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微小RNA-186-5p(miR-186-5p)下调TLR3表达抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡 被引量：4
1
作者 刘叶 宋冰 +1 位作者 郑魏 胡晶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期877-883,共7页
目的研究高糖处理AC16心肌细胞微小RNA-186-5p(miR-186-5p)、Toll样受体3(TLR3)表达水平的变化及其与心肌细胞凋亡的关系。方法靶基因预测数据库Target Scan7.1预测miR-186-5p可直接作用于TLR3,采用高糖诱导培养的人AC16心肌细胞,建立... 目的研究高糖处理AC16心肌细胞微小RNA-186-5p(miR-186-5p)、Toll样受体3(TLR3)表达水平的变化及其与心肌细胞凋亡的关系。方法靶基因预测数据库Target Scan7.1预测miR-186-5p可直接作用于TLR3,采用高糖诱导培养的人AC16心肌细胞,建立糖尿病心肌病模型。采用实时定量PCR检测心肌细胞miR-186-5p水平,Western blot法检测心肌细胞TLR3表达水平。采用细胞转染过表达或降低miR-186-5p或TLR3水平,通过流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测心肌细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白表达,荧光素酶报告基因检测miR-186-5p与TLR3的相互作用。结果生物信息学分析和荧光素酶活性测定证实TLR3为miR-186-5p直接作用的靶基因,高糖处理的心肌细胞miR-186-5p表达下调,过表达miR-186-5p可逆转高糖诱导的细胞凋亡,并降低c-caspase-3蛋白水平。下调TLR3水平抑制高糖诱导的细胞凋亡并降低c-caspase-3蛋白水平。过表达TLR3可以上调miR-186-5p抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡水平。TLR3表达水平升高可逆转miR-186-5p抑制HG诱导心肌细胞凋亡的作用。结论miR-186-5p通过下调TLR3表达抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-186-5p(mir-186-5p) Toll样受体3(TLR3) 心肌细胞 细胞凋亡 高糖
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