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江米酒凝乳机理的初步研究 被引量:12
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作者 薛璐 姜铁民 +1 位作者 任发政 陈历俊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期37-38,共2页
研究了江米酒制作米酒奶的凝乳机理。试验结果证实,江米酒中的凝乳活性因子,即江米酒发酵过程中微生物产生的蛋白酶是米酒奶凝乳的主要原因。
关键词 江米酒 凝乳机理 蛋白酶
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辣木籽凝乳酶的提取分离条件优化
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作者 吴改转 庄玺 +1 位作者 王雪峰 黄艾祥 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期137-142,152,共7页
为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法... 为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法分离纯化条件进行优化,并采用SDS-PAGE和RP-HPLC对分离得到的辣木籽凝乳酶的分子质量和纯度进行分析。结果表明:盐法提取的最佳条件为料液比1∶10、提取温度30℃、pH 7.15、NaCl浓度0.3 mol/L、提取时间0.5 h;在20%~40%AS饱和度下的沉淀蛋白凝乳活性最好且蛋白质总占有率达61.71%;离子交换色谱法的最佳分离条件为进样质量浓度30 mg/mL、流动相pH 5.15、流速1.68 mL/min、流动相组成为0.05 mol/L醋酸钠+0.05 mol/L氯化钠,在此条件下辣木籽凝乳酶的凝乳比活力值达到24 SU/mg;该凝乳酶的分子质量主要分布在35~45 kDa,纯度达到90%以上。采用该方法能有效提取分离辣木籽凝乳酶,且能很好地保持其凝乳活性。 展开更多
关键词 辣木籽 凝乳酶 硫酸铵分级沉淀 离子交换色谱法 凝乳活性 SDS-PAGE
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黄粉虫凝乳蛋白酶的分离纯化及结构预测
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作者 杨祥 乔海军 +4 位作者 杨晓丽 文鹏程 汪月 张卫兵 张忠明 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期93-99,共7页
黄粉虫资源丰富、蛋白含量高,具有很高的开发价值,然而关于黄粉虫凝乳蛋白酶鲜有报道。该研究采用连续柱层析的方法从黄粉虫肠道中分离纯化出了一种凝乳蛋白酶。利用液相色谱串联质谱和Edman降解等方法比对得到该酶的氨基酸序列。使用... 黄粉虫资源丰富、蛋白含量高,具有很高的开发价值,然而关于黄粉虫凝乳蛋白酶鲜有报道。该研究采用连续柱层析的方法从黄粉虫肠道中分离纯化出了一种凝乳蛋白酶。利用液相色谱串联质谱和Edman降解等方法比对得到该酶的氨基酸序列。使用生物信息学方法预测和分析了其理化性质和结构。结果表明,黄粉虫凝乳蛋白酶的分子质量约为29.68 kDa,凝乳活力为173.8 SU/mg,C/P(clotting activity/proteolytic activity)值为104.7。该酶的等电点为4.22;疏水性氨基酸比例为43.37%,不稳定性指数31.49,理化性质稳定。与小牛皱胃酶和骆驼凝乳酶比对发现,三者在N端序列和二级结构等方面具有较大差异;该酶64.8%的氨基酸残基的归一化B因子(normalized B-factor,BFP)值<0,说明其三级结构具有良好的稳定性。该研究可为昆虫凝乳蛋白酶的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 黄粉虫 凝乳蛋白酶 分离纯化 理化性质 结构
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辣木凝乳酶水解酪蛋白位点及其酪蛋白磷酸肽、酪蛋白糖巨肽 被引量:3
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作者 施娅楠 张家艳 黄艾祥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第10期104-110,共7页
基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,液相色谱-串联质谱法研究辣木凝乳酶对酪蛋白的酶切位点和水解特性,并分析该凝乳酶水解产生的酪蛋白糖巨肽和酪蛋白磷酸肽。结果表明,辣木凝乳酶酶切κ-酪蛋白的Arg 93-His 94位点导致凝乳,区别... 基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,液相色谱-串联质谱法研究辣木凝乳酶对酪蛋白的酶切位点和水解特性,并分析该凝乳酶水解产生的酪蛋白糖巨肽和酪蛋白磷酸肽。结果表明,辣木凝乳酶酶切κ-酪蛋白的Arg 93-His 94位点导致凝乳,区别于其他已报道的凝乳酶,具有明显特异性。酶作用下κ-酪蛋白的米氏常数K_(m)=0.49 mg/mL,最大反应速率V_(m)=45.2 U/min,有效促进酪蛋白胶束的聚集和凝乳。该酶对α-、β-、κ-酪蛋白产生不同程度的水解,对α-酪蛋白的水解速度最快,说明其适用于软质奶酪的加工。以酪蛋白为底物,通过钡-乙醇沉淀法得到酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPPs),产率为15.87%,得到的CPPs可以使钙沉淀推迟23 min,有利于钙离子被肠道有效吸收。以水牛乳为底物时,乳凝固后析出的乳清中含酪蛋白糖巨肽6.61 mg/mL,糖基化程度477.527μg/mg。研究为新型植物凝乳酶的研发,及其在奶酪、酪蛋白活性肽等产品的应用提供科学依据。 展开更多
关键词 辣木凝乳酶 酶切位点 κ-酪蛋白 酪蛋白磷酸肽 酪蛋白糖巨肽
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