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VEGF启动子介导鼠α1,3半乳糖基转移酶表达及其对缺氧的人肝癌细胞HepG2的靶向杀伤效应 被引量：1
1
作者 喻召才 刘文超 +2 位作者 陈衍 斯晓明 曹国武 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第4期598-601,共4页
目的:利用血管内皮生长因子(VEGF)基因启动子介导鼠α1,3半乳糖基转移酶(α1,3GT)在缺氧肝癌细胞HepG2中靶向表达并检测其诱导的人血清天然抗体对肝癌细胞的杀伤效应,为肝癌的靶向基因治疗方法提供新的思路。方法:利用PCR从Balb/c小鼠... 目的:利用血管内皮生长因子(VEGF)基因启动子介导鼠α1,3半乳糖基转移酶(α1,3GT)在缺氧肝癌细胞HepG2中靶向表达并检测其诱导的人血清天然抗体对肝癌细胞的杀伤效应,为肝癌的靶向基因治疗方法提供新的思路。方法:利用PCR从Balb/c小鼠肝组织中扩增出小鼠VEGF基因启动子片段并插入到荧光素酶报告载体中;用所构建的荧光素酶报告载体瞬时转染HepG2细胞;经缺氧诱导后检测转染细胞中荧光素酶活性;进一步通过基因重组构建受VEGF基因启动子调控的鼠α1,3GT重组逆转录病毒载体并稳定转染HepG2细胞;转染细胞在缺氧条件下培养后,通过CDCC试验检测人血清对转染细胞的杀伤效应。结果:在转染重组有VEGF基因启动子的荧光素酶报告载体的HepG2中,荧光素酶的活性是对照组的2-3倍;通过CDCC实验发现转染有鼠α1,3GT重组逆转录病毒载体的HepG2细胞经缺氧培养后对人血清的杀伤效应更加敏感。结论:利用VEGF基因启动子介导鼠α1,3GT在缺氧肿瘤细胞中靶向表达并诱导人血清天然抗体对肿瘤细胞产生杀伤效应在肿瘤的靶向基因治疗中具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 鼠α1 3半乳糖基转移酶 血管内皮生长因子 肝细胞癌 缺氧
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