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题名改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞
被引量：1
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作者
马瑞杰
李妍
孙晓梅
胡竹林
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机构
云南省第二人民医院眼科中心
中国医学科学院昆明医学生物研究所灵长类研究中心
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出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2016年第7期618-621,共4页
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基金
云南省应用基础研究项目(昆医联合专项)(编号:2014FB074
2013 FB109)~~
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文摘
目的分析改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞的可行性。方法揭取恒河猴角膜后弹力层和内皮层,反复剪碎,用1 mg·m L^(-1)胶原酶A消化15 min,离心后重悬接种。待原代细胞长满80%~90%时,以40×106个·L^(-1)的密度传代。观察记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,进行细胞鉴定,并与组织贴壁法相比较。结果改良揭膜消化法获取的原代细胞生长较慢,21 d融合成单层铺路石样结构,无基质细胞污染;传代细胞生长较快,5~6 d可传一代;神经元特异烯醇化酶表达阳性。组织贴壁法分离组织24h后组织片体积变小,透亮度明显下降,疑似溶解,高倍镜下观察显示,后弹力层纤维排列紊乱,细胞观察不清;继续培养至第5天,细胞完全溶解,组织片碎裂,轮廓不清,未见角膜内皮细胞爬出。结论改良揭膜消化法能简易高效地获得大量恒河猴角膜内皮细胞。
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关键词
角膜内皮细胞
改良揭膜消化法
体外培养
恒河猴
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Keywords
corneal endothelial cells
modified＂peel-and-digest＂procedure
in vitro culture
R hesus monkey
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分类号
R772.2
[医药卫生—眼科]
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