猫爪草中的脂肪酸类化合物 被引量：9

1

作者 熊英 苌美燕 +2 位作者 章常华 罗永明 邓可众 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期348-351,共4页

为了解小毛茛(Ranunculus ternatus Thunb.)的化学成分,采用色谱技术从其干燥块根猫爪草中分离纯化得到5个脂肪酸类化合物,经波谱分析,他们的结构分别鉴定为(R)-3-hydroxy-11-methoxy-11-oxoundecanoic acid(1)、十六烷酸(2)、棕榈酸乙... 为了解小毛茛(Ranunculus ternatus Thunb.)的化学成分,采用色谱技术从其干燥块根猫爪草中分离纯化得到5个脂肪酸类化合物,经波谱分析,他们的结构分别鉴定为(R)-3-hydroxy-11-methoxy-11-oxoundecanoic acid(1)、十六烷酸(2)、棕榈酸乙酯(3)、已二酸(4)和硬脂酸(5)。其中,化合物1为新化合物,这些成分对耐药结核分枝杆菌(耐INH+RFP)有一定的体外抑制活性。 展开更多

关键词 猫爪草 脂肪酸 耐多药结核

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应用PCR-荧光探针法快速检测耐多药结核分枝杆菌基因型 被引量：7

2

作者 梁建琴 李洪敏 +6 位作者 高华方 刘莹莹 王金河 武丽红 冯士生 刘景阳 史晓朋 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期5140-5142,共3页

目的评价PCR-荧光探针法快速检测耐多药结核分枝杆菌基因型的临床应用价值。方法应用PCR-荧光探针法对142份涂阳痰液样本进行分子菌种鉴定,对鉴定为结核分枝杆菌复合群的标本进行katG、inhA、rpoB耐药基因突变位点检测,并与传统药敏试... 目的评价PCR-荧光探针法快速检测耐多药结核分枝杆菌基因型的临床应用价值。方法应用PCR-荧光探针法对142份涂阳痰液样本进行分子菌种鉴定,对鉴定为结核分枝杆菌复合群的标本进行katG、inhA、rpoB耐药基因突变位点检测,并与传统药敏试验结果比较。结果 142份涂阳痰样本中3份鉴定为非结核分枝杆菌,139份鉴定为结核分枝杆菌复合群;139株结核分枝杆菌中92株未检测出katG、inhA、rpoB基因耐药检测位点突变,其中传统药敏结果72株为HSRS、6株为HSRR、14株为HRRR;33株检测出katG和rpoB或inhA和rpoB两个基因耐药位点突变,传统药敏结果均为HRRR;11株检测出katG或inhA耐药基因位点突变,传统药敏结果均为HRRS;1株检测出rpoB耐药基因位点突变,传统药敏结果为HSRR,药敏试验符合率为84.17%;对部分样本行PCR产物直接测序(PCR-DS),结果显示,PCR-荧光探针和PCR-DS检测耐多药结核分枝杆菌基因型结果符合率为100.00%。结论 PCR-荧光探针法快速检测耐多药结核分枝杆菌基因型简便、快速,具有临床推广应用价值。 展开更多

关键词 PCR-荧光探针法 耐多药结核分枝杆菌 KATG基因 inhA基因 RPOB基因

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耐多药结核分枝杆菌中embB基因突变与乙胺丁醇耐药的相关性研究 被引量：7

3

作者 刘志广 孙庆 +4 位作者 刘海灿 肖彤洋 赵秀芹 万康林 赵丽丽 《疾病监测》 CAS 2015年第4期321-324,共4页

目的研究耐多药结核分枝菌中emb B基因突变与乙胺丁醇耐药的相关性。方法比例法检测84株耐多药结核分枝杆菌的乙胺丁醇(EMB)耐药性,基因测序检测emb B基因的突变,χ2检验分析二者之间的相关性。结果84株耐多药结核分枝杆菌中有43株(51.... 目的研究耐多药结核分枝菌中emb B基因突变与乙胺丁醇耐药的相关性。方法比例法检测84株耐多药结核分枝杆菌的乙胺丁醇(EMB)耐药性,基因测序检测emb B基因的突变,χ2检验分析二者之间的相关性。结果84株耐多药结核分枝杆菌中有43株(51.2%)对EMB耐药,41株(48.8%)对EMB敏感,57株耐多药菌株(67.9%)的emb B基因发生突变。在43株EMB耐药菌株中,emb B基因突变的菌株为40株(93.0%),而41株EMB敏感菌株中,emb B基因突变的菌株为17株(41.5%),emb B基因在耐药菌株中的突变频率远高于敏感菌株(χ2=25.58,P=0.00)。emb B306是最常见的突变位点,其在耐药菌株的突变率也高于敏感菌株(χ2=12.37,P=0.00),emb B基因和emb B306位点检测EMB耐药的敏感度、特异度和准确性分别为93.0%和65.1%,58.5%和73.2%,76.2%和69.0%。结论 EMB耐药的产生与emb B基因和emb B306突变有关,二者用于检测EMB耐药有一定的参考意义。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 乙胺丁醇 耐药 突变

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肉汤微量稀释法对耐多药结核分枝杆菌敏感性检测的评价

4

作者 钟业腾 王洁莹 +3 位作者 陈灼霖 许玉妮 邱文华 裴华 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期840-846,共7页

目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结... 目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结果罗氏比例法和BMD法药敏结果平均判读时间分别为28.0、8.5 d。罗氏比例法检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇、卡那霉素和卷曲霉素的耐药率高于BMD法(均P<0.001);BMD法检测丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的耐药率高于罗氏比例法(均P<0.001)。以罗氏比例法药敏结果为金标准,BMD法检测耐药性的灵敏度和特异度分别为50.00%~100%、95.69%~100%,除EMB(87.39%)、INH(94.96%)外,BMD法检测其他药物的耐药性符合率均≥95%。罗氏比例法药敏结果与WGS总符合率为76.19%(32/42),BMD法药敏结果与WGS总符合率为23.81%(10/42),差异具有统计学意义(χ^(2)=23.048,P<0.001)。两种药敏方法检测结果不一致的MTB共34株,罗氏比例法耐药+BMD法敏感的26株MTB中,22株(84.62%)相关耐药基因发生突变;罗氏比例法敏感+BMD法耐药的11株MTB中,5株(45.45%)相关耐药基因发生突变。结论BMD法是一种准确、快速的MDR-MTB敏感性检测方法,但仍需要进一步改进和优化,耐药性与相关耐药基因的突变密切相关。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 罗氏比例法 肉汤微量稀释法 最低抑菌浓度 药物敏感试验

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苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌感染小鼠模型免疫功能的调节作用 被引量：5

5

作者 袁秀丽 《医学综述》 2016年第11期2230-2233,共4页

目的分析苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)感染小鼠模型免疫功能的调节作用。方法选取30只健康雄性昆明种小鼠,采用随机数字表法分为正常组、对照组及苦参提取物组,每组10只。对照组及苦参提取物组小鼠通过尾静脉注入MDR-TB 3 m... 目的分析苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)感染小鼠模型免疫功能的调节作用。方法选取30只健康雄性昆明种小鼠,采用随机数字表法分为正常组、对照组及苦参提取物组,每组10只。对照组及苦参提取物组小鼠通过尾静脉注入MDR-TB 3 m L,正常组尾静脉内注入等量0.9%Na Cl注射液。苦参提取物给予200 mg/kg苦参提取物灌胃,正常组和对照组给予等体积极0.9%Na Cl注射液灌胃。采用流式细胞仪测定血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清γ干扰素(IFN)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12等细胞因子水平及补体C3、补体C4、免疫球蛋白(Ig)G、Ig M、Ig A水平变化。结果苦参提取物组血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平高于对照组[(0.62±0.08)%比(0.53±0.06)%,(0.50±0.06)%比(0.40±0.05)%,(1.68±0.20)比(1.42±0.12),P<0.05],CD+8水平低于对照组[(0.20±0.04)%比(0.29±0.05)%,P<0.05];与正常组[(0.64±0.07)%、(0.56±0.08)%、(0.15±0.03)%、(1.73±0.18)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清IFN-γ、IL-12高于对照组[(1.37±0.08)ng/L比(1.18±0.05)ng/L,(2.35±0.12)ng/L比(2.08±0.11)ng/L],血清IL-10、IL-4低于对照组[(12.01±0.25)ng/L比(12.47±0.26)ng/L,(6.02±0.23)ng/L比(6.31±0.27)ng/L,P<0.05];与正常组[(1.55±0.14)ng/L、(11.23±0.26)ng/L、(5.56±0.27)ng/L、(24.7±0.07)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清C3、C4、Ig G、Ig M、Ig A高于对照组[(1.01±0.15)g/L比(0.67±0.09)g/L,(0.26±0.06)g/L比(0.19±0.03)g/L,(13.22±1.91)g/L比(7.92±0.94)g/L,(2.57±0.63)g/L比(1.84±0.37)g/L,(1.28±0.33)g/L比(0.52±0.11)g/L,P<0.05];与正常组[(1.27±0.20)g/L、(0.31±0.08)g/L、(15.82±1.75)ng/L、(2.91±0.65)g/L、(1.35±0.37)g/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论苦参提取物可以同时提升MDR-TB小鼠的细胞免疫及体液免疫水平,具有明显的抗MDR-TB作用,可以作为苦参提取物应用于临床MDR-TB感染患者治 展开更多

关键词 苦参提取物 耐多药结核分枝杆菌 免疫功能

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吉林省238株耐多药结核分枝杆菌药敏结果分析 被引量：4

6

作者 张炜煜 杨修军 +2 位作者 王博 赵薇 王艳华 《中国卫生工程学》 CAS 2015年第6期540-541,共2页

目的获得吉林省耐药结核分枝杆菌耐药本底数据,为耐多药结核病的治疗提供依据。方法依据WHO/IUATLD结核病耐药监测指南,收集耐多药结核菌238株,采用比例法对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星、卡那霉素进行药敏试验。结果在... 目的获得吉林省耐药结核分枝杆菌耐药本底数据,为耐多药结核病的治疗提供依据。方法依据WHO/IUATLD结核病耐药监测指南,收集耐多药结核菌238株,采用比例法对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星、卡那霉素进行药敏试验。结果在238株MDR-TB菌株中,耐S率为73.5%,耐EMB率为42.4%,耐Ofx率为33.2%,耐Km率为17.6%;另外,XDR-TB菌株占12.2%。结论吉林省耐多药结核病现状不容乐观,应提高现代结核病控制策略(DOTS)执行质量,加强实验室对MDR-TB和XDR-TB的检测能力。 展开更多

关键词 结核 肺 药物耐受性 耐多药结核分枝杆菌

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耐多药结核分枝杆菌基因突变分析 被引量：3

7

作者 杨松 钟敏 +1 位作者 张耀亭 王易伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第6期412-415,425,共5页

目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌株进行基因突变分析。方法对耐多药结核分枝杆菌临床分离菌株进行耐药基因的PCR检测,利用基因序列测定方法分析耐药基因突变情况。结果从耐多药结核病(MDR-TB)患者临床分离菌株中快速检测到rpoB、kat... 目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌株进行基因突变分析。方法对耐多药结核分枝杆菌临床分离菌株进行耐药基因的PCR检测,利用基因序列测定方法分析耐药基因突变情况。结果从耐多药结核病(MDR-TB)患者临床分离菌株中快速检测到rpoB、katG、rpsL、embB基因及其突变。耐多药菌株、全耐及单耐利福平分离菌株均检测rpoB基因点突变,突变位点主要为第516、526和531常见密码子,1例MDR-TB出现第479位和第531位密码子同时突变。耐多药菌、全耐菌及单耐异烟肼的菌株均检测有katG基因点突变,突变位点均为第2066位碱基C突变为G。全耐菌和对乙胺丁醇(EMB)耐药的耐多药菌株均检测有embB基因点突变,突变位点均为第306位密码子ATG突变为ACG。全耐菌和对链霉素(SM)耐药的MDR-TB菌株均检测有rpsL基因点突变,突变密码子为CCT突变为CTT,其中从1株对SM敏感的MDR-TB中也检测到突变。全敏感株、标准株及利福平(RIF)、异烟肼(INH)或EMB敏感的耐药株均无rpoB、katG或embB基因突变。结论PCR及基因序列测定可快速检测耐多药结核基因,结核分枝杆菌耐多药性与多个基因突变相关。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 基因 突变

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耐多药结核分枝杆菌临床分离株rpsL基因特征分析 被引量：3

8

作者 车洋 于梅 +1 位作者 平国华 林律 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第3期311-313,共3页

目的阐明宁波地区耐多药结核分枝杆菌rps L基因突变特征,为本地区耐多药结核病的有效预防控制提供科学依据。方法从宁波市疾病预防控制中心共收集67例耐多药结核分枝杆菌临床分离株,包括耐链霉素（SM）菌株40株和SM敏感菌株27株。采用PC... 目的阐明宁波地区耐多药结核分枝杆菌rps L基因突变特征,为本地区耐多药结核病的有效预防控制提供科学依据。方法从宁波市疾病预防控制中心共收集67例耐多药结核分枝杆菌临床分离株,包括耐链霉素（SM）菌株40株和SM敏感菌株27株。采用PCR直接测序法分析rps L基因的分子突变特征。结果 40株耐SM菌株中有31株rps L发生突变,突变率为77.50%,突变类型主要为Lys43Arg和Lys88Arg;27株SM敏感菌株中有4株发生突变,突变率为14.81%,突变类型主要为Ala119Gly。耐多药结核分枝杆菌中SM耐药株rps L基因突变率明显高于SM敏感株,两者之间差异有统计学意义（χ^2=25.387,P〈0.05）。结论宁波地区耐多药结核分枝杆菌rps L基因突变与链霉素耐药高度相关,其中Lys43Arg突变是主要突变类型,耐药基因突变类型存在地区差异。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 链霉素 RPSL基因

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抑制鹿源多药耐药结核菌中药的筛选 被引量：2

9

作者 姜园园 李温明 +7 位作者 刘畅 曾范利 时坤 李健明 刁乃超 李仲乐 刘东旭 杜锐 《动物医学进展》 北大核心 2016年第4期54-57,共4页

为了筛选对鹿源多药耐药结核菌有效的中药耐药抑制剂,通过MABA法检测24种中药的水和乙醇提取物对多药耐药结核菌及标准菌H37Rv的体外抗菌效果,将筛选出的抗菌效果好的黄连醇提物和黄连水提物采用紫外分光光度法进行活性成分含量测定,同... 为了筛选对鹿源多药耐药结核菌有效的中药耐药抑制剂,通过MABA法检测24种中药的水和乙醇提取物对多药耐药结核菌及标准菌H37Rv的体外抗菌效果,将筛选出的抗菌效果好的黄连醇提物和黄连水提物采用紫外分光光度法进行活性成分含量测定,同时以MABA法与标准品比较体外抗结核菌活性。结果显示,黄连、独活和侧柏叶有明显的抗结核活性,其中黄连水粗提物和乙醇粗提物效果最佳,测得它们活性成分即总生物碱含量分别为22.74%和35.23%,并显示二者与小檗碱的体外抗结核作用相同。 展开更多

关键词 鹿 多药耐药结核菌 中药 耐药抑制剂

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巨噬细胞耐多药结核分枝杆菌感染模型功能特点的观察 被引量：2

10

作者 吕霞丽 林婷婷 +9 位作者 高静韬 贾红彦 朱传智李 自慧 董静 孙琦 舒薇 潘丽萍 张宗德 李琦 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期741-748,共8页

目的观察巨噬细胞耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-Mtb)感染模型的吞噬和杀菌功能特点,探讨其在吞噬杀菌过程中免疫应答和代谢功能的变化,为完善巨噬细胞在耐多药结核病(multidrug-resistant tu... 目的观察巨噬细胞耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-Mtb)感染模型的吞噬和杀菌功能特点,探讨其在吞噬杀菌过程中免疫应答和代谢功能的变化,为完善巨噬细胞在耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)发生和发展中的作用机制提供依据。方法分别建立巨噬细胞MDR-Mtb和H37Rv株感染模型,采用菌落形成单位(colony-forming unit,CFU)计数、液相芯片技术和Cholesterol Assay试剂盒分别观察MDR-Mtb对巨噬细胞吞噬和杀菌功能、分泌细胞因子[Th1因子(IL-12/23 p40、IL-27和TNF-α)、Th2因子(IL-6和IL-10)]和胆固醇代谢的影响。采用SPSS25.0软件进行统计学分析,应用均值±标准差(Mean±SD)表示,比较采用t检验或F检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)MDR-Mtb感染巨噬细胞后,胞内CFU计数逐渐增高,至感染后24 h达峰值;胞外CFU计数逐渐降低,至感染后24 h达低值。感染后48 h,胞内CFU计数较感染后24 h降低,胞外CFU计数则较感染后24 h增高(P<0.05),均与感染后4 h相接近(P>0.05)。感染后8~48 h,MDR-TB组胞内CFU计数均低于H37Rv组,而胞外CFU计数则高于H37Rv组(P<0.05)。(2)MDR-TB组巨噬细胞上清液IL-12/23 p40、IL-27、TNF-α、IL-6和IL-10表达量均高于空白对照组(P<0.05)。与感染后4 h相比较,仅感染后24 h、48 h的TNF-α和IL-6表达量增高(P<0.05)。与H37Rv组相比较,MDR-TB组感染后48 h的IL-12/23 p40和TNF-α及感染后24 h的IL-6表达量降低,而其感染后48 h的IL-27表达量则增高(P<0.05)。(3)MDR-TB组感染后24 h、48 h胆固醇的表达量较感染后4 h降低,且低于空白对照组(P<0.05),但与H37Rv组各时间点胆固醇表达量相接近(P>0.05)。(4)当感染后24 h MDR-TB组胞内CFU计数达峰值时,仅TNF-α表达量达峰值;当感染后48 h MDR-TB组胞内CFU计数降低时仅IL-6表达量达峰值。当感染后MDR-TB组胞内CFU计数呈现先增高后降低的趋势时,胆固醇表达量呈现降低� 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 巨噬细胞 细胞因子 胆固醇

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月华丸(胶囊)对耐多药结核菌感染自噬相关蛋白LC3的影响 被引量：1

11

作者 刘婷婷 欧阳建军 +3 位作者 伍参荣 王茜 陈国茜 宁尚圣 《湖南中医杂志》 2019年第3期129-131,共3页

目的:观察月华丸(胶囊)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的影响,探寻其抗结核分枝杆菌的药效药理作用及其机制。方法:以月华丸(胶囊)含药血清干预感染结核分枝杆菌小鼠的单核巨噬细胞(RAW264. 7),实验共分为5组:阴性对照组、10%月华丸(胶... 目的:观察月华丸(胶囊)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的影响,探寻其抗结核分枝杆菌的药效药理作用及其机制。方法:以月华丸(胶囊)含药血清干预感染结核分枝杆菌小鼠的单核巨噬细胞(RAW264. 7),实验共分为5组:阴性对照组、10%月华丸(胶囊)含药血清组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华丸(胶囊)含药血清组、自噬诱导剂雷帕霉素(Rep)组,另设未被感染的细胞为正常组。采用免疫荧光染色法检测LC3。结果:阴性对照组细胞胞浆中未见LC3蛋白颗粒。与阴性对照组比较,3-MA+月华丸(胶囊)含药血清组细胞胞浆中可见少量LC3蛋白颗粒,10%月华丸(胶囊)含药血清组及Rep组细胞胞浆LC3蛋白颗粒均明显增多,3-MA+月华丸(胶囊)含药血清组多于10%月华丸(胶囊)含药血清组。结论:月华丸(胶囊)含药血清能诱导被耐多药结核菌感染巨噬细胞自噬。 展开更多

关键词 月华丸(胶囊) 耐多药结核菌 LC3 免疫荧光染色法 实验研究

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宁波地区耐多药结核分枝杆菌pncA基因突变特征与吡嗪酰胺耐药相关性研究

12

作者 车洋 杨天池 +1 位作者 林相 薄丁旖 《中国卫生检验杂志》 CAS 2021年第3期267-269,275,共4页

目的探讨宁波地区耐多药MTB的pnc A基因突变特征与吡嗪酰胺(PZA)耐药之间的关系。方法通过宁波地区2015年-2017年耐药监测项目收集筛选了130株耐多药MTB,应用BACTEC MGIT 960系统检测耐多药MTB的PZA耐药性,同时采用PCR DNA直接测序法检... 目的探讨宁波地区耐多药MTB的pnc A基因突变特征与吡嗪酰胺(PZA)耐药之间的关系。方法通过宁波地区2015年-2017年耐药监测项目收集筛选了130株耐多药MTB,应用BACTEC MGIT 960系统检测耐多药MTB的PZA耐药性,同时采用PCR DNA直接测序法检测耐多药MTB的pncA基因突变特征。结果 130株耐多药MTB有71株(54.62%,71/130)对PZA耐药,59株(45.38%,59/130)对PZA敏感。初治耐多药58株,PZA耐药24株,PZA耐药率为41.38%(24/58);复治耐多药72株,PZA耐药47株,PZA耐药率为65.28%(47/72),两者差异有统计学意义(χ2=7.402,P <0.05)。130株耐多药MTB中有61株(46.92%,61/130)发生了pncA基因突变。在71株PZA耐药菌株中,pncA基因突变的菌株为59株(83.10%,59/71),在59株PZA敏感菌株中,pncA基因突变的菌株为2株(3.39%,2/59),PZA耐药菌株中的pncA基因突变率高于敏感菌株(χ2=82.203,P <0.05)。pncA基因突变检测PZA耐药的敏感度、特异度和准确度分别为83.10%、96.61%、89.23%。结论宁波地区耐多药MTB对PZA耐药形势较为严峻,pncA基因突变与PZA耐药相关。 展开更多

关键词 吡嗪酰胺 耐多药结核分枝杆菌 突变 耐药

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吉林省耐多药结核分枝杆菌rpoB基因突变特征分析

13

作者 张炜煜 杨修军 张立夫 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第23期3429-3431,3435,共4页

目的分析吉林省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征,为耐多药结核病快速诊断方法的建立提供科学依据。方法采用DNA测序技术对吉林省287株耐多药结核分枝杆菌进行rpoB基因序列检测,分析检测菌株rpoB基因突变特征。结果 ... 目的分析吉林省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征,为耐多药结核病快速诊断方法的建立提供科学依据。方法采用DNA测序技术对吉林省287株耐多药结核分枝杆菌进行rpoB基因序列检测,分析检测菌株rpoB基因突变特征。结果 287株耐多药结核分枝杆菌中201株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因发生突变,突变率为70.03%(201/287)。碱基突变发生在前3顺位的是rpoB 531(39.72%)、rpoB 526(18.82%)、rpoB 516(5.92%)。287株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因共发现碱基突变、缺失、插入等40种基因突变类型。其中,单位点碱基突变、双位点碱基突变、多位点碱基突变、碱基缺失、碱基插入的发生率分别为60.63%(174/287)、6.27%(18/287)、1.39%(4/287)、1.39%(4/287)、0.70%(2/287)。结论吉林省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药相关基因最常见突变为rpoB 531、rpoB 526和rpoB 516。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 利福平 RPOB基因 基因突变 利福平耐药决定区

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青蒿琥酯抗耐多药结核分枝杆菌的作用活性及机制研究

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作者 喻容 周星 +2 位作者 马小华 石国民 向延根 《热带医学杂志》 CAS 2024年第6期793-800,共8页

目的探讨青蒿琥酯(ASN)单独或联合抗结核药物利福平(RFP)和异烟肼(INH)对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)的抗菌活性及其作用机制。方法选择2021年1月-2022年5月经长沙市中心医院确认保存的MDRTB 20例,进行体外药敏试验。根据不同药物处理... 目的探讨青蒿琥酯(ASN)单独或联合抗结核药物利福平(RFP)和异烟肼(INH)对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)的抗菌活性及其作用机制。方法选择2021年1月-2022年5月经长沙市中心医院确认保存的MDRTB 20例,进行体外药敏试验。根据不同药物处理将其分为无药对照组、青蒿琥酯组、利福平组、异烟肼组、青蒿琥酯联合利福平组、青蒿琥酯联合异烟肼组,检测其最小抑菌浓度(MIC)。采用基因芯片法检测青蒿琥酯对MDRTB耐药基因突变位点分析,实时荧光定量PCR检测青蒿琥酯改善抗结核药物对MDR-TB影响与外排泵关系,扫描电镜和透射电镜观察青蒿琥酯处理前后细菌细胞的改变情况。结果20株耐药菌株经鉴定均为MDR-TB,耐药基因分别为rpoB531C-T突变、rpoB526C-T突变和rpoB516A-T突变,katG315G-A突变和katG315G-C突变;其中,10株为rpoB531C-T突变、katG315G-A突变;6株为rpoB531C-T突变、katG315G-C突变;4株为rpoB516A-T突变、katG315G-A突变。随机挑选3、8号菌株,MDR-TB耐药位点均为rpoB531C-T突变和KatG315G-C突变,经青蒿琥酯处理24 h前后,rpoB531C-T位点突变和KatG315G-C位点突变均未发生改变。青蒿琥酯单独作用MDR-TB时,MIC较高;青蒿琥酯与利福平、异烟肼联合作用时,MIC值明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.001)。20株MDR-TB菌株中,仅在青蒿琥酯组中有2株能够显著抑制外排泵基因efpA、RV1250 mRNA表达,差异均有统计学意义(t=6.635、16.520,P均<0.05);其余菌株对efpA、RV1250 mRNA表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。扫描电镜结果显示,与对照组比较,加入青蒿琥酯后,菌体干枯皱缩;透射电镜结果显示,青蒿琥酯处理后,出现脂质脱落,菌体死亡。结论青蒿琥酯单独作用对MDR-TB未显示出抗结核活性,但联合抗结核药时,可改善抗结核药物对MDR-TB的药物敏感性;药物外排泵efpA、RV1250基因可能不是青蒿琥酯发挥主要机制;青蒿琥酯可破坏结核分枝杆� 展开更多

关键词 青蒿琥酯 抗结核药物 耐多药结核分枝杆菌 电镜 最小抑菌浓度

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