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Environmental Stresses Modulate Abundance and Timing of Alternatively Spliced Circadian Transcripts in Arabidopsis 被引量:11
1
作者 Sergei A. Filichkin Jason S. Cumbie +6 位作者 Palitha Dharmawardhana Pankaj Jaiswal Jeff H. Chang Saiprasad G. Palusa A.S.N. Reddy Molly Megraw Todd C. Mockler 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期207-227,共21页
Environmental stresses profoundly altered accumulation of nonsense mRNAs including intron-retaining (IR) transcripts in Arabidopsis. Temporal patterns of stress-induced IR mRNAs were dissected using both oscillating... Environmental stresses profoundly altered accumulation of nonsense mRNAs including intron-retaining (IR) transcripts in Arabidopsis. Temporal patterns of stress-induced IR mRNAs were dissected using both oscillating and non-oscillating transcripts. Broad-range thermal cycles triggered a sharp increase in the long IR CCA1 isoforms and altered their phasing to different times of day. Both abiotic and biotic stresses such as drought or Pseudomonas syringae infection induced a similar increase. Thermal stress induced a time delay in accumulation of CCA1 14Rb transcripts, whereas functional mRNA showed steady oscillations. Our data favor a hypothesis that stress-induced instabilities of the central oscillator can be in part compensated through fluctuations in abundance and out-of-phase oscillations of CCA1 IR transcripts. Taken together, our results support a concept that mRNA abundance can be modulated through altering ratios between functional and nonsense/IR transcripts. SR45 protein specifically bound to the retained CCA1 intron in vitro, suggesting that this sp!icing factor could be involved in regulation of intron retention. Transcriptomes of nonsense-mediated mRNA decay (NMD)-impaired and heat-stressed plants shared a set of retained introns associated with stress- and defense-inducible transcripts. Constitutive activation of certain stress response networks in an NMD mutant could be linked to disequilibrium between functional and nonsense mRNAs. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS alternative splicing circadian clock intron retention nonsense-mediated mrna decaynmd environmental stress
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无义介导的mRNA降解机制及其在单基因遗传病中的作用 被引量:7
2
作者 郭文婷 徐汪洋 顾鸣敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期935-942,共8页
无义介导的mRNA降解(Nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是一种广泛存在于真核生物细胞中的mRNA质量监控机制。该机制通过识别和降解含有提前终止密码子(Premature translational-termination codon,PTC)的转录产物防止有潜在毒性的截... 无义介导的mRNA降解(Nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是一种广泛存在于真核生物细胞中的mRNA质量监控机制。该机制通过识别和降解含有提前终止密码子(Premature translational-termination codon,PTC)的转录产物防止有潜在毒性的截短蛋白的产生。据估计,约1/3的遗传性疾病是由提前终止密码子引起的,而NMD作用通常会改变某些遗传病的临床症状或遗传方式。文章主要综述了人体细胞中NMD对底物的识别及其作用机制,并以几种单基因遗传病为例探讨其对这些疾病表型的影响,表明NMD作用机制的进一步揭示将有助于单基因遗传病发病机制的阐明及治疗方法的改进。 展开更多
关键词 无义介导的mrna降解(nmd) 提前终止密码子(PTC) 截短蛋白 人类单基因遗传病
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核糖体蛋白S26的研究进展 被引量:4
3
作者 王枭宇 梁超 方肇勤 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第5期450-453,共4页
核糖体蛋白(ribosomal proteins,RPs)不仅在细胞内参与合成蛋白质,还具有多种核糖体外功能。核糖体蛋白S26(RPS26)位于核糖体小亚基,其功能障碍与多种疾病密切相关。近年来,有关RPS26的研究主要在参与核糖体装配等核糖体功能方面,以及... 核糖体蛋白(ribosomal proteins,RPs)不仅在细胞内参与合成蛋白质,还具有多种核糖体外功能。核糖体蛋白S26(RPS26)位于核糖体小亚基,其功能障碍与多种疾病密切相关。近年来,有关RPS26的研究主要在参与核糖体装配等核糖体功能方面,以及参与无义介导的mRNA降解机制(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)、直接或间接调控重要的抑癌基因p53表达等核糖体外功能方面。多篇报道证实RPS26基因突变可引起戴-布二氏贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA),而RPS26基因与Ⅰ型糖尿病的关系仍有争议。探索RPS26参与NMD机制在DBA发生中的作用有助于深入认识DBA发病机理,同时也可为完善SMaRT(spliceosome-mediated mRNA trans-splicing)技术等基因疗法提供帮助。此外,RPS26在癌症中的作用也值得进一步探索。 展开更多
关键词 核糖体蛋白S26(RPS26) 无义介导的mrna降解(nmd) P53蛋白 戴-布二氏贫血(DBA) Ⅰ型糖尿病(T1D) 癌症
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SMG1-UPF1-eRF1-eRF3复合体参与贾第虫无义介导的mRNA降解激活 被引量:4
4
作者 王美 吕佳 +4 位作者 石文鑫 柴杨丽 文建凡 张西臣 柴宝峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期519-529,共11页
无义介导的mRNA降解(NMD)是一种重要的真核生物mRNA质量监控途径。NMD可识别并降解含有提前终止密码子(PTC)的异常mRNA(PTC-mRNA)。但NMD途径对PTC-mRNA的识别和降解机制尚无阐明。蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)是一种寄生性的原生动物,... 无义介导的mRNA降解(NMD)是一种重要的真核生物mRNA质量监控途径。NMD可识别并降解含有提前终止密码子(PTC)的异常mRNA(PTC-mRNA)。但NMD途径对PTC-mRNA的识别和降解机制尚无阐明。蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)是一种寄生性的原生动物,进化上处于真核生物基部,对其NMD途径的研究有利于了解NMD途径的机制与进化。本研究通过双分子荧光互补实验、酵母双杂交实验和体外pull-down实验,分析了贾第虫的UPF1(GlUPF1)、SMG1(GlSMG1)和肽链释放因子(GleRF1、GleRF3)之间的相互作用关系。结果表明,贾第虫的肽链释放因子都能够与GlUPF1发生相互作用,且GlUPF1的CH结构域与GleRF3能够形成较稳定的复合体,而GlSMG1的激酶结构域PIKK能与UPF1的C端和N端结构域相互作用。进一步研究证实,GlSMG1的PIKK结构域能使GlUPF1两种截短体GlUPF1(1~500 aa)和GlUPF1(501~1 304 aa)发生磷酸化修饰,说明GlUPF1的N端和C端均有GlSMG1的磷酸化位点。进一步分析证实,T111是GlUPF1上的1个磷酸化位点。我们的研究结果表明,贾第虫NMD途径起始阶段,首先在mRNA的PTC处的核糖体上形成SMG1-UPF1-eRF1-eRF3(SURF)复合体,并且GlSMG1磷酸化修饰GlUPF1,由此激活NMD途径,可能招募XRN1和SKI7d等酶参与无义mRNA的降解。 展开更多
关键词 蓝氏贾第虫 无义介导的mrna降解 UPF1 SMG1 磷酸化修饰
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NMD作用的顺式调控元件 被引量:1
5
作者 黄峙 周天鸿 郭宝江 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1321-1326,共6页
真核生物利用无义介导的mRNA降解 (nonsense mediatedmRNAdecay ,NMD) ,对含有提前终止密码子(prematureterminationcodons ,PTC)的异常转录产物进行快速清除 ,防止毒害性截短蛋白 (truncatedproteins)的产生 ,是真核生物重要的mRNA监... 真核生物利用无义介导的mRNA降解 (nonsense mediatedmRNAdecay ,NMD) ,对含有提前终止密码子(prematureterminationcodons ,PTC)的异常转录产物进行快速清除 ,防止毒害性截短蛋白 (truncatedproteins)的产生 ,是真核生物重要的mRNA监视机制。NMD作用的启动与多种顺式调控元件有关 ,它们包括 :提前终止密码子的标识 ;PTC下游特定位置的序列元件 ,在酵母细胞称为DSE (downstreamsequenceelement,DSE) ,在哺乳动物细胞主要为内含子剪接依赖性序列元件 (exon exonjunction ,EEJ) ;稳定作用元件 (stabilizerelements ,STE)对NMD作用的阻抑调节 ;以及其他与NMD作用相关的序列 ,如 poly(A)延长、5′ UTR的uORF(upstreamopenreadingframe ,uORF)和程序化核糖体移码 (programmed 1ribosomalframeshift, 1PRF)信号序列等。 展开更多
关键词 无义介导的mrna降解 nmd 顺式调控元件 提前终止密码子(PTC) 截短蛋白
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NMD机制及其对人类遗传病的治疗意义 被引量:2
6
作者 胡建燃 李平 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第6期535-541,共7页
无义介导的mRNA降解机制(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是真核细胞内重要的RNA质量监控机制,能够识别并降解含有提前终止子(premature termination codon,PTC)的mRNA,避免细胞内积累有害的截短蛋白质产物。同时,NMD机制还调控着大... 无义介导的mRNA降解机制(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是真核细胞内重要的RNA质量监控机制,能够识别并降解含有提前终止子(premature termination codon,PTC)的mRNA,避免细胞内积累有害的截短蛋白质产物。同时,NMD机制还调控着大量不含PTC的mRNA稳定性,影响其蛋白质产物的含量。现综述了NMD机制的底物、调控因子及其对人类遗传病治疗意义的最新研究进展。 展开更多
关键词 无义介导的mrna降解机制(nmd) 真核生物细胞 提前终止子(PTC) 人类遗传病
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PTC下游翻译重启导致NMD途径的逃逸
7
作者 刘静 张智博 柴宝峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期168-174,共7页
无义突变介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)途径是真核生物体内一种重要的mRNA监督质控机制,它降解含有由无义突变、错误剪接、移码突变等产生的提前终止翻译密码子(premature translation termination codon,PTC)... 无义突变介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)途径是真核生物体内一种重要的mRNA监督质控机制,它降解含有由无义突变、错误剪接、移码突变等产生的提前终止翻译密码子(premature translation termination codon,PTC)的mRNA,从而防止这种mRNA翻译产生的截短型蛋白质对机体造成的伤害.研究发现,一些含有PTC的mRNA发生了NMD途径逃逸,但具体机制仍不清楚.本研究将成视网膜细胞瘤基因1(retinoblastoma gene 1,RB1)作为NMD途径的靶基因,构建mini-RB1基因,包括外显子1-14(cDNA)、内含子14-外显子15-内含子15和外显子16-27(cDNA)的三部分序列,将其构建到真核表达载体pcDNA 3.1(-)中.根据人类基因组突变数据库选择3个突变位点W99X、G310X和R467X,构建相应无义突变体.分别将mini-RB1基因野生型和无义突变体转入HeLa细胞进行表达.用qRT-PCR检测发现,W99X无义突变体与野生型相比mRNA的水平无显著差异.为了进一步证实mini-RB1(W99X)发生了NMD逃逸,利用NMD途径抑制剂放线菌酮和转录抑制剂放线菌素D,分别处理转入野生型的mini-RB1基因及其无义突变体mini-RB1(W99X)的哺乳动物细胞,发现mini-RB1基因无义突变体的mRNA水平与野生型无明显差异,说明含有W99X无义突变的mini-RB1基因的mRNA发生了NMD逃逸.Western印迹检测mini-RB1基因的蛋白质表达发现,在无义突变位点W99X下游重新起始了蛋白质的翻译,因此,PTC下游蛋白质翻译的重新起始可能是导致无义mRNA逃逸NMD途径监控的主要原因. 展开更多
关键词 成视网膜细胞瘤基因 无义突变介导的mrna降解途径 nmd逃逸 翻译重新起始
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关于强心苷类药物与无义介导的mRNA降解在抗肿瘤作用中的研究 被引量:1
8
作者 周旋 李娟 《临床与病理杂志》 2016年第9期1440-1444,共5页
强心苷是一类具有强心作用的甾体苷类化合物,其可抑制心肌细胞膜上的Na^+/K^+ATP酶,通过降低质膜两侧Na^+的浓度差以减小Na^+-Ca^(2+)交换的驱动力,使胞质内Ca^(2+)浓度增加,从而产生强心效应。强心苷与细胞膜上Na^+/K^+ATP酶特异性结合... 强心苷是一类具有强心作用的甾体苷类化合物,其可抑制心肌细胞膜上的Na^+/K^+ATP酶,通过降低质膜两侧Na^+的浓度差以减小Na^+-Ca^(2+)交换的驱动力,使胞质内Ca^(2+)浓度增加,从而产生强心效应。强心苷与细胞膜上Na^+/K^+ATP酶特异性结合,一方面可抑制其离子通道作用,另一方面在较低浓度下可调控下游信号通路,近来研究表明,其可能具有抗肿瘤效应。无义介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是近年发现的RNA监控机制,被认为与肿瘤的发生发展有关。本文旨在探讨强心苷、NMD与肿瘤之间的相互关系,为肿瘤的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 强心苷 Na+/K+ATP酶 无义介导的mrna降解
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八肋游仆虫中无义介导的mRNA降解途径因子的细胞共定位研究
9
作者 周宝春 王软林 柴宝峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期646-655,共10页
无义介导的mRNA降解途径(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)是一种mRNA质量监控机制,识别和降解含有提前终止密码子(premature termination codons, PTCs)的异常转录本,以保障基因的准确表达。到目前为止,有报道的从高等哺乳动物到果... 无义介导的mRNA降解途径(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)是一种mRNA质量监控机制,识别和降解含有提前终止密码子(premature termination codons, PTCs)的异常转录本,以保障基因的准确表达。到目前为止,有报道的从高等哺乳动物到果蝇、线虫、酵母和原生动物中,均有NMD调控途径,但其机制模型存在一定的差异。由于原生动物在生物的起源与进化上的特殊地位,以及所含的调控因子相对简单,在各种分子机制的研究领域成为热点材料。本文以八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)作为研究对象,从八肋游仆虫大核基因组数据库中,经过同源序列比对,分析鉴定到参与NMD途径的相关因子,包括无义mRNA识别因子poly(A)结合蛋白(poly(A) binding protein, PABP);启动NMD途径的核心因子上游移码蛋白1(up-frameshift 1, UPF1)和上游移码蛋白2(up-frameshift 2, UPF2);外显子连接复合体(exon junction complex, EJC)组分因子MAGO(Mago nashi)、Y14(Tsunagi或RMB8)、eIF4AIII(eukaryotic initiation factor 4A3)和UAP56(U2AF56 associated protein 56);降解无义mRNA的相关因子外切体(exosome)、脱帽酶(decapping mRNA 2, DCP2)、外切酶(5′-3′exoribonuclease 1, XRN1)和去腺苷酸化酶(PGK promoter directed over production, POP2)。其中,后3种蛋白质是mRNA加工小体(processing body, P-Body)的组分。通过荧光共定位分析,分别依次证实UPF1与UPF2之间、EJC组分因子之间和P-body组分因子之间的相互作用关系。随后,通过UPF2分别与MAGO和Y14的荧光共定位结果,推测八肋游仆虫依赖于EJC的NMD途径模型。通过UPF1分别与DCP2和外切体(exosome)的荧光共定位结果,推测了八肋游仆虫无义mRNA的两种降解方式:一种是无义mRNA被介导到P-body中分别被DCP2和POP2脱去5′端帽和3′端Poly(A)尾,随后在XRN1的作用下,沿着5′→3′的方向降解;另一种是在胞质中,无义mRNA直接通过招募POP2去腺苷酸化,随后又在招募来的外切体作用下,沿� 展开更多
关键词 八肋游仆虫 无义介导的mrna降解途径 外切体 加工小体 外显子连接复合体
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蓝氏贾第虫无义mRNA的降解 被引量:1
10
作者 吕佳 柴杨丽 +1 位作者 周宝春 柴宝峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期212-221,共10页
无义介导的mRNA降解途径(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)作为细胞内的一种重要的mRNA质量监控机制,可以降解含有提前终止密码子(premature termination codon,PTC)的异常转录本,从而避免截短蛋白质对细胞的毒害,但其详细的分子机制... 无义介导的mRNA降解途径(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)作为细胞内的一种重要的mRNA质量监控机制,可以降解含有提前终止密码子(premature termination codon,PTC)的异常转录本,从而避免截短蛋白质对细胞的毒害,但其详细的分子机制有待进一步阐释。蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)作为一种寄生性单细胞原生动物,进化地位特殊,对其NMD途径的研究有利于阐明基因表达调控的分子和进化机制。本研究通过酵母双杂交及体外pull-down实验分析了贾第虫NMD途径因子上游移码蛋白1 (Giardia lamblia up-frameshift 1,Gl UPF1)、贾第虫RNA结合蛋白(Giardia lamblia HRP1,Gl HRP1)、贾第虫核糖核酸外切酶(Giardia lamblia Ski7p,Gl Ski7p、Giardia lamblia XRN1,Gl XRN1)之间的相互作用关系。结果表明,Gl UPF1全长与Gl HRP1、Gl XRN1(1~500aa)、Gl Ski7p间均可发生相互作用。而且Gl UPF1的CH结构域和C端结构域分别与Gl HRP1、Gl XRN1(1~500 aa)、Gl Ski7p相互作用。说明Gl UPF1在贾第虫NMD途径中作为招募平台,在无义mRNA识别和降解过程中发挥重要作用。为此,结合本实验室之前的研究结果,我们提出原生动物贾第虫的NMD途径:在提前终止密码子处SURF(SMG1-UPF1-eRF1-eRF3)复合物形成后,Gl UPF1被磷脂酰肌醇3-激酶(suppressor with morphogenetic effect on genitalia 1,SMG1)磷酸化修饰,NMD途径激活,随后Gl UPF1与HRP1相互作用,将转录本标记为NMD底物; Gl UPF1进而招募下游贾第虫5'-3'核糖核酸降解酶Gl XRN1、贾第虫3'-5'核糖核酸降解因子Gl Ski7p,最终降解靶标mRNA。 展开更多
关键词 蓝氏贾第虫 无义介导的mrna降解途径 贾第虫不均一核小核糖核蛋白 贾第虫上游移码蛋白1 贾第虫5’-3’核糖核酸外切酶 贾第虫3’-5’超级杀手蛋白质
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