多重PCR方法同时鉴别人参、西洋参、三七 被引量：19

1

作者 刘丽 肖炳燚 +5 位作者 罗晖明 聂平 李文莉 丁野 孙辉 李玲 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期668-677,共10页

目的:建立一种能同时鉴别人参属人参、西洋参、三七3种药材的多重聚合酶链反应(PCR)方法。方法:通过分析人参、西洋参、三七psb A-trn H基因序列的差异设计了特异性引物对1,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术筛选获得的特异性片... 目的:建立一种能同时鉴别人参属人参、西洋参、三七3种药材的多重聚合酶链反应(PCR)方法。方法:通过分析人参、西洋参、三七psb A-trn H基因序列的差异设计了特异性引物对1,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术筛选获得的特异性片段的基因序列,设计了特异性引物对2;优化了多重PCR鉴别体系并验证其耐受性和实用性。结果:构建的多重PCR鉴别体系能够成功地鉴别人参、西洋参、三七,人参样本可扩增出片段大小约为150 bp的特异性条带,西洋参样本可扩增片段大小出约为150 bp和400bp 2条特异性片段,三七样本可扩增出片段大小约为400 bp的特异性条带。结论:本多重PCR鉴别体系特异性好,可准确、可靠地鉴别人参、西洋参、三七。 展开更多

关键词 中药材分子鉴别 psb A-trn H基因序列分析 DNA分子标记技术 多重聚合酶链反应 多重PCR方法 人参 西洋参 三七

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急性白血病多药耐药基因及多药耐药相关蛋白基因的表达及临床研究 被引量：7

2

作者 马靛 赖永榕 +1 位作者 卢玉英 牛威林 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期47-49,共3页

目的探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药基因（ｍｄｒ１）及多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）的表达与预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）的方法检测５５例ＡＬ患者的ｍｄｒ１及ＭＲＰ的表达。结果发现复发急变组的... 目的探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药基因（ｍｄｒ１）及多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）的表达与预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）的方法检测５５例ＡＬ患者的ｍｄｒ１及ＭＲＰ的表达。结果发现复发急变组的ｍｄｒ１及ＭＲＰ基因表达水平（０．７３５±０．２４９，１．１５７±０．４４７）较初治组（０．４０８±０．１８６，０．４６５±０．２５３）明显升高（Ｐ＜０．０１）。而且ｍｄｒ１及ＭＲＰ同时高表达者的完全缓解（ＣＲ）率明显低于ｍｄｒ１及ＭＲＰ同时低表达者（Ｐ＜０．０１）。结论ｍｄｒ１和ＭＲＰ同时高表达是判断ＡＬ患者耐药复发及不良预后的重要因素。 展开更多

关键词 白血病 急性 多药耐药性 MDR MRP

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快速鉴定诺卡菌的多重聚合酶链反应的建立 被引量：8

3

作者 孙渭歌 侯雪新 +5 位作者 徐帅 孙丽娜 赵利利 张景山 杨海燕 李振军 《微生物与感染》 2014年第2期107-111,共5页

为快速准确鉴定诺卡菌,首先设计针对诺卡菌rpoB、secA1、16S rRNA基因的引物,利用单重聚合酶链反应(PCR)和测序验证引物的特异度,建立多重PCR鉴定系统,在同一反应体系和条件下对44株诺卡菌标准株、44株临床分离株和7株对照株进行扩增。... 为快速准确鉴定诺卡菌,首先设计针对诺卡菌rpoB、secA1、16S rRNA基因的引物,利用单重聚合酶链反应(PCR)和测序验证引物的特异度,建立多重PCR鉴定系统,在同一反应体系和条件下对44株诺卡菌标准株、44株临床分离株和7株对照株进行扩增。结果显示,利用单对引物对其中2株诺卡菌(标准株DSM43003、临床株CDC 51)进行扩增,出现的条带均为与目的片段长度一致的单一条带,经测序并经基本局部比对搜索工具(BLAST)验证扩增片段为目的基因。建立的多重PCR结果显示,44株诺卡菌标准株中有43株(97.7%)、44株临床分离株中有42株(95.5%)rpoB、secA1、16S rRNA这3条片段均显示,7株对照株均未显示条带。结果提示,本研究建立的多重PCR简单、快速、灵敏度高、特异度好,适用于诺卡菌的快速鉴定。 展开更多

关键词 诺卡菌 多重聚合酶链反应 鉴定

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食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的多重PCR快速检测法 被引量：7

4

作者 秦丽云 魏绣萍 吕国平 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1124-1126,共3页

目的建立食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的多重PCR快速检测方法。方法根据公布的金黄色葡萄球菌肠毒素基因A～D型序列,分别设计引物并验证引物的特异性,建立多重PCR方法,检测食品风险监测和食物中毒事件中分离得到的165株金黄色葡萄球... 目的建立食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的多重PCR快速检测方法。方法根据公布的金黄色葡萄球菌肠毒素基因A～D型序列,分别设计引物并验证引物的特异性,建立多重PCR方法,检测食品风险监测和食物中毒事件中分离得到的165株金黄色葡萄球菌肠毒素基因A～D型。结果 165株金黄色葡萄球菌有95株携带肠毒素基因,毒素基因携带率为57.6%(95/165),携带一种基因型的占42.4%(72/165),同时携带两种以上毒素基因的占13.9%(23/165)。结论该方法具有简便快速、灵敏度高、特异性强等特点,适用于食源性金黄色葡萄球菌和食物中毒中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测。 展开更多

关键词 多重聚合酶链反应 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因

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重庆市合川区发热伴呼吸道感染患者多病原体监测结果分析

5

作者 刘莉莉 彭雨崟 +2 位作者 何腊梅 吴妮 王良凤 《现代医药卫生》 2024年第15期2548-2552,2557,共6页

目的分析重庆市合川区发热伴呼吸道感染患者的病原体流行病学特征。方法选取2022-2023年重庆市合川区某医院246例发热伴急性呼吸道感染患者,采用多重聚合酶链反应(PCR)法对甲型/乙型流感病毒、新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、呼吸道合胞病毒... 目的分析重庆市合川区发热伴呼吸道感染患者的病原体流行病学特征。方法选取2022-2023年重庆市合川区某医院246例发热伴急性呼吸道感染患者,采用多重聚合酶链反应(PCR)法对甲型/乙型流感病毒、新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)等18种病原体进行检测,同时应用实时荧光定量PCR法开展SARS-CoV-2、流感病毒及其分型检测,分析呼吸道病原体感染情况,并比较2种检测方法的一致性。结果246例患者中,呼吸道病原体阳性159例,其中1种以上病原体感染144例(58.54%)。不同性别患者呼吸道病原体总检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同性别患者各种呼吸道病原体检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄段患者呼吸道病原体总检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄段患者流感病毒、RSV检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05),而其他呼吸道病原体检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同季节就诊患者呼吸道病原体总检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同季节就诊患者H3N2+SARS-CoV-2、H1N1、SARS-CoV-2检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05),而其他呼吸道病原体检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对于SARS-CoV-2、流感病毒,多重PCR技术和实时荧光定量PCR法敏感性基本一致,二者具有较好的一致性。结论流感病毒是2022-2023年重庆市合川区发热伴呼吸道感染患者致病的主要病原体,其他病原体混合感染的情况也并不少见。对于SARS-CoV-2和流感病毒,多重PCR法和实时荧光定量PCR法敏感性基本一致。 展开更多

关键词 流感病毒 呼吸道感染 多重聚合酶链式反应

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多重聚合酶链反应快速检测脑膜炎中的病原体 被引量：4

6

作者 苏明权 于文彬 +3 位作者 马越云 谭庆荣 范金水 丁振若 《第四军医大学学报》 2000年第4期405-407,共3页

目的　建立脑膜炎多重 PCR检测系统 ,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌 ,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断 .方法　根据新型隐球菌 URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的 H.8外膜蛋白基因序列... 目的　建立脑膜炎多重 PCR检测系统 ,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌 ,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断 .方法　根据新型隐球菌 URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的 H.8外膜蛋白基因序列、结核分枝杆菌基因组中的 IS986插入基因序列片段 ,分别设计出 3对特异性寡聚核苷酸引物 ,采用多重PCR技术 ,同时检出脑脊液中的新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌 .结果　应用多重 PCR反应体系 ,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果 ;多重 PCR扩增的预期结果为 :单一菌感染出现一条特异性扩增区带 ;混合感染应出现 2条或 3条特异性扩增区带 ,经实验达到预期的扩增结果 ;对 15份已明确诊断的脑脊液标本 ,分别采用常规 PCR和多重 PCR进行同步扩增 ,结果两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段 ,符合率达 10 0 % .对 2 0例临床脑脊液标本的 PCR扩增结果分别为 :新型隐球菌 15 % (3/2 0 )、结核杆菌 2 5 % (5 / 2 0 )、脑膜炎双球菌 10 % (2 / 2 0 ) .结论　多重 PCR有效地为临床病原体的混合感染 ,以及原因不明的脑膜炎患者的快速诊断 ,提供了快速、准确的诊断手段 .有效地减少了脑膜炎的误诊和漏诊 。 展开更多

关键词 多重PCR 新型隐球菌 结核杆菌 脑膜炎双球菌

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基于毛细电泳的多重PCR方法检测儿童呼吸道腺病毒感染常见血清型的价值 被引量：5

7

作者 张悦 吕芳芳 +5 位作者 贾晓慧 林祖潘 温顺航 徐智 朱浩威 张海邻 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期256-259,共4页

目的建立一种呼吸道腺病毒常见血清型检测方法,并利用该方法检测温州地区儿童呼吸道人腺病毒(HAdV)感染的主要血清型。方法利用基于毛细电泳的多重PCR法建立呼吸道腺病毒常见12种血清型检测方法,将2018年1月至2019年12月收治于温州医科... 目的建立一种呼吸道腺病毒常见血清型检测方法,并利用该方法检测温州地区儿童呼吸道人腺病毒(HAdV)感染的主要血清型。方法利用基于毛细电泳的多重PCR法建立呼吸道腺病毒常见12种血清型检测方法,将2018年1月至2019年12月收治于温州医科大学附属育英儿童医院,经直接免疫荧光法检测HAdV阳性的1059例急性呼吸道感染患儿的呼吸道标本作为研究对象,对其进行回顾性分析,采用多重PCR方法测定HAdV-1、2、3、4、5、7、14、21、37、40、41和55型等12种血清型,同时随机抽取部分标本与一代测序法比较检测结果一致性。结果共收集到1059份HAdV抗原阳性的呼吸道标本,多重PCR法检测发现,1种血清型阳性947例(89.4%),2种血清型混合感染13例(1.2%),阴性24例(2.3%),阳性但不能分型75例(7.1%)。947例单种血清型阳性儿童中,B亚群的HAdV-3型415例(43.8%),HAdV-7型318例(33.6%),HAdV-55型12例(1.2%),HAdV-21型2例(0.2%);C亚群的HAdV-2型108例(11.4%),HAdV-1型70例(7.4%),HAdV-5型16例(1.7%);E亚群的HAdV-4型6例(0.6%)。未检出HAdV-14、HAdV-37、HAdV-40和HAdV-41。随机抽取多重PCR法检测的HAdV分型阳性的标本51例,与一代测序的检测进行比较,均符合。结论建立并验证了基于毛细电泳的多重PCR法对儿童呼吸道腺病毒感染常见血清型的诊断价值。B亚群的HAdV-3、HAdV-7和C亚群的HAdV-2、HAdV-1为温州地区儿童呼吸道腺病毒感染的主要血清型,HAdV-14、HAdV-37、HAdV-40和HAdV-41未检出。 展开更多

关键词 腺病毒 血清型 多重聚合酶链反应 毛细电泳

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呼吸机相关肺炎最常见七种病原体多重聚合酶链式反应-毛细管电泳检测平台的建立

8

作者 王亚飞 陈褚强 《中国医疗器械信息》 2024年第9期34-36,共3页

目的:建立可同时检测呼吸机相关肺炎最常见7种病原体的多重聚合酶链式反应(PCR)-毛细管电泳检测平台,评估其新检测平台的有效性。方法:选择2019年4月~2022年12月于本院重症监护病房接受机械通气后发生呼吸机相关肺炎的56例患者作为研究... 目的:建立可同时检测呼吸机相关肺炎最常见7种病原体的多重聚合酶链式反应(PCR)-毛细管电泳检测平台,评估其新检测平台的有效性。方法:选择2019年4月~2022年12月于本院重症监护病房接受机械通气后发生呼吸机相关肺炎的56例患者作为研究对象,提取患者的呼吸道病原体,选择目标病原体后建立7种目标病原体的多重PCR反应,并结合毛细管电泳检测技术,建立多重PCR-毛细管电泳检测平台,评估其平台的特异性和灵敏性。结果:建立的多重PCR-毛细管电泳检测平台检测鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单孢菌的敏感性和特异性明显,且与单重荧光定量PCR检测结果的符合率均高于90%(P<0.05)。结论:多重PCR-毛细管电泳检测平台的建立可用于呼吸机相关肺炎最常见7种病原体的检测中,且有效性较好。 展开更多

关键词 呼吸机相关肺炎 多重聚合酶链式反应 毛细管电泳 病原体检测

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基于探针熔解曲线分析的多重PCR同步鉴定6种腹泻病原菌

9

作者 任继轩 胡朝晖 +4 位作者 陈嘉昌 王维世 刘向东 刘鑫源 李颖 《检验医学》 CAS 2024年第8期793-799,共7页

目的基于多重聚合酶链反应(PCR)和探针熔解曲线分析技术,建立可同时鉴定6种常见急性感染性腹泻病原菌的高灵敏度诊断方法,并验证其检测性能。方法采用熔解曲线分析6种常见急性感染性腹泻病原菌熔解温度(Tm)值,建立基于探针熔解曲线分析... 目的基于多重聚合酶链反应(PCR)和探针熔解曲线分析技术,建立可同时鉴定6种常见急性感染性腹泻病原菌的高灵敏度诊断方法,并验证其检测性能。方法采用熔解曲线分析6种常见急性感染性腹泻病原菌熔解温度(Tm)值,建立基于探针熔解曲线分析的多重PCR检测方法,并评价其灵敏度、特异性和重复性。采用该方法检测175例疑似感染性腹泻患者粪便样本,比较该方法鉴定结果与细菌培养法和荧光PCR法鉴定结果的差异,不一致结果通过测序进行确认。结果建立的多重PCR检测方法可实现单次PCR同步检测6种肠道病原菌,检测限为1×10^(3)~1×10^(4)拷贝·mL^(-1),不同病原菌间无交叉反应,特异性高。175例腹泻患者粪便样本中共检出91例(52%)阳性样本。6种病原菌的检测内变异系数(CV)均<0.1%。与细菌培养法相比,该方法检测沙门菌、志贺菌的符合率分别为94.85%(kappa=0.894)、100.00%(kappa=1.000);与荧光PCR相比,该方法检测艰难梭菌的符合率为98.28%(kappa=0.900)。结论建立的基于探针熔解曲线分析的多重PCR方法同时鉴定6种腹泻病原菌具有较高的灵敏度和特异性,可为急性感染性腹泻的临床诊断及时提供实验室依据。 展开更多

关键词 多重聚合酶链反应 熔解曲线分析 感染性腹泻 病原菌

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住院百日咳儿童混合感染的临床特征

10

作者 黄超颖 李雨希 +2 位作者 王红梅 李迟 邓继岿 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2023年第5期326-330,共5页

目的探讨百日咳儿童混合感染的临床特征及病原构成情况。方法选取2018—2022年深圳市儿童医院确诊百日咳,且完成了呼吸道病原体多重PCR检测的住院患儿,根据病原构成分为百日咳单纯感染组与混合感染组,回顾性分析两组患儿的临床特征。采... 目的探讨百日咳儿童混合感染的临床特征及病原构成情况。方法选取2018—2022年深圳市儿童医院确诊百日咳,且完成了呼吸道病原体多重PCR检测的住院患儿,根据病原构成分为百日咳单纯感染组与混合感染组,回顾性分析两组患儿的临床特征。采用二元Logistic逐步回归分析方法分析混合感染的危险因素。结果共纳入208例患儿,其中百日咳单纯感染组64例,混合感染组144例。144例混合感染组中,合并1种病原体感染者106例(73.61%,106/144),以鼻病毒为主(63.21%,67/106)。>3月龄(OR=2.262,95%CI:1.185~4.316)和喘息(OR=2.771,95%CI:1.177~6.522)为百日咳患儿发生混合感染的危险因素。结论百日咳住院患儿混合感染率较高,百日咳混合感染更易发生在3月龄以上或喘息症状的患儿。 展开更多

关键词 百日咳 儿童 混合感染 多重聚合酶链式反应

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多重PCR在调味品致病菌检测中的应用前景分析 被引量：4

11

作者 赵敏 张奕南 曲勤凤 《中国调味品》 CAS 北大核心 2012年第5期14-19,共6页

食源性疾病是最为重要的食品安全问题之一,加强食源性疾病监测和食品污染物检验是面对这一问题的迫切需要。传统分离培养加生化鉴定检测食源性致病菌的方法,往往操作步骤繁琐耗时,精确度较低、很难满足目前高通量、时间短的要求。尤其... 食源性疾病是最为重要的食品安全问题之一,加强食源性疾病监测和食品污染物检验是面对这一问题的迫切需要。传统分离培养加生化鉴定检测食源性致病菌的方法,往往操作步骤繁琐耗时,精确度较低、很难满足目前高通量、时间短的要求。尤其是各种调味料品种繁杂,微生物很难扩增,传统方法对致病菌的检出率低。多重PCR技术特异性强、灵敏度高、程序简便易行,自诞生以来,就迅速被广泛地应用于生命科学研究的各个领域,基于该技术的病原菌检测方法已经在国内外广泛开展。文章对近年来基于多重PCR技术的病原菌检测的研究前沿进行了综述,分析了多重PCR方法在调味品致病菌检测中应用优势。内容涉及目标基因、生物芯片技术以及色谱技术和多重PCR的结合、灵敏度提高的方法,同时文章对多重PCR技术在调味品检测中的未来应用的局限、解决方案和前景进行了分析。 展开更多

关键词 多重PCR 调味品致病菌检测 目标基因 生物芯片

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建立多重PCR方法进行Vel-,Sc1-,GIL-及In^b-稀有血型检测 被引量：4

12

作者 王钰箐 龚淞颂 +6 位作者 戴菁 陆晔玲 吴希 沈伟 陆琼 向东 蔡晓红 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1000-1003,共4页

目的建立稳定的多重PCR-SSP反应方法检测Vel-,Sc1-,GIL-及Inb-稀有血型,辅助鉴定稀有血型人士易产生的高频抗体。方法根据Vel,Scianna,Gill及Indian血型系统编码基因的单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,对献血者DNA模板使用多重PCR方... 目的建立稳定的多重PCR-SSP反应方法检测Vel-,Sc1-,GIL-及Inb-稀有血型,辅助鉴定稀有血型人士易产生的高频抗体。方法根据Vel,Scianna,Gill及Indian血型系统编码基因的单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,对献血者DNA模板使用多重PCR方法进行检测,并使用PCR基因定点诱变技术和基因合成的方法制备出的Sc1,GIL,Inb及Vel阴性对照品作为对照,根据是否扩增出目标片段判断稀有血型基因的存在。直接测序验证此方法的准确性。结果建立了稳定的多重PCR-SSP反应体系,能够同时检测Vel-,Sc1-,GIL-及Inb-稀有血型,PCR-SSP结果与直接测序结果相一致。结论该方法能在同一体系中同时扩增4个稀有血型,具有快捷、高效且成本低的优点,为稀有血型人士用血及抗体特异性鉴定提供保障。 展开更多

关键词 多重PCR PCR—SSP 稀有血型

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阴沟肠杆菌的耐药性分析及其耐药机制研究 被引量：4

13

作者 王凤霞 胡祎明 +2 位作者 胡志东 田彬 李静 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期5128-5130,共3页

目的了解某院临床分离阴沟肠杆菌耐药基因分布及流行情况,为临床合理用药提供参考。方法收集2008年1月-2011年6月自临床感染患者分离的114株阴沟肠杆菌进行细菌鉴定和药敏试验,了解产酶阴沟肠杆菌的流行情况。结果未检出碳青霉烯酶基因... 目的了解某院临床分离阴沟肠杆菌耐药基因分布及流行情况,为临床合理用药提供参考。方法收集2008年1月-2011年6月自临床感染患者分离的114株阴沟肠杆菌进行细菌鉴定和药敏试验,了解产酶阴沟肠杆菌的流行情况。结果未检出碳青霉烯酶基因,34株阴沟肠杆菌广谱β-内酰胺酶基因阳性,其中18株携带ESBLs基因,47株阴沟肠杆菌质粒AmpC酶基因阳性;共检出26株Ⅰ类整合子基因阳性菌株,其中23株可变区扩增阳性,共扩增出4种耐药基因盒,aadB-aadA2(1000bp)17株,dfrA15(700bp)4株,aadA1(1 000bp)2株;产酶菌株呈现多药耐药现象;15株产CTX-M基因阴沟肠杆菌接合试验成功;ERIC分型结果显示,63株产酶菌株为11种不同克隆株。结论 AmpC酶、广谱β-内酰胺酶和Ⅰ类整合子广泛分布于临床分离阴沟肠杆菌中,在阴沟肠杆菌多药耐药机制中起重要作用;阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的敏感性降低或耐药,主要与其携带AmpC酶和ESBLs有关,且院内存在产酶菌株的散在克隆传播现象。 展开更多

关键词 整合子 AMPC酶 超广谱p内酰胺酶 多重聚合酶链反应

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腹透相关性腹膜炎革兰阳性致病菌及相关耐药基因的检测分析 被引量：3

14

作者 李晓峰 燕雯雯 +1 位作者 胡丽芬 吴永贵 《安徽医学》 2016年第1期1-4,共4页

目的通过探讨腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)革兰阳性致病菌药敏结果并检测相关耐药基因,了解本地区PDAP革兰阳性球菌相关耐药基因携带情况,以指导临床用药。方法收集2014年1月至2015年10月入住安徽医科大学第一附属医院的PDAP患者腹透液标... 目的通过探讨腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)革兰阳性致病菌药敏结果并检测相关耐药基因,了解本地区PDAP革兰阳性球菌相关耐药基因携带情况,以指导临床用药。方法收集2014年1月至2015年10月入住安徽医科大学第一附属医院的PDAP患者腹透液标本,进行传统培养并进行药敏试验,以革兰阳性球菌为研究分析对象,应用多重聚合酶链反应检测样品中4种耐药基因,分别为万古霉素耐药基因van A/van B/van C,一代头孢耐药基因mec A。结果 44份培养结果为革兰阳性球菌的标本中4份含有van A基因,37份携带van C基因,未检出van B基因,12份携带mec A基因,携带mec A基因的样本耐药率高于未携带基因的样本,两组差异有统计学意义(P<0.05);所选样本对头孢唑林的耐药率达63.63%,对万古霉素均敏感。结论本地区PDAP患者中以革兰阳性菌为主,携带相关耐药基因的样本表现出多重耐药,相关耐药基因在耐药机制中发挥着重要作用,因此,检测样本是否携带相关耐药基因对临床抗菌药物的选择有一定指导作用。 展开更多

关键词 腹膜透析相关性腹膜炎 革兰阳性球菌 耐药基因 多重聚合酶链反应

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的多重聚合酶链反应检测方法 被引量：2

15

作者 苏明权 于文彬 +2 位作者 张建芳 樊新 丁振若 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第22期2100-2101,共2页

目的　建立多重聚合酶链反应 (multiplex poly-m erase chain reaction,mt- PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) .方法　对临床分离的 6 3株金黄色葡萄球菌 ,采用 m t- PCR快速检测 MRSA的决定基因 mec和辅助基因 fem A,用 16... 目的　建立多重聚合酶链反应 (multiplex poly-m erase chain reaction,mt- PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) .方法　对临床分离的 6 3株金黄色葡萄球菌 ,采用 m t- PCR快速检测 MRSA的决定基因 mec和辅助基因 fem A,用 16 Sr RNA基因作内参照 .结果　 mt- PCR的预期扩增结果为耐药株出现 3条扩增区带 ,敏感株只有 fem A基因和 16 Sr RNA基因出现 2条扩增区带 .在 6 3株金黄色葡萄球菌中 ,药敏法 34.9% (2 2 / 6 3)耐药 ;mt- PCR扩增 mec A基因 34.5 % (2 3/ 6 3)阳性 ,fem A基因和 16 Sr RNA基因 10 0 %阳性 ;单引物 PCR与 mt- PCR两者阳性扩增符合率为 10 0 % .结论　采用多重聚合酶链反应 ,可在同一扩增体系内同时检出 mec A基因、fem A基因 ,对 MRSA临床株的快速、及时检出 ,有效控制 MRSA造成的感染 。 展开更多

关键词 多重聚合酶链反应 甲氧西林 金黄色葡萄球菌 MRSA

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多重PCR技术检测宫颈癌组织中HPV16、18和11/6E_6基因的研究 被引量：1

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作者 陈晓 周宜男 +1 位作者 张月明 赵富玺 《新疆医科大学学报》 CAS 2001年第1期18-20,共3页

目的 :研究宫颈癌发病与 HPV16、18E6基因的关系。方法 :采用多重 PCR技术检测 83例宫颈癌组织中 HPV16、18及 11/ 6 E6基因。结果 :( 1)新疆地区 36例宫颈癌中 HPV E6基因检出率为 86 .11% ( 31/ 36 ) ,其中HPV16 E6占构成比 80 .5 6 %... 目的 :研究宫颈癌发病与 HPV16、18E6基因的关系。方法 :采用多重 PCR技术检测 83例宫颈癌组织中 HPV16、18及 11/ 6 E6基因。结果 :( 1)新疆地区 36例宫颈癌中 HPV E6基因检出率为 86 .11% ( 31/ 36 ) ,其中HPV16 E6占构成比 80 .5 6 % ( 2 5 / 31)。 ( 2 )山西地区宫颈癌中 HPV DNA阳性检出率 5 1.0 6 % ( 2 4/ 47) ,其中HPV16 E6占构成比 5 0 .0 0 % ( 12 / 2 4)。 ( 3)两组 HPV E6阳性检出率比较 P <0 .0 1,差异有显著性。两组 HPV16E6构成比比较 ,P >0 .0 5 ,差异无显著性。结论 :宫颈癌发生与 HPV感染的关系密切 ,且新疆地区比山西地区更为密切。两组 HPV感染以 展开更多

关键词 人类乳头状瘤病毒 多重聚合酶链反应 宫颈癌 HPV16 HPV18 11/6E6基因

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多重聚合酶链反应技术对判定住院儿童肺炎病原谱的初步研究 被引量：3

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作者 王贵清 董晓艳 +7 位作者 钟海琴 袁浪 蒋鲲 王超 孙超 陆权 孟超越 户宜 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第8期617-622,共6页

目的探讨多重聚合酶链反应(multiple polymerase chain reaction,mPCR)技术在住院儿童肺炎病原谱中的临床应用。方法前瞻性纳入2019年9月至2020年6月上海交通大学附属儿童医院呼吸科收治的230例肺炎患儿的临床资料,采用mPCR技术检测病原... 目的探讨多重聚合酶链反应(multiple polymerase chain reaction,mPCR)技术在住院儿童肺炎病原谱中的临床应用。方法前瞻性纳入2019年9月至2020年6月上海交通大学附属儿童医院呼吸科收治的230例肺炎患儿的临床资料,采用mPCR技术检测病原体,同时采用传统方法检测病原体做自身对照。入院24 h内,采集患儿的鼻咽拭子用mPCR方法行35项病原体核酸检测;采集痰液行细菌培养和真菌培养,并用直接免疫荧光法行8项呼吸道病毒抗原检测;采集静脉血用颗粒凝集法行血清肺炎支原体抗体检测。结果230例肺炎患儿中男童136例(59.1%),女童94例(40.9%),平均年龄为(3.6±3.0)岁。mPCR方法检出前10位病原体依次为肺炎链球菌(17.0%)、人腺病毒(13.9%)、肺炎支原体(13.9%)、人鼻病毒(10.0%)、巨细胞病毒(10.0%)、人呼吸道合胞病毒(9.6%)、人冠状病毒(9.6%)、人博卡病毒(8.3%)、人偏肺病毒(7.4%)以及大肠埃希菌(6.1%)。m PCR检测结果中,3岁以下儿童中巨细胞病毒和大肠埃希菌的检出率显著高于3岁及以上儿童[(19.8%vs.0,χ^(2)=25.115,P=0.000)、(10.3%vs.1.8%,χ^(2)=7.422,P=0.006)],而肺炎支原体检出率则显著低于3岁及以上儿童(5.2%vs.22.8%,χ^(2)=14.928,P=0.000)。m PCR方法的1种或1种以上病原体检出率、2种或2种以上病原体检出率、病毒检出率、细菌检出率及真菌检出率与传统方法比较显著增高,差异有统计学意义[(78.7%vs.65.2%,χ^(2)=10.353,P=0.001)、(49.1%vs.11.7%,χ^(2)=75.941,P=0.000)、(58.7%vs.8.3%,χ^(2)=131.350,P=0.000)、(43.5%vs.17.4%,χ^(2)=36.964,P=0.000)、(3.5%vs.0.4%,χ^(2)=4.080,P=0.043)];而m PCR方法的肺炎支原体检出率与传统方法比较显著降低,差异有统计学意义(13.9%vs.50.0%,χ^(2)=68.874,P=0.000)。mPCR与传统方法之间相同病原检出的一致性欠佳(Kappa<0.5,P<0.05)。结论上海交通大学附属儿童医院住院肺炎最常见的病原体呈多种病毒和细菌,混合感染占半数。与传统 展开更多

关键词 肺炎 病原 多重聚合酶链反应 儿童

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肺炎链球菌血清型监测结果与疫苗覆盖情况 被引量：1

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作者 王颖童 何宝花 +3 位作者 张海霞 曹玉雯 贾肇一 孙印旗 《河北医药》 CAS 2022年第14期2115-2119,共5页

目的研究2014至2018年中河北省肺炎链球菌血清型分布与动态变迁,分析疫苗覆盖率。方法应用多重聚合酶链式反应对菌株进行血清分型;计算PCV7、PCV10、PCV13、PPV23疫苗的覆盖率,使用卡方检验和Bonferroni检验,进行差异比较。结果可分型... 目的研究2014至2018年中河北省肺炎链球菌血清型分布与动态变迁,分析疫苗覆盖率。方法应用多重聚合酶链式反应对菌株进行血清分型;计算PCV7、PCV10、PCV13、PPV23疫苗的覆盖率,使用卡方检验和Bonferroni检验,进行差异比较。结果可分型菌株中较多的血清型包括:19F(176株33.40%)、6(87株16.51%)、19A(57株10.82%)、14(30株5.69%)、23F(20株3.80%)。19F型和19A型在非侵袭性菌株中占比高于侵袭性(P<0.05);14型在侵袭性菌株中比例明显高于非侵袭性菌株(P<0.05)。19F 2015年达到高点后开始下降;2017至2018年出现了19A比例回升、6群下降和14型明显上升。PCV7、PCV10、PCV13、PPV23的总体覆盖率依次为60.34%、64.33%、78.37%、83.30%,PCV13和PCV23显著高于PCV7和PCV10(P<0.05)。结论本地2014至2018年间优势血清型依次为:19F、6、19A、14、23F型。对于本地区肺炎链球菌引发的感染,19F型和19A型菌株起到的作用可能会下降,引起的症状可能会减轻。相反,6群和14型起的作用会上升,引起的症状也可能会加重。推荐使用PCV13替代PCV7和PCV10,对于>2岁儿童也推荐使用PPV23。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 血清型 多重聚合酶链式反应 肺炎球菌结合疫苗 肺炎链球菌多糖疫苗 疫苗覆盖率

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多重PCR技术对南通市空肠弯曲菌监测结果分析 被引量：2

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作者 熊海平 苏婧 +1 位作者 黄红玫 许海燕 《交通医学》 2014年第5期433-435,438,共4页

目的 :了解南通市不同鸡群、鸡肉、人群及环境中空肠弯曲菌的分布状况。方法:采用多重PCR法对相关鸡的样品、农贸市场环境样品、腹泻患者粪便及健康体检人员肛拭子等进行空肠弯曲菌检测。结果:119份成年鸡肛拭子、124份苗鸡粪便和56份... 目的 :了解南通市不同鸡群、鸡肉、人群及环境中空肠弯曲菌的分布状况。方法:采用多重PCR法对相关鸡的样品、农贸市场环境样品、腹泻患者粪便及健康体检人员肛拭子等进行空肠弯曲菌检测。结果:119份成年鸡肛拭子、124份苗鸡粪便和56份鸡养殖场环境样品分别检出38份、9份和5份空肠弯曲菌阳性,阳性率分别为31.93%、7.26%和8.93%;162份新鲜鸡肉、178份冷冻鸡肉和57份农贸市场环境样品分别检出28份、2份和4份空肠弯曲菌阳性,阳性率分别为17.28%、1.12%和7.02%;418份腹泻患者粪便,9份检出空肠弯曲菌,阳性率为2.15%;857份健康体检人群的肛拭子未检出空肠弯曲菌。结论:在除健康体检人群肛拭子外的7大类样品中均检出空肠弯曲菌,提示南通市存在空肠弯曲菌病的流行隐患,应采取措施对该病进行防控。 展开更多

关键词 空肠弯曲菌 多重聚合酶链反应 鸡 鸡肉 腹泻患者 健康体检人群

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一例45，X／46，X，Yqh-混合型生殖腺发育不全患者的临床特征及遗传学分析 被引量：2

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作者 王珊珊 李海波 +5 位作者 苏敏 杨晓清 黄华 张玉泉 李红 张建林 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期216-220,共5页

目的探讨1例混合型生殖腺发育不全患者的临床及遗传学特征，为患者的临床诊疗提供依据。方法收集患者的临床资料并检测血清激素水平和外周血染色体核型，应用多重PCR检测Y染色体SRY基因及无精症因子（azoospermiafactor，AZF）a、b、c... 目的探讨1例混合型生殖腺发育不全患者的临床及遗传学特征，为患者的临床诊疗提供依据。方法收集患者的临床资料并检测血清激素水平和外周血染色体核型，应用多重PCR检测Y染色体SRY基因及无精症因子（azoospermiafactor，AZF）a、b、c区域缺失情况、SRY全基因测序；全腹CT和肿块病理切片及免疫组化分析。结果患者血清激素检测结果均正常；染色体核型为45，X／46，X，Yqh-；多重PCR结果显示SRY、zFY及AZFa区无缺失，AZFb区和魁强c区均缺失；SRy全基因测序未见突变；全腹CT示盆腔巨大肿块，术后病理诊断为精原细胞瘤，免疫组化结果显示PLAP、CD117均阳性。结论通过对患者临床资料及遗传学的分析，初步诊断患者为混合型生殖腺发育不全；腺体发生恶变，经病理及免疫组化分析为精原细胞瘤。45，X／46，X，Yqh-患者其精原细胞瘤风险与SRY基因的存在具有相关性。 展开更多

关键词 混合型生殖腺发育不全 多重PCR SRY基因 无精症因子 精原细胞瘤

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