免疫抑制法检测肌酸激酶同工酶MB临床应用评价 被引量：12

1

作者 陈闻达 李懿皞 +3 位作者 朱晶 邵文琦 王蓓丽 郭玮 《临床检验杂志》 CAS 2021年第2期86-89,共4页

目的对选定的肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)检测试剂盒进行性能验证及对异常CK-MB结果的临床标本进行回顾性分析。方法对CK-MB检测试剂盒的正确度、精密度、线性范围、最大稀释比以及参考区间进行验证;随机选取50例表观健康体检者作为健康人... 目的对选定的肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)检测试剂盒进行性能验证及对异常CK-MB结果的临床标本进行回顾性分析。方法对CK-MB检测试剂盒的正确度、精密度、线性范围、最大稀释比以及参考区间进行验证;随机选取50例表观健康体检者作为健康人对照组,50例临床确诊心血管疾病患者作为心血管疾病组并用于临床应用的验证;收集28例临床检测报告为“CK结果倒置”的患者血清标本,对试剂盒纠正“CK结果倒置”结果的能力进行评估。结果选定的CK-MB检测试剂盒各项检测性能符合要求,在临床应用上能较好地纠正由巨CK-Ⅱ(线粒体型CK)引起的“CK倒置”结果,从而能更好地为临床提供参考。结论该试剂盒各项检测性能良好,其添加的线粒体型CK抑制抗体能较好地纠正巨CK-Ⅱ(线粒体型CK)引起的“CK结果倒置”结果,但其他类型的“CK结果倒置”结果,仍需通过同工酶电泳等方法进行确认。 展开更多

关键词 肌酸激酶同工酶MB 免疫抑制法 线粒体CK 性能验证

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结直肠腺癌患者血清线粒体肌酸激酶检测的意义 被引量：10

2

作者 顾鹏飞 张建 +1 位作者 仲人前 王爱华 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第2期129-131,共3页

目的通过对结直肠腺癌患者血清线粒体肌酸激酶(M tCK)的检测,探讨其在结直肠腺癌诊断中的临床意义。方法选择手术治疗的结直肠腺癌患者107例和同期非肿瘤患者53例为研究对象。用电泳法检测血清M tCK,同时用化学发光免疫测定检测癌胚抗原... 目的通过对结直肠腺癌患者血清线粒体肌酸激酶(M tCK)的检测,探讨其在结直肠腺癌诊断中的临床意义。方法选择手术治疗的结直肠腺癌患者107例和同期非肿瘤患者53例为研究对象。用电泳法检测血清M tCK,同时用化学发光免疫测定检测癌胚抗原(CEA),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测糖抗原(CA)242。结果结直肠腺癌患者组中M tCK、CEA、CA242的阳性率分别为59.8%、55.1%和63.5%,非肿瘤对照组为3.7%、5.7%和3.7%。M tCK检测的敏感性和特异性分别为59.8%和96.2%,与CEA、CA242联合检测的敏感性和特异性分别为44.8%和100.0%。结论血清M tCK检测有助于结直肠腺癌的诊断,与CEA和CA242联合检测可显著提高对结直肠腺癌诊断的特异性。 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶 腺癌 癌胚抗原 糖抗原242

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肿瘤患者血清线粒体肌酸激酶水平变化及其诊断意义研究进展 被引量：4

3

作者 张宁宁 陆伟 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第4期445-448,共4页

线粒体肌酸激酶(Mt CK)存在于细胞内线粒体内膜和外膜间隙,属肌酸激酶同工酶系列,其主要生理作用是在有氧情况下通过磷酸肌酸穿梭机制提供肌肉收缩所需能量。近年来,很多研究发现Mt CK在肿瘤患者血清中高表达,且大多数是患有恶性肿瘤患... 线粒体肌酸激酶(Mt CK)存在于细胞内线粒体内膜和外膜间隙,属肌酸激酶同工酶系列,其主要生理作用是在有氧情况下通过磷酸肌酸穿梭机制提供肌肉收缩所需能量。近年来,很多研究发现Mt CK在肿瘤患者血清中高表达,且大多数是患有恶性肿瘤患者的血清中Mt CK呈高表达,在预后不好的病人中过表达尤其明显,推测其对恶性肿瘤的临床诊断及预后判断具有重要意义。同时,分子生物学研究认为Mt CK过表达可以使细胞在某种程度上获得一定的生长优势以抵抗调亡。 展开更多

关键词 肿瘤 线粒体肌酸激酶 临床诊断

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双抗体夹心ELISA测定人广泛型线粒体肌酸激酶方法的建立 被引量：4

4

作者 张健 简敏华 +1 位作者 蒋玲丽 葛丹红 《检验医学》 CAS 2013年第10期913-916,共4页

目的建立测定人血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法应用原核表达的uMtCK重组蛋白免疫小鼠获得7株单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中抗体19F11进行辣根过氧化物酶(HRP)... 目的建立测定人血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法应用原核表达的uMtCK重组蛋白免疫小鼠获得7株单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中抗体19F11进行辣根过氧化物酶(HRP)标记作为检测抗体,抗体3C1作为俘获抗体,建立检测人uMtCK双抗体夹心ELISA方法,并进行方法学评价。同时采用该法检测50名健康体检者和85例肿瘤标志物[甲胎蛋白(AFP)或癌胚抗原(CEA)]阳性患者的血清。结果通过筛查获得配对抗体,建立检测人uMtCK的双抗体夹心ELISA方法。该法的检测限为28.8 ng/mL,批内变异系数(CV)为4.5%～7.7%,批间CV为8.2%～13.5%,平均回收率为97.1%。用该法检测50名健康体检者血清uMtCK浓度,结果均为阴性;85例肿瘤标志物阳性患者中有15例检出uMtCK,浓度为52.8～1 442.2 ng/mL。结论建立的双抗体夹心ELISA可以用于测定人血清uMtCK浓度。 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶 广泛型亚型 酶联免疫吸附试验

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血清uMtCK、NSE、CYFRA21-1、Pro-GRP及LD检测在肺癌诊断中的应用及其与临床病理分期的关系 被引量：6

5

作者 谢春霞 田可港 +2 位作者 徐淑华 张磊 牟晓峰 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第4期461-464,共4页

目的探讨血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)及乳酸脱氢酶(LD)在肺癌诊断、临床病理分期中的价值。方法采用电化学发光分析法和酶法检测78例肺癌住... 目的探讨血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)及乳酸脱氢酶(LD)在肺癌诊断、临床病理分期中的价值。方法采用电化学发光分析法和酶法检测78例肺癌住院患者和20例肺部良性结节患者血清NSE、CYFRA21-1、PRO-GRP及LD水平,uMtCK采用肌酸激酶同工酶电泳进行分析。结果肺癌组血清uMtCK、NSE及LD阳性率均高于肺部良性结节组(P<0.05),Ⅲ~Ⅳ期肺癌患者uMtCK、NSE、CYFRA21-1及LD阳性率均高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),uMtCK与NSE、CYFRA21-1及LD均呈正相关(r=0.424、0.488、0.721,P<0.05)。NSE及Pro-GRP与肺癌病理类型相关(r=0.570、0.653,P<0.05),上述5项检测指标与TNM分期相关(r=0.419、0.552、0.356、0.549,P<0.05)。结论血清uMtCK、NSE及LD指标在肺癌患者筛查及临床分期判断中都有较高的的价值,NSE和Pro-GRP在判断肺癌病理类型方面有一定作用,CYFRA21-1在不同分期间存在差异。 展开更多

关键词 广泛型线粒体肌酸激酶 肿瘤标志物 肺癌 相关性分析

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线粒体肌酸激酶在乳腺肿瘤中的表达及意义 被引量：4

6

作者 成继民 陈兴 +5 位作者 张乃哲 贺占国 郑锡铭 江泓 张立 王更银 《现代诊断与治疗》 CAS 1997年第1期10-11,共2页

目的　研究线粒体肌酸激酶在乳腺肿瘤中的表达及意义。方法　　应用线粒体肌酸激酶抗血清和免疫组化ＬＳＡＢ法对４５例乳腺肿瘤组织行ＣＫ－ｍｉｔ检测。结果　癌细胞免疫组化染色阳性率分别是乳腺浸润性导管瘤７８．２％（２５／３２... 目的　研究线粒体肌酸激酶在乳腺肿瘤中的表达及意义。方法　　应用线粒体肌酸激酶抗血清和免疫组化ＬＳＡＢ法对４５例乳腺肿瘤组织行ＣＫ－ｍｉｔ检测。结果　癌细胞免疫组化染色阳性率分别是乳腺浸润性导管瘤７８．２％（２５／３２）、乳腺腺瘤１０．０％（１／１０）、癌旁组织２．９％（１／３５）。线粒体肌酸激酶阳性率在癌组织内比在癌旁组织和腺瘤内高（Ｐ＜０．０１）。结论　线粒体肌酸激酶有助于乳腺癌的早期诊断。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 线粒体肌酸酶 免疫组织化学

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线粒体肌酸激酶在肺癌组织中的表达 被引量：5

7

作者 成继民 陈兴 +3 位作者 贺占国 王更银 郭宏 张哲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期12-13,共2页

目的 :研究线粒体肌酸激酶(CK -mit)在肺癌中的表达及意义。方法 :应用抗人心肌线粒体肌酸激酶单克隆抗体和免疫组化LSAB法对50例肺癌组织进行CK -mit检测。结果 :肺癌阳性率为58 % ,阳性与阴性表达相差显著(P<0.05)。其中肺腺癌阳性... 目的 :研究线粒体肌酸激酶(CK -mit)在肺癌中的表达及意义。方法 :应用抗人心肌线粒体肌酸激酶单克隆抗体和免疫组化LSAB法对50例肺癌组织进行CK -mit检测。结果 :肺癌阳性率为58 % ,阳性与阴性表达相差显著(P<0.05)。其中肺腺癌阳性率87.5 %(14/16) ,鳞癌47.6 %(10/21) ,未分化癌30 %(3/10) ,腺鳞癌100 %(2/2) ,透明细胞癌0 %(0/1)。腺癌较鳞癌和未分化癌对线粒体肌酸激酶表达阳性率高(P<0.05)。结论 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶 肺肿瘤 基因表达

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血清CKMT1A、NFL检测联合^(11)C-β-CFT PET/CT脑显像在帕金森病诊断中的价值 被引量：3

8

作者 常培叶 薛婧婷 +1 位作者 王春梅 赵平 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第18期4424-4427,共4页

目的探究帕金森病(PD)患者血清线粒体肌酸激酶(CKMT)1A、神经丝轻链蛋白(NFL)活性的变化及^(11)C-甲基-N-2β-甲基酯-3β-(4-F-苯基)托烷(^(11)C-β-CFT)正电子发射计算机断层显像(PET)/电子计算机X射线断层扫描技术(CT)脑显像的情况,... 目的探究帕金森病(PD)患者血清线粒体肌酸激酶(CKMT)1A、神经丝轻链蛋白(NFL)活性的变化及^(11)C-甲基-N-2β-甲基酯-3β-(4-F-苯基)托烷(^(11)C-β-CFT)正电子发射计算机断层显像(PET)/电子计算机X射线断层扫描技术(CT)脑显像的情况,为发现PD标志物提供线索。方法PD患者39例为PD组,对照组50例来自健康体检者,使用酶联免疫吸附试验测定血清CKMT1A、NFL浓度,使用^(11)C-β-CFT PET/CT显示黑质、纹状体多巴胺转运体(DAT)的摄取情况。结果PD组血清CKMT1A、NFL水平明显高于对照组(P<0.05);PD组纹状体DAT结合量指数及结合不对称性显著低于对照组(P<0.05)。结论CKMT1A、NFL联合^(11)C-β-CFT PET/CT脑显像有可能成为辅助诊断PD的标志物。 展开更多

关键词 帕金森病 多巴胺转运体 线粒体肌酸激酶1A 神经丝轻链蛋白

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人线粒体肌酸激酶广泛型亚型的原核表达、抗体制备及其临床应用意义 被引量：4

9

作者 张建 王爱华 +1 位作者 顾鹏飞 于嘉屏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1320-1324,共5页

目的:在大肠杆菌中克隆表达人线粒体肌酸激酶广泛型亚(uMtCK)的蛋白,免疫家兔制备抗uMtCK的多克隆抗体,检测胃肠肿瘤组织中uMtCK的表达。方法:采用RT-PCR从培养的肿瘤细胞(HeLa细胞)中成功扩增出1062bp的uMtCK基因片段,构建重组质粒pQE3... 目的:在大肠杆菌中克隆表达人线粒体肌酸激酶广泛型亚(uMtCK)的蛋白,免疫家兔制备抗uMtCK的多克隆抗体,检测胃肠肿瘤组织中uMtCK的表达。方法:采用RT-PCR从培养的肿瘤细胞(HeLa细胞)中成功扩增出1062bp的uMtCK基因片段,构建重组质粒pQE30-uMtCK,转化大肠杆菌表达酶融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE、Western印迹鉴定及酶活性测定。纯化的uMtCK蛋白免疫家兔制备了抗uMtCK多抗。免疫组化法检测59例胃及直肠肿瘤组织切片中uMtCK的表达。结果:RT-PCR扩增出的片段经酶切鉴定和测序证实为uMtCK的基因;在大肠杆菌M15中实现了高效、可溶性的融合表达。免疫家兔制备的抗uMtCK多抗经Western免疫印迹分析适合作uMtCK的进一步分析。免疫组化检测临床病理标本结果显示,59例胃及直结肠肿瘤标本uMtCK的阳性率为76.5％。结论:成功克隆了人uMtCK的编码基因,并将其在大肠杆菌中成功表达;制备了抗uMtCK多抗,免疫组化检测临床病理标本的结果提示uMtCK有助于胃肠肿瘤的诊断。 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶 基因表达 胃肠肿瘤

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CKMT1A、CRABP2、PAX8在子宫内膜癌患者血清中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系

10

作者 董仙萍 于倩 +3 位作者 刘英杰 厉昕妤 郭佳 杨小杰 《检验医学与临床》 CAS 2024年第20期2970-2974,2979,共6页

目的探讨线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)、细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)、配对盒基因8(PAX8)在子宫内膜癌患者血清中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系。方法选取2021年5月至2022年5月唐山市妇幼保健院收治的107例子宫内膜癌患者作... 目的探讨线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)、细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)、配对盒基因8(PAX8)在子宫内膜癌患者血清中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系。方法选取2021年5月至2022年5月唐山市妇幼保健院收治的107例子宫内膜癌患者作为研究组。并在治疗后进行1年定期随访,根据患者复发情况分为复发组和未复发组。另选取同时期在该院进行体检的86例健康者作为健康组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平,比较不同临床病理指标的子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平。采用Pearson相关分析子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CKMT1A、CRABP2、PAX8单独及三者联合检测对子宫内膜癌复发的预测价值。结果研究组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平均高于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清CKMT1A与CRABP2水平呈正相关(r=0.437,P<0.001),CKMT1A与PAX8水平呈正相关(r=0.526,P<0.001),CRABP2与PAX8水平呈正相关(r=0.493,P<0.001)。不同肌层浸润、分化程度、淋巴结转移情况等的子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平随着分化程度的降低及淋巴结的转移而升高(P<0.05)。复发组纳入12例患者,非复发组纳入95例患者。复发组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平均高于非复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CKMT1A、CRABP2和PAX8单独预测子宫内膜癌复发的曲线下面积分别为0.886、0.850、0.811,均低于三者联合检测的0.978(Z三者联合-CKMT1A=2.318,P=0.020;Z三者联合-CRABP2=2.030,P=0.042;Z三者联合-PAX8=2.955,P=0.003)。结论子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2和PAX8水平均高表达,三者表达与病理类型、分化程度、淋巴结转移情况等临床病� 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶1A 细胞视黄酸结合蛋白2 配对盒基因8 子宫内膜癌 临床病理参数 预后

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实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶基因的表达 被引量：4

11

作者 钱琤 于嘉屏 +3 位作者 王爱华 顾鹏飞 邓安梅 仲人前 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第2期6-8,共3页

目的建立检测人广泛型线粒体肌酸激酶（ubiquitous mitochondrial creatine kinase，uMtCk）mRNA荧光定量的方法，并检测了结直肠腺癌病人肿瘤组织和癌旁组织中uMtCk基因表达的水平。方法基于TaqMan荧光探针技术，以GAPDH作为内参，建... 目的建立检测人广泛型线粒体肌酸激酶（ubiquitous mitochondrial creatine kinase，uMtCk）mRNA荧光定量的方法，并检测了结直肠腺癌病人肿瘤组织和癌旁组织中uMtCk基因表达的水平。方法基于TaqMan荧光探针技术，以GAPDH作为内参，建立实时荧光定量RT-PCR方法，并检测了30名结直肠腺癌病人肿瘤组织和癌旁组织uMtCk mRNA的表达。结果30倒结直肠肿瘤患者肿瘤组织中有uMtCk mRNA的表达，范围为7.4×10^5－5.3×10^8拷见／μg RNA，均值为（9.4±5.7）×10^6拷贝／μg RNA；30例癌旁组织uMtCk表达为4.5×10^3－6.9×10^5拷贝／μg RNA，均值为（8.6±3.4）×10^4拷贝／μg RNA。结论成功地建立了人uMtCk基因表达含量的荧光定量检测方法，检测结果可用绝对拷贝数表示，定量准确可靠。且结直肠腺癌病人肿瘤组织uMtCk mRNA的含量是升高的，提示uMtCk mRNA含量的检测有助于结直肠腺癌病人临床诊断。 展开更多

关键词 广泛型线粒体肌酸激酶 荧光定量反转录 聚合酶链反应 结直肠腺癌

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口服替诺福韦对心型肌酸激酶检测的影响 被引量：2

12

作者 王鹏程 张冉 +3 位作者 陈立华 徐丹 罗向波 黄维亮 《湖南师范大学学报（医学版）》 2020年第6期4-6,共3页

目的:探讨口服替诺福韦治疗艾滋病后对患者外周血心型肌酸激酶(CK-MB)活性检测的影响。方法:采用回顾性研究方法,选取2019年9月~2019年12月期间长沙市第一医院HIV门诊经治患者170例,根据治疗药物中是否含富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)分... 目的:探讨口服替诺福韦治疗艾滋病后对患者外周血心型肌酸激酶(CK-MB)活性检测的影响。方法:采用回顾性研究方法,选取2019年9月~2019年12月期间长沙市第一医院HIV门诊经治患者170例,根据治疗药物中是否含富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)分为TDF组和非TDF组,比较两组之间的CK-MB活性和CK-MB质量浓度,并分别对两组的CK-MB活性和CK-MB质量浓度进行相关性分析。结果:TDF组CK-MB活性明显高于非TDF组,两组间CK-MB质量浓度差异无显著性;非TDF组CK-MB活性与CK-MB质量浓度相关系数为0.963,TDF组CK-MB活性与CK-MB质量浓度相关系数为0.094。结论:替诺福韦治疗艾滋病导致患者免疫抑制法检测的CK-MB活性假性升高。 展开更多

关键词 富马酸替诺福韦二吡呋酯 HIV感染 心型肌酸激酶 广泛型线粒体肌酸激酶

原文传递

血清uMtCK、AHSG及NGAL与胃癌患者病理参数及临床预后的关系 被引量：2

13

作者 陈瑶 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第5期720-723,727,共5页

目的探究血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)、胎球蛋白A(AHSG)及中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)水平与胃癌患者临床病理参数及临床预后的关系。方法选取本院消化内科2017年1月至2019年1月收治的85例胃癌患者作为研究组,另选择同期于本院... 目的探究血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)、胎球蛋白A(AHSG)及中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)水平与胃癌患者临床病理参数及临床预后的关系。方法选取本院消化内科2017年1月至2019年1月收治的85例胃癌患者作为研究组,另选择同期于本院门诊健康体检的志愿者85例作为对照组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清uMtCK、AHSG及NGAL水平,分析uMtCK、AHSG及NGAL与胃癌患者临床病理参数的关系;患者随访2~3年,统计研究期间胃癌患者死亡情况,并分为生存组(n=62)和死亡组(n=23);Cox多因素分析uMtCK、AHSG及NGAL水平异常是否为影响胃癌患者预后的危险因素。结果研究组血清u MtCK、AHSG及NGAL水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、性别、组织类型、Lauren.s分型胃癌患者血清uMtCK、AHSG及NGAL水平比较均差异无统计学意义(P>0.05);不同肿瘤分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、血管侵犯胃癌患者血清uMtCK、AHSG及NGAL水平比较均差异有统计学意义(P<0.05)。存活组胃癌患者血清uMtCK、AHSG及NGAL水平均低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素回归分析结果显示,uMtCK、AHSG及NGAL升高为影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论胃癌患者血清uMtCK、AHSG及NGAL存在异常升高的情况,且与胃癌进展、转移及不良预后存在密切相关性,检测相关指标水平有助于胃癌患者的诊断和预后评估。 展开更多

关键词 广泛型线粒体肌酸激酶 胎球蛋白A 中性粒细胞相关载脂蛋白

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线粒体肌酸激酶1对人鼻咽癌细胞株CNE－1顺铂敏感性的作用研究 被引量：2

14

作者 蓝瑞隆 黄菲 +4 位作者 陈瑞庆 王锃 陈俊英 林经安 傅冷西 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期524-529,共6页

目的探讨线粒体肌酸激酶1（ubiquitous mitochondrial creatine kinase，CKMT1）在人鼻咽癌细胞株CNE－1对顺铂（cisplatin，DDP）敏感性中的影响。 方法瞬转CNE－1得CKMT1过表达细胞或空载体细胞（EV），MTT法绘制生长曲线、计算DDP I... 目的探讨线粒体肌酸激酶1（ubiquitous mitochondrial creatine kinase，CKMT1）在人鼻咽癌细胞株CNE－1对顺铂（cisplatin，DDP）敏感性中的影响。 方法瞬转CNE－1得CKMT1过表达细胞或空载体细胞（EV），MTT法绘制生长曲线、计算DDP IC50，不同浓度DDP处理下平板克隆形成实验，流式细胞术检测细胞周期与凋亡，Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl－2/C－PARP及转录因子p－STAT3－Tyr705水平。采用GraphpadPad Prism5软件进行统计学处理。 结果CKMT1和空载体细胞的转染效率均达90%以上；前者的增殖速度高于后者；但前者DDP IC50为2.76 μmol/L，显著低于后者的4.60 μmol/L（t＝6.91，P〈0.01），且在一定浓度DDP作用下前者的克隆形成率较低；细胞周期在G2/M期阻滞更明显。DDP浓度为2 μmol/L时，CKMT1凋亡率（18.33±0.67）%显著高于EV（11.80±0.70）%（t＝6.75，P〈0.01）；CKMT1的促凋亡蛋白C－PARP和Bax显著高于EV（t＝72.63，P〈0.01；t＝4.22，P〈0.05），而凋亡抑制蛋白Bcl－2在CKMT1中的表达显著低于EV（t＝49.08，P〈0.01）；且p－STAT3－Tyr705水平也更低（t＝221.60，P〈0.01）。结论DDP作用下，CKMT1可能通过一定的机制抑制STAT3的活化，进而提高CNE－1对DDP的敏感性。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 线粒体肌酸激酶 顺铂

原文传递

实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶基因的表达 被引量：2

15

作者 罗喜俊 何嘉琳 +3 位作者 梁俊杰 朱显军 梁伟雄 唐兴奎 《广州医科大学学报》 2019年第3期10-12,共3页

目的:分析实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)基因的表达。方法:选取2016年1月至2017年12月在广州市番禺中心医院治疗的98例结直肠腺癌患者作为研究对象,另选取同期100例健康体检者作为对照组,采用实... 目的:分析实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)基因的表达。方法:选取2016年1月至2017年12月在广州市番禺中心医院治疗的98例结直肠腺癌患者作为研究对象,另选取同期100例健康体检者作为对照组,采用实时荧光定量PCR检测患者肿瘤组织及癌旁组织的uMtCK mRNA的表达。结果:结直肠腺癌患者肿瘤组织中均存在uMtCK mRNA表达,其范围为7.5×10~5~5.3×10~8拷贝μg RNA,平均(9.2±5.8)×10~6拷贝μgRNA;结直肠腺癌患者癌旁组织中的uMtCK基因表达为4.4×10~3~6.8×10~5拷贝μgRNA,平均(8.5±3.2)×10~4拷贝μgRNA。与对照组比较,差异均有统计学差异(P<0.05)。结论:结直肠腺癌患者组织中uMtCK mRNA含量升高,实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中uMtCK基因的表达,其最终结果可采用绝对拷贝数表示,定量结果准确可靠。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR检测 结直肠腺癌 广泛型线粒体肌酸激酶基因 癌旁组织

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人心肌线粒体肌酸激酶的提纯及抗体制备 被引量：1

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作者 王爱华 张建 +2 位作者 于嘉屏 顾鹏飞 竺蓓 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第3期235-238,共4页

目的　从人心肌中分离纯化肌小节型线粒体肌酸激酶 (sMtCK) ,制备抗血清 ,从抗血清中制备对sMtCK有特异免疫反应的抗体 ,建立酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,测定血清sMtCK。方法　采用超低温高速离心、硫酸铵分级提取、SepharoseCL6B层析... 目的　从人心肌中分离纯化肌小节型线粒体肌酸激酶 (sMtCK) ,制备抗血清 ,从抗血清中制备对sMtCK有特异免疫反应的抗体 ,建立酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,测定血清sMtCK。方法　采用超低温高速离心、硫酸铵分级提取、SepharoseCL6B层析等技术分离纯化sMtCK ,免疫新西兰大白兔。应用自制抗sMtCK建立ELISA检测健康体检者、心肌炎及急性心肌梗死 (AMI)患者血清sMtCK。结果　经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)和Westernblot鉴定 ,纯化的sMtCK为单一蛋白质条带。制备的抗sMtCK多克隆抗体在琼脂糖免疫扩散实验和ELISA中的抗体效价分别为 1∶32和 1∶80 0。自制抗体建立的ELISA检测心肌炎和AMI患者的血清sMtCK阳性率分别为 5 1.6 % (16 / 31)和 5 4 .1% (2 0 / 37) ,与健康对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　经离心、提取、纯化所得的sMtCK是免疫纯。建立的ELISA检测血清sMtCK有助于心肌炎和AMI的诊断。 展开更多

关键词 心肌线粒体肌酸激酶 抗体 sMtCK 酶联免疫吸附试验

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人线粒体肌酸激酶广泛型亚型在大肠埃希菌中的表达及抗体制备 被引量：1

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作者 张建 王爱华 +1 位作者 顾鹏飞 于嘉屏(指导) 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期360-363,共4页

目的　获得人线粒体肌酸激酶广泛型亚型 (uMtCK)的全长基因 ,在大肠埃希菌中表达 ,研制抗uMtCK多克隆抗体。方法　采用逆转录PCR从培养的肿瘤细胞 (Hela细胞 )中成功扩增出 10 6 2bp的uMtCK的基因片段 ,插入到质粒pMD18 T中 ,经酶切和... 目的　获得人线粒体肌酸激酶广泛型亚型 (uMtCK)的全长基因 ,在大肠埃希菌中表达 ,研制抗uMtCK多克隆抗体。方法　采用逆转录PCR从培养的肿瘤细胞 (Hela细胞 )中成功扩增出 10 6 2bp的uMtCK的基因片段 ,插入到质粒pMD18 T中 ,经酶切和测序证实为uMtCK的基因编码序列 ,再插入到质粒pQE30 ,转化大肠埃希菌 ,诱导重组质粒pQE30 uMtCK表达酶融合蛋白。经亲和层析纯化 ,并进行SDS PAGE、westernblot鉴定及酶活性测定。纯化的uMtCK蛋白免疫家兔制备抗uMtCK多抗。结果　RT PCR扩增出的片段经酶切鉴定和测序证实为uMtCK的基因 ;在大肠埃希菌M15中实现了高效、可溶性的融合表达 ,表达量约 17%。重组uMtCK具有CK样催化活性 ,表明原核表达的uMtCK具有类似于天然蛋白质的生物学活性。经免疫印迹分析 ,制备的抗uMtCK多抗适合作uMtCK的进一步分析之用。结论　人uMtCK在大肠埃希菌中实现了高效表达 ,制备了针对uMtCK的抗体。 展开更多

关键词 CK 大肠埃希菌 亚型 高效表达 肌酸激酶 线粒体 抗体制备 酶切 测序 纯化

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线粒体肌酸激酶同工酶的免疫印迹检测及在肺癌诊断中的应用 被引量：1

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作者 陈兴 杨国明 +3 位作者 郑锡铭 张立 郭桐生 张乃哲 《解放军医药杂志》 CAS 1998年第3期165-167,共3页

应用自制抗线粒体肌酸激酶同工酶(CK-mit)抗血清,建立了以琼脂糖电泳和免疫印迹分析来定性检测血清中CK-mit的方法。并检测了33例肺癌患者、31例其它肺部疾病患者(对照组)血清标本.结果显示肺癌组CK-mit阳性率明显高于对照组(57.6％比6.... 应用自制抗线粒体肌酸激酶同工酶(CK-mit)抗血清,建立了以琼脂糖电泳和免疫印迹分析来定性检测血清中CK-mit的方法。并检测了33例肺癌患者、31例其它肺部疾病患者(对照组)血清标本.结果显示肺癌组CK-mit阳性率明显高于对照组(57.6％比6.5％,P<0.001),同时检测了血清CK及CK-MB活力,两组间无显著差异(P>0.05),CK-mit阳性率在不同类型肺癌分别是鳞癌71.4％(10/14),小细胞癌66.7％(6/9)和腺癌30％(3/10)。CK-mit检测的灵敏度和特异度分别是57.6％和93.5％。提示CK-mit检测有助于肺癌的临床诊断。 展开更多

关键词 线粒体肌酸激酶 免疫印迹 肺癌

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线粒体肌酸激酶同工酶在肺癌和食管癌组织中的表达 被引量：1

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作者 张乃哲 王晓玲 +2 位作者 张敬一 苏平 陈兴 《实用癌症杂志》 1997年第3期172-174,共3页

应用自制的兔抗人心肌线粒体肌酸激酶同工酶（ＣＫ－ｍｉｍｉ）抗血清，采用ＡＢＣ法对１０６例肺癌、５２例食管癌存档蜡块进行了免疫组化定位检测。结果显示：肺癌ＣＫ－ｍｉｍｉ的检出率为１００．０％，阳性染色的肺癌细胞浆内可见... 应用自制的兔抗人心肌线粒体肌酸激酶同工酶（ＣＫ－ｍｉｍｉ）抗血清，采用ＡＢＣ法对１０６例肺癌、５２例食管癌存档蜡块进行了免疫组化定位检测。结果显示：肺癌ＣＫ－ｍｉｍｉ的检出率为１００．０％，阳性染色的肺癌细胞浆内可见清晰的棕色颗粒，以鳞癌细胞最明显，５２例食管癌也全部为阳性表达。ＣＫ－ｍｉｍｉ的染色强度随着肿瘤细胞分化程度的升高而减低，鳞癌的阳性染色最明显，腺癌中阳性颗粒细小，分布均匀。Ⅲ级食管鳞癌中ＣＫ－ｍｉｍｉ的表达低于Ⅰ级和Ⅱ级食管鳞癌，有显著性差异（χ２＝５．１０，Ｐ＜０．０５和χ２＝７．１９，Ｐ＜０．０１）。表明细胞内ＣＫ－ｍｉｍｉ的阳性表达强度和阳性颗粒分布与细胞的分化程度和病理分型有关，它可作为一项肿瘤标志物用于诊断恶性肿瘤，对肺癌、食管癌的防治研究具有一定的临床意义。 展开更多

关键词 肺肿瘤 食管肿瘤 CK-mimi 免疫组织化学

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线粒体肌酸激酶在食管癌组织中的表达

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作者 张哲 王晓玲 +3 位作者 苏平 张敬一 吴国祥 陈兴 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第7期525-525,共1页

应用免疫组化ABC法，采用自制的兔抗人心肌线粒体肌酸激酶（CK－mimi）抗血清，对52例食管癌组织切片进行了检测。探讨食管癌组织中CK－mimi分布与临床病理分型的关系，旨在协助临床寻找食管癌新的诊断标志。结果显示：正常食管组织CK－... 应用免疫组化ABC法，采用自制的兔抗人心肌线粒体肌酸激酶（CK－mimi）抗血清，对52例食管癌组织切片进行了检测。探讨食管癌组织中CK－mimi分布与临床病理分型的关系，旨在协助临床寻找食管癌新的诊断标志。结果显示：正常食管组织CK－mimi为阴性，52例食管癌全部为阳性，鳞癌随组织病理分级的增加而染色强度减弱。Ⅲ级鳞癌与Ⅰ级或Ⅱ级鳞癌相比，其减弱的程度均有统计学意义（P＜0．01）。提示CK－mimi可作为食管疾诊断、分级的免疫组化标志。对其防治研究具有一定的临床意义。 展开更多

关键词 食管肿瘤 线粒体 肌酸激酶 免疫组织化学

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