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反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架的影响 被引量:9
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作者 林珏龙 许丽艳 +6 位作者 李恩民 蔡唯佳 牛永东 方昆阳 熊华淇 沈忠英 曾毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期409-415,共7页
为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞N... 为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞NGAL基因表达的亚细胞克隆 .在细胞内F 肌动蛋白 (F actin)及DNA荧光双标记基础上 ,通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜扫描术等技术手段检测封闭反义NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞中F actin和DNA含量、F actin形态结构以及肿瘤细胞生物学行为的变化特征 .结果显示 ,反义封闭NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞F actin的含量明显降低 ,与永生化食管上皮细胞SHEE相近 ,但细胞分裂增殖指数未见明显变化 .表明反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架有明显影响 ,而对SHEEC食管癌细胞的分裂增殖影响不明显 .激光共聚焦显微镜扫描观测显示 ,反义封闭NGAL基因表达可使SHEEC食管癌细胞F actin分布均匀 ,F actin小体减少 ,细胞间连接重新建立 ,结构较紧密 ,主要形态结构特征与SHEE细胞趋于一致 .提示反义封闭NGAL基因表达可对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架F actin产生明显影响 ,推测癌细胞的微丝骨架F 展开更多
关键词 微丝骨架 F-肌动蛋白 NGAL基因 SHEEC细胞 细胞周期
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微丝骨架与信号转导研究进展 被引量:11
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作者 雷宇华 闫芝芬 +1 位作者 严玉平 魏建昆 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期37-41,共5页
微丝骨架作为细胞骨架的一种 ,它在细胞的许多功能活动中起重要作用。近年来 ,研究证明微丝骨架受信号转导的调节。动物细胞中存在着细胞外基质 (ECM ) 质膜 (PM ) 细胞骨架(CTK)连续体 ,胞内、外信号可以通过此连续体进行双向传递。... 微丝骨架作为细胞骨架的一种 ,它在细胞的许多功能活动中起重要作用。近年来 ,研究证明微丝骨架受信号转导的调节。动物细胞中存在着细胞外基质 (ECM ) 质膜 (PM ) 细胞骨架(CTK)连续体 ,胞内、外信号可以通过此连续体进行双向传递。研究还证明 ,植物细胞中存在细胞壁 (CW ) 质膜 (PM ) 细胞骨架 (CTK)连续体 ,并认为它类似于动物细胞中的ECM PM CTK连续体 ,有着相同的功能。 展开更多
关键词 微丝骨架 信号转导 肌动蛋白 连续性 又向传递
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启膈散对食管癌细胞微丝骨架重排的影响 被引量:12
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作者 史会娟 石冬璇 李晶 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1237-1241,共5页
目的研究启膈散对食管癌细胞微丝骨架的影响,并探讨其抑制转移的机制。方法采用高分化人食管癌细胞TE1、Eca109及低分化人食管癌细胞TE13,将细胞分为对照组(未加药)及启膈散(100μg/mL)组。应用免疫荧光法观察各组食管癌细胞形态的变化... 目的研究启膈散对食管癌细胞微丝骨架的影响,并探讨其抑制转移的机制。方法采用高分化人食管癌细胞TE1、Eca109及低分化人食管癌细胞TE13,将细胞分为对照组(未加药)及启膈散(100μg/mL)组。应用免疫荧光法观察各组食管癌细胞形态的变化,激光共聚焦显微镜观察启膈散对食管癌细胞微丝排列的影响。采用细胞阻抗检测技术检测启膈散对食管癌细胞同基质黏附力及细胞迁移能力的影响。结果启膈散组食管癌细胞TE1、TE13及Eca109中微丝排列更规则,伪足消失,对照组细胞中微丝排列混乱,且以细胞膜微丝排列不规则更为明显,在细胞膜上微丝排列缺乏同向性,向外伸出伪足。与对照组比较,启膈散组食管癌细胞TE1和TE13中形态规则的细胞数目明显增多(P<0.05),TE1与TE13细胞经启膈散作用后细胞与基质的黏附力及迁移能力均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论启膈散能够抑制食管癌细胞发生微丝骨架重排,使食管癌细胞同基质之间的黏附力降低,从而抑制细胞的迁移。 展开更多
关键词 启膈散 食管癌 细胞微丝骨架 细胞迁移
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细胞内微丝骨架的变化对人肝癌Bel-7402细胞形态的影响 被引量:7
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作者 林珏龙 陈耀文 +3 位作者 李璟 方昆阳 许险峰 霍霞 《激光生物学报》 CAS CSCD 2004年第3期224-227,共4页
癌细胞的形态及癌细胞的生物学行为(如粘附、迁移和浸润)与细胞内骨架系统密切相关,本研究利用Phalloidin FITC标记人肝癌Bel 7402细胞内F 肌动蛋白(F actin),使用激光扫描共聚焦显微镜观测细胞微丝骨架与癌细胞形态的关系,及Cyt B处理B... 癌细胞的形态及癌细胞的生物学行为(如粘附、迁移和浸润)与细胞内骨架系统密切相关,本研究利用Phalloidin FITC标记人肝癌Bel 7402细胞内F 肌动蛋白(F actin),使用激光扫描共聚焦显微镜观测细胞微丝骨架与癌细胞形态的关系,及Cyt B处理Bel 7402细胞后,癌细胞内微丝骨架的变化。结果显示:癌细胞内F actin解聚,F actin小体的聚集重组是癌细胞的形态变化的主要因素之一。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 人肝癌Bel-742细胞 F-肌动蛋白 微丝骨架 细胞松弛素-B
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益生芽孢杆菌对草鱼肠黏膜结构的保护作用 被引量:7
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作者 黄灿 张忠海 +4 位作者 吴淑勤 张丁 李思思 陈孝煊 吴志新 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期774-780,共7页
为了研究益生菌对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道黏膜结构的保护作用,选取健康草鱼随机分成3组:(1)对照组:口灌无菌PBS 0.2 m L/尾后第2和第4天分别口灌无菌PBS 0.1 m L/尾;(2)嗜水气单胞菌组(Ah组):口灌嗜水气单胞菌(Aeromonas hy... 为了研究益生菌对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道黏膜结构的保护作用,选取健康草鱼随机分成3组:(1)对照组:口灌无菌PBS 0.2 m L/尾后第2和第4天分别口灌无菌PBS 0.1 m L/尾;(2)嗜水气单胞菌组(Ah组):口灌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)菌液0.2 m L/尾(1.0×107 cfu/m L)后第2和第4天分别口灌无菌PBS0.1 m L/尾;(3)枯草芽孢杆菌保护组(Ah+Bs组):口灌嗜水气单胞菌菌液0.2 m L/尾后第2和第4天分别口灌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌液0.1 m L/尾(1.0×107 cfu/m L);连续7d取中肠中部,通过检测草鱼肠黏膜形态及肠上皮细胞微丝骨架的变化,旨在研究益生枯草芽孢杆菌对嗜水气单胞菌造成的肠黏膜结构损伤的保护作用。结果表明:Ah组病变主要表现为肠道黏膜上皮细胞变性,坏死,大量脱落;固有层出血、水肿变粗;大量炎性细胞浸润;超微结构变化表现为紧密连接缝隙明显变宽;微绒毛萎缩变短,稀疏,排列紊乱;线粒体可见明显肿胀、嵴减少,内质网明显扩张;肠上皮细胞中的微丝呈绿色雾状,微丝荧光强度逐渐减弱,明显低于对照组。与Ah组相比,Ah+Bs组上述病变有明显改善,肠道黏膜上皮细胞轻微脱落,炎症和出血等症状明显减轻;紧密连接缝隙明显变窄;微绒毛数量多且排列较整齐;线粒体无明显肿胀;肠上皮细胞中的微丝荧光强度高于Ah组。结果说明益生芽孢杆菌对嗜水气单胞菌造成的肠黏膜结构损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 益生枯草芽孢杆菌 嗜水气单胞菌 草鱼 肠黏膜 微丝骨架
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杜仲花粉离体萌发特征及花粉管微丝骨架分布 被引量:5
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作者 游韩莉 贾婷婷 +2 位作者 田菊 王君 康向阳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期495-501,共7页
以干燥的杜仲成熟花粉为材料,对杜仲花粉离体萌发的适宜液体培养基配方进行了筛选,并对花粉萌发特征及花粉管微丝骨架分布规律进行了研究。结果表明:(1)适宜杜仲花粉离体萌发的液体培养基组成为200g/L蔗糖+30mg/L硼酸+10mg/L Ca(NO3)2,... 以干燥的杜仲成熟花粉为材料,对杜仲花粉离体萌发的适宜液体培养基配方进行了筛选,并对花粉萌发特征及花粉管微丝骨架分布规律进行了研究。结果表明:(1)适宜杜仲花粉离体萌发的液体培养基组成为200g/L蔗糖+30mg/L硼酸+10mg/L Ca(NO3)2,于26℃条件下离体培养18h的花粉萌发率可达46.29%±3.75%。(2)在适宜液体培养条件下,杜仲花粉萌发率在培养6h内急剧增长,随后趋于平稳;而花粉管在培养8h内伸长较快,之后有放缓趋势,至培养48h时,花粉管长度可达363.14±30.51μm。(3)杜仲花粉属于2胞花粉,花粉萌发过程中,营养核和生殖核的移动存在一定的时序性,通常营养核先于生殖核进入到花粉管;杜仲花粉生殖核的有丝分裂发生在花粉管中,离体培养12h可逐渐观察到有丝分裂行为。(4)花粉萌发过程,微丝骨架形成束状,与花粉管伸长方向平行排布,与较为稀疏的网状微丝阵列组成连续系统,引导细胞核的运动。 展开更多
关键词 杜仲 离体 液体培养基 花粉萌发 微丝骨架
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EBP50影响HeLa细胞微丝骨架的分布和定位 被引量:4
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作者 郑君芳 王瑛 +1 位作者 陈鹏 贺俊崎 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期1192-1195,共4页
目的:通过研究与膜-细胞骨架连接蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)家族相结合的磷酸化蛋白50(ERM-binding phospho-protein-50,EBP50)对HeLa细胞微丝骨架含量、分布的影响及受血小板源性生长因子PDGF(platelet-derived growth factor)刺... 目的:通过研究与膜-细胞骨架连接蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)家族相结合的磷酸化蛋白50(ERM-binding phospho-protein-50,EBP50)对HeLa细胞微丝骨架含量、分布的影响及受血小板源性生长因子PDGF(platelet-derived growth factor)刺激后,微丝骨架在细胞中定位的变化及微丝骨架定位变化与EBP50的关系,阐明EBP50蛋白影响肿瘤细胞生长迁移的分子机制。方法:将pBK-CMV-HA空载体和pBK-CMV-HA-EBP50wt重组质粒分别转染HeLa细胞系,G418进行稳定表达细胞系的筛选,并用Western免疫印迹方法进行蛋白表达的鉴定;利用Western免疫印迹、免疫荧光细胞化学染色等方法结合光镜和激光共聚焦扫描显微镜分别观察和分析HA-HeLa与HA-EBP50-HeLa微丝骨架的含量及分布的异同;然后使用10ng/ml和20ng/mlPDGF37℃刺激细胞15min后,分别观察及分析两组细胞微丝骨架的分布情况及EBP50在细胞中定位的变化。结果:Western免疫印迹鉴定证实转染的外源性EBP50cDNA片段可在HeLa细胞系中成功表达EBP50蛋白,证明获得稳定表达EBP50蛋白的HeLa细胞系。Western免疫印迹及免疫荧光结果证实,转染空载pBK-CMV-HA的HeLa细胞微丝骨架粗大疏松,方向不一,交错排列;与其相比,EBP50虽然对HeLa细胞微丝骨架的含量没有明显影响,但能够促使细胞微丝骨架呈致密细丝状,平行规则排列,并沿细胞极性分布;并且在PDGF刺激下,EBP50能够与微丝骨架一起自胞浆迁移至膜上,并共定位。结论:EBP50能改变HeLa细胞微丝骨架的分布。在受到PDGF刺激时,EBP50还能使HeLa细胞系的微丝骨架定位于膜表面。EPB50可能通过影响微丝骨架的分布和定位来发挥其影响肿瘤细胞生长迁移的功能。 展开更多
关键词 微丝骨架 HELA细胞 EBP50
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油松离体花粉管的生长及微丝骨架分布 被引量:2
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作者 尚峰男 宋少宇 +1 位作者 田菊 王君 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期34-38,共5页
采用离体培养结合荧光定位技术对油松花粉管生长特征和微丝骨架分布规律进行研究。结果表明:油松花粉离体萌发过程,除大量呈单一花粉管形态外,还存在异形花粉管,如具2条花粉管及分枝花粉管等;在适宜培养条件下,培养60h后萌发率趋于稳定(... 采用离体培养结合荧光定位技术对油松花粉管生长特征和微丝骨架分布规律进行研究。结果表明:油松花粉离体萌发过程,除大量呈单一花粉管形态外,还存在异形花粉管,如具2条花粉管及分枝花粉管等;在适宜培养条件下,培养60h后萌发率趋于稳定(91%以上),培养96h后花粉管长度逐渐趋于稳定(173μm以上);异形花粉管发生频率与花粉萌发率呈极显著正相关(r=0.7867,P=0.0041),花粉管分枝发生于管伸长至89.73(±3.44)μm处;在不同形态的花粉管中均有微丝骨架正常分布,并且推动花粉管细胞核和造粉体向花粉管顶端移动;在花粉管的透明区,微丝束呈现平行于花粉管的浓密网状结构,当花粉管生长较长时,微丝束有变得稀疏的趋势。 展开更多
关键词 油松 离体 花粉管生长 微丝骨架
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烟草BY-2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculin B处理对其分布的影响 被引量:2
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作者 叶露飞 刘成科 +1 位作者 孟春梅 洪健 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期497-502,共6页
用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后... 用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构;共聚焦显微成像显示了随latrunculin B处理时间的延长微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程.建立原生质体制备、微丝骨架荧光染色、latrunculin B处理及激光共聚焦显微观察的实验体系为进一步研究植物微丝骨架的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 原生质体 微丝骨架 LATRUNCULIN B 激光共聚焦显微镜
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植物微丝骨架研究进展
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作者 杨坤 王琦 李艳红 《首都师范大学学报(自然科学版)》 2004年第S1期96-99,共4页
文章就植物花粉管、保卫细胞中微丝骨架以及微丝骨架与信号转导的一些研究进展作了简要介绍 .
关键词 植物微丝骨架 结构 信号转导
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用免疫荧光细胞化学法观察肿瘤细胞内的微丝分布
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作者 赵雁飞 郭寿延 赵涵芳 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1991年第3期210-214,共5页
文章介绍了从鸡砂囊平滑肌中提取肌动蛋白抗原及抗肌动蛋白血清的制备,并用自制抗血清应用于间接免疫荧光染色技术,观察体外培养的5种正常细胞和3种肿瘤细胞株内的微丝结构。观察结果提示正常细胞中微丝的数量、分布,形态与细胞的不同... 文章介绍了从鸡砂囊平滑肌中提取肌动蛋白抗原及抗肌动蛋白血清的制备,并用自制抗血清应用于间接免疫荧光染色技术,观察体外培养的5种正常细胞和3种肿瘤细胞株内的微丝结构。观察结果提示正常细胞中微丝的数量、分布,形态与细胞的不同时相、运动和形态变化有关。含肌动蛋白的微丝可呈现直纤维状的线型荧光或呈弥散的颗粒状荧光。肿瘤细胞内微丝的数量略有减少,排列稀疏,在细胞浆内分布不均匀。与正常细胞间存在一定差异。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 微丝 免疫荧光 细胞化学
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细胞松弛素B和鬼笔环肽对梨花粉管钙离子浓度和尖端钙离子通道的影响
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作者 刘珠琴 吴巨友 +2 位作者 姜雪婷 徐国华 张绍铃 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1763-1767,共5页
应用激光共聚焦显微镜和全细胞膜片钳技术研究了微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(CB)和稳定剂鬼笔环肽(PD)对梨花粉管细胞内钙离子浓度动态变化和尖端质膜上钙离子通道的影响。结果显示:CB处理能促进花粉管内胞质钙离子[Ca2+]i浓度增加,同时... 应用激光共聚焦显微镜和全细胞膜片钳技术研究了微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(CB)和稳定剂鬼笔环肽(PD)对梨花粉管细胞内钙离子浓度动态变化和尖端质膜上钙离子通道的影响。结果显示:CB处理能促进花粉管内胞质钙离子[Ca2+]i浓度增加,同时还能激活质膜上的钙离子通道;而PD处理对花粉管内[Ca2+]i浓度及钙离子通道几乎没有影响。研究表明,微丝骨架的解聚激活了花粉管质膜上的钙离子通道,使得胞外钙离子大量流入,胞内钙离子浓度升高,从而抑制花粉管生长。 展开更多
关键词 花粉管 微丝骨架 钙离子通道 细胞松弛素B 鬼笔环肽
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洋葱鳞茎薄壁细胞原生质体胞质肌动蛋白质微丝骨架的形态与结构 被引量:3
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作者 王新宇 郭凤劲 +1 位作者 聂秀菀 郑国锠 《实验生物学报》 CSCD 1996年第2期169-177,共9页
使用四甲基罗丹明标记的鬼笔环碱(TRITC-Ph)探针,以新分离的洋葱鳞茎薄壁细胞原生质体为材料,观察了细胞胞质肌动蛋白微丝骨架的结构与形态。研究结果发现洋葱鳞茎内部细胞的细胞质内存在极丰富而精细的肌动蛋白微丝束。这些肌动蛋白微... 使用四甲基罗丹明标记的鬼笔环碱(TRITC-Ph)探针,以新分离的洋葱鳞茎薄壁细胞原生质体为材料,观察了细胞胞质肌动蛋白微丝骨架的结构与形态。研究结果发现洋葱鳞茎内部细胞的细胞质内存在极丰富而精细的肌动蛋白微丝束。这些肌动蛋白微丝束的直径约1.0—4.5μm,有下列四种不同的排列形式:(1)相互平行排列,方向大体与细胞的长轴垂直;(2)从一些结合位点辐射而出,并向四周延伸,然后再相互交织在一起,形成一个非常密集而复杂的网络;(3)细而稀疏,相互交织成网状,两端分别与质膜不同位置上的结合位点相连;(4)粗而稀疏,相互交织成网状,两端都与质膜相连,或一端与质膜相连,另一端与细胞核周围的微丝束网络相连。部分微丝束具有“Y”形分支。 展开更多
关键词 肌动蛋白 微丝 原生质体 洋葱 鳞茎 薄壁细胞
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