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丹参注射液诱导间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:113
1
作者 项鹏 夏文杰 +5 位作者 王连荣 陈振光 张丽蓉 张秀明 李艳 李树浓 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期321-324,I001,共5页
【目的】丹参注射液体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。【方法】采用Ficoll Paque液离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,分别采用含丹参注射液或硫代甘油等试剂的无血清达乐伯克改良必... 【目的】丹参注射液体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。【方法】采用Ficoll Paque液离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,分别采用含丹参注射液或硫代甘油等试剂的无血清达乐伯克改良必需基本培养基 (DMEM )诱导MSC分化为神经元 ,免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白(NF M )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、巢蛋白 (nestin)的表达。【结果】成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 0 5× 10 6,15代可获得 (2~ 3)× 10 12 个细胞 ,细胞流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD44、CD90、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性。加入丹参或硫代甘油诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF M、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 神经元 丹参注射液 细胞分化
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成人骨髓间质干细胞定向诱导为神经元样细胞的研究 被引量:56
2
作者 项鹏 夏文杰 +4 位作者 张丽蓉 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期385-387,I001,共4页
目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴... 目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增 5代可获 5× 10 7个细胞。加入巯基乙醇等或硫代甘油等诱导剂诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可以分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 神经元 神经系统疾病 MSC
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Effects of puerarin against glutamate excitotoxicity on cultured mouse cerebral cortical neurons 被引量:69
3
作者 董丽萍 王天佑 《中国药理学报》 CSCD 1998年第4期339-342,共4页
EfectsofpuerarinagainstglutamateexcitotoxicityonculturedmousecerebralcorticalneuronsDONGLiPing1,WANGTianYo... EfectsofpuerarinagainstglutamateexcitotoxicityonculturedmousecerebralcorticalneuronsDONGLiPing1,WANGTianYou(BeijingNeurosur... 展开更多
关键词 葛根素 谷酸钠 神经细胞 兴奋毒
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三七总皂甙诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:57
4
作者 撒亚莲 李海标 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期409-410,437,共3页
【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、... 【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、纯化 ,选用第 5代后的间质干细胞进行诱导分化。用 10 μg/LbFGF预诱导 2 4h ,更换成含三七总皂甙的无血清培养基DMEM诱导间质干细胞分化为神经元样细胞。用免疫组化SABC法鉴定神经丝蛋白 (NF M )、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白 (nestin)、微管联合蛋白 2 (MAP 2 )、生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。【结果】第5代间质干细胞形态达到均一 ,呈梭形。用三七总皂甙诱导 30min到 5h ,间质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起 ,形似神经细胞。免疫组化显示NF M、NSE、MAP 2、GAP 4 3、nestin表达阳性 ,而GFAP阴性。【结论】三七总皂甙可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 三七总皂甙 骨髓间质干细胞 分化 神经元样细胞
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BP算法各种改进算法的研究及应用 被引量:43
5
作者 金丕彦 芮勇 《南京航空航天大学学报》 CAS CSCD 1994年第S1期201-205,共5页
在简述BP网结构、算法及优缺点的基础上,详细研究了BP算法的改进方法及措施,即“步长自适应”、“训练集归一化”、“导数提升”、“各层变尺度”、“训练集重组”及“隐含层节点数的确定”。本文以实例在BP网的训练时间和预报... 在简述BP网结构、算法及优缺点的基础上,详细研究了BP算法的改进方法及措施,即“步长自适应”、“训练集归一化”、“导数提升”、“各层变尺度”、“训练集重组”及“隐含层节点数的确定”。本文以实例在BP网的训练时间和预报精度两方面,将上述各改进的算法与经典算法做出对比,对比结果表明,合适地选取改进算法将大大加速BP网的训练时间并有效地提高BP网的预报精度。 展开更多
关键词 神经元 神经网络 预报 算法
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神经生长因子治疗脑出血的临床疗效观察 被引量:59
6
作者 孟令秋 赵玉军 +2 位作者 陈谦 王新平 唐颖馨 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期46-48,共3页
目的观察鼠神经生长因子(NGF)治疗脑出血的临床疗效。方法选择脑出血患者119例,随机分为对照组63例和NGF组56例,在常规治疗基础上,2组分别给予胞磷胆碱或鼠NGF制剂治疗2周,分别于治疗后1、2周,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评... 目的观察鼠神经生长因子(NGF)治疗脑出血的临床疗效。方法选择脑出血患者119例,随机分为对照组63例和NGF组56例,在常规治疗基础上,2组分别给予胞磷胆碱或鼠NGF制剂治疗2周,分别于治疗后1、2周,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评价2组患者的神经功能缺损情况,采用Barthel指数(BI)评价患者的日常生活活动能力。结果治疗后,2组患者的NIHSS评分均较治疗前显著降低(P<0.01),BI均较治疗前显著增加(P<0.01);治疗后1周,2组NIHSS评分及BI差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2周,NGF组患者的NIHSS评分明显低于对照组,BI明显高于对照组(P<0.01)。结论 NGF治疗可以有效缓解脑出血患者的神经功能缺损,改善患者的日常生活活动能力。 展开更多
关键词 脑出血 神经生长因子 神经元 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶
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黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究 被引量:43
7
作者 贾延劼 杨于嘉 +6 位作者 周燕 宋元宗 刘丽旭 宋建辉 王霞 钟乐 余小河 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第19期1337-1341,共5页
目的 探讨中药单体黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可行性。方法 以黄芩甙作为主要诱导剂 ,诱导成年大鼠骨髓基质细胞 6d。采用免疫细胞化学染色、蛋白质印迹 (WesternBlot)、逆转录PCR(RT PCR)法检测神经细胞、胶质... 目的 探讨中药单体黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可行性。方法 以黄芩甙作为主要诱导剂 ,诱导成年大鼠骨髓基质细胞 6d。采用免疫细胞化学染色、蛋白质印迹 (WesternBlot)、逆转录PCR(RT PCR)法检测神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA的表达 ;原位末端标记染色评价细胞凋亡率 ;绿色荧光蛋白转染后 ,进行同种异体脑移植 ,观察诱导后细胞在脑内存活情况。结果 黄芩甙诱导 6d后 ,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态。诱导前骨髓基质细胞不表达神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA ;诱导 6h ,nestin出现暂时表达 ,诱导 6d表达神经细胞标记蛋白和mRNA ,不表达胶质细胞标记蛋白和mRNA。细胞凋亡率为 12 2 %± 2 8%。同种异体脑移植 14d ,移植物存活良好。结论 黄芩甙可以定向诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞。 展开更多
关键词 黄芩甙 骨髓细胞 细胞分化 神经细胞 诱导剂 诱导分化
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麝香多肽体外诱导成年大鼠和人骨髓间充质干细胞定向分化为神经元的研究 被引量:38
8
作者 肖庆忠 李浩威 +4 位作者 温冠媚 黄少华 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1179-1182,T003,共5页
目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组... 目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、神经巢蛋白 (nestin)的表达。结果 :成年大鼠和人BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导后 ,BMMSC胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :麝香多肽可以在体外诱导成年大鼠和人BMMSCs定向分化为神经元。 展开更多
关键词 骨髓 干细胞 神经元 麝香多肽 细胞分化
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大鼠骨髓间质干细胞用中药绞股蓝诱导为神经细胞的研究 被引量:39
9
作者 董燕湘 董晓先 +1 位作者 何慧华 刘金保 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期355-358,共4页
目的 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)分化为神经细胞。方法 用SD大鼠股骨骨髓细胞体外培养。用绞股蓝总甙加入无血清L DMEM诱导MSC分化为神经细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶 (NSE)、神经干细胞标志物巢蛋白 (nestin)和... 目的 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)分化为神经细胞。方法 用SD大鼠股骨骨髓细胞体外培养。用绞股蓝总甙加入无血清L DMEM诱导MSC分化为神经细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶 (NSE)、神经干细胞标志物巢蛋白 (nestin)和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 大鼠骨髓间质干细胞在体外扩增 5~ 2 2代 ,对照组不加任何诱导剂 ,MSC可分化为神经样细胞 (5 3 1%± 4 3% )。加入绞股蓝诱导剂诱导 1~ 5h ,MSC形态转变为典型的神经样细胞(90 0 %± 4 6 % )。免疫细胞化学染色显示诱导出的神经样细胞 ,NSE、nestin、GFAP表达阳性。继续培养 12~ 19d ,5d后对照组所有细胞逐渐死亡。绞股蓝组持续诱导 12~ 19d后神经样细胞形态完好 ,大部分细胞变为圆形并聚集成团 ,NSE、nestin、GFAP表达阳性。如果换回正常培养液 ,神经样细胞可逆转回MSC并传代。结论 骨髓本身可能存在神经干细胞。大鼠骨髓间质干细胞用中成药绞股蓝诱导可分化为多种形态的神经样细胞。 展开更多
关键词 大鼠 骨髓间质干细胞 绞股蓝 神经细胞 细胞分化 免疫细胞化学 脑部疾病
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Antagonistic effects of extract from leaves of Ginkgo biloba on glutamate neurotoxicity 被引量:51
10
作者 朱俐 吴娟 +3 位作者 廖红 高静 赵晓宁 张祖暄 《中国药理学报》 CSCD 1997年第4期345-347,共3页
目的:观察EGb及其所含成分槲皮素和内酯B对谷氨酸诱导的神经元损伤的拮抗作用.方法:对小鼠下丘脑弓状核作形态学观察和图象分析,采用MTT法检测皮层原代培养神经元的活性,用Fura2测定单个神经元内游离钙离子的浓度(... 目的:观察EGb及其所含成分槲皮素和内酯B对谷氨酸诱导的神经元损伤的拮抗作用.方法:对小鼠下丘脑弓状核作形态学观察和图象分析,采用MTT法检测皮层原代培养神经元的活性,用Fura2测定单个神经元内游离钙离子的浓度([Ca2+]i).结果:EGb及其内酯B能够保护神经元对抗谷氨酸的损伤,阻止谷氨酸诱发的[Ca2+]i的升高.EGb能够逆转谷氨酸诱导的下丘脑弓状核神经元核面积的减少.结论:EGb及其内酯B可以通过降低[Ca2+]i水平对抗谷氨酸神经毒性,内酯B很可能是EGb中对抗谷氨酸神经毒性的主要成分之一. 展开更多
关键词 谷氨酸盐 银杏 银杏内酯B 拮抗作用
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人脐带间充质干细胞的生物学特性及向神经样细胞分化的研究 被引量:41
11
作者 马廉 崔冰琳 +5 位作者 冯学永 罗敏洁 蒋学武 杨立业 谢庆东 黄天华 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期513-517,共5页
目的研究人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)的特性及向神经细胞分化的可能性,为神经移植寻找新的细胞来源。方法检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记;丹参和β巯基乙醇诱导人脐带来源的MSCs向神经细胞分化,用免疫细胞化学方法对... 目的研究人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)的特性及向神经细胞分化的可能性,为神经移植寻找新的细胞来源。方法检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记;丹参和β巯基乙醇诱导人脐带来源的MSCs向神经细胞分化,用免疫细胞化学方法对分化和未分化的细胞进行鉴定;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞的神经相关基因表达。结果从人脐带分离、培养的贴壁细胞,体外生长形态类似于成纤维细胞,可以维持在未分化状态稳定增殖,体外增殖超过10代。这类细胞MSCs的表面标记CD29、CD44、CD59、CD105呈现高表达,造血细胞表面标记CD14、CD33、CD34、CD28、CD45、CD117和与移植免疫排斥相关的表面标记CD80(B7-1)、CD86(B7-2)、CD40、CD40L不表达或低表达。丹参和β巯基乙醇均可诱导人脐带MSCs向神经样细胞分化,分化的细胞表达神经干细胞的标记巢蛋白(Nestin),神经元的标记β-Ⅲ类神经微管(β-TubulinⅢ)和神经微丝(NF),以及神经胶质细胞的标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。RT-PCR检测证实,经丹参诱导后的MSCs表达神经干细胞相关基因Nestin,诱导前和诱导后的MSCs均表达神经细胞基因Pleiotrophin,诱导后的表达明显增强。结论人脐带华尔通胶含有丰富的MSCs,易于培养扩增,其表达MSCs的表面标记,不表达或低表达造血细胞和与移植排斥相关的细胞标记。人脐带来源的MSCs能分化为神经细胞,表达神经细胞的相关标记和基因,这种细胞可能成为中枢神经系统细胞移植的一个干细胞来源。 展开更多
关键词 脐带 间质干细胞 神经元 细胞分化
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β淀粉样蛋白诱导脑内神经元凋亡及褪黑素的保护作用 被引量:30
12
作者 高曲文 陈俊抛 +4 位作者 田时雨 刘辉 韩燕 徐斌 林煜 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 2000年第1期7-9,共3页
目的 探讨凋亡机制在 β 淀粉样蛋白 (Aβ)脑内致阿尔茨海默病 (AD)作用中的意义及褪黑素 (MT)对Aβ脑内神经毒性的干预效果。方法 将Aβ1 4 0 微量注射至大鼠右侧海马CA1区 ,7d后 ,用尼氏染色检测神经元丢失 ,HE染色、TUNEL染色及透... 目的 探讨凋亡机制在 β 淀粉样蛋白 (Aβ)脑内致阿尔茨海默病 (AD)作用中的意义及褪黑素 (MT)对Aβ脑内神经毒性的干预效果。方法 将Aβ1 4 0 微量注射至大鼠右侧海马CA1区 ,7d后 ,用尼氏染色检测神经元丢失 ,HE染色、TUNEL染色及透射电镜检测细胞凋亡 ;用免疫组化SABC法检测Bax/Bcl 2的表达。结果 Aβ组右侧海马CA1区发现大量凋亡细胞 ,而假手术对照组和生理盐水对照组未发现细胞凋亡 ;Aβ组Bax表达增强 ,而Bcl 2表达在上述三组间无明显差异 ;MT组海马CA1区神经元计数为 47.4± 5 .9,明显多于Aβ组 (2 9.4± 4.5 ) ,但少于生理盐水对照组 (79.8± 7.6 )和假手术对照组 (83.1± 8.5 ) ,MT组细胞凋亡 (8.4± 3.7)少于Aβ组 (18.9± 6 .1)。 结论 Aβ能诱导脑内神经元凋亡 ,并可能与促进Bax的表达有关 ;MT能明显减轻Aβ的脑内神经毒性 。 展开更多
关键词 淀粉样Β蛋白 脱噬作用 褪黑激素 阿尔茨海默病
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人参皂苷Rb_1对大鼠胎鼠海马神经细胞凋亡的影响 被引量:38
13
作者 朱陵群 范吉平 +5 位作者 黄啟福 孙塑伦 高颖 邹忆怀 何丽云 张壮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1229-1231,共3页
目的 :以原代培养的大鼠胎鼠海马神经细胞缺氧 /缺糖再给氧为模型 ,观察人参皂苷Rb1对神经细胞凋亡的抑制作用。方法 :流式细胞术检测凋亡细胞百分率 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率 ,同时 ,测定细胞LDH的释放和NO的产... 目的 :以原代培养的大鼠胎鼠海马神经细胞缺氧 /缺糖再给氧为模型 ,观察人参皂苷Rb1对神经细胞凋亡的抑制作用。方法 :流式细胞术检测凋亡细胞百分率 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率 ,同时 ,测定细胞LDH的释放和NO的产生量。结果 :神经细胞缺氧 /缺糖 5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死 ,并显著增加LDH的释放和NO的产生 ,并随再给氧时间的延长而增加。人参皂苷Rb1能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率 ,减少LDH的释放和NO的过量产生 ,人参皂苷Rb1的作用随剂量增加而作用增加。结论 :人参皂苷Rb1具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用 ,这种作用可能与降低或抑制NOS活性 ,减少NO的过量产生有关。 展开更多
关键词 低血糖症 神经细胞凋亡 人参皂苷RB1 神经元缺血性损伤
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单神经元自适应PID控制器的研究 被引量:29
14
作者 徐中 孙伟 刘晓冰 《大连理工大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期667-672,共6页
将二次型性能指标引入单神经元并利用自学习功能构成了自适应 P I D 控制器;分析了神经元自适应控制系统的稳定性和学习算法的收敛性.仿真结果表明,这种控制方案具有良好的自适应性.
关键词 神经元 二次性能指标 PID控制 自适应控制
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铝对体外人胚大脑神经细胞毒作用的研究 被引量:26
15
作者 黄国伟 康静 +4 位作者 张文治 刘莉 俞鸣 梅玫 董亚利 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期106-108,共3页
目的 探讨铝对人胚大脑神经细胞的毒作用及其机制。方法 采用无血清体外细胞培养方法 ,观察铝对人胚大脑神经细胞的生长发育及功能的影响 ,同时进行光镜和电镜形态学观察。结果 高铝组的细胞存活数低于对照组 ,差异有显著性 ,光镜观... 目的 探讨铝对人胚大脑神经细胞的毒作用及其机制。方法 采用无血清体外细胞培养方法 ,观察铝对人胚大脑神经细胞的生长发育及功能的影响 ,同时进行光镜和电镜形态学观察。结果 高铝组的细胞存活数低于对照组 ,差异有显著性 ,光镜观察在高铝组可见大量变性坏死细胞 ;随铝剂量的增加神经细胞的DNA含量、神经细胞特异性烯醇化酶、胆碱酯酶活性也随之下降 ,呈负相关关系 ,并且低铝组、高铝组低于对照组 ,差异有显著性。神经细胞过氧化脂质含量 ,高铝组高于对照组 ,差异有显著性 ,并与铝剂量呈正相关关系。高剂量铝引起大脑神经细胞超微结构的损害表现为各种膜结构的损害及神经微丝微管排列紊乱。结论 铝可抑制大脑神经细胞的分化成熟及功能 ,并随铝剂量的增加而增强 ,其毒作用机制可能是通过抑制神经细胞抗氧化能力产生脂质过氧化而导致细胞各种膜结构的损害。 展开更多
关键词 神经元 细胞培养 铝中毒
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多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞 被引量:32
16
作者 刘金保 董晓先 +4 位作者 董燕湘 何慧华 董伟华 梁仲培 肖庆忠 《中国药物与临床》 CAS 2003年第3期234-236,共3页
目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神... 目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果 大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1~ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。 展开更多
关键词 中药成分 诱导 大鼠 骨髓间质干细胞 神经元样细胞
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丹参酮ⅡA定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究 被引量:36
17
作者 夏文杰 项鹏 +5 位作者 张丽蓉 陈振光 余伟华 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期865-869,T001,共6页
目的 :丹参酮ⅡA体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Fi coll-Paque液离心和贴壁法分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,FGF - 2对MSC增殖和分化的影响。采用含丹参酮ⅡA的无血清... 目的 :丹参酮ⅡA体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Fi coll-Paque液离心和贴壁法分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,FGF - 2对MSC增殖和分化的影响。采用含丹参酮ⅡA的无血清达乐伯克改良必需基本培养基 (DMEM)诱导MSC分化为神经元样细胞 ,免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF -M)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、巢蛋白 (nestin)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 0 5× 10 6,15代可获得 ( 2 - 3)× 10 12 个细胞 ,流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD4 4、CD90、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD34、CD38、CD4 5、CD80、CD86为阴性。FGF - 2促进hMSC生长 ,并且对MSC的分化能力基本没有影响。丹参酮ⅡA诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF -M、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 神经元 丹参酮ⅡA 成纤维细胞生长因子 细胞分化
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大鼠脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡 被引量:32
18
作者 傅强 侯铁胜 +3 位作者 鲁凯伍 贺石生 赵杰 李明 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期222-224,共3页
目的 研究脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡及其分布特点。 方法  44只大鼠分为对照组 (4只 )和损伤组 (4 0只 )。损伤组脊髓 (T8,9)经中度压迫致伤后 ,分别在伤后 30min、2 ,4,8,2 4,48,72h和 7,14,2 1d处死取材 (每时相点鼠数 =4只 )... 目的 研究脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡及其分布特点。 方法  44只大鼠分为对照组 (4只 )和损伤组 (4 0只 )。损伤组脊髓 (T8,9)经中度压迫致伤后 ,分别在伤后 30min、2 ,4,8,2 4,48,72h和 7,14,2 1d处死取材 (每时相点鼠数 =4只 )。应用HE、尼氏染色及凋亡细胞原位末端标记法对脊髓组织进行细胞检测。 结果 伤后 4h ,损伤段及邻近段可见末端标记阳性神经细胞 ;伤后 8h ,损伤段灰质中阳性细胞数达高峰 ;伤后 2 4h ,白质中阳性胶质细胞数达高峰 ;伤后72h ,相邻节段阳性细胞数达高峰。阳性细胞以白质中胶质细胞为主 ,主要分布于相邻节段。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经细胞 细胞凋亡 大鼠
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麝香组分诱导成年大鼠骨髓间质干细胞体外定向分化为神经元样细胞的能力 被引量:27
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作者 肖庆忠 温冠媚 +4 位作者 李浩威 黄少华 张秀明 李艳 李树浓 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期405-408,F001,共5页
【目的】探讨麝香组分体外诱导成年大鼠骨髓间质干细胞 (adultratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMM SCs)定向分化为神经元样细胞的能力。【方法】分别采用含麝香多肽或麝香酮的L DMEM培养基体外定向诱导第 5代至 10代的rBMMSCs,并... 【目的】探讨麝香组分体外诱导成年大鼠骨髓间质干细胞 (adultratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMM SCs)定向分化为神经元样细胞的能力。【方法】分别采用含麝香多肽或麝香酮的L DMEM培养基体外定向诱导第 5代至 10代的rBMMSCs,并分别应用相差显微镜观察神经元样细胞和免疫细胞组化检测神经元样细胞所表达的神经干细胞特异性标志 (nestin)、神经元特异性标志 [神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificenolase ,NSE)和神经丝蛋白 (neurofilament ,NF) ]及星形胶质细胞特异性标志 [胶质纤维酸性蛋白 (gliafiberacidprotein ,GFAP) ],并进行神经元样细胞记数分析。【结果】成年大鼠BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L DMEM培养基诱导后 ,发现细胞胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。神经元样细胞记数分析发现 :rBMMSCs经过麝香多肽诱导后 ,NSE+ 神经元样细胞和NF H+ 神经元样细胞的比例分别高达 93 5和 88 2 %;而用含麝香酮的无血清L DMEM培养基却无上述变化。【结论】麝香多肽能在体外诱导rBMMSCs定向分化为神经元样细胞 ,而麝香酮却无此能力。 展开更多
关键词 麝香组分 大鼠 骨髓间质干细胞 体外定向 分化 神经元样细胞 麝香多肽 麝香酮
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发育期大鼠高热惊厥脑损伤模型的建立 被引量:38
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作者 杨志仙 秦炯 +1 位作者 周国平 常杏芝 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期225-228,共4页
目的 :建立发育期大鼠高热惊厥脑损伤模型。方法 :采用热水浴诱导大鼠高热惊厥 (febrileconvulsion ,FC) ,隔日诱导惊厥 1次 ,共诱导 10次。发育期大鼠随机分为 3组 :4 5 .0℃热水浴组 (n =6 ) ,4 4 .5℃热水浴组(n =10 ) ,4 4 .0℃热... 目的 :建立发育期大鼠高热惊厥脑损伤模型。方法 :采用热水浴诱导大鼠高热惊厥 (febrileconvulsion ,FC) ,隔日诱导惊厥 1次 ,共诱导 10次。发育期大鼠随机分为 3组 :4 5 .0℃热水浴组 (n =6 ) ,4 4 .5℃热水浴组(n =10 ) ,4 4 .0℃热水浴组 (n =10 ) ,选取高热未惊厥与FC比例最合适的一组 ,将此组的水浴温度定为以后实验的高热处理温度。发育期大鼠随机分为两组 :37.0℃水浴正常对照组 (n =10 ) ,4 4 .5℃热水浴组 (n =4 0 ) ,高热处理组又分为高热未惊厥组 (FC =0 ,n =10 )和FC组 (FC≥ 6次 ,n =2 2 )。HE染色观察各组大鼠海马神经元形态学改变 ;尼氏染色观察海马神经元丢失情况 ;电镜观察海马神经元超微结构的改变 ;体视学方法计数海马CA1区神经元数密度。结果 :HE染色可见FC组海马CA1区、CA2区细胞排列紊乱、极向不清、细胞空泡变 ,细胞核大小不一致、圆形或椭圆形 ;尼氏染色未见FC组明显的海马神经元丢失 ;FC组大鼠海马CA1区和门区神经元线粒体体积减少、部分出现空泡、基质浓缩、嵴模糊不清或消失 ,高尔基复合体轻 中度扩张 ;FC组大鼠海马CA1区神经元数密度显著减少 ,与正常对照组及高热未惊厥组比较 ,差异均有显著性。结论 :热水浴诱导大鼠FC与人类FC有许多相似之处 ,大鼠FC频繁发作可导致海马? 展开更多
关键词 发育期 大鼠 高热惊厥 脑损伤 神经元
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