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以疫苗免疫为核心的猪气喘病控制与净化技术 被引量:25
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作者 华利忠 邵国青 周勇岐 《中国兽药杂志》 2012年第7期50-53,共4页
猪气喘病的控制和净化已成为养猪产业急需解决的难题,本文简述了国外的研究动态,提出控制和净化技术须从种猪、环境、疫苗和药物四个层次依次着手,介绍了常用的药物组合和用药策略,肯定了灭活疫苗的明显效果,报告了活疫苗(168株)在突破... 猪气喘病的控制和净化已成为养猪产业急需解决的难题,本文简述了国外的研究动态,提出控制和净化技术须从种猪、环境、疫苗和药物四个层次依次着手,介绍了常用的药物组合和用药策略,肯定了灭活疫苗的明显效果,报告了活疫苗(168株)在突破母源抗体,占位效应和刺激粘膜免疫和细胞免疫的显著作用,提出我国从龙头企业核心种猪场实施净化猪气喘病的可行思路,并提出具体的建议措施。 展开更多
关键词 猪气喘病 疫苗免疫 净化
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Immune Responses to the Attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 Strain Vaccine by Intrapulmonic Immunization in Piglets 被引量:22
2
作者 FENG Zhi-xin, SHAO Guo-qing, LIU Mao-jun, WU Xu-su, ZHOU Yong-qi and GAN Yuan Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/National Center for Engineering Research of Veterinary Bio-Products, Ministry of Agriculture, Nanjing 210014, P.R.China 《Agricultural Sciences in China》 CSCD 2010年第3期423-431,共9页
To investigate the immune responses to the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain vaccine, 8-15 d old piglets were immunized with M. hyopneurnoniae 168 strain vaccine by intrapulmonic route. And the specific I... To investigate the immune responses to the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain vaccine, 8-15 d old piglets were immunized with M. hyopneurnoniae 168 strain vaccine by intrapulmonic route. And the specific IgG antibody in serum, lymphoproliferation, IFNT, and specific secretory IgA (SIgA) antibody in bronchoalveolar lavage fluid were detected on 30 and 60 d post-immunization (DPI), respectively. On 60 DPI, all the pigs except for those in health control group were challenged with a field M. hyopneumoniae strain JS. Necropsy was performed on 30 d post-challenge (DPC). The results showed that IFN7 and specific SIgA were stimulated on surface of respiratory tract after immunization. And peripheral blood mononuclear cells could also be proliferated about 1.81 and 2.12 fold on 30 and 60 DPI when stimulated by M. hyopneumoniae protein in vitro. However, no serum IgG antibody against M. hyopneumoniae was detected during the whole immune phage. After challenge, vaccinated pigs were observed with only very slight histological lesion in individual lobes. None of vaccinated pigs showed any clinical signs. While the unvaccinated pigs from challenge control group showed varying degrees of clinical sign and severe macroscopical lesion of mycoplasmal pneumonia of swine (MPS). The result suggested that the attenuated M. hyopneumoniae 168 strain vaccine inoculated by intrapulmonic route could activate the systemic cellular immunity, the local mucosal immunity and IFNγ secretion in respiratory tract to against M. hyopneumoniae infection in piglets. 展开更多
关键词 mycoplasma hyopneumoniae attenuated vaccine cellular immunity mucosal immunity
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猪气喘病实验猪模型的建立 被引量:22
3
作者 邵国青 刘茂军 +4 位作者 孙佩元 王继春 杜改梅 周勇岐 刘冬霞 《微生物与感染》 2007年第4期215-218,共4页
目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15~25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干... 目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15~25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。 展开更多
关键词 猪气喘病 猪肺炎支原体 实验猪模型
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猪肺炎支原体MY-99株膜蛋白SDS-PAGE分析及免疫原性研究 被引量:17
4
作者 熊焰 孙霞 苟琳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期74-78,共5页
采用TritonX 100和KI两种方法分步提取猪肺炎支原体MY 99株膜蛋白,结果显示,0 6mol/LKI溶液具有较好的溶解蛋白质的作用。经SDS PAGE和免疫印迹分析表明,膜蛋白的分子量在14—100KD之间,其中36KD和64KD为保护性抗原。研究还发现,猪肺炎... 采用TritonX 100和KI两种方法分步提取猪肺炎支原体MY 99株膜蛋白,结果显示,0 6mol/LKI溶液具有较好的溶解蛋白质的作用。经SDS PAGE和免疫印迹分析表明,膜蛋白的分子量在14—100KD之间,其中36KD和64KD为保护性抗原。研究还发现,猪肺炎支原体MY 99株膜蛋白具有非特异性和特异性的致有丝分裂作用,对T淋巴细胞刺激的转化率分别为10 08%和24 75%(P<0 05),并能诱导机体产生高效价的抗体,免疫后7d、14d和21d抗体效价达1∶23.50、1∶26.33和1∶27.83。 展开更多
关键词 肺炎 支原体 MY-99株 膜蛋白 SDS-PAGE分析 免疫原性
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猪肺炎支原体P46基因的原核表达与间接ELISA方法的建立 被引量:20
5
作者 沈青春 王芳 +4 位作者 韩明远 覃青松 范学政 杨汉春 宁宜宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期431-437,共7页
猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体,本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆,并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG,然后再克隆到pET28a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内实现了高效表达,表达产物相对分子质量约为31ku,... 猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体,本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆,并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG,然后再克隆到pET28a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内实现了高效表达,表达产物相对分子质量约为31ku,约占菌体总蛋白35%,表达形式为包涵体,通过Western blotting证明表达产物与猪肺炎支原体高免血清具有很好的反应原性和特异性。将大肠杆菌表达的猪肺炎支原体P46重组蛋白经过洗涤、过柱纯化后,作为间接ELISA包被抗原用于检测猪血清中猪肺炎支原体抗体,通过对各参数和试剂的优化建立了rP46-ELISA方法,获得了较好的效果,通过与现有ELISA检测方法的比较,结果表明二者间具有较高的符合率。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 P46蛋白 原核表达 ELISA
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猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:20
6
作者 武昱孜 靳蒙蒙 +4 位作者 白方方 张旭 华利忠 雷治海 邵国青 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1268-1272,共5页
根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模... 根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间的线性关系表达式为Ct=-3.426×lg(conc)+43.343,有良好的线性关系,标准曲线的相关系数为0.997,扩增效率为95.85%,重复性良好。对江苏省某猪场的48份猪肺组织进行荧光定量PCR检测,结果有43份肺组织呈现阳性,阳性检出率为89.58%,比巢式PCR的敏感性高。表明,该检测方法能用于Mhp的快速检测,可对猪支原体肺炎的早期诊断和流行病学调查提供新的技术手段。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 P97基因 荧光定量PCR TaqMan-BHQ探针
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猪肺炎支原体培养技术研究 被引量:15
7
作者 还红华 邵国青 +2 位作者 倪艳秀 王继春 何家惠 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期70-71,共2页
目的 摸索猪肺炎支原体的最佳培养技术。方法 选取不同的培养基 ,以不同的培养、保存方法检测培养结果。结果与结论 培养是以KM2 为最佳 ,在培养过程中注意适当接触氧气 ,长期保存培养物必须冻干 ,冻干培养物保存时间可达10年以上。
关键词 猪肺炎支原体 Mhp培养 猪地方流行性肺炎
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猪肺炎支原体中国分离株热休克蛋白Hsp70(Dnak)的全基因克隆及C末端基因的表达与免疫活性分析 被引量:15
8
作者 李媛 张建华 +2 位作者 王亮 乔祖建 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期169-173,共5页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,MHP)是猪气喘病的病原。DnaK又称为热休克蛋白Hsp70,具有分子伴侣和免疫的作用。以MHP中国分离株Yin-1为模板,扩增了DnaK基因的全序列,将该序列克隆到pMD18-T载体上并测序。测序结果Yin-1株DnaK... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,MHP)是猪气喘病的病原。DnaK又称为热休克蛋白Hsp70,具有分子伴侣和免疫的作用。以MHP中国分离株Yin-1为模板,扩增了DnaK基因的全序列,将该序列克隆到pMD18-T载体上并测序。测序结果Yin-1株DnaK基因即Hsp70基因全长1 803 bp,编码600 aa,第631~633位TGA在支原体编码色氨酸而不是作为终止密码子。将该序列与多种致病支原体DnaK基因进行分析比较,发现Yin-1株与232株、J株、7 448株等MHP菌株的DNA同源性为99.3%~99.4%,氨基酸同源性为99.2%~99.3%,而与非同种支原体的DNA和氨基酸同源性仅为64.5%~74.4%和59.3%~77%。这表明DnaK基因在种内高度保守,种间差异较大。以pET28a为载体构建重组质粒,原核表达DnaK C末端大小为1 kb左右的基因,对表达的蛋白进行纯化后,通过Western blot检测它的免疫活性。原核表达得到大小为41 ku的目的蛋白,经Western blot证实,纯化蛋白可与MHP阳性猪血清反应,具有免疫活性。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 猪喘气病 伴侣蛋白DnaK 热休克蛋白70
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猪肺炎支原体的分离方法 被引量:17
9
作者 韦艳娜 白昀 +6 位作者 孔猛 冯志新 刘茂军 熊祺琰 白方方 吴叙苏 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期104-107,共4页
为了寻求分离猪肺炎支原体更好的方法,本试验采用剪碎法、研磨法、匀浆法和灌洗法对猪肺组织进行处理,并研究了不同肺脏组织处理方法对猪肺炎支原体活力的影响。结果显示,剪碎法与灌洗法获得的处理液对猪肺炎支原体的影响小于研磨法与... 为了寻求分离猪肺炎支原体更好的方法,本试验采用剪碎法、研磨法、匀浆法和灌洗法对猪肺组织进行处理,并研究了不同肺脏组织处理方法对猪肺炎支原体活力的影响。结果显示,剪碎法与灌洗法获得的处理液对猪肺炎支原体的影响小于研磨法与匀浆法。采用剪碎法、灌洗法和研磨法对100份猪肺组织进行猪肺炎支原体野毒株分离的结果显示,经PCR鉴定,剪碎法分离到1株猪肺炎支原体,分离率为1%;研磨法分离到7株猪肺炎支原体,分离率为7%;灌洗法分离到2株猪肺炎支原体,分离率为2%。以上结果表明,研磨法获得的组织处理液对支原体活力有一定的影响,但其分离率好于剪碎法和灌洗法。因此,研磨法是一种较好的猪肺炎支原体分离方法。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 分离培养
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猪肺炎支原体主要抗原蛋白的研究进展 被引量:17
10
作者 张悦 刘茂军 邵国青 《中国农学通报》 CSCD 2013年第2期16-22,共7页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和新型疫苗的研究发展上受到一定限制,从而影响了对MPS的控制。本研究综合Mhp主要粘附因子、膜蛋白及细胞质蛋白等主要抗原蛋白的研究进展,为该病原致病机理研究、建立特异性诊断方法和推动基因工程疫苗发展提供一定的理论基础,对MPS的正确诊断、检测、免疫预防和控制也有重要意义。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 特异性抗原蛋白 特异性诊断方法 疫苗
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检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立 被引量:15
11
作者 刘茂军 靳岷 +2 位作者 杜改梅 邵国青 张映 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第5期437-441,共5页
选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间... 选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min。对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 检测方法 间接ELISA
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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立及应用 被引量:15
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作者 逯晓敏 冯志新 +4 位作者 刘茂军 吴叙苏 甘源 张映 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期91-95,共5页
根据GenBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体不同菌株培养物进行了扩增,并对经肺内免疫猪支原体肺炎活疫苗后支气管肺泡灌洗液进行了检测。结果表明,不... 根据GenBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体不同菌株培养物进行了扩增,并对经肺内免疫猪支原体肺炎活疫苗后支气管肺泡灌洗液进行了检测。结果表明,不同菌种均能扩增出427 bp的目的条带,而其他病原菌未出现特异性扩增条带。建立的套式PCR方法检测猪肺炎支原体的最低检测限度为10个CCU(颜色变化单位)。支气管肺泡灌洗液检测结果表明,经肺内免疫的猪支气管肺泡灌洗液扩增结果均为阳性。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 P36 套式PCR
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猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达 被引量:11
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作者 刘茂军 邵国青 +1 位作者 张映 聂向庭 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期207-211,共5页
通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有... 通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 P97基因 克隆 表达
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猪圆环病毒与其它病原共感染的研究进展 被引量:14
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作者 杨雁婷 徐雷 +2 位作者 黄瑶 徐志文 朱玲 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1016-1024,共9页
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是一种全球流行的高度传染性病毒,可引起猪圆环病毒病(PCVD)和猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)。PCV包括PCV1、PCV2、PCV3和PCV4四种基因型。目前已有研究报道PCV单独感染动物不会导致明显的PCVAD,而与其... 猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是一种全球流行的高度传染性病毒,可引起猪圆环病毒病(PCVD)和猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)。PCV包括PCV1、PCV2、PCV3和PCV4四种基因型。目前已有研究报道PCV单独感染动物不会导致明显的PCVAD,而与其他病原如PRRSV、PPV、CSFV、PRV、PEDV、SS2、HPS和Mhp等共感染后会加重临床症状的表现。本文总结了PCV与猪源病毒、细菌和支原体之间发生共感染的现况及基础研究,为混合感染疾病的预防以及新疫苗的研发提供新思路。 展开更多
关键词 猪圆环病毒(PCV) 共感染 病毒 细菌 肺炎支原体
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抗猪支原体共同抗原单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:10
15
作者 孟书霞 焦新安 +4 位作者 邵国青 刘文博 潘志明 张如宽 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期127-131,共5页
以猪肺炎支原体 (Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp) 16 8菌株F332作为抗原 ,免疫 8周龄BALB/c小鼠 ,利用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得两株能稳定分泌特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株单抗与Mhp和猪鼻支原体 (M .hyorhinis ,Mh)等反应 ,而... 以猪肺炎支原体 (Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp) 16 8菌株F332作为抗原 ,免疫 8周龄BALB/c小鼠 ,利用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得两株能稳定分泌特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株单抗与Mhp和猪鼻支原体 (M .hyorhinis ,Mh)等反应 ,而不与鸡支原体、对照血清等反应。结果表明两株单抗可能是针对猪支原体共同抗原的单抗。用SDS_PAGE电泳和Western_blot分析猪支原体的膜蛋白成分 ,结果显示 ,猪支原体的共同抗原是 80kd和 30kd蛋白 ,两株单抗均与Mhp和Mh的 30kd蛋白条带反应 ,表明这两株单抗特异地针对猪支原体的共同抗原成分 30kd蛋白。可以看出 ,这两株单抗在Mhp的抗原分析。 展开更多
关键词 制备 鉴定 猪肺炎支原体 单克隆抗体 共同抗原
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一株猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定 被引量:12
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作者 刘茂军 邵国青 +5 位作者 周勇岐 苏国东 王继春 孙佩元 冯志新 刘冬霞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期308-310,共3页
从猪支原体肺炎病例病料中分离得到1株支原体,对其进行培养试验、代谢抑制试验、PCR鉴定和动物回归试验。分离株攻毒猪后,该猪出现典型的猪支原体肺炎临床症状和病变,证明该分离株为猪肺炎支原体。这为猪肺炎支原体的研究提供了条件。
关键词 猪肺炎支原体 分离 鉴定 毒力
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猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重PCR检测方法的建立与应用 被引量:11
17
作者 刘茂军 王占伟 +4 位作者 韦艳娜 马庆红 杨莉莉 周勇岐 邵国青 《中国兽药杂志》 2012年第9期7-10,共4页
根据猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的16S rRNA基因设计3条引物,建立Mhp和Mhr的双重PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验。应用建立的方法检测了临床样品和疫苗样品。结果显示,该方法具有良好的特异性,最低可检测到0.6... 根据猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的16S rRNA基因设计3条引物,建立Mhp和Mhr的双重PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验。应用建立的方法检测了临床样品和疫苗样品。结果显示,该方法具有良好的特异性,最低可检测到0.66 ng的Mhp基因组DNA和0.58 ng Mhr基因组DNA。临床样品和疫苗样品检测结果与普通PCR检测结果一致。该双重PCR方法可用于Mhp与Mhr的鉴别、诊断以及疫苗纯粹性检查,快速而准确。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 猪鼻支原体 PCR 检测
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猪肺炎支原体168弱毒株P46基因的克隆和鉴定 被引量:6
18
作者 邵国青 钱建飞 +3 位作者 凌雯 杨奎 赵军 蔡宝祥 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1999年第3期157-161,共5页
猪肺炎支原体的表面抗原基因 P46基因可引起宿主早期特异性免疫反应,其分子量约46 k Da。根据 Gen Bank 公布的 P46基因序列设计1对能扩增 1 377 bp P46结构基因的引物(5: G G C A A G C... 猪肺炎支原体的表面抗原基因 P46基因可引起宿主早期特异性免疫反应,其分子量约46 k Da。根据 Gen Bank 公布的 P46基因序列设计1对能扩增 1 377 bp P46结构基因的引物(5: G G C A A G C T T C A G G T T G T G G A C A G A C A G,3: A C C G G A T C C A T C A C A T C A G A A A G A G C)作 P C R,成功地从猪肺炎支原体168弱毒株染色体 D N A 中扩增出目的基因。 P C R 产物克隆于 p U C19质粒中,部分测序表明克隆基因与 J株基因同源性达96% 。其变异主要表现为 A 碱基缺失或变为 C碱基;人工致弱株外显子基因中 A、 T 碱基较 G、 C可能有更高的易变性。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 PCR P46基因 克隆
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麻黄附子细辛汤治疗小儿支原体肺炎对肺泡灌洗液中支原体病菌含量和氧化应激水平影响 被引量:11
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作者 李西云 陈恒 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第9期76-78,共3页
目的分析麻黄附子细辛汤治疗小儿支原体肺炎对患儿肺泡灌洗液中支原体病菌含量和氧化应激水平影响。方法选取医院2016年10月—2018年10月收治的小儿支原体肺炎患儿108例,分为两组。对照组给予常规治疗,观察组给予常规治疗联合麻黄附子... 目的分析麻黄附子细辛汤治疗小儿支原体肺炎对患儿肺泡灌洗液中支原体病菌含量和氧化应激水平影响。方法选取医院2016年10月—2018年10月收治的小儿支原体肺炎患儿108例,分为两组。对照组给予常规治疗,观察组给予常规治疗联合麻黄附子细辛汤治疗,分析两组患儿治疗后的临床疗效。结果观察组治疗后发热消失时间(1.79±0.32)d、咳嗽消失时间(3.56±0.39)d、肺部干湿罗音消失时间(5.20±0.78)d短于对照组(P<0.05)。两组治疗前肺泡灌洗液支原体病菌量组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后肺泡灌洗液支原体病菌量低于对照组(P<0.05)。两组治疗前肺泡灌洗液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗5 d、10 d后MDA水平低于对照组,SOD水平高于对照组(P<0.05)。观察组不良反应率(7.41%,4/54)与对照组(5.56%,3/54)比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论麻黄附子细辛汤治疗小儿支原体肺炎可加快临床症状体征的消失,减少肺泡灌洗液中支原体病菌含量,减轻氧化应激反应,且不增加不良反应。 展开更多
关键词 麻黄附子细辛汤 小儿支原体肺炎 支原体病菌 氧化应激
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猪肺炎支原体弱毒株与佐剂配合鼻腔免疫对仔猪呼吸道抗体分泌细胞的影响 被引量:12
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作者 李云锋 王建美 +1 位作者 李鹏成 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期103-107,共5页
应用猪肺炎支原体弱毒株配合佐剂CpG鼻腔免疫仔猪,检测呼吸道(鼻黏膜、气管和肺)IgA和IgG分泌细胞的分布与面积变化。30头仔猪随机均分为5组,7日龄首免,鼻腔免疫组10日龄二免,首免后42 d宰杀,取鼻黏膜、气管和肺,利用免疫组化技术检测Ig... 应用猪肺炎支原体弱毒株配合佐剂CpG鼻腔免疫仔猪,检测呼吸道(鼻黏膜、气管和肺)IgA和IgG分泌细胞的分布与面积变化。30头仔猪随机均分为5组,7日龄首免,鼻腔免疫组10日龄二免,首免后42 d宰杀,取鼻黏膜、气管和肺,利用免疫组化技术检测IgA和IgG分泌细胞。结果表明:应用猪肺炎支原体弱毒株配合CpG鼻腔免疫后6周,鼻黏膜IgA和IgG分泌细胞的面积均极显著增加(P<0.01),气管IgA分泌细胞的面积也显著增加(P<0.01)。而单独应用猪肺炎支原体弱毒株鼻腔免疫或肌肉注射虽然也能显著增加鼻黏膜和气管IgA、IgG分泌细胞的面积(P<0.01),但仍显著低于配合佐剂鼻腔免疫的效果。在肺中并未检测到IgA和IgG分泌细胞。结果提示,猪肺炎支原体弱毒株配合CpG鼻腔免疫能够增强局部呼吸道体液免疫应答水平。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 呼吸道 鼻腔免疫 IgA分泌细胞 IgG分泌细胞
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