抗人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及初步鉴定 被引量：7

1

作者 贾娟娟 刘一兵 +2 位作者 许文革 张雪峰 韩世泉 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期467-470,共4页

为获得可用于免疫分析的人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的单克隆抗体,用基因重组的cTnI免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用ELISA法筛选,有限稀释法进行克隆化。经2次融合,获得12株分泌cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA法... 为获得可用于免疫分析的人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的单克隆抗体,用基因重组的cTnI免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用ELISA法筛选,有限稀释法进行克隆化。经2次融合,获得12株分泌cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA法测定腹水滴度大于1∶1×105,亲和常数大于1×108L/mol;此12株单克隆抗体与人心肌组织来源的cTnI可特异性结合,与cTnT、肌钙蛋白C(TnC)、人骨胳肌肌钙蛋白I(skTnI)、人骨胳肌肌钙蛋白T(skTnT)均无交叉反应。在这12株单克隆抗体中,有3株单抗可相互进行配对。该抗体的获得,为cTnI免疫诊断试剂的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 肌钙蛋白I 杂交瘤 单克隆抗体

原文传递

血小板膜GPⅡb/Ⅲa单抗及水蛭素对损伤动脉内膜血小板沉积量的影响 被引量：2

2

作者 朱智明 刘伊丽 +2 位作者 万华印 唐志宏 宾建平 《心肺血管病杂志》 CAS 1998年第1期39-41,共3页

本研究在单条动脉实验模型上，应用125Ⅰ标记血小板观察了CDw41及水蛭素对模拟血管成形术后血小板沉积量的影响。结果表明，仅用肝素抗凝组（2U／ml）损伤段血小板沉积量为：9．34±2．12×106个血小板／cm2和400．28±70．... 本研究在单条动脉实验模型上，应用125Ⅰ标记血小板观察了CDw41及水蛭素对模拟血管成形术后血小板沉积量的影响。结果表明，仅用肝素抗凝组（2U／ml）损伤段血小板沉积量为：9．34±2．12×106个血小板／cm2和400．28±70．38×106个血小板／g；未损伤段血小板沉积量为：1．23±0．54×106个血小板／cm2和69．36±18．25×106个血小板／g（P＜0．01）。CDw41组及水蛭素组损伤段血小板沉积量分别为：2．39±0．79×106个血小板／cm2和106．72±26．97×106个血小板／g；5．41±2．37×106个血小板／cm2和230．461±97．28×106个血小板／g。 展开更多

关键词 单克隆抗体 水蛭素 动脉 血小板沉积

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F型肉毒毒素单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：3

3

作者 许永亮 王佳星 +5 位作者 李响 孙志杰 于海威 刘栋琦 张惟材 熊向华 《生物技术通讯》 CAS 2020年第1期29-33,共5页

目的:制备F型肉毒毒素(BoNT/F)鼠源单克隆抗体。方法:以BoNT/F重链C端(BoNT/FHc)为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后尾血效价最高小鼠的脾脏细胞与鼠骨髓瘤细胞Sp2/0在聚乙二醇作用下进行细胞融合,ELISA筛选阳性细胞孔,通过有限稀释法分离... 目的:制备F型肉毒毒素(BoNT/F)鼠源单克隆抗体。方法:以BoNT/F重链C端(BoNT/FHc)为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后尾血效价最高小鼠的脾脏细胞与鼠骨髓瘤细胞Sp2/0在聚乙二醇作用下进行细胞融合,ELISA筛选阳性细胞孔,通过有限稀释法分离能稳定分泌抗体的细胞株。小鼠腹腔注射杂交瘤细胞制备的腹水利用Pro tein G进行亲合层析纯化,SDS-PAGE检测抗体纯度,非竞争ELISA测定抗体亲和力常数,亚型鉴定试剂盒鉴定抗体亚型,PCR扩增抗体轻重链可变区基因并经Vbase软件分析抗体框架区与互补决定区(CDR)氨基酸序列。结果:经过3轮免疫后,5只小鼠尾血效价均达到1∶16000,其中2号鼠尾血效价最高;杂交瘤细胞融合率为74.48%,阳性率为11.54%;2轮克隆化后筛选得到7株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,选择其中细胞培养上清效价最高的1F4制备抗体;腹水纯化后1F4抗体纯度超过95%,与BoNT/FHc抗原的亲和力常数为1.08×10^-8 mol/L;亚型鉴定结果表明1F4重链和轻链分别为IgG1型和κ型,抗体可变区氨基酸序列分析显示1F4重链和轻链CDR3序列为TRHGYFPSWFAY和QQHYSTPWT。结论:筛选到一株高亲和力的鼠源单克隆抗体,为BoNT/F检测和中和抗体的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 F型肉毒毒素 单克隆抗体 细胞融合 抗体纯化

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原发性肝癌病人外周血T淋巴细胞亚群变化的检测意义 被引量：3

4

作者 黄文献 林为澄 +1 位作者 许慎 洪永寿 《实用癌症杂志》 1995年第2期114-115,共2页

近年来，众多研究已表明肿瘤宿主免疫功能的改变，主要表现为细胞免疫功能下降和体液免疫功能升高（１）。为了探讨原发性肝癌（ＰＨＣ）患者免疫功能改变情况及其临床意义，作者应用ＯＫＴ系单克隆抗体，通过间接免疫荧光法对３２例晚... 近年来，众多研究已表明肿瘤宿主免疫功能的改变，主要表现为细胞免疫功能下降和体液免疫功能升高（１）。为了探讨原发性肝癌（ＰＨＣ）患者免疫功能改变情况及其临床意义，作者应用ＯＫＴ系单克隆抗体，通过间接免疫荧光法对３２例晚期原发性肝癌病人包括未能手术者１０例，手术切除后未复发者１２例或复发及转移的１０例病人进行外周血Ｔ淋巴细胞亚群的检测观察，并与健康人做了比较分析。作者断定ＯＫＴ系细胞检测可作为判断ＰＨＣ病人治疗和预后免疫监视的一个有价值的指标。 展开更多

关键词 癌 肝肿癌 外周血 T细胞亚群 单克隆抗体

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SOX11基因在B细胞非霍奇金淋巴瘤中表达研究 被引量：3

5

作者 曹鑫 姜胜华 +7 位作者 林赠华 张亚平 黄红铭 王信峰 尹红 丁佐凤 刘红 钱宇 《交通医学》 2014年第3期207-209,213,共4页

目的:探讨SOX11在各型B细胞非霍奇金淋巴瘤中表达的差异。方法:对B细胞非霍奇金淋巴瘤103例应用免疫组化方法检测SOX11的表达。结果:12例反应性增生中不表达SOX11,套细胞淋巴瘤21例中19例(90.5%)细胞核表达SOX11,弥漫大B细胞淋巴瘤45例... 目的:探讨SOX11在各型B细胞非霍奇金淋巴瘤中表达的差异。方法:对B细胞非霍奇金淋巴瘤103例应用免疫组化方法检测SOX11的表达。结果:12例反应性增生中不表达SOX11,套细胞淋巴瘤21例中19例(90.5%)细胞核表达SOX11,弥漫大B细胞淋巴瘤45例中细胞核表达15例(33.3%),滤泡性淋巴瘤11例中细胞核表达4例(36.4%),伯基特淋巴瘤9例中细胞核表达2例(22.2%),小淋巴细胞淋巴瘤13例中细胞核散在弱阳性1例(7.7%),淋巴结边缘区淋巴瘤4例中细胞核中度表达1例(25.0%),SOX11在套细胞淋巴瘤的表达率和其他类型淋巴瘤比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SOX11蛋白可在多种不同类型的B细胞性淋巴瘤中表达,在MCL中的表达率明显高于其它类型淋巴瘤。 展开更多

关键词 淋巴瘤 SOX11基因 B细胞 淋巴结反应性增生 单克隆抗体 免疫组织化学法 流式细胞术 Sox11

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抗T-2毒素单克隆抗体的制备与初步鉴定 被引量：3

6

作者 朱参胜 宋朝君 +2 位作者 彭双清 李荣华 金伯泉 《中国地方病防治》 北大核心 2006年第5期265-267,共3页

目的制备和鉴定抗T-2毒素单克隆抗体。方法将T-2毒素与牛血清白蛋白(BSA)交联,制备T-2毒素与BSA交联物(T-2-BSA),以T-2-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以HAT培养液筛选杂交瘤细胞,用有限稀释法进行克隆化。... 目的制备和鉴定抗T-2毒素单克隆抗体。方法将T-2毒素与牛血清白蛋白(BSA)交联,制备T-2毒素与BSA交联物(T-2-BSA),以T-2-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以HAT培养液筛选杂交瘤细胞,用有限稀释法进行克隆化。用筛选的阳性单克隆细胞株,按常规方法制备腹水,腹水用饱和硫酸铵沉淀后,用阴离子交换法纯化,获得纯化的单克隆抗体。采用ELISA鉴定抗体的亚类,并测定血清和腹水中抗体的效价。结果制备出T-2毒素与BSA交联物T-2-BSA,免疫小鼠血清的效价在1×10-6以上。获得1株能稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞系,该抗体(T2mAb)属于IgG1亚类,轻链为κ链。腹水效价为1×10-6。ELISA法证明T2mAb可与T-2毒素发生特异性反应。结论成功制备出抗T-2毒素单克隆抗体,为建立测定食品、饲料和组织液中T-2毒素的免疫学方法打下了坚实的基础。 展开更多

关键词 T-2毒素 单克隆抗体

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抗氯霉素单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立 被引量：1

7

作者 陈正贤 施曼玲 +2 位作者 李因来 叶兴乾 沈立荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期133-138,共6页

用人工合成的氯霉素-卵清蛋白（CAP—OVA）免疫BALB／c小鼠，通过杂交瘤技术筛选出1株能稳定传代并分泌抗氯霉素（CAP）单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞4C9，并以此制备腹水单抗．经间接竞争ELISA（ciELISA）检测，该单抗亚类重链类型是... 用人工合成的氯霉素-卵清蛋白（CAP—OVA）免疫BALB／c小鼠，通过杂交瘤技术筛选出1株能稳定传代并分泌抗氯霉素（CAP）单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞4C9，并以此制备腹水单抗．经间接竞争ELISA（ciELISA）检测，该单抗亚类重链类型是IgG1，轻链为K类型，单抗腹水效价为1：1×10^6，与甲砜霉素、氟甲砜霉素以及其他常见抗生素的交叉反应率小于0．01％．用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记单抗，建立了CAP直接竞争ELISA（cdELISA）方法．此法检测的线性范围为0．1～100ng·mL^-1，半数抑制浓度（IC50）为5．81ng·L^-1添加回收实验表明所建立的CAPcdELISA方法检测限达到0．1ng·L^-1，对比试验表明其检测灵敏度与商品试剂CAP ELISA基本相当． 展开更多

关键词 氯霉素 单克隆抗体 酶标抗体 直接竞争ELISA

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以牛血清白蛋白为中间载体的血卟啉衍生物与抗胃癌单克隆抗体交联物的抗肿瘤作用 被引量：1

8

作者 张永健 王耐勤 +1 位作者 刘彤 董志伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第12期886-890,共5页

以牛血清白蛋白为中间载体,将血卟啉衍生物(HPD)与抗胃癌单克隆抗体3H11交联。交联物3H11-BSA-HPD的克分子比为1:1:200。本文对3H11-BAS-HPD的体内外抗肿瘤作用进行了研究,并与直接交联物3H11-HPD进行比较。3H11-BSA-HPD和3H11-HPD对胃... 以牛血清白蛋白为中间载体,将血卟啉衍生物(HPD)与抗胃癌单克隆抗体3H11交联。交联物3H11-BSA-HPD的克分子比为1:1:200。本文对3H11-BAS-HPD的体内外抗肿瘤作用进行了研究,并与直接交联物3H11-HPD进行比较。3H11-BSA-HPD和3H11-HPD对胃癌靶细胞BGC-823的细胞毒效应相似,并均明显比游离HPD强。在接种靶细胞(2×10~5细胞/只)的裸鼠中,对照组和HPD组均于接种后13天内形成瘤块,而间接和直接交联物处理组在34天实验期内仅有1/6动物形成肿瘤。结果表明3H11-BSA-HPD和3H11-HPD在HPD相等剂量下,具有相似的导向杀伤肿瘤细胞的作用。 展开更多

关键词 单克隆抗体 血卟啉衍生物 抗肿瘤药

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单克隆抗体建立t-PA夹心ELISA法及其应用

9

作者 王钦红 王鸿利 +2 位作者 邵慧珍 王学锋 王振义 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1998年第1期47-50,共4页

运用杂交瘤技术制备了5株t-PA单抗.并对其免疫学特性作了鉴定。采用3株自制单抗建立了t-PA:Ag夹心ELISA法.该法特异性高.灵敏度0.6ng/ml.回收率96.9%,平均批内CV5.8%.批间CV8.5%。结合t-PA:A、PAI:A二项指标.测定50例正常对照组.87例肝... 运用杂交瘤技术制备了5株t-PA单抗.并对其免疫学特性作了鉴定。采用3株自制单抗建立了t-PA:Ag夹心ELISA法.该法特异性高.灵敏度0.6ng/ml.回收率96.9%,平均批内CV5.8%.批间CV8.5%。结合t-PA:A、PAI:A二项指标.测定50例正常对照组.87例肝病和48例冠心病患者,结果提示肝病血浆t-PA、PAI变化与病情严重程度密切相关;冠心病血浆t-PA、PAI变化与临床类型有一定关系,PAI:A显著升高与不稳定心绞痛的预后转归有关。 展开更多

关键词 单克隆抗体 ELISA T-PA

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两种方法标记^(99m)Tc抗CEA单抗及其鼠放免显像的比较研究

10

作者 管梁 吕中伟 +2 位作者 朱承谟 田伟家 濮鸣芳 《上海医学影像》 2001年第3期222-223,218,共3页

目的 评价两种方法^(99m)Tc标记抗CEA单抗与结肠癌肿瘤细胞表现相关抗原的亲和性。方法 分别采用2巯基乙醇法(2-ME)和亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)法,以新鲜^(99m)Tc淋洗液标记抗CEA单抗,并对荷人结肠癌裸鼠进行SPECT显像,比较两种标记方法... 目的 评价两种方法^(99m)Tc标记抗CEA单抗与结肠癌肿瘤细胞表现相关抗原的亲和性。方法 分别采用2巯基乙醇法(2-ME)和亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)法,以新鲜^(99m)Tc淋洗液标记抗CEA单抗,并对荷人结肠癌裸鼠进行SPECT显像,比较两种标记方法的显像效果。结果 2-ME法标记单抗在实验所得最佳标记条件免疫活性(B/T％)69.1％,标记率为88.7％,胶体含量8.1％。2-IT法标记的单抗免疫活性可达73.2％,标记率为93.7％,胶体含量4.8％。稳定性以2-IT方法为佳标记后1、2、6、12小时放化纯皆在90％以上,标记操作时间和标记方法M者各有优缺点。二者在荷瘤裸鼠的瘤体内显像清晰,2-IT法标记抗体的瘤本比值(T/NT)为5.33±1.11,2ME法为4.11±1.53,血池和肝肾的放射性以2-ME法为高。结论 表明以2-IT法和2-MT法预处理抗CEA单抗皆具有达到外接巯基的目的,可有效进行^(99m)Tc标记,较少损伤蛋白活性,标记方法简单,放射性核素标记的抗 CEA单抗对瘤体具有较高的亲和力,适用于SPECT显像。其中以2-IT法标记率高,胶体含量少,稳定性强,T/NT值大等优点,更适用于放射免疫显像。 展开更多

关键词 CEA 单克隆抗体 标记法 放射免疫显像 肿瘤

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单克隆抗体检测栗疫菌dsRNA的研究初报(英文) 被引量：6

11

作者 周尔勋 王克荣 +2 位作者 刘凤权 陆家云 Michael G. Milgroom 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期91-92,共2页

本文利用dsRNA特异性单克隆抗体,采用双抗体夹芯ELISA法,检测了栗疫菌中的dsRNA。结果表明:该法不仅能从栗疫菌低毒力菌株的总核酸粗提液中检测到dsRNA而不受其它核酸的干扰,而且比电泳法简便迅速,在大量筛选含dsRNA的栗疫菌低毒力菌株... 本文利用dsRNA特异性单克隆抗体,采用双抗体夹芯ELISA法,检测了栗疫菌中的dsRNA。结果表明:该法不仅能从栗疫菌低毒力菌株的总核酸粗提液中检测到dsRNA而不受其它核酸的干扰,而且比电泳法简便迅速,在大量筛选含dsRNA的栗疫菌低毒力菌株中具有很大的实用价值。 展开更多

关键词 栗疫菌 单克隆抗体 双抗体夹心 ELISA法 板栗

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组合单克隆抗体夹心斑点-ELISA检测日本血吸虫循环抗原的研究 被引量：2

12

作者 娄文娴 俞安洲 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1995年第3期141-144,共4页

本研究将抗不同表位单抗组合，首次用于夹心斑点-ＥＬＩＳＡ检测血吸由感染。对慢性日本血吸虫病患者的阳性检出率为８５％，１２例急性患者均阳性，１０例晚血病人４例阳性，非疫区正常人的假阳性率为２．２％。用单盲法检测的-组血清... 本研究将抗不同表位单抗组合，首次用于夹心斑点-ＥＬＩＳＡ检测血吸由感染。对慢性日本血吸虫病患者的阳性检出率为８５％，１２例急性患者均阳性，１０例晚血病人４例阳性，非疫区正常人的假阳性率为２．２％。用单盲法检测的-组血清其符合率亦较满意。在基本消灭血吸虫病地区检测了１１００人，用夹心斑点-ＥＬＩＳＡ测抗原，阳性率为６．５％，以ＩＨＡ测抗体阳性率为２５．２％。在低年龄组人群，斑点ＥＬＩＳＡ与ＣＯＰＴ符合率为８８．９％，明显高于ＩＨＡ与ＣＯＰＴ的符合率（３５．７％），Ｐ＜０．０５。动物实验中，组合单抗夹心班点ＥＬＩＳＡ对低感染兔的阳性检出率高于单个单抗直接斑点-ＥＬＩＳＡ。 展开更多

关键词 单克隆抗体 夹心斑点 ELISA 日本血吸虫病

原文传递

抗CD20单克隆抗体提高淋巴瘤细胞对X射线的敏感性

13

作者 闵凤玲 刘芬菊 +2 位作者 文万信 翟丽佳 周玮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期660-665,共6页

本研究观察抗CD20单克隆抗体制剂利妥昔(RTX)对X射线所致的人淋巴瘤细胞损伤的影响。用SRB法检测细胞存活,FITC-Annexin-V/PI试剂盒测定细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度。结果显示,RTX可明... 本研究观察抗CD20单克隆抗体制剂利妥昔(RTX)对X射线所致的人淋巴瘤细胞损伤的影响。用SRB法检测细胞存活,FITC-Annexin-V/PI试剂盒测定细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度。结果显示,RTX可明显增强X射线时的肿瘤细胞生长抑制作用(p<0.05);与单照射组比较,RTX可增加辐射诱导的细胞凋亡;透射电子显微镜下可见多种凋亡表现;细胞内[Ca2+]离子明显升高。结论:RTX可提高淋巴瘤细胞对X射线的辐射敏感性,诱导较多细胞的凋亡,并且与细胞内钙离子的变化有关。 展开更多

关键词 抗CD20单克隆抗体 利妥昔 淋巴瘤细胞 X射线敏感性

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免疫抑制酸性蛋白单克隆抗体MI-2体外抗肿瘤作用的观察

14

作者 陈兵 蔡学君 +2 位作者 周绍娟 樊代明 张学庸 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 1993年第2期11-14,共4页

作者采用MTT比色法观察了本室自制免疫抑制酸性蛋白单克隆抗体MI-2的体外抗肿瘤作用。结果表明:MI-2在浓度为7.81 μg/ml时即可明显抑制胃癌细胞株SGC 7901的生长(抑制率7.5％±2.4％,P<0.01),并见剂量依赖型表现;在LAK细胞与SGC... 作者采用MTT比色法观察了本室自制免疫抑制酸性蛋白单克隆抗体MI-2的体外抗肿瘤作用。结果表明:MI-2在浓度为7.81 μg/ml时即可明显抑制胃癌细胞株SGC 7901的生长(抑制率7.5％±2.4％,P<0.01),并见剂量依赖型表现;在LAK细胞与SGC 7901胃癌细胞的效靶比为10:1时,加入1.95 μg/ml的MI-2即可明显增强LAK细胞的细胞毒作用(增强效应为206.3％,P<0.01),也呈剂量依赖性表现。作者还发现MI-2的这种抗肿瘤作用与补体无关。 展开更多

关键词 单克隆抗体 免疫抑制因子 淋巴因子激活杀伤细胞 细胞毒性 胃肿瘤

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西伯利亚鲟(Acipenser baerii)IFN-γ基因克隆、原核表达和单克隆抗体制备

15

作者 田照辉 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期69-73,110,共6页

利用转录组信息克隆西伯利亚鲟IFN-γ的可读编码框(ORF)528 bp,编码176个氨基酸,具有IFN-γ的特征序列和核定位序列,参照此序列构建N端含有6His(组氨酸)的原核表达载体Pet30α-IFN-γ,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(异丙基硫代半乳糖... 利用转录组信息克隆西伯利亚鲟IFN-γ的可读编码框(ORF)528 bp,编码176个氨基酸,具有IFN-γ的特征序列和核定位序列,参照此序列构建N端含有6His(组氨酸)的原核表达载体Pet30α-IFN-γ,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)诱导表达,SDS-PAGE蛋白电泳和免疫印迹Western Blot鉴定,重组蛋白为22.8 ku,主要以包涵体形式存在,温度37℃时的最佳表达条件为0.75 mmol/L的IPTG诱导6 h,利用镍柱层析得到纯化的重组蛋白,重组蛋白免疫小鼠,进行细胞融合获得8株阳性细胞株,利用protein G亲和层析纯化的单克隆抗体效价为2×105,为深入研究西伯利亚鲟IFN-γ免疫学功能奠定基础。 展开更多

关键词 西伯利亚鲟 IFN-Γ基因 原核表达 重组蛋白 单克隆抗体

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A型肉毒毒素单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：3

16

作者 吕孙慧 刘凌志 +5 位作者 霍江 李磊 汪建华 游松 熊向华 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2018年第2期199-202,共4页

目的:制备并鉴定抗A型肉毒毒素重链C端(BoNT/AHc)鼠源单抗。方法:以BoNT/AHc蛋白为抗原免疫小鼠,利用杂交瘤技术获得鼠源单抗,通过抗体分型、SDS-PAGE、Western印迹及ELISA法分析鉴定。结果:筛选得到3株鼠单抗1B1、1B2、1C6,重链类型均... 目的:制备并鉴定抗A型肉毒毒素重链C端(BoNT/AHc)鼠源单抗。方法:以BoNT/AHc蛋白为抗原免疫小鼠,利用杂交瘤技术获得鼠源单抗,通过抗体分型、SDS-PAGE、Western印迹及ELISA法分析鉴定。结果:筛选得到3株鼠单抗1B1、1B2、1C6,重链类型均为IgG1,轻链类型均为κ型;3株纯化抗体的纯度达90%以上,均能与抗原BoNT/AHc特异性结合,亲和力常数分别为1.43×10~8、2.31×10~8、1.44×10~9L/mol;叠加ELISA结果显示3株抗体与抗原BoNT/AHc结合位点相同或相近。结论:筛选得到3株能与BoNT/AHc特异性结合的鼠源单抗,为A型肉毒毒素中和抗体的研发,以及快速有效的肉毒毒素检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 A型肉毒毒素 单克隆抗体 制备 鉴定

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特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析

17

作者 张娟 余晓林 +4 位作者 陈维贤 陶鹏 唐霓 黄爱龙 郑建 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第4期459-462,共4页

目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1... 目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白)分别免疫Balb/c小鼠制备McAb,通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性,以Western blot鉴定单克隆抗体特异性,并对McAb结合表位进行初步分析。结果:筛选出7株抗SARS-CoVN1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,腹水效价105以上;亲和常数达108以上。Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoVN蛋白发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位,其余均识别不同的抗原表位。结论:通过分段表达纯化的SARS-CoV N蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中,N1单抗识别N蛋白N端(1￣549bp),N2单抗识别N蛋白C端(496￣1269bp),可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。 展开更多

关键词 SARS-COV 核衣壳蛋白 单克隆抗体 抗原表位

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非霍奇金淋巴瘤单克隆抗体治疗的研究进展 被引量：2

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作者 温宁笑 袁红梅 《现代诊断与治疗》 CAS 2010年第4期221-223,共3页

单克隆抗体应用于临床治疗恶性淋巴瘤目前已经取得了明显成效,与传统治疗相比,具有靶向性、不良反应小、能达到体内肿瘤细胞的微量残留等特点。新的抗CD20单克隆抗体为非霍奇金淋巴瘤治疗带来了新的发展,对以美罗华为代表单克隆抗体治... 单克隆抗体应用于临床治疗恶性淋巴瘤目前已经取得了明显成效,与传统治疗相比,具有靶向性、不良反应小、能达到体内肿瘤细胞的微量残留等特点。新的抗CD20单克隆抗体为非霍奇金淋巴瘤治疗带来了新的发展,对以美罗华为代表单克隆抗体治疗恶性淋巴瘤的耐药问题带来了新的突破,提出了新策略。 展开更多

关键词 单克隆抗体 淋巴瘤 抗CD20 非霍奇金淋巴瘤

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B72．3第二代单克隆抗体的研制和免疫组化分析

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作者 徐迈 董明 +2 位作者 王兰 张素敏 苏晓林 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1994年第4期307-310,共4页

以Ｂ７２．３单抗的对应肿瘤相关糖蛋白抗原７２（ＴＡＧ－７２）为免疫源，采用细胞融合技术制备出了Ｂ７２．３第二代单克隆抗体７２－４５和７２－１４２。上述单抗的免疫组化分析结果表明，除同胎儿和成人皮脂腺、汗腺和小肠上皮细... 以Ｂ７２．３单抗的对应肿瘤相关糖蛋白抗原７２（ＴＡＧ－７２）为免疫源，采用细胞融合技术制备出了Ｂ７２．３第二代单克隆抗体７２－４５和７２－１４２。上述单抗的免疫组化分析结果表明，除同胎儿和成人皮脂腺、汗腺和小肠上皮细胞呈一定程度的反应外，同其它正常组织器官均呈阴性反应。相反，单抗７２－４５在大肠癌的阳性率为１００％，肺腺癌为８０％。单抗７２－１４２在大肠癌阳性率为４０．５％，肺腺癌为７９．５％。结果提示上述单抗对恶性肿瘤的诊断和治疗具有一定的潜在应用价值。 展开更多

关键词 单克隆抗体 癌 大肠肿瘤 免疫组织化学

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抗结肠癌和抗癌胚抗原的单克隆抗体识别大肠良恶性病变的对比研究

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作者 周亚东 周殿元 +3 位作者 张月彩 续正慧 李树彬 张万岱 《第一军医大学学报》 CSCD 1989年第4期322-32,共1页

应用抗癌胚抗原(CEA)和抗结肠癌单克隆抗体(MC_3)对大肠癌以及腺瘤等良性病变的结肠粘膜进行了免疫组织化学(PAP法)研究.结果CEA在大肠癌和重度不典型增生的腺瘤组织中阳性率为100％,在正常结肠组织和其它非腺瘤的良性病变组织中良性率... 应用抗癌胚抗原(CEA)和抗结肠癌单克隆抗体(MC_3)对大肠癌以及腺瘤等良性病变的结肠粘膜进行了免疫组织化学(PAP法)研究.结果CEA在大肠癌和重度不典型增生的腺瘤组织中阳性率为100％,在正常结肠组织和其它非腺瘤的良性病变组织中良性率为33.33—60.00％,在轻、中度不典型增生腺瘤组织中分别为74.58％和84.62％.MC_3相应抗原在大肠癌中阳性率为100％,在轻、中、重度不典型增生腺瘤组织中阳性率分别为44.07％、69.23％、100％,在正常结肠粘膜及良性非腺瘤性病变组织中阳性率为0—22.22％.以上结果表明MC_3和抗CEA两种单克隆抗体在识别恶性肿瘤方面的敏感性均佳,但MC_3特异性远优于抗CEA单克隆抗体. 展开更多

关键词 大肠癌 抗癌胚抗原 单克隆抗体

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