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MicroRNA-105-5p/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究
1
作者 赵丹 黄金平 +5 位作者 张亚楠 张荣花 熊亚南 王梅梅 刘志勇 章广玲 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第15期41-51,共11页
目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺... 目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。利用Kaplan-Meier Plotter在线工具探讨miR-105-5p与胰腺癌患者预后的关系。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor。CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移及侵袭能力;qRT-PCR检测miR-105-5p对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ZEB1表达的影响。生物信息学方法预测miR-105-5p的候选靶基因,并对候选靶基因进行GO和KEGG富集分析。双萤光素酶实验检测miR-105-5p与PPM1A的靶向关系。qRT-PCR检测在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor后PPM1A的表达。免疫荧光实验检测PPM1A在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC+pcDNA3.1、mimic NC+pcDNA3.1-PPM1A、miR-105-5p mimic+pcDNA3.1-PPM1A后,通过挽救实验进一步研究miR-105-5p inhibitor与PPM1A在胰腺癌细胞中的相互作用关系。结果胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中miR-105-5p mRNA相对表达量高于hTRET-HPNE细胞中miR-105-5p mRNA相对表达量(P<0.05),以PANC-1细胞中的相对表达量最高。miR-105-5p高表达与胰腺癌患者的不良预后有关(P<0.05)。miR-105-5p mimic组细胞增殖、迁移及侵袭能力均高于mimic NC组(P<0.05)。与mimic NC比较,miR-105-5p mimic下调E-cadherin mRNA表达,上调N-cadherin、Vimentin、ZEB1 mRNA表达(P<0.05)。转染miR-105-5p inhibitor后得到相反的结果。双萤光素酶实验证实miR-105-5p与PPM1A存在靶向关系。免疫荧光实验显示在胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中PPM1A的荧光强度低于人胰腺导管上皮细胞 展开更多
关键词 胰腺癌 microrna-105-5p pANC-1细胞 ppM1A 迁移 侵袭
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miR-105-5p调控CDC5L表达对胶质瘤细胞增殖迁移的影响
2
作者 宋海龙 徐东为 +4 位作者 余秋男 荆彦平 李世冲 刘建中 刘京让 《河北医学》 CAS 2023年第6期906-912,共7页
目的:分析微小RNA-105-5p(miR-105-5p)通过调控细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体(CDC5L)对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:收集本院35例经手术治疗的人脑胶质瘤组织及因脑外伤行减压术的正常脑组织样本。取对数生长期U251细胞,分为对照(c... 目的:分析微小RNA-105-5p(miR-105-5p)通过调控细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体(CDC5L)对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:收集本院35例经手术治疗的人脑胶质瘤组织及因脑外伤行减压术的正常脑组织样本。取对数生长期U251细胞,分为对照(control)组、转染miR-105-5p阴性对照(miR-NC)组、转染miR-105-5p模拟物(miR-105-5p mimics)组、转染沉默CDC5L阴性对照(si-NC)组、转染沉默CDC5L(si-CDC5L)组、共转染miR-105-5p mimics及pcDNA(pcDNA)组以及共转染miR-105-5p mimics及pcDNA-CDC5L(miR-105-5p mimics+pcDNA-CDC5L)组。qRT-PCR检测胶质瘤组织、正常脑组织及各组U251细胞中miR-105-5p及CDC5L mRNA的表达情况;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;Western blot法检测CDC5L、细胞周期蛋白(CyclinDl)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)表达;双荧光素酶报告实验验证miR-105-5p与CDC5L的靶向关系。结果:与正常脑组织比较,胶质瘤组织中miR-105-5p水平显著下降,CDC5L mRNA显著升高(P<0.05)。miR-105-5p表达水平与CDC5L表达水平呈负相关(r=-0.512,P=0.002)。与control组、si-NC组比较,si-CDC5L组细胞p21蛋白表达量升高(P<0.05),24h、48h、72h OD值、迁移细胞数、CDC5L mRNA表达量及CDC5L、CyclinDl、MMP-2、MMP-9蛋白表达量均降低(P<0.05);与control组、miR-NC组比较,miR-105-5p mimics组miR-105-5p表达量和p21蛋白表达量升高(P<0.05),24h、48h、72h OD值、迁移细胞数、CDC5L mRNA表达量以及CDC5L、CyclinDl、MMP-2、MMP-9蛋白表达量均降低(P<0.05);过表达CDC5L逆转miR-105-5p对U251细胞的增殖、迁移及CyclinDl、MMP-2、MMP-9、p21蛋白蛋白的影响(P<0.05)。双荧光素酶实验验证,CDC5L是miR-105-5p的下游靶点。结论:miR-105-5p通过靶向下调CDC5L抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移。 展开更多
关键词 微小RNA-105-5p 细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体 胶质瘤 增殖 迁移
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浆液性卵巢癌组织miR-105-5p表达变化及临床意义 被引量：1
3
作者 陈宏丽 孙娇娇 胡郅珺 《中国性科学》 2021年第11期64-67,共4页
目的检测浆液性卵巢癌患者组织中微小RNA(miR)-105-5p表达变化及临床意义。方法选取2018年6月至2021年5月上海交通大学医学院附属瑞金医院舟山分院和上海交通大学医学院附属仁济医院诊治的90例浆液性卵巢癌患者作为研究对象,获取其癌组... 目的检测浆液性卵巢癌患者组织中微小RNA(miR)-105-5p表达变化及临床意义。方法选取2018年6月至2021年5月上海交通大学医学院附属瑞金医院舟山分院和上海交通大学医学院附属仁济医院诊治的90例浆液性卵巢癌患者作为研究对象,获取其癌组织为研究组。选取同期诊治的90例卵巢良性肿瘤患者,获取其良性肿瘤组织为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测组织中miR-105-5p水平;分析miR-105-5p与浆液性卵巢癌临床病理特征的关系;采用Spearman分析浆液性卵巢癌癌组织中miR-105-5p与淋巴结转移的相关性;绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析癌组织中miR-105-5p对浆液性卵巢癌淋巴结转移的预测价值。结果与对照组比较,研究组miR-105-5p水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。以浆液性卵巢癌癌组织中miR-105-5p水平<0.72为miR-105-5p低表达组,以癌组织中miR-105-5p水平≥0.72为miR-105-5p高表达组,结果显示miR-105-5p与年龄、肿瘤体积、绝经情况、细胞分化程度、TNM分期无关(P>0.05),与淋巴结转移关系密切(P<0.05)。采用Spearman分析浆液性卵巢癌癌组织中miR-105-5p与淋巴结转移关系,结果显示miR-105-5p与淋巴结转移呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示,癌组织中miR-105-5p水平预测浆液性卵巢癌淋巴结转移的ROC曲线下面积为0.753,截断值为0.801,其灵敏度为86.5%,特异度为55.3%。结论浆液性卵巢癌组织中miR-105-5p低表达,与淋巴结转移关系密切,对淋巴结转移有一定诊断价值。 展开更多
关键词 浆液性卵巢癌 微小RNA-105-5p 淋巴结转移
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扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响 被引量：4
4
作者 徐婷 程名 王叙德 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期1607-1611,共5页
目的探究扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响及机制。方法选取Hep3B细胞随机分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组。低浓度组、中浓度组和高浓度组分别用0.5,1和2μ... 目的探究扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响及机制。方法选取Hep3B细胞随机分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组。低浓度组、中浓度组和高浓度组分别用0.5,1和2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组先分别转染anti-miR-NC和anti-miR^(-1)05-5p再用2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,对照组不转染也不用扁蒴藤素处理。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR^(-1)05-5p的表达水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测小鼠双微体基因(MDM2)蛋白表达水平。结果对照组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%,(46.44±7.23)%,(56.23±6.64)%,(85.82±7.55)%;凋亡率分别为(3.40±0.74)%,(35.94±3.39)%,(36.29±1.58)%,(8.55±1.37)%;miR^(-1)05-5p表达水平分别为1.00±0.00,3.36±0.30,3.18±0.19,1.57±0.12;MDM2蛋白表达水平分别为0.90±0.08,0.16±0.03,0.19±0.03,0.69±0.08。上述指标,高浓度组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组与高浓度+anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论扁蒴藤素可能通过miR^(-1)05-5p靶向MDM2抑制肝细胞癌细胞Hep3B增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 扁蒴藤素 微小RNA-105-5p(miR-105-5p) 小鼠双微体基因(MDM2) 肝癌细胞 增殖 凋亡
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