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MCU通过LETM1维持线粒体钙稳态调节口腔鳞状细胞癌细胞转移
1
作者 武燃 刘辉 +5 位作者 郑深 左伟文 毕磊 陈晖 张春光 许晓亮 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期411-416,共6页
目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter,MCU)与亮氨酸拉链/EF跨膜蛋白-1(leucine zipper/EF hand-containing transmembrane-1,LETM1)在调控线粒体钙稳态机制中的作用以及对口腔鳞状细胞癌细胞转移的影响... 目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter,MCU)与亮氨酸拉链/EF跨膜蛋白-1(leucine zipper/EF hand-containing transmembrane-1,LETM1)在调控线粒体钙稳态机制中的作用以及对口腔鳞状细胞癌细胞转移的影响。方法:选用口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞株作为研究对象,构建MCU慢病毒干扰载体和过表达质粒,合成LETM1 siRNA干扰序列。采用细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞侵袭、迁移的影响;细胞内钙离子荧光探针(Fluo-4 AM)以及JC-1线粒体膜电位测定实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位的影响;免疫荧光和Western blot检测CAL-27细胞内MCU、LETM1以及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达水平。结果:MCU过表达促进CAL-27细胞迁移和侵袭,MCU沉默组及MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞迁移和侵袭能力均明显受到抑制(F=45.302、1300.246;均P>0.05);MCU过表达组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位明显上调,MCU沉默组和MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位水平均明显降低(F=75.585、141.767;均P<0.01);MCU过表达组MCU、LETM1、N-cadherin以及Vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低;MCU沉默组MCU、LETM1、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平较其他处理组明显降低,而E-cadherin蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。结论:MCU可调控LETM1及EMT标志物的表达,干扰LETM1可阻断MCU上调线粒体钙离子浓度和线粒体膜电位水平,降低口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 线粒体钙单向传递体 侵袭 迁移 上皮-间充质转化
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MCU介导的线粒体Ca2+稳态失调参与模拟失重引起的大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡 被引量：1
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作者 杨璐 贾敏 +2 位作者 葛逸玲 谢满江 陈励 《心脏杂志》 CAS 2019年第4期456-461,共6页
目的观察线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca2+ uniporter, MCU)在模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模拟失重模型,实验大鼠分为对照(Control, CON)组和尾吊(tail suspension, SUS)组。造模成... 目的观察线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca2+ uniporter, MCU)在模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模拟失重模型,实验大鼠分为对照(Control, CON)组和尾吊(tail suspension, SUS)组。造模成功后,分离脑动脉血管,取病理切片行TUNEL染色及细胞色素C免疫荧光染色检测平滑肌细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白及MCU蛋白表达水平,最后急性分离脑动脉平滑肌细胞,分别采用Rhod-2 AM、mitoSOX染色检测细胞线粒体内Ca2+水平和活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,尾吊组模拟失重大鼠基底动脉平滑肌细胞TUNEL阳性率显著增加(P < 0.05),细胞色素C入核率显著增加(P < 0.05),促凋亡蛋白cleaved caspas-9、cleaved caspas-3、Bax表达显著增加(P < 0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2显著降低(P < 0.05);同时,MCU蛋白表达水平下调(P < 0.05);此外,尾吊组大鼠脑动脉平滑肌细胞线粒体内Ca2+浓度下降(P < 0.05)及ROS水平增加(P < 0.05)。结论模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡,同时MCU表达降低,提示MCU可能参与了模拟失重引起的脑动脉平滑肌细胞凋亡这一病理过程。 展开更多
关键词 模拟失重 脑动脉平滑肌 线粒体钙单向转运体 凋亡
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沙库巴曲缬沙坦对心肌梗死后心力衰竭大鼠室性心律失常的影响及其机制 被引量：4
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作者 叶强 查克岚 +3 位作者 杨锐雪 敬玉玲 李涛 陈稳 《西南医科大学学报》 2023年第2期135-140,共6页
目的探究血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂(angiotensin receptor neprilysin inhibitors,ARNI)沙库巴曲缬沙坦(sacubitril)对心肌梗死后心力衰竭(heart failure,HF)大鼠室性心律失常的影响及其可能机制。方法采用左冠状动脉前降支结扎法... 目的探究血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂(angiotensin receptor neprilysin inhibitors,ARNI)沙库巴曲缬沙坦(sacubitril)对心肌梗死后心力衰竭(heart failure,HF)大鼠室性心律失常的影响及其可能机制。方法采用左冠状动脉前降支结扎法制作SD大鼠心肌梗死后心力衰竭模型,随机分成心衰组(HF组)、沙库巴曲缬沙坦组(HF+ARNI组)(68 mg/kg·d^(-1),灌胃)、缬沙坦组(HF+ARB组)(30 mg/kg·d^(-1),灌胃)、MCU抑制剂-钌红组(HF+RR组)(2 mg/kg·d^(-1),腹腔注射)。另设假手术组(Sham组)。连续药物干预4周。药物干预前和结束后行超声心动图检查。开胸burst刺激,检测大鼠室性心律失常诱导率。HE染色观察大鼠心脏组织病理形态学的改变。Western blot法检测大鼠心肌线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca^(2+)uniporter protein,MCU)表达。结果与Sham组相比,HF组大鼠发生心脏结构重构,心功能显著降低(P<0.05)。与HF组、HF+RR组相比,HF+ARNI组大鼠心脏结构重构和心功能显著改善(P<0.05)。与HF+ARB组相比,HF+ARNI组大鼠心脏结构重构显著改善(P<0.05),但是大鼠心功能改善不明显(P>0.05)。与HF组、HF+RR组相比,HF+ARNI组大鼠在电压6V及12V Burst刺激时室性心律失常诱导率显著降低(P<0.05);与HF+ARB组相比,HF+ARNI组大鼠在12V Burst刺激时室性心律失常诱导率显著降低(P<0.05)。Western blot结果示:与Sham组大鼠相比,HF组大鼠心肌中MCU蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与HF组相比,HF+ARNI组大鼠、HF+RR组及HF+ARB组均表现出MCU蛋白表达下降(P<0.05)。与HF+ARB组相比较,HF+ARNI组大鼠心肌MCU表达显著下降(P<0.05)。与HF+ARNI组相比较,HF+RR组大鼠心肌MCU表达下降更显著(P<0.05)。结论ARNI可显著降低心肌梗死后心衰大鼠室性心律失常的诱导率,其机制可能是改善心功能和心脏结构重构,并下调MCU的表达。 展开更多
关键词 沙库巴曲缬沙坦 心肌梗死 心力衰竭 室性心律失常 线粒体钙单向转运体
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