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利用多基因缺失型杆状病毒在昆虫细胞中生产腺相关病毒
1
作者 张峒 蒋卓含 +4 位作者 吴奕凡 李倩茹 刘晨静 张元兴 刘琴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期473-484,共12页
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是基因治疗领域最常使用的病毒载体之一,产量低、成本高是该产业面临的关键瓶颈问题。本研究旨在基于多基因缺失型杆状病毒,建立双病毒感染昆虫细胞以生产AAV的技术体系。首先,进行AAV生产用多... 腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是基因治疗领域最常使用的病毒载体之一,产量低、成本高是该产业面临的关键瓶颈问题。本研究旨在基于多基因缺失型杆状病毒,建立双病毒感染昆虫细胞以生产AAV的技术体系。首先,进行AAV生产用多基因缺失型重组杆状病毒的构建和扩增,并检测杆状病毒滴度及其感染细胞的效果;然后,使用双杆状病毒共感染昆虫细胞,并优化感染条件;最后,基于优化条件进行AAV生产,并检测评估产量、质量等相关指标。结果表明,AAV生产用多基因缺失型杆状病毒滴度较野生型无差异,感染后细胞存活率下降明显减缓。使用双病毒路线进行AAV优化生产,Bac4.0-1的基因组滴度为1.63×10~(11)VG/mL,Bac5.0-2的基因组滴度为1.02×10~(11) VG/mL,较野生型产量分别提升了240%和110%。电镜下,3组均具有正常的AAV病毒形态,且转导活性相近。本研究建立了基于多基因缺失型杆状病毒感染昆虫细胞的AAV生产体系,显著提高了AAV产量,具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 杆状病毒 多基因缺失 昆虫细胞 腺相关病毒 生产工艺
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初治多发性骨髓瘤患者13q14缺失与预后的关系分析 被引量：1
2
作者 肖红 吴勇军 +3 位作者 黄力君 陈明 肖京琳 刘华东 《中国医师杂志》 CAS 2021年第3期389-392,共4页
目的分析初治多发性骨髓瘤患者13q14缺失与预后的关系方法整理2012年1月至2016年12月湘潭市第一人民医院入院初治多发性骨髓瘤患者(121例)的随访资料,对患者3年总生存期(0S)和无进展生存期(PFS)进行单因素分析;根据患者13q14缺失情况分... 目的分析初治多发性骨髓瘤患者13q14缺失与预后的关系方法整理2012年1月至2016年12月湘潭市第一人民医院入院初治多发性骨髓瘤患者(121例)的随访资料,对患者3年总生存期(0S)和无进展生存期(PFS)进行单因素分析;根据患者13q14缺失情况分为缺失组(n=39)和未缺失组(n=82),比较不同13ql4缺失情况患者预后情况。结果截至随访时间,患者3年总生存率为71.90%(87/121),3年总生存期(0S)为5.8~36个月;3年无进展生存率为47.93%(58/121),3年无进展生存期(PFS)为2.3~36个月,中位PFS为34.8个月;年龄、低蛋白血症、高乳酸脱氢酶及13q14缺失是患者0S的独立影响因素(P<0.05);年龄、高乳酸脱氢酶及13q14缺失是患者PFS的独立影响因素(P<0.05);13q14缺失组3年总生存率为61.54%(24/39),3年无进展生存率为25.64%(10/39),均低于未缺失组[76.83%(63/82),58.54%(48/82),P<0.05]。结论13q14缺失的初治多发性骨髓瘤患者近期预后较差,根据0S和PFS的共同影响因素对患者进行危险分层治疗,将有助于改善其预后。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 基因缺失 预后 因素分析 统计学
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多重PCR法检测喉癌组织中P16基因纯合缺失及异常甲基化
3
作者 穆红 林鹏 +2 位作者 刘丽 黄繁嫱 刘明洲 《天津医科大学学报》 1999年第3期25-27,共3页
目的：采用多重ＰＣＲ法检测喉癌及癌旁组织中Ｐ１６ 基因纯合缺失和异常甲基化。方法：选用二对引物分别扩增Ｐ１６ 基因外显子１ 和２，分析有无纯合缺失，对未检出缺失的样品用甲基化敏感内切酶Ｓｍ ａＩ消化后，再扩增外显子１，分... 目的：采用多重ＰＣＲ法检测喉癌及癌旁组织中Ｐ１６ 基因纯合缺失和异常甲基化。方法：选用二对引物分别扩增Ｐ１６ 基因外显子１ 和２，分析有无纯合缺失，对未检出缺失的样品用甲基化敏感内切酶Ｓｍ ａＩ消化后，再扩增外显子１，分析有无Ｐ１６ 基因异常甲基化。结果：３９ 例喉癌组织标本中９ 例标本有Ｐ１６ 基因纯合缺失，缺失率为２３．０８％ （９／３９）。３０ 例未检测到Ｐ１６ 基因缺失的喉癌组织标本，有４ 例检出异常甲基化，检出率为１３．３３％ （４／３０）。３９ 例癌旁组织标本均未检测到Ｐ１６基因缺失或异常甲基化。结论：采用多重ＰＣＲ法可检测出Ｐ１６ 基因常见的纯合缺失和异常甲基化失活。研究表明，Ｐ１６ 展开更多
关键词 多重PCR P16 基因 基因缺失 异常甲基化 喉癌
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