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巢式PCR分析电离辐射诱导人外周血线粒体DNA4977bp缺失 被引量:25
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作者 封江彬 陆雪 +2 位作者 陈德清 陈晓穗 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期533-536,共4页
目的 探索对不同剂量电离辐射诱导的人外周血线粒体DNA 4 977bp缺失进行分析的方法。方法 采用 3对引物对γ射线诱导的人外周血线粒体DNA缺失进行PCR扩增 ,建立对人线粒体DNA 4 977bp缺失进行分析的巢式PCR方法 ,扩增线粒体DNA缺失区... 目的 探索对不同剂量电离辐射诱导的人外周血线粒体DNA 4 977bp缺失进行分析的方法。方法 采用 3对引物对γ射线诱导的人外周血线粒体DNA缺失进行PCR扩增 ,建立对人线粒体DNA 4 977bp缺失进行分析的巢式PCR方法 ,扩增线粒体DNA缺失区片段 ,纯化PCR产物进行测序。采集 5例正常人外周血进行 0~ 5Gy6 0 Coγ射线的外照射 ,利用巢式PCR技术 ,分析6 0 Coγ射线照射后外周血有核细胞中线粒体DNA 4 977bp缺失的发生情况。结果 用建立的巢式PCR方法可在受到照射的外周血样品中检测到mtDNA 4 977bp缺失。所有外周血样本在照射前均无线粒体DNA 4 977bp缺失 ,1~ 5Gy6 0 Coγ线照射后均诱导出此缺失。结论 本研究所建立的巢式PCR方法可用来分析电离辐射诱导的人外周血淋巴细胞线粒体DNA 4 977bp缺失。 展开更多
关键词 人外周血 巢式pcr 线粒体DNA 照射 缺失 ^60Coγ射线 电离辐射诱导 pcr产物 测序 纯化
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蜜蜂囊状幼虫病毒病的Nest-PCR检测 被引量:23
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作者 许益鹏 章奕卿 +2 位作者 李江红 邢丽苹 张传溪 《科技通报》 2007年第6期824-827,共4页
蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病,病原为一小正链RNA病毒。如何尽早鉴别蜂群的感染在养蜂业生产上具有重要的意义。本文报道一种利用RNA反转录结合巢式PCR检测鉴定蜜蜂的囊状幼虫病毒病的方法。
关键词 中华蜜蜂 囊状幼虫病毒病 反转录 nestpcr 检测
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甘蔗宿根矮化病菌PCR检测技术研究 被引量:19
3
作者 周凌云 周国辉 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第2期172-174,共3页
以甘蔗茎组织总DNA为模板,以16S rRNA基因赖氏细菌属(L eif son ia)通用引物为第一轮引物、甘蔗宿根矮化病菌(L eif son ia xy li subsp.xy li,Lxx)亚种特异引物为第二轮引物建立了Lxx巢式PCR检测技术。根据已报道的Lxx巴西分离物基因... 以甘蔗茎组织总DNA为模板,以16S rRNA基因赖氏细菌属(L eif son ia)通用引物为第一轮引物、甘蔗宿根矮化病菌(L eif son ia xy li subsp.xy li,Lxx)亚种特异引物为第二轮引物建立了Lxx巢式PCR检测技术。根据已报道的Lxx巴西分离物基因组全序列(G enB ank登录号AE 016822.1)设计了扩增致病相关基因片段的3个引物对,经多种组合进行了RCR检验,筛选出两个特异性好、灵敏高的引物对,建立了Lxx的多重PCR检测技术。克隆测序表明,PCR产物与巴西分离物基因组相应区段同一率为99%以上,从而证实了上述PCR技术的正确性。检测结果表明,广东样品的阳性率为90%,海南样品的阳性率为60%。 展开更多
关键词 甘蔗宿根矮化病菌 甘蔗 巢式pcr 双重pcr 检测
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用多重PCR快速检测登革病毒并分型 被引量:8
4
作者 肖维威 马文丽 +2 位作者 郑夔 黄吉城 郑文岭 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第5期393-395,共3页
目的 建立一种多重聚合酶链反应 (PCR)方法 ,对不同型别登革病毒进行快速检测及分型。方法 采用 4种型别登革病毒通用的外侧引物进行逆转录PCR(RT PCR)反应 ,继用 4对 (5种 )型特异引物在单管内进行巢式PCR ,依据扩增产物的片段大小... 目的 建立一种多重聚合酶链反应 (PCR)方法 ,对不同型别登革病毒进行快速检测及分型。方法 采用 4种型别登革病毒通用的外侧引物进行逆转录PCR(RT PCR)反应 ,继用 4对 (5种 )型特异引物在单管内进行巢式PCR ,依据扩增产物的片段大小进行分型。结果 采用多重PCR ,扩增出 4 82、119、2 90及 392bp的特异片段 ,分别代表登革病毒 1~ 4型。结论 该方法快速、敏感、特异 ,有一定的推广应用价值。 展开更多
关键词 登革病毒 分型 快速检测 型别 多重pcr 逆转录pcr 多重聚合酶链反应 pcr) 扩增产物 RT—pcr
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广西某血站献血员巴贝虫感染情况调查 被引量:11
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作者 王华素 彭恒 +1 位作者 朱淮民 薛绍礼 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期283-287,共5页
目的调查分析广西某采血站献血员感染巴贝虫情况,提供我国巴贝虫的流行病学基础资料,也为安全输血提供科学依据。方法于2013年从广西某血站搜集抗凝输血袋残留血,共计1 900份,采用巴贝虫属18SrRNA和β-tubulin的引物Nest-PCR、形态学观... 目的调查分析广西某采血站献血员感染巴贝虫情况,提供我国巴贝虫的流行病学基础资料,也为安全输血提供科学依据。方法于2013年从广西某血站搜集抗凝输血袋残留血,共计1 900份,采用巴贝虫属18SrRNA和β-tubulin的引物Nest-PCR、形态学观察及间接荧光免疫方法(IFA),对献血员血液内的巴贝虫感染情况进行检测。结果广西某采血站献血员血液内巴贝虫感染总阳性率为2.53%(48/1 900),均为田鼠巴贝虫(Babesia microti),巴贝虫属18SrRNA引物扩增灵敏度远高于β-tubulin引物。显微镜检查有38份标本在红细胞内发现有核呈圆形且致密、胞质呈环形且纤细的环状体,巴贝虫属18SrRNA的Nest-PCR阳性标本血清IFA在抗体滴度≥1∶64未观察到特异性荧光,视为阴性。结论健康献血员中存在一定比例的Babesia microti感染率,对于有免疫功能低下的接受输血者来说,应当增加输血样本的巴贝虫检测。 展开更多
关键词 巴贝虫属 18SrRNA 献血员 巢式pcr 田鼠巴贝虫
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2011年西宁地区儿童腹泻病毒流行病学调查 被引量:8
6
作者 刘桂香 易虎 +5 位作者 田登 赵生仓 杨维成 徐琼 石燕 张华一 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第4期674-676,共3页
目的:对2011年西宁市腹泻病毒进行流行病学调查,对青海省腹泻病毒流行株和流行趋势进行统计分析,为腹泻病毒引起的腹泻提供实验室资料,更好地控制病毒性腹泻的流行。方法:用巢式PCR和多重PCR方法对西宁地区488例婴幼儿腹泻标本进行腹泻... 目的:对2011年西宁市腹泻病毒进行流行病学调查,对青海省腹泻病毒流行株和流行趋势进行统计分析,为腹泻病毒引起的腹泻提供实验室资料,更好地控制病毒性腹泻的流行。方法:用巢式PCR和多重PCR方法对西宁地区488例婴幼儿腹泻标本进行腹泻病毒检测。结果:西宁地区腹泻儿童中腹泻病毒的检出率分别为:轮状病毒A组阳性33例(6.76%),其中G9型15例、G3型13例、P6型1例、P8型2例、P9型2例;轮状病毒B/C组阳性3例(0.61%);杯状病毒阳性23例(4.71%),其中扎如病毒17例、诺如病毒GⅡ型6例;星状病毒阳性7例(1.43%)。结论:轮状病毒A组和杯状病毒是西宁地区婴幼儿腹泻的主要病原体之一。 展开更多
关键词 婴幼儿腹泻 腹泻病毒 多重pcr 巢式pcr
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大豆、油菜籽及大豆油中外源基因检测的灵敏度、准确度研究 被引量:5
7
作者 吴姗 鲍晓霞 +2 位作者 张晓峰 黎昊雁 董强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期177-184,共8页
本研究针对转基因产品中转入的目的基因以及启动子、终止子,设计了相应引物35SCP142、CPNOS165。通过对引物的调整,使PCR扩增产物的大小控制在100~170bp,从而提高了检测灵敏度。在25μl的PCR反应体系中,可以检测到0.01ng的外源DNA。为... 本研究针对转基因产品中转入的目的基因以及启动子、终止子,设计了相应引物35SCP142、CPNOS165。通过对引物的调整,使PCR扩增产物的大小控制在100~170bp,从而提高了检测灵敏度。在25μl的PCR反应体系中,可以检测到0.01ng的外源DNA。为了检测以大豆为原料的油脂类产品中的外源基因,我们又设计了NEST-PCR的两对引物35SCP318和35SCP114,并检测到了外源基因的片断。对新设计的引物进行准确度分析,即在不同的样品(包括转基因或非转基因产品)中进行检测,并经测序验证,新设计的引物35SCP142,CPNOS165及NEST-PCR的引物都有高特异性,可用于含有相应外源基因的产品检测。 展开更多
关键词 转基因检测 灵敏度 准确度 引物 nest-pcr
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鸭群中REV感染的流行病学调查 被引量:7
8
作者 倪楠 崔治中 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期514-519,共6页
【目的】了解网状内皮组织增生病病毒(REV)在鸭群中的感染状态。【方法】从山东省不同地区送检的病(死)鸭中,随机采集法氏囊、脾脏和肝脏等220份样品。细胞培养分离病毒,以提取的组织DNA为模板进行特异性斑点杂交、PCR和nest-PCR检测。... 【目的】了解网状内皮组织增生病病毒(REV)在鸭群中的感染状态。【方法】从山东省不同地区送检的病(死)鸭中,随机采集法氏囊、脾脏和肝脏等220份样品。细胞培养分离病毒,以提取的组织DNA为模板进行特异性斑点杂交、PCR和nest-PCR检测。从不同地区阳性样品中任选一个进行克隆测序、同源性比较和进化树分析。【结果】从35/39份法氏囊、54/84份脾脏和32/97份肝脏DNA样品中检出REV(121/220)。其中法氏囊的检出率最高,显著高于肝脏、脾脏(P<0.01),但用细胞培养分离病毒、常规PCR、组织DNA直接点杂交检测时,均未检出REV。YN-1和BZ-1株env基因片段与美国分离的鸭源SNV株同源性高达99.8%,LQ-1株env基因片段与美国鸡源分离株的同源性为100%,均高于近几年中国鸡源分离株。【结论】在检测REV感染时,应加强对法氏囊的检测,但由于REV在感染鸭的组织中含量很低,应采用更为敏感的nest-PCR。同源性和进化树分析表明,我国鸭源REV很可能是在引进未经对REV检疫的种鸭时引入的。 展开更多
关键词 网状内皮增生病病毒 巢式pcr 病原分离 序列分析
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巢式PCR法检测弓形虫的应用研究 被引量:6
9
作者 傅斌 刘克义 +3 位作者 韩广东 魏庆宽 李瑾 崔勇 《中国热带医学》 CAS 2005年第5期929-931,共3页
目的调查山东省商品肉弓形虫污染和动物弓形虫感染情况,并进行SAG2分型研究,分析商业肉制品在弓形虫传播中的作用。方法自由市场采集商品肉,用巢式PCR方法检测弓形虫DNA,阳性者经纯化PCR产物,进行SAG2临床分型研究。结果共检测商品肉89... 目的调查山东省商品肉弓形虫污染和动物弓形虫感染情况,并进行SAG2分型研究,分析商业肉制品在弓形虫传播中的作用。方法自由市场采集商品肉,用巢式PCR方法检测弓形虫DNA,阳性者经纯化PCR产物,进行SAG2临床分型研究。结果共检测商品肉89份,阳性22份,阳性率为24·72%。其中,猪肉标本56份,16份阳性,阳性率为28·57%,Ⅰ型13份,Ⅱ型1份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份,未能定型1份;羊肉标本33份,6份阳性,阳性率为18·18%,Ⅰ型5份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份。22份阳性标本中单纯Ⅰ型占81·82%,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染占9·09%,Ⅲ型未能检测到。1份可疑病人血标本阳性,为Ⅰ型。结论肉类弓形虫污染率很高,以Ⅰ型为主,是人类感染的重要来源。家庭食品加工过程中生熟不分与人们对食品鲜美的追求造成误食包囊感染,可能是造成人类弓形虫感染率大幅升高的最为重要的原因之一。 展开更多
关键词 弓形虫病 巢式多聚酶链反应 SAG2基因分型
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水貂病毒性肠炎巢式PCR,PCR-RFLP联合诊断方法的建立 被引量:5
10
作者 易立 闫喜军 +4 位作者 罗彬 王建科 赵传芳 吴威 程世鹏 《经济动物学报》 CAS 2008年第4期204-208,共5页
根据水貂肠炎细小病毒的VP2基因序列设计4条特异性引物,建立了检测水貂肠炎细小病毒的巢式PCR方法。采用一次扩增的敏感性来检测5个TCID50/mL的细小病毒MEVB株,二次扩增的敏感性来检测0.05个TCID50/mL的细小病毒MEVB株。同时,利用该方... 根据水貂肠炎细小病毒的VP2基因序列设计4条特异性引物,建立了检测水貂肠炎细小病毒的巢式PCR方法。采用一次扩增的敏感性来检测5个TCID50/mL的细小病毒MEVB株,二次扩增的敏感性来检测0.05个TCID50/mL的细小病毒MEVB株。同时,利用该方法第一轮PCR产物酶切,能够区分犬细小病毒与水貂肠炎细小病毒,具有重要的实用价值和应用的前景。 展开更多
关键词 水貂肠炎细小病毒 巢式pcr pcr-RFLP
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向日葵白锈病菌巢式PCR检测方法的研究 被引量:6
11
作者 刘彬 张祥林 +2 位作者 王羽中 乾义柯 陈燕 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期859-863,共5页
【目的】建立向日葵白锈病菌(Albugo tragopogi (Persoon) Schruter var helianthi Novotlenova)的巢式PCR检测方法。【方法】用通用引物NL1/NL4对采自伊犁的向日葵白锈病菌进行PCR扩增、克隆、酶切和测序,设计该病菌的特异性引物,用巢... 【目的】建立向日葵白锈病菌(Albugo tragopogi (Persoon) Schruter var helianthi Novotlenova)的巢式PCR检测方法。【方法】用通用引物NL1/NL4对采自伊犁的向日葵白锈病菌进行PCR扩增、克隆、酶切和测序,设计该病菌的特异性引物,用巢式PCR法检测供试样品。【结果】序列测定和比对结果表明,该病菌的核酸序列与GeneBank公布的向日葵白锈病菌核酸序列同源率为97%。针对该段基因设计向日葵白锈病菌的特异性引物ATHP3/ATHP4,用巢式PCR法对供试样品进行扩增,扩增片段为370 bp。【结论】成功建立了向日葵白锈病菌巢式PCR检测方法。 展开更多
关键词 向日葵 白锈病菌 巢式pcr 检测
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南宁某警犬基地蜱虫及病原体感染调查 被引量:6
12
作者 王华素 徐金山 +5 位作者 彭恒 李孟英 陈要朋 刘铁牛 朱淮民 薛绍礼 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2015年第2期94-98,共5页
目的 了解广西南宁某警犬养殖训练基地蟀虫及病原体携带情况. 方法 2013年7月在广西南宁某警犬养殖训练基地,采用逆毛式检蜱法采集犬体表以及犬舍墙壁的蜱虫,用巴贝虫属18S rRNA通用引物的巢式PCR、原核生物16S rRNA及真核生物线粒体16S... 目的 了解广西南宁某警犬养殖训练基地蟀虫及病原体携带情况. 方法 2013年7月在广西南宁某警犬养殖训练基地,采用逆毛式检蜱法采集犬体表以及犬舍墙壁的蜱虫,用巴贝虫属18S rRNA通用引物的巢式PCR、原核生物16S rRNA及真核生物线粒体16S rRNA通用引物的PCR和序列测定方法,鉴定蜱虫体内的病原体感染情况和蜱虫种类. 结果 从警犬体表及犬舍墙壁共计采集5只饱血蜱和13只饥饿蜱;经PCR鉴定均为血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus).蜱虫体内扩增到田鼠巴贝虫(Babesia microti)、伯纳特氏立克次氏体(Goxiella burnetii)、假单胞球菌(Pseu-domonas sp.)、甲基杆菌(Methylobacterium sp.)DNA序列,阳性率分别为27.8% (5/18)、22.2% (4/18)、11.1% (2/18)、11.1% (2/18). 结论 南宁某警犬养殖训练基地蜱虫存在一定比例的田鼠巴贝虫、伯纳特氏立克次氏体、假单胞球菌、甲基杆菌感染阳性率,对接触人员、及其他牲畜有潜在感染的风险,应加强预防和控制. 展开更多
关键词 血红扇头蜱 巢式pcr 田鼠巴贝虫 立克次氏体
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血清登革热病毒NEST-PCR检测 被引量:3
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作者 蒋力云 吴新伟 +4 位作者 何丽娟 鲁恩洁 刘远 熊远 狄飚 《预防医学情报杂志》 CAS 2006年第3期265-266,共2页
目的 建立用NEST—PCR快速检测登革热病毒的方法。方法 通用引物对样本进行RT—PCR扩增,然后用分型引物进行NEST—PCR,根据产物条带的位置分型。结果 标准毒株的扩增结果与预期结果相同,血清登革热病毒在病程2~5d的阳性率高于6~9d... 目的 建立用NEST—PCR快速检测登革热病毒的方法。方法 通用引物对样本进行RT—PCR扩增,然后用分型引物进行NEST—PCR,根据产物条带的位置分型。结果 标准毒株的扩增结果与预期结果相同,血清登革热病毒在病程2~5d的阳性率高于6~9d的阳性率,分别为6/7和2/6。结论 NEST—PCR方法是一个快速、准确检测登革热的方法,但它更适用于早期临床检测。 展开更多
关键词 登革热病毒 nestpcr RT—pcr
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安徽地区家畜嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因检测和序列分析 被引量:5
14
作者 史永林 王誓闻 +4 位作者 胡万富 张永根 刘红 曹明华 张丽娟 《安徽预防医学杂志》 2013年第5期329-330,338,共3页
目的了解安徽农村地区散养家畜自然感染嗜吞噬细胞无形体状况和基因特征。方法应用巢式PCR对怀远、明光和广德县采集的148份家畜全血样本进行嗜吞噬无形体16S rRNA基因检测,并对扩增产物测序,应用生物软件MEGA4.0进行序列分析。结果 14... 目的了解安徽农村地区散养家畜自然感染嗜吞噬细胞无形体状况和基因特征。方法应用巢式PCR对怀远、明光和广德县采集的148份家畜全血样本进行嗜吞噬无形体16S rRNA基因检测,并对扩增产物测序,应用生物软件MEGA4.0进行序列分析。结果 148份家畜全血样本中检测出山羊、牛和犬嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因阳性率分别22.1%、25.0%和40.0%。26份PCR阳性扩增产物测序成功,序列分析结果表明:检出序列可归为4群,I群优势株占分析序列的66.7%,与北京、浙江和湖北等地检测序列同属一个分支。目的基因测定序列与参考序列同源性达97.0~99.0%。结论安徽调查地区农村家畜动物存在嗜吞噬细胞无形体感染,山羊是该地区嗜吞噬细胞无形体的重要宿主动物之一。 展开更多
关键词 嗜吞噬细胞无形体 16S RRNA 巢式pcr 序列分析
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贮藏期猕猴桃果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究 被引量:5
15
作者 朱丹 曹凡 +7 位作者 高贵田 王铎 徐雅芬 杜莹琳 张鑫 李朝正 孙强 周敏娜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期493-499,共7页
为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrp W保守区设计2对特... 为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrp W保守区设计2对特异引物进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序。结果表明,从4个猕猴桃贮藏库抽取40个样品,其中8个样品检测出阳性扩增;对特异扩增得到的550bp的hrp W序列进行BLAST对比分析,发现该序列与丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrp W序列同源性为99%。此外,本试验建立的巢式PCR检测方法对Psa的检出限为103cfu·m L^(-1),检测方法特异性强,灵敏度高,能减少假阳性的出现,保证了快速检测结果的可靠性,为控制猕猴桃果实传播Psa提供了理论依据。 展开更多
关键词 猕猴桃溃疡病 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种 巢式pcr hrpW
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大豆深加工产品中外源基因检测灵敏度的研究 被引量:1
16
作者 吴姗 吴蓉 +1 位作者 林晓佳 吴志毅 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 2008年第4期139-146,共8页
为了提高大豆深加工食品中外源基因的检测灵敏度,改良了普通PCR反应的引物,并设计了NEST-PCR反应程序。模拟食品加工中高温、高压等处理方法,将转基因大豆研磨成粉状,在高压灭菌锅内进行高温、高压处理。应用新设计的引物35SCP142、CPNO... 为了提高大豆深加工食品中外源基因的检测灵敏度,改良了普通PCR反应的引物,并设计了NEST-PCR反应程序。模拟食品加工中高温、高压等处理方法,将转基因大豆研磨成粉状,在高压灭菌锅内进行高温、高压处理。应用新设计的引物35SCP142、CPNOS165进行外源基因检测,通过对引物的调整,检测灵敏度得到了明显的提高,可以检测到的转基因大豆含量仅为1%,且为经过121℃/30min处理的样品中的外源基因。应用NEST-PCR的高灵敏度的特性,设计了NEST-PCR的两对引物35SCP318和35SCP114,并检测到外源基因的片段。将普通PCR的检测灵敏度和荧光定量PCR的灵敏度作比较,若引物设计合理,且PCR条件适合,普通PCR的检测灵敏度可以和荧光定量PCR的相媲美。 展开更多
关键词 转基因检测 引物优化 nestpcr 荧光定量pcr
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上海地区HTLV—Ⅰ相关高危人群病毒感染的检测 被引量:1
17
作者 伍晓菲 王华 +3 位作者 梁辉 刘晓颖 郑岚 王迅 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第3期25-28,共4页
目的建立人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ(HTLV—Ⅰ)前病毒的核酸检测方法,对HTLV—Ⅰ相关高危标本进行检测,初步了解上海地区HTLV-1在相关疾病和高危人群中的流行特点,探讨核酸检测法在HTLV—Ⅰ高危人群中的检测意义。方法实验收集了6... 目的建立人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ(HTLV—Ⅰ)前病毒的核酸检测方法,对HTLV—Ⅰ相关高危标本进行检测,初步了解上海地区HTLV-1在相关疾病和高危人群中的流行特点,探讨核酸检测法在HTLV—Ⅰ高危人群中的检测意义。方法实验收集了69例淋巴瘤/白血病患者,72例有多次输血史的其他血液病患者以及1例HTLV—Ⅰ相关脊髓病(HAM)/热带痉挛性下肢瘫痪(TSP)疑诊患者血液标本。采用荧光定量PCR筛查HTLV-1前病毒tax基因,酶联免疫法检测血清HTLV—Ⅰ/Ⅱ抗体,对上述2种检测中出现任一阳性结果的标本进一步采用nest—PCR检测HTLV-1前病毒env基因以确定HTLV—Ⅰ的感染。结果仅HAM/TSP疑诊患者tax基因扩增出现阳性曲线;ELISA检测标本血清HTLV—Ⅰ/Ⅱ抗体均为阴性;nest—PCR扩增env基因未见特异性条带。结论上海地区小样本HTLV—Ⅰ相关高危人群中未检出HTLV—Ⅰ感染;建立的核酸检测方法能对HTLV—Ⅰ病毒感染进行有效的筛查和确认。 展开更多
关键词 T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ tax基因 荧光定量pcr ENV基因 nestpcr
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用套式PCR对泌尿生殖道生殖支原体感染现状的检测 被引量:3
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作者 丁雁 李璐 +1 位作者 牟琴峰 杨淑兰 《中国优生与遗传杂志》 1998年第1期19-20,共2页
目的:了解泌尿生殖道生殖支原体的感染状况。方法:采用套式 PCR 对临床正常者46例(女26,男20)和泌尿生殖道炎症患者142例,(男49、女93),进行生殖支原体的检测。结果;(1)临床正常男女性泌尿生殖道生殖支原体的检出率为4.3%(2/46)。(2)泌... 目的:了解泌尿生殖道生殖支原体的感染状况。方法:采用套式 PCR 对临床正常者46例(女26,男20)和泌尿生殖道炎症患者142例,(男49、女93),进行生殖支原体的检测。结果;(1)临床正常男女性泌尿生殖道生殖支原体的检出率为4.3%(2/46)。(2)泌尿生殖道炎症患者的检出率为40.8%(58/142),其中合并 NG、CT、或 UU 感染率占23.2%(33/142),单纯生殖支原体感染率占17.6%(25/142)。结论:泌尿生殖道有生殖支原体的寄居;生殖支原体的感染是泌尿生殖道炎症的病因之一。 展开更多
关键词 套式pcr 生殖支原体 泌尿生殖道炎症 检测
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输血传递病毒与肝炎相关关系的探讨 被引量:1
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作者 乌云 白莉 +3 位作者 安屏 奥敦托娅 其其格 孙美艳 《内蒙古医学院学报》 2000年第4期243-245,共3页
目的 :研究输血传递病毒 (TTV)在不同类型肝病患者中的感染情况及非甲 庚型 (NA G)肝炎中TTV是否为肝炎的致病因子。方法 :采用nest PCR技术对临床上 12 9例肝病患者及反复输血的血液病患者血清检测了TTV DNA。ELISA法检测血清抗HAV Ig... 目的 :研究输血传递病毒 (TTV)在不同类型肝病患者中的感染情况及非甲 庚型 (NA G)肝炎中TTV是否为肝炎的致病因子。方法 :采用nest PCR技术对临床上 12 9例肝病患者及反复输血的血液病患者血清检测了TTV DNA。ELISA法检测血清抗HAV IgM ,HBV M ,抗HCV IgG ,抗HEV IgM ,抗HGV -IgM及血清ALT水平。结果 :12 9例血清中TTV检出率为 19.38% (2 5 / 12 9)。 45例NA G型肝炎患者中检出率为 42 .2 2 % (19/45 ) ,其中急性肝炎 9例 ,慢性肝炎 9例 ,肝硬化 1例 ,肿功均有程度不同的损害。结论 :TTV感染是部分NA G型肝炎患者的致病因子 ,可导致慢性化。除输血传播外尚有肠道传播的可能性。 展开更多
关键词 输血传递病毒 nest-pcr 肝炎 传播途径 流行病学
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大花蕙兰转齿兰环斑病毒外壳蛋白基因及检测 被引量:2
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作者 彭博 魏莉 +1 位作者 杨凯 李潞滨 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2016年第2期234-237,共4页
[目的]通过植物转基因技术获得抗病毒大花蕙兰种质资源,优化转化体系和鉴定方法。[方法]本研究克隆了齿兰环斑病毒外壳蛋白基因,并构建了该基因的p BI121表达载体,用根癌农杆菌介导法转化大花蕙兰,尝试以巢式PCR方法检测转基因再生植株... [目的]通过植物转基因技术获得抗病毒大花蕙兰种质资源,优化转化体系和鉴定方法。[方法]本研究克隆了齿兰环斑病毒外壳蛋白基因,并构建了该基因的p BI121表达载体,用根癌农杆菌介导法转化大花蕙兰,尝试以巢式PCR方法检测转基因再生植株。[结果]优化了大花蕙兰遗传转化体系,建立了利用巢式PCR技术检测转基因大花蕙兰植株的方法,获得了32株转基因株(系)。[结论]优化了以类原球茎为外植体的农杆菌介导转化大花蕙兰的方法,确定以5%10%类原球茎存活时的抗生素(卡那霉素)浓度为筛选浓度;获得了转ORSV CP基因大花蕙兰植株;对大花蕙兰转基因植株检测时,巢式PCR较普通PCR更灵敏、准确。 展开更多
关键词 大花蕙兰 齿兰环斑病毒 外壳蛋白基因 转基因 巢式pcr
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