肝细胞生长因子诱导骨髓间质干细胞分化为心肌细胞 被引量：18

1

作者 方天翎 闵军 +6 位作者 邓小耿 钱世鵾 褚忠华 陈亚进 邵静 魏菁 陈积圣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1167-1170,共4页

目的 :探讨肝细胞生长因子 (HGF)体外诱导骨髓间质干细胞 (MSC)定向分化心肌细胞的一种新方法。方法 :分离SD大鼠骨髓MSC ,培养至 4 - 6代后 ,添加HGF(终浓度 10 μg/L)持续培养 30d ,倒置显微镜下动态观察分化细胞的自律性搏动和对 0 ... 目的 :探讨肝细胞生长因子 (HGF)体外诱导骨髓间质干细胞 (MSC)定向分化心肌细胞的一种新方法。方法 :分离SD大鼠骨髓MSC ,培养至 4 - 6代后 ,添加HGF(终浓度 10 μg/L)持续培养 30d ,倒置显微镜下动态观察分化细胞的自律性搏动和对 0 1%异丙肾上腺素和无Ca2 + 孵育液的反应 ,并行心肌肌凝蛋白表达鉴定。结果 :分化第 14 - 2 0d骨髓间质干细胞增殖形成集落 ,10 % - 5 0 %克隆中开始出现持续节律收缩的细胞群体 ,节律频率为 70- 90次 /min ,异丙肾上腺素加快其搏动速率 ,无Ca2 + 孵育液则抑制之。细胞心肌肌凝蛋白表达鉴定为心肌细胞。结论 :HGF可诱导骨髓间质干细胞分化为心肌细胞 。 展开更多

关键词 肝细胞生长因子 骨髓问质干细胞 心肌 分化

下载PDF 职称材料

体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的初步研究 被引量：10

2

作者 王秀丽 王常勇 +4 位作者 虞星炬 郭希民 段翠密 赵云山 董灵芝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期441-445,共5页

目的 :5 -氮胞苷作为分化诱导剂 ,初步探讨其单独或联合全反式维甲酸应用时对小鼠胚胎干细胞(mESC)分化为心肌细胞的影响 ,旨在建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法 :采用MTT法确定 5 -氮胞苷的非细胞毒性参考剂量。设... 目的 :5 -氮胞苷作为分化诱导剂 ,初步探讨其单独或联合全反式维甲酸应用时对小鼠胚胎干细胞(mESC)分化为心肌细胞的影响 ,旨在建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法 :采用MTT法确定 5 -氮胞苷的非细胞毒性参考剂量。设计不同条件培养基 (5 -氮胞苷单独或配伍全反式维甲酸应用 )对mESC进行诱导分化 ,并通过免疫组化技术及RT -PCR方法等对分化细胞进行鉴定。结果 :5 -氮胞苷的非细胞毒性参考剂量为 8μmol/L ,能够诱导mESC分化为心肌合胞体 (与阴性对照组比较 ,P <0 0 1) ,诱导分化率可达 5 0 %。配伍全反式维甲酸持续诱导的结果等同于单独应用全反式维甲酸的作用效果 (P >0 0 5 ) :即对ESC向心肌细胞的诱导分化没有促进作用。结论 :5 -氮胞苷能够诱导mESC分化为心肌合胞体 ,从而得以建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的方法。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 心肌 分化 阿扎胞苷 维甲酸

下载PDF 职称材料

Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响 被引量：7

3

作者 徐小红 王力 +3 位作者 张宁坤 郑楠 高连如 朱智明 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期796-800,共5页

目的探讨apelin-13蛋白在体外对5-氮胞苷(5-Aza)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向心肌细胞分化的影响。方法采用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,胰酶消化传代;取P2代细胞置于不同分化条件的培养液中分化培养14d,实验分为A、B、C、D组(apel... 目的探讨apelin-13蛋白在体外对5-氮胞苷(5-Aza)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向心肌细胞分化的影响。方法采用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,胰酶消化传代;取P2代细胞置于不同分化条件的培养液中分化培养14d,实验分为A、B、C、D组(apelin-13浓度分别为0、1×10-6、2×10-6和10×10-6mol/L),各组培养基中5-Aza浓度均为10×10-6mol/L。采用流式细胞仪检测hUC-MSCs表面免疫标记,MTT法检测细胞在570nm处的吸光度(A)值,RTPCR检测肌钙蛋白T(cTnT)、GATA-4 mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测心肌细胞表面标志物cTnT的表达。结果流式细胞仪鉴定结果表明,hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、经典人类白细胞抗原Ⅰ类抗原(HLAABC),不表达CD34、CD45、经典人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(HLA-DR)。MTT检测显示,0、10×10-6mol/L apelin-13处理的hUC-MSCs在570nm处的A值分别为0.841±0.290、0.875±0.325,差异无统计学意义(P>0.05)。B、C、D组cTnT mRNA表达水平分别是A组的2.09±1.35、5.24±1.30、1.17±0.63倍,B、C、D组GATA-4 mRNA表达水平分别是A组的2.68±1.18、4.82±0.14、2.14±0.27倍;C组与B、D组比较,cTnT、GATA-4 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色显示,诱导14d后C组细胞cTnT蛋白表达呈阳性。结论 10×10-6mol/L apelin-13对hUC-MSCs无毒性作用,一定浓度的apelin-13蛋白可增强5-Aza诱导hUC-MSCs向心肌细胞分化的效率,浓度为2×10-6mol/L时增强作用最明显。 展开更多

关键词 脐带 间质干细胞 心肌 细胞分化 APELIN-13 5-氮胞苷

下载PDF 职称材料

梗死心肌组织裂解液对鼠骨髓间充质干细胞诱导分化作用的体外研究 被引量：4

4

作者 赵金超 顾春虎 +5 位作者 王云雅 魏旭峰 董小超 刘金成 王云 易定华 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第6期411-415,共5页

目的探讨梗死心肌组织裂解液对骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化的诱导作用。方法取SD大鼠梗死区心肌组织及其周围区域正常心肌组织分别制备梗死心肌组织裂解液和正常心肌组织裂解液;用Balb/c小鼠骨髓细胞进行MSC培养,取生长较好的... 目的探讨梗死心肌组织裂解液对骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化的诱导作用。方法取SD大鼠梗死区心肌组织及其周围区域正常心肌组织分别制备梗死心肌组织裂解液和正常心肌组织裂解液;用Balb/c小鼠骨髓细胞进行MSC培养,取生长较好的第2代MSC制备MSC贴片,分别用DMEM培养基(空白对照组)、加入正常心肌组织裂解液的DMEM培养基(正常心肌组织裂解液组)和加入梗死心肌组织裂解液的DMEM培养基(梗死心肌组织裂解液组)培养。取各组培养14d的MSC,透射电镜下观察细胞超微结构;并进行免疫细胞化学染色,观察α-肌动蛋白(actin)、心肌特异性转录因子4(GATA-4)、心肌特异性肌球蛋白重链(MHC)、心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)、心肌增强因子2(MEF-2)、连接蛋白(Cx)43和Cx45的表达情况。结果超微结构观察显示空白对照组细胞器结构正常;正常心肌组织裂解液组细胞内未见明显的肌丝样结构;而梗死心肌组织裂解液组部分细胞内可见细小的肌丝样结构。免疫细胞化学染色分析显示,空白对照组MSC不表达心肌细胞特异性蛋白;正常心肌组织裂解液组MSC仅表达α-actin;而梗死心肌组织裂解液组MSC表达α-actin、GATA-4、MHC、cTnT、cTnI和MEF-2等心肌特异性标志蛋白,但不表达Cx43和Cx45。结论梗死心肌组织裂解液可以诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化。 展开更多

关键词 间质干细胞 心肌 梗死 细胞分化

下载PDF 职称材料

P19细胞体外DM SO诱导向心肌样细胞分化 被引量：5

5

作者 李秀华 张雷 +2 位作者 王海萍 赵春芳 尹青 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第2期129-132,共4页

目的:体外诱导P19细胞向胚胎心肌样细胞分化.方法:P19细胞经复苏、传代,在体外二甲基亚砜(DMSO)诱导下向心肌细胞分化,分化细胞经HE染色及心肌标志物转录因子(GATA-4),连接蛋白43(connecxin43),α-肌节型肌动蛋白(α-sarcomeric actin)... 目的:体外诱导P19细胞向胚胎心肌样细胞分化.方法:P19细胞经复苏、传代,在体外二甲基亚砜(DMSO)诱导下向心肌细胞分化,分化细胞经HE染色及心肌标志物转录因子(GATA-4),连接蛋白43(connecxin43),α-肌节型肌动蛋白(α-sarcomeric actin)的免疫细胞化学染色后,在光镜、倒置显微镜下观察细胞形态学变化,透射电镜下观察细胞超微结构变化.结果:经DMSO诱导分化后4 d有细胞聚集体形成,6 d有部分细胞GATA-4和connecxin43呈阳性表达,GATA-4阳性表达位于细胞核和细胞质,connecxin43阳性表达呈斑点状分布于心肌细胞胞质内和细胞膜表面.10 d时GA-TA-4和connecxin43阳性表达明显增加,并有部分细胞呈α-sarcomeric actin阳性,阳性表达位于细胞质.电镜观察,未分化细胞为圆形或椭圆形,细胞间连接松散,细胞质较少,细胞器不发达;诱导后6 d,细胞间出现紧密连接和中间连接,细胞质增多,部分细胞表面出现突起,突起内可见微丝.诱导后10d,线粒体、粗面内质网、滑面内质网、高尔基体丰富,并有中心粒形成.结论:P19细胞在DMSO诱导下已有向心肌分化趋向,有类似胚胎心肌细胞形成. 展开更多

关键词 P19细胞 细胞学 细胞分化 干细胞移植 心肌样细胞分化

下载PDF 职称材料

关于骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的诱导剂研究概况 被引量：5

6

作者 张晓琼 凌斌 孙洁 《心血管康复医学杂志》 CAS 2014年第6期683-685,共3页

骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多向分化潜能,且在体外容易扩增培养,是一种治疗心梗理想的种子细胞,通过诱导剂将骨髓间充质干细胞诱导为心肌样细胞是心血管领域研究的热门话题。本文就目前常用的诱导剂作一概况。

关键词 间质干细胞 心肌 细胞分化

下载PDF 职称材料

L-抗坏血酸促进人胚胎干细胞向心肌细胞分化的研究

7

作者 陈景 邱敏 +3 位作者 张海鹏 李慧丽 张梦珍 李晓红 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第5期545-552,共8页

目的用不同浓度的L-抗坏血酸(VitC)作为分化基础培养液中的诱导剂,观察其对人胚胎干细胞(hESC)分化为心肌细胞的影响,探寻一种成分明确、成本低廉且高效的诱导方法。方法复苏hESC,使用干细胞培养液培养至细胞融合度90%后,分别用含不同浓... 目的用不同浓度的L-抗坏血酸(VitC)作为分化基础培养液中的诱导剂,观察其对人胚胎干细胞(hESC)分化为心肌细胞的影响,探寻一种成分明确、成本低廉且高效的诱导方法。方法复苏hESC,使用干细胞培养液培养至细胞融合度90%后,分别用含不同浓度(0、10、20、30、40、50、60、70μmol/L)VitC的分化培养液对其进行诱导分化,在光学显微镜下观察分化过程。用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)分别检测干细胞特异性标志物Nanog和性别决定因子同源盒2(Sox2),心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心脏特异性同源盒转录因子(Nkx2.5)的表达。用免疫荧光检测Nanog、cTnT、Nkx2.5的蛋白表达变化。结果在分化基础培养液中,低浓度VitC(10~30μmol/L)不能诱导h ESC向心肌分化,随着VitC浓度的增高,干细胞逐渐往心肌方向分化,心肌分化效率逐渐提高,Nanog和Sox2的表达量逐渐下降;VitC浓度为40μmol/L或50μmol/L组在第8天开始出现自发跳动细胞,且有cTnT和Nkx2.5阳性表达。realtime PCR结果显示随分化时间延长,cTnT和Nkx2.5的mRNA表达逐渐增加,心肌表面标志物Nkx2.5、cTnT的mRNA表达量在VitC浓度40μmol/L和50μmol/L要比60μmol/L和70μmol/L的诱导效果更高。提示浓度大于60μmol/L就开始出现抑制分化的作用。结论实验研究证实VitC在hESC向心肌分化中是不可或缺的因子,研究还明确了VitC诱导h ESC分化为心肌细胞的适宜浓度范围。 展开更多

关键词 人胚胎干细胞(hESC) 心肌分化 心肌细胞 L-抗坏血酸(VitC) 维生素C

下载PDF 职称材料

比较体外不同条件诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究 被引量：4

8

作者 钱海燕 李庚山 +3 位作者 徐红新 吕菁君 蒋雯 王晶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2198-2201,共4页

目的比较体外不同分化条件下胚胎干细胞(ESC)分化为心肌细胞的分化比率。方法用布法罗大鼠肝细胞(BRL)条件培养基抑制ESC分化及保持其增殖,以维甲酸(RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)及激活素-A(activin-A)为分化诱导剂... 目的比较体外不同分化条件下胚胎干细胞(ESC)分化为心肌细胞的分化比率。方法用布法罗大鼠肝细胞(BRL)条件培养基抑制ESC分化及保持其增殖,以维甲酸(RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)及激活素-A(activin-A)为分化诱导剂,组合成6种分化培养基,采用悬滴悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞,比较各组分化比率。结果6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞,其中以TGF-β1(2μg/L)、activin-A(20μg/L)及20%胎牛血清(FCS)组成的分化培养基可以使高达9280%±222%的ESC分化为心肌细胞,分化比率显著高于其它各组(P<001)。结论以BRL条件培养基培养,TGF-β1、activin-A作分化诱导剂可作为一种理想的ESC体外分化体系。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 心肌 细胞 分化

下载PDF 职称材料

老年骨髓基质细胞移植治疗急性心肌梗死实验研究 被引量：4

9

作者 潘国栋 王凤婕 +2 位作者 吴艳 曾敬 宋健 《郧阳医学院学报》 2004年第2期65-67,71,F002,共5页

目的 :观察老年大鼠骨髓基质细胞 (MSC)能否在急性心肌梗死环境中存活、增殖和向心肌样细胞分化。方法 :选用老年近交系Wistar大鼠 ,取供体鼠MSC ,体外扩增 ,DAPI荧光标记。受体鼠经左冠状动脉结扎建立急性心肌梗死模型。 1周后将标记的... 目的 :观察老年大鼠骨髓基质细胞 (MSC)能否在急性心肌梗死环境中存活、增殖和向心肌样细胞分化。方法 :选用老年近交系Wistar大鼠 ,取供体鼠MSC ,体外扩增 ,DAPI荧光标记。受体鼠经左冠状动脉结扎建立急性心肌梗死模型。 1周后将标记的MSC用直接注射方式移植到梗死灶中 ,移植后 3、7、14d取材 ,观察梗死灶中MSC分布、扩散及心肌特异性蛋白T(TnT)的表达。结果 :在不同移植时间梗死灶中都发现DAPI阳性的细胞 ,且细胞计数随移植时间延长而增多。部分细胞表达TnT ,其中少数细胞出现心肌样横纹。结论 :老年大鼠MSC可在急性心肌梗死环境中存活、增殖 ,有向心肌样细胞分化的能力。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 心肌梗死 细胞移植 老年大鼠 细胞分化 心肌细胞 MSC

下载PDF 职称材料

Junctophilin 1在小鼠胚胎干细胞定向分化心肌细胞及大鼠胚胎心肌发生中的表征 被引量：2

10

作者 梁星光 吴博文 +3 位作者 张维晨 周立民 朱丹雁 楼宜嘉 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期359-365,共7页

目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1(JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据。方法:小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收... 目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1(JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据。方法:小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收集拟胚体转至培养皿中悬浮分化培养。每隔2 d收集细胞供分子生物学评价,并于心肌分化成熟期(第17天),免疫荧光成像原位检测JP1与心肌小节蛋白α-Actinin和Troponin-T是否呈共表达,流式细胞术定量确认JP1阳染率。另以大鼠胎心为研究对象,大鼠受精后第14天起,每隔2 d取胎心直至分娩新生鼠,供RT-PCR和免疫印迹实验用。结果:ES细胞分化过程中,JP1在基因转录层面全程表达,至第11天达高峰。蛋白层面呈一过性表达,在第9天达高峰,此后迅速下降,至分化培养第15天消失,分化成熟期未见表达。大鼠胎心表达趋势与ES细胞分化过程基本一致,但JP1蛋白表达持续在出生后。在分化终端,流式细胞术显示JP2和肌小节蛋白双染率达16.59%,而未见JP1阳染细胞。结论:JP1基因在小鼠ES细胞定向分化心肌细胞全程均有转录,但JP1仅在分化早期有一过性表达。大鼠胎心JP1表达趋势与ES细胞分化过程基本相一致。 展开更多

关键词 Junctophilin 1 胚胎干细胞 连接蛋白类 心肌/生长和发育 心肌/细胞学 细胞分化 定向分化 大鼠胚胎 心肌发生

下载PDF 职称材料

体外培养脂肪干细胞向心肌细胞诱导的实验研究 被引量：2

11

作者 梁慧 王庆胜 +1 位作者 方海滨 杨红梅 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第21期5050-5053,共4页

目的:研究诱导体外培养脂肪干细胞(ADSCs)向心肌细胞分化的方法。方法:培养原代脂肪干细胞经CD34、CD44、CD105抗体标记鉴定后,进行5-aza诱导培养。通过鉴定心肌细胞特异性抗原横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T检测细胞分化情况。结... 目的:研究诱导体外培养脂肪干细胞(ADSCs)向心肌细胞分化的方法。方法:培养原代脂肪干细胞经CD34、CD44、CD105抗体标记鉴定后,进行5-aza诱导培养。通过鉴定心肌细胞特异性抗原横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T检测细胞分化情况。结果:ADSCs高表达间充质干细胞特异抗原CD44、CD105,不表达CD34;表达HLA-I抗原,不表达HLA-抗原。经5-aza诱导后,细胞形态变为类似于心肌样细胞。免疫细胞化学检测横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性,流式细胞仪显示心肌细胞特异性抗原阳性细胞为94%。结论:脂肪干细胞具有向心肌细胞分化的可能,在组织工程学及干细胞移植领域有着良好的应用前景。 展开更多

关键词 干细胞/细胞学 脂肪组织/细胞学 心肌/细胞学 细胞分化 细胞 培养的

下载PDF 职称材料

促进心肌干细胞向心肌细胞分化的策略 被引量：1

12

作者 汪蕾 陈旭翔 +4 位作者 伍权华 吴浩 龙会宝 侯婧瑛 王彤 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第5期774-780,共7页

背景:近年研究表明心脏内存在内源性的心肌干细胞,可以修复受损心肌,使心肌再生。目的:综述目前能够提高心肌干细胞分化的方法。方法:应用计算机检索Pub Med数据库中近10年有关心肌干细胞分化的文献,检索词为"cardiac stem cells,c... 背景:近年研究表明心脏内存在内源性的心肌干细胞,可以修复受损心肌,使心肌再生。目的:综述目前能够提高心肌干细胞分化的方法。方法:应用计算机检索Pub Med数据库中近10年有关心肌干细胞分化的文献,检索词为"cardiac stem cells,cardiac progenitor cells,differentiation",选择以提高心肌干细胞分化为主题的文章,最终选取代表性英文文献64篇。结果与结论:通过导入细胞因子,micro-RNA以及一些物理与化学的方法诱导心肌干细胞向心肌细胞分化,从而显著提高了心肌干细胞治疗心肌梗死的效率。 展开更多

关键词 心肌干细胞 心肌细胞 干细胞 心肌梗死 分化 国家自然科学基金

下载PDF 职称材料

人羊水来源c-kit＋与c-kit-间充质干细胞生物学特征及体外心肌诱导分化能力的比较

13

作者 白静 王一茹 +3 位作者 刘丽凤 陈杰 苏绍萍 王禹 《中华老年多器官疾病杂志》 2012年第4期294-300,共7页

目的比较人羊水来源c-kit＋与c-kit-间充质干细胞的生物学特征及体外心肌分化能力。方法通过常规产前诊断或自愿引产，以羊膜腔穿刺术获取14份孕中期羊水（15～31周），通过流式细胞仪分选c-kit＋间充质干细胞，比较c—kit＋干细胞与c-k... 目的比较人羊水来源c-kit＋与c-kit-间充质干细胞的生物学特征及体外心肌分化能力。方法通过常规产前诊断或自愿引产，以羊膜腔穿刺术获取14份孕中期羊水（15～31周），通过流式细胞仪分选c-kit＋间充质干细胞，比较c—kit＋干细胞与c-kit-干细胞的细胞形态及生长曲线。流式细胞仪及免疫细胞化学分析对两种细胞进行表型鉴定，比较其体外向成骨、成脂及心肌样细胞诱导分化能力。RT-PCR和Westonblot检测相关基因及蛋白的表达。结果14份羊水标本中，有5份标本可以分选到c—kit＋羊水干细胞，分布在孕16-22周，分选的细胞数量占贴壁细胞的（3．30±1．24）％。羊水干细胞以成纤维状为主，可以稳定传代，体外培养可增殖到50代以上。经过c—kit分选后，细胞呈均匀一致的长纤维状，排列规律。C-kit＋及c-kit-羊水干细胞具有相似的生长曲线。两种细胞均具有间充质干细胞特征，表达间充质干细胞标记（CD29，CD44，CD73，CD90，CDl05），不表达造血细胞系标记（CD34，CD45），表达I类人类组织相容性抗原（HLA—ABC），不表达II类人类组织相容性抗原（HLA—DR）。Oct-4及SSEA-4胚胎干细胞标记在c-kit＋干细胞的表达比率明显高于c．kit-干细胞。两种细胞在体外均可以向成脂细胞、成骨细胞分化。成脂细胞诱导后，可以看到细胞内脂滴聚集，油红0染色阳性。成骨细胞诱导后，可以看到钙盐沉积，VonKossa染色阳性。两种细胞分别与新生乳鼠心肌共培养，体外向心肌细胞诱导，c—kit＋羊水干细胞可以检测到GATA-4，α-actin，Cx43和cTnT基因及蛋白的表达。而c-kit-干细胞在诱导后只表达GATA-4的基因及蛋白。结论羊水来源c—kit＋及c—kit-干细胞均表达间充质干细胞表型特征，体外可以向成脂、成骨细胞分化。然而，c—kit＋干细胞的心肌样细胞分化能力明显强于c—kit-干� 展开更多

关键词 c—kit 羊水 间充质干细胞 心肌 细胞分化

下载PDF 职称材料

PTEN在胚胎早期心脏发育过程中的作用

14

作者 马征来 常青 +4 位作者 夏潮勇 王丽京 吴婷 李艳 杨雪松 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期137-140,共4页

目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部... 目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部分鸡胚37℃孵箱继续培养30 h,待其发育形成心管,观察过表达PTEN对心管发生的影响;另一部分鸡胚在超净台内完成心肌干细胞的离体,体外培养使其分化发育成心肌组织,主要研究PTEN在细胞增殖、分化和凋亡过程中的作用。结果 30 h后鸡胚整体的免疫组织化学(N-cadherin)结果显示,PTEN-WT组和PTEN-G129E组鸡胚心管出现了反向环化、多囊化等畸形,GFP组和PTEN-C124S组心管发育受到的影响较小;转染后离体培养得到的心肌组织的跳动频率与GFP组下降的速度加快,且维持时间缩短,GFP组与PTEN-WT组差异有显著性(P<0.05),PTEN-WT组与PTEN-C124S组、PTEN-G129E组差异无显著性(P>0.05)。结论 PTEN蛋白酯酶可能参与早期胚胎心肌干细胞之间黏附分子的表达从而调节细胞迁移、分化发育,并加速了心肌组织的衰老。 展开更多

关键词 PTEN 原肠胚 心肌干细胞 N-CADHERIN 心肌分化

下载PDF 职称材料

骨髓基质细胞在梗塞区与非缺血区心肌中的分化

15

作者 潘国栋 宋健 刘维新 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期309-315,共7页

目的　观察心肌梗塞环境对移植骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞分化的影响。方法　采用成年近交系Wis tar大鼠 ,经左冠状动脉前降支结扎建立急性心肌梗塞模型。术后 1周 ,将来自同种供体、经体外扩增和DAPI标记的MSC分别植入梗塞区和非... 目的　观察心肌梗塞环境对移植骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞分化的影响。方法　采用成年近交系Wis tar大鼠 ,经左冠状动脉前降支结扎建立急性心肌梗塞模型。术后 1周 ,将来自同种供体、经体外扩增和DAPI标记的MSC分别植入梗塞区和非缺血区心肌。移植后 1、2、4周取材、连续冰冻切片 ,观察两种环境中MSC的分布、迁移及心肌特异性肌钙蛋白T(TnT)的表达。结果　植入梗塞区中的MSC扩散较快、增殖似更明显。两种环境中都可见移植细胞表达TnT ,且有少数细胞呈现心肌样横纹 ,但梗塞区移植细胞TnT阳性率显著高于非缺血区。结论　急性心肌梗塞环境有利于骨髓基质细胞向心肌样细胞分化。 展开更多

关键词 心肌梗塞 骨髓基质细胞 MSC 心肌样细胞 分化 心肌

下载PDF 职称材料

脂肪组织来源基质细胞的心肌样细胞分化

16

作者 周青 严萍萍 施海明 《心血管病学进展》 CAS 2008年第4期528-531,共4页

脂肪组织来源基质细胞具有多向分化潜能、易获得性、易于分离培养和较强的再生能力等突出优点,已成为一种新的组织工程干细胞来源。现就脂肪组织来源基质细胞生物学特性、影响分化因素、向心肌样细胞分化及治疗缺血性心脏疾病等方面进... 脂肪组织来源基质细胞具有多向分化潜能、易获得性、易于分离培养和较强的再生能力等突出优点,已成为一种新的组织工程干细胞来源。现就脂肪组织来源基质细胞生物学特性、影响分化因素、向心肌样细胞分化及治疗缺血性心脏疾病等方面进行综述。 展开更多

关键词 脂肪组织来源基质细胞 心肌分化 缺血性心脏病

下载PDF 职称材料

MyoD在不同发育阶段小鼠心肌的表达定位

17

作者 薛霖莉 冀云燕 +6 位作者 郝晓静 曹靖 任华伟 李艺雷 耿建军 王海东 赫晓燕 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第8期59-64,共6页

[目的]为了探讨小鼠MRFs基因家族中MyoD基因与心肌细胞增殖分化之间的关系,[方法]本研究对幼年、性成熟、体成熟、老年4组小鼠心肌MyoD基因的表达进行研究。取小鼠心肌组织,采用实时荧光定量PCR技术检测MyoD mRNA在不同发育阶段小鼠心... [目的]为了探讨小鼠MRFs基因家族中MyoD基因与心肌细胞增殖分化之间的关系,[方法]本研究对幼年、性成熟、体成熟、老年4组小鼠心肌MyoD基因的表达进行研究。取小鼠心肌组织,采用实时荧光定量PCR技术检测MyoD mRNA在不同发育阶段小鼠心肌的表达,免疫组织化学法定位MyoD在心肌中的分布。[结果]HE染色显示幼年鼠肌纤维排列紧密,细胞核中心化现象多见,随着年龄增长,肌纤维排列疏松,细胞核中心化现象少见,老年鼠稍有回升。免疫组化MyoD在幼年小鼠中表达量最高,性成熟、体成熟、老年鼠中MyoD表达量均低于幼年鼠。其中性成熟小鼠表达量高于体成熟小鼠和老年小鼠。MyoD在小鼠的不同发育阶段心肌上均有表达,其中在幼年阶段心肌上的表达最显著,而在性成熟阶段和体成熟阶段心肌上的表达降低,老年阶段表达稍有回升,且差异显著。[结论]MyoD对于肌肉的形成有重要的作用,尤其是在胚胎发育早期。MyoD表达量与小鼠心肌细胞的发育具有相关性,即MyoD在不同发育阶段小鼠心肌细胞的表达存在差异性,可以作为判断肌细胞发育程度的一种指标,为进一步研究肌肉作用机制提供理论依据。 展开更多

关键词 小鼠 心肌 MyoD基因 不同发育阶段 差异性

下载PDF 职称材料

P19-αMHC—EGFP干细胞株的构建及其向心肌细胞诱导分化的初步研究

18

作者 龚杰 张奇军 +6 位作者 汪剑 孙凤荣 钱玲梅 孔祥清 杨荣 盛燕辉 曹克将 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期691-694,共4页

目的构建稳定携带心肌特异报告基因pαMHC—EGFP的P19细胞株并诱导其向心肌细胞分化。方法应用脂质体转染法转染质粒pαMHC—EGFP到P19干细胞，通过G418筛选和有限稀释法得到稳定携带pαMHC—EGFP的细胞克隆P19-αMHC—EGFP。诱导P19一o... 目的构建稳定携带心肌特异报告基因pαMHC—EGFP的P19细胞株并诱导其向心肌细胞分化。方法应用脂质体转染法转染质粒pαMHC—EGFP到P19干细胞，通过G418筛选和有限稀释法得到稳定携带pαMHC—EGFP的细胞克隆P19-αMHC—EGFP。诱导P19一otMHC—EGFP向心肌细胞分化，在诱导的不同阶段观测其超微结构的变化，在诱导分化进程中监测“跳动”的发绿色荧光的心肌细胞出现。同时与未转染pαMHC—EGFP的P19细胞进行心肌细胞分化率及心肌肌钙蛋白I（cTnI）表达量的对比。结果电镜结果提示在诱导的第10天，部分细胞出现心肌细胞样特征。P19-αMHC—EGFP在诱导分化的第7天出现发强绿色荧光并“跳动”的心肌细胞，同时与对照P19细胞在心肌细胞分化率及cTnI表达量上差异无统计学意义（P〉0．05）。结论P19-αMHC-EGFP细胞株在分化为心肌细胞的同时具有强绿色荧光标记，其向心肌细胞分化的效率及cTnI的合成未受影响。这一特征有利于对分化成熟的心肌细胞进行识别和纯化，从而应用于心肌细胞替代治疗。 展开更多

关键词 心肌 干细胞 细胞分化

原文传递

加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究 被引量：6

19

作者 韩析言 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期43-48,5,共7页

目的探讨加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)向心肌样细胞分化的实验研究。方法采用贴壁法获取大鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原。MTT法检测加味丹参饮对BMSCs最大无毒浓度,用第3代细... 目的探讨加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)向心肌样细胞分化的实验研究。方法采用贴壁法获取大鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原。MTT法检测加味丹参饮对BMSCs最大无毒浓度,用第3代细胞分组诱导:正常对照组,加味丹参饮组,5-氮胞苷组,加味丹参饮+5-氮胞苷组,应用western blot检测各组细胞结合蛋白(Desmin),α-肌球蛋白重链(α-MHC),心肌肌钙蛋白T(c Tn T)蛋白表达,RT-PCR法检测各组细胞GATA-4,缝隙连接蛋白43(CX43)及Nkx2-5 mRNA表达。结果大鼠BMSCs表面CD90阳性率高于95%,CD34及CD45阳性率低于5%。加味丹参饮对BMSCs最大无毒浓度为0.625 g/L。与正常对照组比较,加味丹参饮组,5-氮胞苷组,加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin,α-MHC及c Tn T蛋白表达量上调,GATA-4,CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与加味丹参饮组或5-氮胞苷组比较,加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin,α-MHC及c Tn T蛋白表达量上调,GATA-4,CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论加味丹参饮能够诱导BMSCs向心肌样细胞转化,与5-氮胞苷联合给药具有协同作用。 展开更多

关键词 加味丹参饮 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞 5-氮胞苷 分化

下载PDF 职称材料

自组装短肽水凝胶支架三维培养环境对骨髓间充质干细胞生物学特性及心肌方向分化的影响 被引量：4

20

作者 赵正德 陈振银 +3 位作者 张慧楠 龚剑萍 许少丹 罗忠礼 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期45-51,共7页

目的:探究短肽GFS-4自组装形成的水凝胶作为支架材料构建三维微环境对BMSCs生物学特性及向心肌细胞方向诱导分化过程的影响。方法:刚果红染色、红细胞膜裂解实验检测短肽GFS-4自组装效果及对细胞膜是否具有裂解作用;CCK8和AO/EB染色分... 目的:探究短肽GFS-4自组装形成的水凝胶作为支架材料构建三维微环境对BMSCs生物学特性及向心肌细胞方向诱导分化过程的影响。方法:刚果红染色、红细胞膜裂解实验检测短肽GFS-4自组装效果及对细胞膜是否具有裂解作用;CCK8和AO/EB染色分别检测对BMSCs活性和凋亡的影响;Real-time PCR分析BMSCs诱导分化后MLC-2v、GATA-4基因表达情况。结果:GFS-4自组装后形成致密凝胶,自组装前后对细胞膜无损伤;三维培养环境细胞呈球形生长,细胞活力和凋亡速度均低于二维培养环境。三维培养组在诱导分化过程中的第5天和第7天MLC-2v、GATA-4基因表达均显著高于二维组(P<0.05)。结论:短肽GFS-4自组装水凝胶构建的三维微环境延缓了BMSCs的增殖速度和凋亡速度,并促进向心肌方向诱导分化过程中MLC-2v、GATA-4基因的表达。 展开更多

关键词 细胞三维培养 自组装短肽 骨髓间充质干细胞 心肌分化

原文传递