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靶向人多药耐药基因mrp1特异性小分子干扰RNA有效序列筛选 被引量：2
1
作者 王新平 韩雷 +7 位作者 李德华 赵兰英 苟兴华 潘光栋 夏冬 刘江文 严茂林 严律南 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第7期881-885,共5页
目的:筛选靶向人多药耐药相关蛋白基因(mrp1)特异性小分子干扰RNA(siRNA)的有效序列。方法:设计并体外转录合成靶向mrp1的4条siRNA(mrp1-si251,mrp1-si480,mrp1-si795,mrp1-si1016和空白对照si-阴性),转染转基因单因素肝癌多药耐药细胞H... 目的:筛选靶向人多药耐药相关蛋白基因(mrp1)特异性小分子干扰RNA(siRNA)的有效序列。方法:设计并体外转录合成靶向mrp1的4条siRNA(mrp1-si251,mrp1-si480,mrp1-si795,mrp1-si1016和空白对照si-阴性),转染转基因单因素肝癌多药耐药细胞Hep G2/mrp1。用RT-PCR检测mrp1 mRNA表达,流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达、细胞内柔红霉素(DNR)蓄积,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞对阿霉素(ADM)的敏感性。结果:4条siRNA均能不同程度逆转Hep G2/mrp1细胞由mrp1介导的多药耐药。转染72h后,mrp1-si795组和mrp1-si1016组的mrp1 mRNA表达水平分别分别下调了(86.36±2.26)%和(85.54±1.04)%,较mrp1-si251组和mrp1-si480组明显下降(P<0.05);细胞内柔红霉素蓄积由多到少依次为mrp1-si795组最多,mrp1-si1016组次之,mrp1-si480组较少,mrp1-si251组最少(P<0.05);mrp1-si795组对ADR耐药的相对逆转率(86.36%)最高,mrp1-si1016组(85.54%)次之,较mrp1-si251组(60.93%)和mrp1-si480组(70.29%)有明显差异(P<0.05);mrp1-si1016组和mrp1-si795组多药耐药相关蛋白表达明显下调。结论:实验设计的靶向mrp1 mRNA的siRNA序列能够不同程度逆转多药耐药相关蛋白介导的人肝癌耐药细胞HepG 2/mrp1的多药耐药性,mrp1-si1016和mrp1-si795效果最好,mrp1-si480较差,mrp1-si251最差。mrp1-si1016和mrp1-si795可以作为进一步实验的靶序列。 展开更多
关键词 小分子干扰RNA mrp1基因 HEPG2细胞 多药耐药 多药耐药相关蛋白
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MRP1基因表达与耐药性癫痫的相关性研究 被引量：1
2
作者 王燕 张庆 《中国实用神经疾病杂志》 2015年第2期8-10,共3页
目的研究MRP1基因表达与耐药性癫痫的相关性。方法选取90例符合诊断标准的癫痫患者,其中药物敏感患者50例,癫痫耐药患者40例。采用实时荧光定量PCR方法检测癫痫患者外周血中MRP1基因mRNA的表达水平。结果耐药性癫痫组MRP1基因mRNA表达量... 目的研究MRP1基因表达与耐药性癫痫的相关性。方法选取90例符合诊断标准的癫痫患者,其中药物敏感患者50例,癫痫耐药患者40例。采用实时荧光定量PCR方法检测癫痫患者外周血中MRP1基因mRNA的表达水平。结果耐药性癫痫组MRP1基因mRNA表达量(9.52±1.38)高于药物敏感组(1),差异有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫患者外周血中MRP1的表达水平,可作为诊断耐药性癫痫的参考指标。 展开更多
关键词 癫痫 耐药性 mrp1基因 实时荧光定量PCR
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靶向mrp1基因shRNA表达载体构建
3
作者 邵淑丽 崔婷婷 +3 位作者 刘迁 陈丽 贾红双 吴敏 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第2期250-252,共3页
目的:构建靶向mrp1基因的shRNA表达载体。方法:根据mrp1基因序列设计并合成编码shRNA的DNA模板,将其定向克隆到psilencer2.1U6-neo质粒上,构建重组载体。经菌落PCR和DNA测序分析检测重组载体构建结果。结果:成功构建靶向mrp1基因shRNA... 目的:构建靶向mrp1基因的shRNA表达载体。方法:根据mrp1基因序列设计并合成编码shRNA的DNA模板,将其定向克隆到psilencer2.1U6-neo质粒上,构建重组载体。经菌落PCR和DNA测序分析检测重组载体构建结果。结果:成功构建靶向mrp1基因shRNA表达载体。结论:为进一步研究mrp1基因在肺癌多药耐药中的作用以及探索肺癌的基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 mrp1基因 psilencer2.1U6-neo质粒 SHRNA 表达载体
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甲状腺乳头状癌中MRP-1基因的表达及其临床意义
4
作者 陆竞艳 曾思恩 +1 位作者 周英琼 韦敏怡 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期24-26,I0002,共4页
目的探讨甲状腺乳头状癌中MRP-1基因mRNA和蛋白的表达及其临床意义。方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学(EnvisionTM)法,检测36例甲状腺乳头状癌组织标本中MRP-1基因mRNA和蛋白的表达,并结合临床资料进行分析。结果MRP-... 目的探讨甲状腺乳头状癌中MRP-1基因mRNA和蛋白的表达及其临床意义。方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学(EnvisionTM)法,检测36例甲状腺乳头状癌组织标本中MRP-1基因mRNA和蛋白的表达,并结合临床资料进行分析。结果MRP-1的免疫组化和RT-PCR的检测结果相符(P<0.01)。甲状腺乳头状癌中MRP-1 mRAN表达水平为1.41±0.47,蛋白阳性率为36.1%(13/36),两者均低于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿及滤泡性腺瘤(P<0.05);MRPl基因mRNA和蛋白表达与甲状腺乳头状癌侵袭转移有关(P<0.05)。结论MRP-1基因与甲状腺乳头状癌的发生、发展、侵袭转移及预后有关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 mrp-1基因
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MRP-1/CD9基因在胃癌及其癌前病变中的差异表达 被引量：4
5
作者 张维铭 郑洁 +4 位作者 徐垚 刘文天 李艳芸 邢军 耿鑫 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期426-429,共4页
目的　筛选和鉴定与胃癌发生、发展相关的基因片段 ,探讨胃癌的癌变分子机理。方法　应用荧光 m RNA差异显示技术对胃正常黏膜、癌前病变及癌组织的基因差异表达情况进行了分析。对其中的运动相关蛋白 (motility- related protein- 1,MR... 目的　筛选和鉴定与胃癌发生、发展相关的基因片段 ,探讨胃癌的癌变分子机理。方法　应用荧光 m RNA差异显示技术对胃正常黏膜、癌前病变及癌组织的基因差异表达情况进行了分析。对其中的运动相关蛋白 (motility- related protein- 1,MRP- 1/CD9)基因 ,用 Northern印迹及逆转录 -聚合酶链反应技术分析在正常及不同病理状态下该基因表达的情况。结果　Northern印迹结果与 m RNA差异显示的结果相符合 ,逆转录 -聚合酶链反应显示 MRP- 1/CD9在胃癌组织中的表达 (0 .31± 0 .18)低于相应的正常胃黏膜 (0 .4 9± 0 .2 4 )及癌前病变组织 (0 .4 7± 0 .18) ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;在胃癌中 ,MRP- 1/CD9在弥漫型胃癌中的表达 (0 .2 2± 0 .17)明显低于肠型胃癌 (0 .38± 0 .16 ) (P<0 .0 5 )。结论　与正常胃黏膜及癌前病变组织相比 ,MRP- 1/CD9基因在胃癌组织中表达明显降低 ,提示 MRP- 1/CD9基因的表达情况可能与胃癌的发病及其组织学分型有关。 展开更多
关键词 mrp-1CD9基因 胃癌 癌前病变 差异表达
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