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微小RNA-543靶向调控RNA结合蛋白47促进胃癌细胞的增殖和转移 被引量:1
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作者 王冰雨 刘文博 +5 位作者 宋步云 李勇 Lu Xue Wang Lu 赵小涵 檀碧波 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第1期52-56,共5页
目的探究微小RNA-543(miR-543)通过抑制RNA结合蛋白47(RBM47)对胃癌细胞增殖和转移的影响和机制。方法荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测40例新鲜胃癌和癌旁组织中miR-543表达;检测正常胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN45、NC... 目的探究微小RNA-543(miR-543)通过抑制RNA结合蛋白47(RBM47)对胃癌细胞增殖和转移的影响和机制。方法荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测40例新鲜胃癌和癌旁组织中miR-543表达;检测正常胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN45、NCIN87、AGS中miR-543的表达。分析miR-543表达与临床病理特征之间的关系。生物信息学分析miR-543的生物学功能和靶基因。双荧光素酶报告基因分析miR-543和靶基因RBM47之间调控关系。应用miR-543抑制物(inhibitor)干扰胃癌AGS细胞株中miR-543表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell小室实验检测胃癌细胞株AGS增殖、侵袭、迁移能力;RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测AGS中人细胞周期素D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、RBM47、组织抑制剂1(TIMP1)表达。数据应用SPSS 25.0统计软件分析。结果miR-543在胃癌组织中(2.476±0.812)的表达高于癌旁组织(1.165±0.295,t=9.880,P<0.01),在胃癌细胞株中的表达均高于GES-1(1.130±0.141,t=9.842,P<0.05;t=13.17,P<0.01;t=35.07,P<0.01),miR-543在AGS细胞株中表达量最高(5.120±0.545)。miR-543表达与胃癌患者淋巴结转移有关(阳性例数:27)。富集分析结果显示miR-543与多种生物学过程有关,RBM47基因是miR-543下游靶基因。RBM47基因在胃癌组织中表达(0.663±0.251)低于癌旁正常组织(1.604±0.613,P<0.01),相关性分析结果显示RBM47基因与miR-543负相关(r=-0.724),双荧光素酶报告基因分析miR-543直接抑制RBM47表达。用miR-543 inhibitor转染AGS后,胃癌细胞增殖、侵袭、迁移能力明显下降(P<0.01);Cyclin D1、MMP-9的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而RBM47、TIMP1的表达明显增高(P<0.01)。结论miR-543可通过抑制RBM47表达促进胃癌细胞的增殖和转移能力。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-543 RNA结合蛋白47 侵袭 迁移 生物信息学
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宫腔镜下宫腔黏连手术后患者血清miR-543、miR-135a表达及预测黏连复发价值 被引量:3
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作者 王青 黄先华 +1 位作者 谢蓉 刘婷 《中国计划生育学杂志》 2022年第6期1369-1373,共5页
目的:探讨宫腔镜下宫腔黏连术后患者血清微小RNA-543(miR-543)、微小RNA-135a(miR-135a)水平与黏连复发关系及预测价值。方法:选取2019年12月—2020年12月于本院行宫腔镜下宫腔黏连分离术的宫腔黏连患者127例,根据术后3个月经周期结束... 目的:探讨宫腔镜下宫腔黏连术后患者血清微小RNA-543(miR-543)、微小RNA-135a(miR-135a)水平与黏连复发关系及预测价值。方法:选取2019年12月—2020年12月于本院行宫腔镜下宫腔黏连分离术的宫腔黏连患者127例,根据术后3个月经周期结束后月经第3-7 d复查是否复发将患者分为复发组(34例)和未复发组(93例)。采用实时荧光定量PCR法检测两组患者术后24 h血清miR-543、miR-135a水平;Pearson法分析术后宫腔黏连复发患者血清miR-543与miR-135a水平相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-543、miR-135a水平预测术后复发价值;Logistic回归分析影响宫腔镜治疗后黏连复发影响因素。结果:复发组病程、血清miR-135a水平高于未复发组,miR-543水平低于未复发组(P<0.05);复发组血清miR-543与miR-135a水平呈负相关(r=-0.539,P<0.05)。血清miR-543、miR-135a预测宫腔镜治疗后黏连复发的曲线下面积(AUC)分别为0.897、0.864,特异性分别为76.3%、92.5%,敏感度分别为91.2%、70.6%;二者联合预测的AUC为0.947,特异性为88.2%,敏感度为94.1%。miR-135a是影响宫腔镜术后复发的独立危险因素(P<0.05),miR-543是治疗后复发的保护因素(P<0.05)。结论:宫腔镜治疗宫腔黏连后复发与患者血清miR-543、miR-135a水平有关且有一定预测价值。 展开更多
关键词 宫腔黏连 宫腔镜手术 术后复发 微小RNA-543 微小RNA-135a 预测 影响因素
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miR-543靶向QKI调节结直肠癌HCT116/FU细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的影响
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作者 胡宁 吴磊 +3 位作者 徐建华 郑森 黄亚辉 孟勇 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期199-205,共7页
目的探讨微小RNA-543(miR-543)通过RNA结合蛋白(quaking,QKI)对结直肠癌HCT116/FU细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的调控作用。方法不同浓度5-FU处理HCT116和HCT116/FU后,根据细胞增殖活力计算IC_(50)。将HCT116/FU细胞分为阴性对照组(NC组)... 目的探讨微小RNA-543(miR-543)通过RNA结合蛋白(quaking,QKI)对结直肠癌HCT116/FU细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的调控作用。方法不同浓度5-FU处理HCT116和HCT116/FU后,根据细胞增殖活力计算IC_(50)。将HCT116/FU细胞分为阴性对照组(NC组)、miR-543抑制物组(miR-543 inhibitor组)、过表达QKI组(QKI组)及过表达QKI+miR-543模拟物组(QKI+miR-543组)。分别检测细胞增殖活力、细胞凋亡及凋亡相关蛋白、QKI和Cyclin D1表达、细胞迁移和细胞周期。结果miR-543在HCT116/FU细胞中高表达,并且HCT116/FU对5-FU的IC_(50)高于HCT116。敲降miR-543减少HCT116/FU细胞增殖活力、迁移数和细胞周期;增加细胞凋亡和cleaved caspase-3、Bax蛋白表达,并且减少Bcl-2和Cyclin D1表达。生物信息学和双荧光素酶报告系统表明QKI是miR-543的下游靶基因。过表达QKI后减少HCT116/FU细胞增殖活力、迁移数和细胞周期,增加细胞凋亡和cleaved caspase-3、Bax蛋白表达,并且减少Bcl-2和Cyclin D1表达;过表达miR-543后缓解过表达QKI对HCT116/FU细胞的不利影响。结论miR-543靶向下调QKI降低结直肠癌HCT116/FU细胞对5-FU敏感性。 展开更多
关键词 结直肠癌 5-氟尿嘧啶 敏感性 微小RNA-543 RNA结合蛋白QKI
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miR-543靶向TCF7L2调控BMSCs成脂分化的实验研究 被引量:1
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作者 封宝红 喻业安 +3 位作者 晏莉 伍军 张艳霞 朱戈丽 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1770-1776,共7页
目的探讨微小RNA-543(miR-543)靶向调控转录因子7类似物2(TCF7L2)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响。方法分离并鉴定大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BMSCs成脂分化诱导过程中mi... 目的探讨微小RNA-543(miR-543)靶向调控转录因子7类似物2(TCF7L2)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响。方法分离并鉴定大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BMSCs成脂分化诱导过程中miR-543的表达变化;体外培养BMSCs细胞,对BMSCs细胞进行干预,过表达miR-543、抑制TCF7L2表达或同时过表达miR-543与TCF7L2,使用成脂分化诱导培养基培养,油红O染色检测BMSCs成脂分化;免疫印迹法检测BMSCs细胞TCF7L2、脂肪细胞蛋白2(aP2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-543与TCF7L2的靶向关系。结果成功分离大鼠BMSCs;BMSCs成脂分化诱导处理1、2、3、4、5 d后miR-543表达水平降低;双荧光素酶报告基因实验证实miR-543与TCF7L2存在靶向关系;过表达miR-543或抑制TCF7L2表达,BMSCs油红O染色后OD值、aP2、PPAR-γ、C/EBPα蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达TCF7L2可部分逆转过表达miR-543对BMSCs细胞成脂分化的抑制作用(P<0.05)。结论miR-543在大鼠BMSCs细胞成脂分化过程中下调表达,过表达miR-543可通过靶向抑制TCF7L2表达而抑制BMSCs细胞成脂分化。 展开更多
关键词 微小RNA-543 转录因子7类似物2 骨髓间充质干细胞 成脂分化 大鼠
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微小RNA-543对大鼠骨关节炎软骨细胞的作用机制研究 被引量:2
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作者 罗奋棋 林院 徐杰 《中外医学研究》 2019年第24期1-3,共3页
目的:研究微小RNA-543对大鼠骨关节炎软骨细胞存在的保护作用机制。方法:此次研究选取20只健康SD(Sprague-Dawley)大鼠进行研究,采取随机数字表法将入组的大鼠分成研究组和对照组,每组10只,对照组大鼠不进行特殊处理,研究组大鼠接受关... 目的:研究微小RNA-543对大鼠骨关节炎软骨细胞存在的保护作用机制。方法:此次研究选取20只健康SD(Sprague-Dawley)大鼠进行研究,采取随机数字表法将入组的大鼠分成研究组和对照组,每组10只,对照组大鼠不进行特殊处理,研究组大鼠接受关节内侧副韧带切断术,构建建立大鼠骨关节炎(OA)模型,采用PCR检测方法分别检测两组大鼠软骨组织的microRNA-543表达水平。对大鼠正常膝关节软骨细胞进行体外分离,10ng/L的IL-1β培养24h形成体外OA模拟状态,使用miR-543mimics进行转染,观察分析miR-543过表达对IL-1β诱导条件下软骨细胞增殖及凋亡相关基因表达水平的影响。结果:研究组大鼠的软骨组织中miR-543的表达水平显著低于对照组(P<0.05)。miR-543mimics转染后软骨细胞的增殖率明显高于对照组(P<0.05),经过IL-1β诱导处理的软骨细胞增殖能力显著低于对照组(P<0.05),经过miR-543mimics转染后IL-1β诱导处理过的软骨细胞增殖能力显著上升(P<0.05)。miR-543mimics转染细胞MDM4mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05),Akt1和Bcl-2mRNA的表达显著高于对照组(P<0.05),经过IL-1β诱导处理后的软骨细胞MDM4mRNA表达显著高于对照组(P<0.05),Akt1和Bcl-2mRNA表达则显著低于对照组(P<0.05),经过miR-543mimics转染后,IL-1β诱导处理过的软骨细胞MDM4、Akt1和Bcl-2mRNA表达水平的变化能够得到显著缓解(P<0.05)。结论:OA大鼠的软骨组织miR-543表达会显著下降,通过miR-543mimics转染促进miR-543表达上调,能够使软骨细胞的增殖得到提升,加之对MDM4、Akt1、Bcl-2表达的影响,能够有效对抗IL-1β诱导引发的软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 微小RNA-543 骨关节炎 软骨细胞 作用机制 细胞凋亡
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微RNA-543对过氧化氢诱导的人静脉内皮细胞氧化应激的影响 被引量:1
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作者 袁会军 芦军 +1 位作者 崔志强 韩鹏 《新乡医学院学报》 CAS 2021年第3期233-239,共7页
目的探讨微RNA-543(miR-543)对过氧化氢(H 2O 2)诱导的人静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激的影响。方法将对数生长期的HUVECs随机分为对照组及100、200、300、400μmol·L^(-1)H 2O 2组。对照组细胞于达尔伯克改良伊格尔培养基中常规培... 目的探讨微RNA-543(miR-543)对过氧化氢(H 2O 2)诱导的人静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激的影响。方法将对数生长期的HUVECs随机分为对照组及100、200、300、400μmol·L^(-1)H 2O 2组。对照组细胞于达尔伯克改良伊格尔培养基中常规培养;100、200、300、400μmol·L^(-1)H 2O 2组细胞分别加入终浓度100、200、300、400μmol·L^(-1)H 2O 2诱导培养;各组细胞培养3 h时采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性。另设inhibitor+H 2O 2组和inhibitor-NC+H 2O 2组。inhibitor+H 2O 2组HUVECs转染miR-543 inhibitor后,再用300μmol·L^(-1)H 2O 2诱导培养3 h;inhibitor-NC+H 2O 2组HUVECs转染inhibitor-NC后,再用300μmol·L^(-1)H 2O 2诱导培养3 h。取对照组、300μmol·L^(-1)H 2O 2组、inhibitor+H 2O 2组和inhibitor-NC+H 2O 2组HUVECs,采用MTT法检测细胞活性,实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中miR-543水平,酶标仪法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平,Western blot法检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子(ICAM1)、血管细胞黏附分子(VCAM1)、血栓调节蛋白(TM)、组织因子途径抑制因子(TFPI)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的相对表达量;双荧光素酶报告基因法检测HUVECs中荧光素酶活性。结果与对照组比较,300μmol·L^(-1)H 2O 2组、inhibitor+H 2O 2组和inhibitor-NC+H 2O 2组HUVECs细胞活性显著降低,miR-543相对表达量显著增高,SOD和GSH-Px活性、NO水平以及TM、TFPI、eNOS蛋白相对表达量显著降低,MDA水平及IL-1β、ICAM1和VCAM1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。与300μmol·L^(-1)H 2O 2组和inhibitor-NC+H 2O 2组比较,inhibitor+H 2O 2组HUVECs细胞活性显著升高,miR-543相对表达量显著降低,SOD和GSH-Px活性、NO水平以及TM、TFPI、eNOS蛋白相对表达量显著升高,MDA水平及IL-1β、ICAM1和VCAM1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。300μmol·L^(-1)H 2O 2组与 展开更多
关键词 微RNA-543 内皮细胞损伤 氧化应激 炎症因子 血栓形成相关因子
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原发性肝癌组织中微RNA-543表达与微血管密度的相关性
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作者 陈文换 杨峰燕 +2 位作者 张艳华 白志超 高建芝 《新乡医学院学报》 CAS 2021年第7期662-665,共4页
目的探讨原发性肝癌(PLC)组织中微RNA-543(miR-543)与微血管密度(MVD)的相关性。方法选择2016年6月至2020年6月涿州市医院收治的100例PLC患者作为观察组,另选择同期因外伤行部分肝切除的70例患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链... 目的探讨原发性肝癌(PLC)组织中微RNA-543(miR-543)与微血管密度(MVD)的相关性。方法选择2016年6月至2020年6月涿州市医院收治的100例PLC患者作为观察组,另选择同期因外伤行部分肝切除的70例患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测PLC组织和正常肝组织中miR-543的表达;免疫组织化学染色观察PLC组织中MVD;分析PLC组织中miR-543表达与MVD的相关性。结果PLC组织和正常肝组织中miR-543相对表达量分别为3.231±0.312、1.021±0.052,PLC组织中miR-543相对表达量显著高于正常肝组织(t=4.216,P<0.05)。PLC组织和正常肝组织中MVD分别为44.79±8.54、9.68±3.27,PLC组织中MVD显著高于正常肝组织(t=3.175,P<0.05)。miR-543表达和MVD与肿瘤直径、肿瘤分期有相关性(P<0.05),与肿瘤数目、是否合并肝硬化无相关性(P>0.05);PLC组织中miR-543表达与MVD呈正相关(r=0.601,P<0.05)。结论PLC组织中miR-543表达上调,PLC组织中miR-543表达与MVD呈显著正相关,miR-543可能在PLC的发生、发展中起促进作用。 展开更多
关键词 微RNA-543 原发性肝癌 微血管密度
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MicroRNA-543 in Systemic Diseases and Possible Applications in Gynecologic Tumors
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作者 Yan-Ran Sheng Wen-Ting Hu +3 位作者 Chun-Yan Wei Yu-Kai Liu Yu-Yin Liu Xiao-Yong Zhu 《Reproductive and Developmental Medicine》 CSCD 2021年第2期107-118,共12页
In recent years,an increasing number of young women have been diagnosed with cancer,including some nulliparous women.Therefore,many young patients with early-stage cancer desire to preserve fertility after cytotoxic o... In recent years,an increasing number of young women have been diagnosed with cancer,including some nulliparous women.Therefore,many young patients with early-stage cancer desire to preserve fertility after cytotoxic oncological treatments.It is important to develop a multidisciplinary approach to achieve the best outcomes for each patient.On the other hand,there has been a sharp increase in microRNAs(miRNAs)as potential biomarkers for the diagnosis,prognosis,and evaluation of treatment efficacy of several diseases.MiR-543 has been reported to affect the pathogenesis and progression of diseases via complex mechanisms.Understanding the regulatory role of miR-543 may aid comprehension of the pathogenesis and treatment of a broad range of diseases.Therefore,we provide an overview of the biogenesis,function,and role of miR-543 in various systems.These results shed light on the anticancer and endometrial protection role of miR-543 in young patients with gynecologic tumors and highlight the clinical potential of miR-543-based applications and related challenges. 展开更多
关键词 Endometrial Receptivity Gynecological Oncology microrna-543 Pathway Target
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