h,动脉血压已明显升高,并持续在高水平上;大鼠左心室重/体重比在第三天开始增加,然后持续升高,第4周时比对照组增加59%;左心室HSP70mRNA在腹主动脉缩窄后4h已明显升高,1d,2d,1w均维持在高水平,1w后逐渐消失。实验结果提示:大鼠心肌负荷增加早期,左心室HSP70mRNA表达明显增加。 展开更多
关键词 心肌肥厚 热休克蛋白 基因转录
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用差减抑制杂交方法鉴定太谷核不育小麦花药败育过程中的特异表达基因 被引量:5
17
作者 常青山 周荣华 +1 位作者 余增亮 贾继增 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期30-33,共4页
以太谷核不育小麦败育花药为对照群体 ,可育花药为目标群体 ,进行抑制差减杂交。用经过败育花药差减的可育花药cDNA群体构建了一个差减抑制杂交文库。结果显示 ,插入片段的大小主要集中在 30 0~ 5 0 0bp之间。随机选取 8个克隆进行Nort... 以太谷核不育小麦败育花药为对照群体 ,可育花药为目标群体 ,进行抑制差减杂交。用经过败育花药差减的可育花药cDNA群体构建了一个差减抑制杂交文库。结果显示 ,插入片段的大小主要集中在 30 0~ 5 0 0bp之间。随机选取 8个克隆进行Northern杂交分析 ,结果其中 7个克隆在可育花药和不育花药之间的表达存在差异。对其中 16个插入cDNA片段测序后与GenBank同源性比较表明 ,共获得未重复序列 13条 ,占81% ,其中与已知功能基因同源的 3条 ,与EST库中的序列同源的 7条 ,新的cDNA片段 3条。 展开更多
关键词 差减抑制杂交方法 鉴定 太谷核不育小麦 花药 败育过程 特异表达基因 SSH技术 northern杂交
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超高产大豆(诱处4号)的某些特性研究 被引量:10
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作者 张性坦 赵存 +5 位作者 陈建南 柏惠侠 阙强 朱有光 林建兴 杨万桥 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期296-300,共5页
诱处4号是—个“超高产”大豆新品系,2年4个试验点平均亩产305.85kg。种子蛋白含量较高(47.58%)。人类必须氨基酸含量显著高于其它品种(系),如8101、合丰25等。此外,其常温生长及热激处理的叶片的总RNA与70kDa热激蛋白基因探针P17North... 诱处4号是—个“超高产”大豆新品系,2年4个试验点平均亩产305.85kg。种子蛋白含量较高(47.58%)。人类必须氨基酸含量显著高于其它品种(系),如8101、合丰25等。此外,其常温生长及热激处理的叶片的总RNA与70kDa热激蛋白基因探针P17Northern杂交呈阳性反应。种子贮藏蛋白中含有稳定的SH_1、SH_2、SH_3、SH_4蛋白带,而且经热激和干旱处理的种子,SH_1、SH_2蛋白带有所加强,这可能与诱处4号具有较强的抗高温、干旱及病毒感染的能力有关。 展开更多
关键词 大豆 热激蛋白 贮藏蛋白 杂交 种子生理
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基因表达常规分析方法概述 被引量:6
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作者 赵子轶 左天荣 韦平 《生物技术通讯》 CAS 2005年第2期204-206,共3页
在基因表达的分析中,RNA转录的稳态水平是检测细胞株和组织的基因表达活性的最方便的参数之一。本文概述了用于检测mRNA丰度的常规分析方法,即Northern印迹、RNase保护试验和实时定量PCR技术,特别是为对数量不多的基因进行表达情况的测... 在基因表达的分析中,RNA转录的稳态水平是检测细胞株和组织的基因表达活性的最方便的参数之一。本文概述了用于检测mRNA丰度的常规分析方法,即Northern印迹、RNase保护试验和实时定量PCR技术,特别是为对数量不多的基因进行表达情况的测定时提供了较为实用的方法。 展开更多
关键词 基因表达 northern印迹 RNase保护试验 实时定量PCR技术 分析方法
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3种mRNA检测方法比较 被引量:5
20
作者 李珊珊 任秀花 +1 位作者 闫爱华 方伟岗 《河南医科大学学报》 2000年第2期113-114,共2页
目的 :比较 3种检测mRNA表达的方法。方法 :采用Nothernblot,RT PCR ,原位杂交法检测基因mRNA的表达。结果及结论 :在使用Nothernblot杂交进行定量分析时 ,关键因素有 :①RNA的质量 ;②探针标记效率 ;③洗膜的控制。RT PCR检测很难用于... 目的 :比较 3种检测mRNA表达的方法。方法 :采用Nothernblot,RT PCR ,原位杂交法检测基因mRNA的表达。结果及结论 :在使用Nothernblot杂交进行定量分析时 ,关键因素有 :①RNA的质量 ;②探针标记效率 ;③洗膜的控制。RT PCR检测很难用于定量分析。原位杂交法可进行细胞内mRNA的定位分析但不能确定mRNA的绝对含量。将这些方法结合使用 ,可全面了解基因mRNA的表达。 展开更多
关键词 northern-blot RT-PCR 原位杂交 MRNA 肿瘤
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