胞浆型磷脂酶A_2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡 被引量：2

1

作者 王■ 周新 +3 位作者 汪炳华 陈丽达 张冀 曹金秀 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期350-355,共6页

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测... 探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测定PLA2 活性 ;蛋白质印迹检测cPLA2 磷酸化 ;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化 .结果表明 ,MM LDL (10 0～ 30 0mg/L)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征 ,凋亡率随MM LDL浓度的增加而上升 .MM LDL能引起胞内钙离子浓度增加 ,cPLA2 的活化及磷酸化 .15 μmol/LAACOCF3 和 5mmol/LEGTA在抑制cPLA2 活性的同时 ,部分抑制MM LDL诱导的HUVECs凋亡 .加入外源性AA (5 0 μmol/L)能逆转AACOCF3 引起的凋亡抑制 .结果提示 ,cPLA2 参与了MM LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递 . 展开更多

关键词 弱氧化修饰低密度脂蛋白 钙 花生四烯酸 内皮细胞 细胞凋亡 胞浆型磷脂酶A2

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mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体 被引量：1

2

作者 谢希 陈琛 +3 位作者 林杰 汤宏霞 秦旭平 李洁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期779-787,共9页

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)是否通过激活p38 MAPK炎症通路上调小鼠肠系膜动脉内皮素(ET)A型(ETA)和B型(ETB)受体。方法:将昆明小鼠分为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)、mm LDL组(尾静脉注射mm LDL)、LDL组(尾静脉注射LDL... 目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)是否通过激活p38 MAPK炎症通路上调小鼠肠系膜动脉内皮素(ET)A型(ETA)和B型(ETB)受体。方法:将昆明小鼠分为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)、mm LDL组(尾静脉注射mm LDL)、LDL组(尾静脉注射LDL)、mm LDL+SB 203580组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射p38 MAPK抑制剂SB 203580)和mm LDL+DMSO组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射DMSO)。微血管张力描记仪记录ETB受体激动剂角蝰毒素6c和ET-1引起肠系膜动脉收缩的量效曲线;RT-q PCR检测ETB受体、ETA受体和白细胞介素(IL-6)的m RNA表达;ELISA检测血清IL-6的水平;Western blot检测ETB受体、ETA受体、IL-6、p38 MAPK、p-p38MAPK、NF-κB和p-NF-κB的蛋白水平。结果:mm LDL引起ETB受体和ETA受体介导的血管收缩反应显著增强(P<0.01),ETB受体、ETA受体和IL-6的m RNA和蛋白表达显著增加(P<0.01),p-p38 MAPK和p-NF-κB蛋白水平显著升高(P<0.01),血清中IL-6水平显著升高(P<0.01);腹腔注射SB 203580抑制了mm LDL的作用。mm LDL引起的IL-6血清浓度升高分别与ETB受体和ETA受体介导的最大收缩率呈正相关。结论:mm LDL通过激活p38 MAPK通路及下游NF-κB转录因子,提高炎症因子IL-6血清水平,增加小鼠肠系膜动脉IL-6、ETA受体和ETB受体表达,增强ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能。 展开更多

关键词 弱氧化修饰低密度脂蛋白 p38 MAPK信号通路 内皮素受体 白细胞介素6

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银杏叶提取物抑制轻度修饰低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞与单核细胞粘附的实验研究 被引量：14

3

作者 刘春华 钱冠清 +1 位作者 刘会齐 刘晓辉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期917-919,共3页

目的 :观察银杏叶提取物 (EGb)对轻度修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)与人类单核细胞系U937粘附功能的影响。方法 :利用计数法观察HUVEC与U937细胞的粘附率 ;用ELISA方法检测MM LDL作用后HUVEC膜表面粘附分子... 目的 :观察银杏叶提取物 (EGb)对轻度修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)与人类单核细胞系U937粘附功能的影响。方法 :利用计数法观察HUVEC与U937细胞的粘附率 ;用ELISA方法检测MM LDL作用后HUVEC膜表面粘附分子血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)、细胞间粘附分子 1(ICAM 1)及P选择素 (P selectin)的表达。结果 :MM LDL( 75μg/ml)作用HUVEC 4h后 ,其对U937细胞粘附明显增加 (P <0 0 1) ,HUVEC膜表面未见VCAM 1、ICAM 1及P selectin表达上调 ,作为阳性对照重组肿瘤坏死因子α(rTNFα) 5 0ng/ml可显著诱导以上 3种粘附分子表达。中药EGb剂量依赖性地抑制MM LDL诱导HUVEC与U937细胞粘附。结论 :EGb能保护HUVEC ,减少MM LDL对其活化 ,可能有利于延缓动脉粥样硬化 (AS)早期进展。MM LDL诱导的HUVEC与U937粘附不是通过ICAM 1,VCAM 1及P selectin介导的。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 银杏叶提取物 VCAM-1 MC 实验研究

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弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导ECV304组织因子基因表达及银杏内酯B的抑制作用 被引量：8

4

作者 陆晓茜 李晓冬 +1 位作者 祖淑玉 朱广瑾 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2002年第3期241-244,共4页

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激... 为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激光共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i 的变化。结果显示 ,4 0mg LmmLDL作用ECV30 4 4h ,能使TF蛋白含量及mRNA水平显著增加 ,并迅速升高 [Ca2 + ]i。抗氧化剂银杏内酯B及PKC抑制剂Staurosporine可拮抗mmLDL的上述诱导反应。以上结果提示 ,mmLDL可诱导ECV30 4TF表达 ,Ca2 + 与PKC参与mmLDL诱导ECV30 4TF基因表达过程 。 展开更多

关键词 弱氧化修饰低密度脂蛋白 组织因子 钙 ECV304 银杏内酯B 抑制作用 基因表达

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Class Ⅲ PI3K/Beclin-1自噬通路参与mmLDL上调小鼠肠系膜动脉ETA受体的研究 被引量：4

5

作者 陈琛 曾中三 +2 位作者 谢希 秦旭平 李洁 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期900-907,共8页

目的探讨弱氧化性低密度脂蛋白(minimally modified low density lipoprotein,mmLDL)上调在体小鼠肠系膜动脉ETA受体的作用(endothelin type A receptors,ETA)并考察自噬是否参与这一过程。方法小鼠尾静脉注射mmLDL,腹腔注射ClassⅢPI3... 目的探讨弱氧化性低密度脂蛋白(minimally modified low density lipoprotein,mmLDL)上调在体小鼠肠系膜动脉ETA受体的作用(endothelin type A receptors,ETA)并考察自噬是否参与这一过程。方法小鼠尾静脉注射mmLDL,腹腔注射ClassⅢPI3K自噬通路抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA),探究自噬在mmLDL给药处理小鼠中的作用,微血管张力描记仪观察内皮素-1(endothelin-1,ET-1)引起的小鼠肠系膜动脉收缩量效曲线的变化,RT-PCR定量ETA受体mRNA,Western blot检测ETA受体和ClassⅢPI3K、Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62及p-NF-κB、NF-κB的蛋白水平表达。结果mmLDL引起ET-1收缩量效曲线明显增强,表现为Emax值由生理盐水(NS)组的(184.87±7.46)%上升为(319.91±20.31)%(P<0.001),pEC50值由NS组的(8.05±0.05)上升为(9.11±0.09)(P<0.01)。mmLDL在上调ClassⅢPI3K、beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ和下调p62蛋白水平的同时,也引起ETA受体mRNA水平、蛋白表达明显增加,增加了p-NF-κB的蛋白水平;腹腔注射3-MA抑制了mmLDL的这些作用。结论mmLDL能通过ClassⅢPI3K/Beclin-1通路激活自噬及下游NF-κB通路上调ETA受体。 展开更多

关键词 弱氧化性低密度脂蛋白 自噬 CLASS Ⅲ PI3K/Beclin-1信号通路 ETA受体

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弱氧化低密度脂蛋白对小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能的影响及机制 被引量：4

6

作者 陈根 秦旭平 +3 位作者 林杰 王俊杰 周楠 李洁 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1657-1664,共8页

探讨mmLDL对小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能的影响及机制。采用离体微血管张力描记技术,透射电镜观察血管内皮超微结构。结果显示,mmLDL致小鼠肠系膜动脉内皮细胞明显水肿、内弹力膜断裂;与生理盐水组Rmax(63±5)%和pIC506.42
... 探讨mmLDL对小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能的影响及机制。采用离体微血管张力描记技术,透射电镜观察血管内皮超微结构。结果显示,mmLDL致小鼠肠系膜动脉内皮细胞明显水肿、内弹力膜断裂;与生理盐水组Rmax(63±5)%和pIC506.42±0.09比较,显著抑制EDHF介导的舒张[Rmax(31±3)%和pIC505.67±0.07,P<0.001,P<0.001];与生理盐水组[Rmax(45±4)%和pIC505.93±0.08]比较,显著抑制NO介导的舒张[Rmax(32±4)%和pIC505.43±0.11,P<0.05,P<0.01];对PGI2介导的舒张功能无明显影响。综上所述,mmLDL损伤内皮细胞超微结构;显著降低内皮依赖性舒张功能与NO-和EDHF途径受损有关。 展开更多

关键词 mmLDL 内皮依赖性舒张 一氧化氮 内皮源性超级化因子 肠系膜动脉

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轻度修饰和氧化低密度脂蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子和一氧化氮的影响 被引量：2

7

作者 乐毅 周玫 陈瑗 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 1994年第2期72-76,共5页

肿瘤坏死因子和一氧化氮与动脉粥样硬化的进程有着密切关系．本实验发现与轻度修饰低密度脂蛋白共同培养２４小时的巨噬细胞肿瘤坏死因子的产生量是与未修饰低密度脂蛋白共同培养的２倍，同时一氧化氮的产生量是后者的５倍。而与氧化低... 肿瘤坏死因子和一氧化氮与动脉粥样硬化的进程有着密切关系．本实验发现与轻度修饰低密度脂蛋白共同培养２４小时的巨噬细胞肿瘤坏死因子的产生量是与未修饰低密度脂蛋白共同培养的２倍，同时一氧化氮的产生量是后者的５倍。而与氧化低密度脂蛋白共同培养的巨噬细胞，肿瘤坏死因子产生量逐渐减少，减小量与氧化低密友脂蛋白的浓度和作用时间相关，一氧化氮的产生量则未见增加。这可能是氧化低密度脂蛋白损伤了细胞免疫反应能力，从而加速了巨噬细胞泡沫样变性。 展开更多

关键词 低密度脂蛋白 肿瘤坏死因子 一氧化氮 免疫反应

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ERK1/2通路参与弱氧化型低密度脂蛋白上调小鼠肠系膜动脉α1受体的研究 被引量：2

8

作者 江高峰 郭立军 +5 位作者 秦旭平 林杰 陈根 曾中三 陈琛 李洁 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2018年第1期1-6,共6页

目的 探讨ERK1/2通路在弱氧化型低密度脂蛋白(mmLDL)上调小鼠肠系膜动脉α1受体中的作用.方法 72只小鼠随机分成3组,正常对照组(小鼠尾静脉注射生理盐水),mmLDL组(小鼠尾静脉注射mmLDL),U0126干预组(小鼠尾静脉注射mmLDL及腹腔注射ERK1/... 目的 探讨ERK1/2通路在弱氧化型低密度脂蛋白(mmLDL)上调小鼠肠系膜动脉α1受体中的作用.方法 72只小鼠随机分成3组,正常对照组(小鼠尾静脉注射生理盐水),mmLDL组(小鼠尾静脉注射mmLDL),U0126干预组(小鼠尾静脉注射mmLDL及腹腔注射ERK1/2通路特异性抑制剂U0126),各24只.微血管肌张力描记仪观察去甲肾上腺素(NA)引起的小鼠肠系膜动脉收缩量效曲线变化,RT-PCR、Western Blotting分别检测α1受体、TNF-α、IL-1β和p ERK1/2的表达,Elisa试剂盒检测血清中TNF-α和IL-1β浓度水平.结果 与正常对照组比较,mmLDL组Emax、pEC50值显著升高,α1受体介导血管收缩增强,α1受体mRNA和蛋白表达、pERK1/2蛋白磷酸化水平、TNF-α、IL-1βmRNA和血清浓度显著升高(均P<0.05).U0126能剂量依赖性抑制mmLDL引起α1受体介导收缩功能增强作用.上述指标U0126干预组均低于mmLDL组,差异有统计学意义(均P<0.05).血清TNF-α、IL-1β浓度与α1受体介导最大收缩百分率Emax正相关性(r=0.94,r=0.96,P<0.05).结论 mmLDL激活ERK1/2信号转导通路引起TNF-α和IL-1β水平增高,上调小鼠肠系膜动脉α1受体,并且引起α1受体介导血管收缩增强. 展开更多

关键词 弱氧化型低密度脂蛋白 ERK1/2 肠系膜动脉 Α1受体 TNF-α IL-1Β

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TLR4mAb抑制mmLDL损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能

9

作者 陈根 林杰 +2 位作者 秦旭平 周楠 李洁 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期274-283,共10页

目的探讨预先使用TLR4单克隆抗体(TLR4mAb)对轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)诱发小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能损伤的影响及作用机制。方法实验分为:空白对照组、mmLDL处理组、TLR4mAb干预组。采用ELISA方法测定血浆中白细胞介素(... 目的探讨预先使用TLR4单克隆抗体(TLR4mAb)对轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)诱发小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能损伤的影响及作用机制。方法实验分为:空白对照组、mmLDL处理组、TLR4mAb干预组。采用ELISA方法测定血浆中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度水平,微血管张力描记技术测定血管内皮依赖性舒张功能,Western blot技术和RT-PCR技术分别考察血管组织蛋白表达量和mRNA表达水平,透射电镜观察肠系膜动脉内皮细胞超显微结构。结果 TLR4mAb剂量依赖性改善mmLDL损伤血管内皮依赖性舒张功能的损伤作用,显著上调K_(Ca)3. 1-通道、K_(Ca)2. 3-通道蛋白表达和下调炎症因子TNF-α和IL-1β表达。TLR4mAb改善mmLDL损伤血管内皮细胞及内皮依赖性舒张功能,可能与其竞争性拮抗mmLDL激活TLR4信号转导通路及其下游的NF-κBp65和p-38MAPK通路有关。结论预先使用TLR4mAb可以减轻mmLDL所诱发的内皮细胞损伤和内皮依赖性舒张功能降低,以及抑制炎症因子的过度表达,调控TLR4通路及其下游的NF-κBp65和p-38MAPK通路可能是预防治疗心血管疾病的有效靶点。 展开更多

关键词 TLR4单克隆抗体 轻度氧化修饰低密度脂蛋白 炎症 肠系膜动脉 内皮依赖性舒张

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mm-LDL激活ECV304 BK_(Ca)及丹参与川芎嗪的干预作用 被引量：3

10

作者 林琳 郑永芳 +1 位作者 屈金河 鲍光宏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期386-389,共4页

目的 观察轻度氧化低密度脂蛋白（mm-LDL）对人脐静脉内皮细胞株ECV304的大电导钙激活钾通道（BK_(Ca)）活动的影响，以及丹参(radix salviae miltiorrhizae)水溶提取物764-3和川芎嗪对其效应的干预。方法 细胞贴附式膜片箝技术。结果 m... 目的 观察轻度氧化低密度脂蛋白（mm-LDL）对人脐静脉内皮细胞株ECV304的大电导钙激活钾通道（BK_(Ca)）活动的影响，以及丹参(radix salviae miltiorrhizae)水溶提取物764-3和川芎嗪对其效应的干预。方法 细胞贴附式膜片箝技术。结果 mm-LDL(100μg/ml) 可增强ECV304 BK_(Ca)的活动；764-3(30μg/ml)和川芎嗪(200μg/ml)可削弱mm-LDL的激活效应。结论 mm-LDL激活BK_(Ca)的活动，从而增大静息钙内流的电化学驱动力，升高胞内钙浓度，致内皮细胞功能障碍。764-3和川芎嗪通过削弱这一作用而对内皮细胞起到保护作用。 展开更多

关键词 钙激活钾通道 轻度氧化低密度脂蛋白 血管内皮细胞 丹参 川芎嗪

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mm-LDL对內皮细胞转录因子NF-kB活性的影响 被引量：4

11

作者 尹鸿操 刘欣岩 +4 位作者 刘佩毛 张华 梁平 王宗立 佘铭鹏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期312-316,共5页

目的 研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法 以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白... 目的 研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法 以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白，用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子-kB抑制亚基激酶(IKK)在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB, 自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用。变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性，mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（-189/＋43）的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞 PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达。 展开更多

关键词 轻微修饰低密度脂蛋白 动脉粥样硬化 内皮细胞 NF-KB 核因子诱导激酶

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Minimally modified low-density lipoprotein induces monocyte chemotactic protein-1 expression in vivo and a novel model for monocyte adhesion to arterial intima

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作者 肖丹华 王宗立 佘铭鹏 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期54-58,共5页

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｔｅｓｔｗｈｅｔｈｅｒｍｉｎｉｍａｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＭＭＬＤＬ）ｃａｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｔｈｅａｒｔｅｒｉａｌｃｅｌｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭＣＰ... ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｔｅｓｔｗｈｅｔｈｅｒｍｉｎｉｍａｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＭＭＬＤＬ）ｃａｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｔｈｅａｒｔｅｒｉａｌｃｅｌｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭＣＰ１ｉｎｖｉｖｏａｎｄｔｈｕｓｉｎ... 展开更多

关键词 minimally modified low density lipoprotein · MONOCYTE chemotactic protein 1 · MONOCYTE · atherosclerosis

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