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微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响
被引量:
2
1
作者
张沛
岳青芬
+1 位作者
侯青霞
韩听锋
《医学研究杂志》
2019年第5期165-169,共5页
目的观察微小RNA-664a-3p(miR-664a-3p)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法提取16例乳腺癌手术标本及其癌旁组织中总RNA,使用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-664a-3p在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量,...
目的观察微小RNA-664a-3p(miR-664a-3p)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法提取16例乳腺癌手术标本及其癌旁组织中总RNA,使用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-664a-3p在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量,并检测miR-664a-3p在4种乳腺癌细胞株(T47D、MDA-MB-231、BT-549、MCF-7)及正常乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达。选取miR-664a-3p表达水平最低的乳腺癌细胞瞬时转染miR-664a-3p模拟物(实验组)或miR-NC(对照组)。qPCR检测转染后细胞中miR-664a-3p的表达。生物信息学软件预测miR-664a-3p的靶基因。使用荧光素酶报告基因实验检测miR-664a-3p对靶基因肿瘤内皮标志物8(TEM8)的靶向作用。qPCR和Western blot法检测TEM8及下游基因的表达。流式细胞术检测细胞周期,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果乳腺癌组织中miR-664a-3p的表达量显著低于癌旁组织(P<0.01)。乳腺癌细胞株中miR-664a-3p的表达量显著低于正常乳腺上皮细胞(P<0.05),其中T47D细胞的表达量最低(P<0.05)。实验组和对照组T47D细胞中miR-664a-3p的表达量分别为24.87±2.17和1.02±0.10(P<0.01)。miR-664a-3p可与TEM8-3'-非编码区(UTR)特异性结合(P<0.01)。与对照组比较,实验组中TEM8 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。转染miR-664a-3p能够显著抑制T47D细胞周期的进展(P<0.05),降低细胞的增殖能力(P<0.01),抑制细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论miR-664a-3p在乳腺癌组织和细胞株表达下调,过表达miR-664a-3p能够通过靶向抑制TEM8基因的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力。
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关键词
微小RNA-
664
a-
3
p
乳腺癌
肿瘤内皮标志物8
增殖
侵袭
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职称材料
miR-664b-3p调控Caspase-1介导细胞焦亡在深静脉血栓形成中的作用
被引量:
3
2
作者
褚楚
刘文
+7 位作者
郭红
赵霖
魏然
张振
郭强
朱肖肖
王彬
李霞
《山东医药》
CAS
2021年第8期20-23,共4页
目的观察深静脉血栓形成(DVT)患者外周血微小RNA-664b-3p(miR-664b-3p)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平变化,分析二者在细胞焦亡中的调控关系。方法选择健康志愿者(健康对照组)和DVT患者(DVT组)各30例,空腹抽取外周静脉血,分...
目的观察深静脉血栓形成(DVT)患者外周血微小RNA-664b-3p(miR-664b-3p)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平变化,分析二者在细胞焦亡中的调控关系。方法选择健康志愿者(健康对照组)和DVT患者(DVT组)各30例,空腹抽取外周静脉血,分离血清及单个核细胞(PBMC)。Western blotting法检测PBMC中活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Cleaved Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)活性片段(GSDMD-N)蛋白,qPCR法检测PBMC中的miR-664b-3p,ELISA法检测血清中的细胞焦亡相关炎症因子白细胞介素(IL)1β和IL-18蛋白。采用Target Scan 7.2生物信息学软件,预测miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′非翻译区(3′UTR)是否存在互补结合位点;分别构建包含结合位点的野生型及突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR质粒,双荧光素酶报告基因系统检测miR-664b-3p对其荧光素酶报告基因活性的影响。结果DVT组PBMC中Cleaved Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达及血清IL-1β、IL-18蛋白水平均高于健康对照组,miR-664b-3p表达低于健康对照组(P均<0.05);生物信息学分析显示,miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′UTR存在互补结合位点;转染miR-664b-3p mimics可以降低野生型Caspase-1 mRNA 3′UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05),但对突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR报告基因活性无显著影响(P>0.05)。结论DVT患者PBMC中miR-664b-3p表达降低,可解除对靶基因Caspase-1的表达抑制,Caspase-1活性增强使GS⁃DMD-N表达升高,进而导致细胞焦亡及相关炎症因子(IL-1β、IL-18)表达升高,最终导致DVT。
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关键词
深静脉血栓形成
细胞焦亡
微小RNA-
664
b-
3
p
半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1
焦孔素D
白细胞介素
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职称材料
题名
微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响
被引量:
2
1
作者
张沛
岳青芬
侯青霞
韩听锋
机构
郑州大学附属洛阳中心医院妇科
出处
《医学研究杂志》
2019年第5期165-169,共5页
文摘
目的观察微小RNA-664a-3p(miR-664a-3p)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法提取16例乳腺癌手术标本及其癌旁组织中总RNA,使用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-664a-3p在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量,并检测miR-664a-3p在4种乳腺癌细胞株(T47D、MDA-MB-231、BT-549、MCF-7)及正常乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达。选取miR-664a-3p表达水平最低的乳腺癌细胞瞬时转染miR-664a-3p模拟物(实验组)或miR-NC(对照组)。qPCR检测转染后细胞中miR-664a-3p的表达。生物信息学软件预测miR-664a-3p的靶基因。使用荧光素酶报告基因实验检测miR-664a-3p对靶基因肿瘤内皮标志物8(TEM8)的靶向作用。qPCR和Western blot法检测TEM8及下游基因的表达。流式细胞术检测细胞周期,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果乳腺癌组织中miR-664a-3p的表达量显著低于癌旁组织(P<0.01)。乳腺癌细胞株中miR-664a-3p的表达量显著低于正常乳腺上皮细胞(P<0.05),其中T47D细胞的表达量最低(P<0.05)。实验组和对照组T47D细胞中miR-664a-3p的表达量分别为24.87±2.17和1.02±0.10(P<0.01)。miR-664a-3p可与TEM8-3'-非编码区(UTR)特异性结合(P<0.01)。与对照组比较,实验组中TEM8 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。转染miR-664a-3p能够显著抑制T47D细胞周期的进展(P<0.05),降低细胞的增殖能力(P<0.01),抑制细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论miR-664a-3p在乳腺癌组织和细胞株表达下调,过表达miR-664a-3p能够通过靶向抑制TEM8基因的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力。
关键词
微小RNA-
664
a-
3
p
乳腺癌
肿瘤内皮标志物8
增殖
侵袭
Keywords
microrna
-
664
a-
3
p
Breast cancer
Tumor endothelial markers 8
p
roliferation
Invasion
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
miR-664b-3p调控Caspase-1介导细胞焦亡在深静脉血栓形成中的作用
被引量:
3
2
作者
褚楚
刘文
郭红
赵霖
魏然
张振
郭强
朱肖肖
王彬
李霞
机构
山东第一医科大学基础医学院(基础医学研究所)
山东德升生物工程有限公司
山东中医药大学附属医院
出处
《山东医药》
CAS
2021年第8期20-23,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81673981)
山东省重点研发项目(2017GSF19118)。
文摘
目的观察深静脉血栓形成(DVT)患者外周血微小RNA-664b-3p(miR-664b-3p)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平变化,分析二者在细胞焦亡中的调控关系。方法选择健康志愿者(健康对照组)和DVT患者(DVT组)各30例,空腹抽取外周静脉血,分离血清及单个核细胞(PBMC)。Western blotting法检测PBMC中活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Cleaved Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)活性片段(GSDMD-N)蛋白,qPCR法检测PBMC中的miR-664b-3p,ELISA法检测血清中的细胞焦亡相关炎症因子白细胞介素(IL)1β和IL-18蛋白。采用Target Scan 7.2生物信息学软件,预测miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′非翻译区(3′UTR)是否存在互补结合位点;分别构建包含结合位点的野生型及突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR质粒,双荧光素酶报告基因系统检测miR-664b-3p对其荧光素酶报告基因活性的影响。结果DVT组PBMC中Cleaved Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达及血清IL-1β、IL-18蛋白水平均高于健康对照组,miR-664b-3p表达低于健康对照组(P均<0.05);生物信息学分析显示,miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′UTR存在互补结合位点;转染miR-664b-3p mimics可以降低野生型Caspase-1 mRNA 3′UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05),但对突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR报告基因活性无显著影响(P>0.05)。结论DVT患者PBMC中miR-664b-3p表达降低,可解除对靶基因Caspase-1的表达抑制,Caspase-1活性增强使GS⁃DMD-N表达升高,进而导致细胞焦亡及相关炎症因子(IL-1β、IL-18)表达升高,最终导致DVT。
关键词
深静脉血栓形成
细胞焦亡
微小RNA-
664
b-
3
p
半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1
焦孔素D
白细胞介素
Keywords
dee
p
venous thrombosis
p
yro
p
tosis
microrna
-
664
b-
3
p
Cas
p
ase-1
gasdermin D
interleukin
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响
张沛
岳青芬
侯青霞
韩听锋
《医学研究杂志》
2019
2
下载PDF
职称材料
2
miR-664b-3p调控Caspase-1介导细胞焦亡在深静脉血栓形成中的作用
褚楚
刘文
郭红
赵霖
魏然
张振
郭强
朱肖肖
王彬
李霞
《山东医药》
CAS
2021
3
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