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弓形虫慢性感染小鼠脑组织差异表达蛋白质组学 被引量：4
1
作者 吕琳 王亚培 +1 位作者 黄万意 袁子国 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期875-882,共8页
通过比较弓形虫慢性感染小鼠与健康小鼠的脑组织,筛选差异表达的鼠脑蛋白质,以期从蛋白质组学角度挖掘其导致中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤的机制,并为寻找生物标志物提供靶标。建立弓形虫PRU株慢性感染小鼠模型,运用iT... 通过比较弓形虫慢性感染小鼠与健康小鼠的脑组织,筛选差异表达的鼠脑蛋白质,以期从蛋白质组学角度挖掘其导致中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤的机制,并为寻找生物标志物提供靶标。建立弓形虫PRU株慢性感染小鼠模型,运用iTRAQ技术,结合LC-MS/MS分析差异表达蛋白质,并采用荧光定量PCR和Western blot验证iTRAQ数据。结果共鉴定出4 983个蛋白,差异表达蛋白461个,其中215个蛋白上调表达,246个蛋白下调表达,差异蛋白主要涉及代谢和神经过程等通路。结果表明,iTRAQ结合LCMS/MS技术能快速有效地进行蛋白质组学研究,为研究弓形虫慢性感染致宿主CNS损伤机制以及发现新的生物标志物提供参考。 展开更多
关键词 小鼠脑组织 弓形虫 ITRAQ 中枢神经系统损伤
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高碘对小鼠脑发育的影响 被引量：49
2
作者 高博 尹桂山 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期134-136,共3页
高碘是否和低碘一样会导致脑发育障碍，特别是母体高碘是否会对子代造成脑发育和智力损害，是一项具有重要医学和遗传学意义而尚未进行深入研究的问题。用高碘水喂小鼠复制出高碘甲状腺肿动物模型，对高碘甲状腺肿母鼠生下的１、７、１... 高碘是否和低碘一样会导致脑发育障碍，特别是母体高碘是否会对子代造成脑发育和智力损害，是一项具有重要医学和遗传学意义而尚未进行深入研究的问题。用高碘水喂小鼠复制出高碘甲状腺肿动物模型，对高碘甲状腺肿母鼠生下的１、７、１４、２１和３０日龄仔鼠的脑重量、脑蛋白质和核酸含量进行了测定，并对３０日龄仔鼠的脑形态变化和学习、记忆能力进行了观察。结果表明，与适碘组相比，高碘组小鼠脑重量、蛋白质含量和蛋白质／ＤＮＡ比值、ＲＮＡ含量和ＲＮＡ／ＤＮＡ比值均明显降低，而ＤＮＡ含量升高。３０日龄仔鼠学习、记忆能力下降，并观察到，这些参数的变化多数从７～１４日龄开始。这提示，摄入过量碘同碘缺乏一样，不仅可引起高碘性甲状腺肿，也可对神经系统造成损害，使脑发育落后，脑功能障碍。 展开更多
关键词 碘 脑发育 高碘
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弓形虫慢性感染小鼠脑转录组分析及与抑郁相关的犬尿氨酸通路的验证 被引量：3
3
作者 张驰 陈嘉婷 +3 位作者 辛紫萱 杨莉莉 杨梓瀚 彭鸿娟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期270-278,共9页
目的筛选并分析刚地弓形虫慢性感染小鼠脑转录组差异表达基因(DEG),分析与抑郁相关的犬尿氨酸(KYN)通路DEG的相对转录水平,为探究弓形虫慢性感染导致小鼠抑郁样症状的机制提供理论依据。方法18只SV129雄性小鼠随机平均分为感染组和对照... 目的筛选并分析刚地弓形虫慢性感染小鼠脑转录组差异表达基因(DEG),分析与抑郁相关的犬尿氨酸(KYN)通路DEG的相对转录水平,为探究弓形虫慢性感染导致小鼠抑郁样症状的机制提供理论依据。方法18只SV129雄性小鼠随机平均分为感染组和对照组。感染组小鼠腹腔注射ME49株速殖子120个(200μl),对照组注射等体积的磷酸缓冲液,感染后3个月收集感染组和对照组小鼠脑组织,提取小鼠脑组织总RNA进行转录组测序,筛选DEG,对DEG进行聚类分析、基因本体(GO)功能注释分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能注释和富集分析。选取与抑郁症相关的KYN通路的8个DEG,分别为γ干扰素(IFN⁃γ)、吲哚胺2,3⁃双加氧酶1(IDO1)、IDO2、犬尿氨酸酶(KYNU)、犬尿氨酸⁃3⁃单氧化酶(KMO)、3⁃羟基邻氨基苯甲酸3,4⁃二加氧酶(3⁃HAO)、波形蛋白(Vim)和脑源性神经营养因子(BDNF),以甘油醛⁃3⁃磷酸脱氢酶基因为内参,实时荧光定量PCR(qRT⁃PCR)检测各个基因的相对转录水平。结果感染组和对照组小鼠脑转录组的DEG共2295个,其中上调2016个,下调279个。GO分析结果显示,生物过程中富集最显著的是定位,共257个DEG;细胞组分中富集最显著的是蛋白复合物,共425个DEG;分子功能中富集最显著的是分子转导活性,共177个DEG。生物过程、细胞组分和分子功能富集DEG数量最多的分别是细胞过程、细胞组分和结合,分别有1039、1240、1088个DEG。KEGG分析结果显示,功能注释分析上调居前3位的代谢通路分别为免疫系统、信号转导、病毒性传染病,下调居前3位的分别为信号转导、信号分子和相互作用、免疫系统;功能富集分析结果显示77条通路富集显著。与抑郁症相关的信号通路有肿瘤坏死因子、神经活性配体⁃受体相互作用、NF⁃kappa B、JAK⁃STAT、坏死性凋亡、细胞凋亡、趋化因子、KYN通路等。qRT⁃PCR结果显示,以对照� 展开更多
关键词 刚地弓形虫 小鼠脑组织 转录组 抑郁症 犬尿氨酸通路
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Dlx1的天然反义转录物在大脑发育中的功能探索 被引量：2
4
作者 吴朝 赵阿妮 +2 位作者 朱丽媛 阴彬 张靖 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期607-610,共4页
目的探索Dlx1的天然反义转录物(Dlx1as)在小鼠大脑发育过程中的功能。方法根据生物信息学分析与分子生物学实验验证Dlx1as是否具有多聚腺苷酸尾,采用实时定量PCR检测Dlx1as与Dlx1 mRNA在小鼠大脑发育过程中随时间的变化,利用原位杂交的... 目的探索Dlx1的天然反义转录物(Dlx1as)在小鼠大脑发育过程中的功能。方法根据生物信息学分析与分子生物学实验验证Dlx1as是否具有多聚腺苷酸尾,采用实时定量PCR检测Dlx1as与Dlx1 mRNA在小鼠大脑发育过程中随时间的变化,利用原位杂交的技术比较Dlx1as与Dlx1 mRNA空间表达谱。结果 Dlx1as具有多聚腺苷酸尾,在小鼠的胚胎发育过程中,从E14.5到E18.5高表达,与Dlx1 mRNA在各时间点表达水平虽比较接近,但在表达区域存在互补的特点。结论 Dlx1as在小鼠大脑发育过程中有一段时间的高表达,与蛋白编码基因Dlx1 mRNA空间互补,推测其可能是通过调控Dlx1 mRNA来影响小鼠的大脑发育。 展开更多
关键词 Dlx1as 小鼠大脑发育 天然反义转录物 原位杂交
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慢病毒介导的小RNA干扰组织蛋白酶B转染小鼠脑微血管内皮细胞的条件
5
作者 周国宏 孔丽 《中国综合临床》 2012年第11期1128-1131,共4页
目的研究慢病毒介导下小RNA干扰组织蛋白酶B转染小鼠脑微血管内皮细胞（bEND．3）的最佳条件。方法实验分3组，完全培养基组（NP组）、培养基＋5mg／L凝聚胺组（P1组）和培养基＋8mg／L凝聚胺组（P2组），每组均有5个不同梯度的转染复数... 目的研究慢病毒介导下小RNA干扰组织蛋白酶B转染小鼠脑微血管内皮细胞（bEND．3）的最佳条件。方法实验分3组，完全培养基组（NP组）、培养基＋5mg／L凝聚胺组（P1组）和培养基＋8mg／L凝聚胺组（P2组），每组均有5个不同梯度的转染复数（MOI），即1、5、10、15、20，每个MOI值设3个孔，共45组。转染48、72、96h分别在荧光显微镜下计数绿色荧光蛋白，并求其转染率，从而得到其最佳MOI值；1周后采用MTr法检测最佳MOI值对bEND．3活性和存活率的影响。结果转染48h时，在各组观察到少量绿色荧光蛋白，其转染率介于1％～9％；72h和96h时，MOI相同的各组问差异无统计学意义（P〉0．01），其中，MOI为1、5、15的各组转染率均低于20％；MOI为10和20组，转染率介于71％～97％与60％～84％，且MOI为10组转染率高于MOI为20组，差异有统计学意义（P〈0．01）。M1rr检测Pl组和P2组存活率，l周时分别为（81．38±6。69）％、（62．03±5．13）％，Pl组显著高于P2组（t=15．795，P〈0．001）。结论慢病毒介导的小RNA干扰组织蛋白酶B转染bEND．3最佳优化条件为MOI=10，凝聚胺为5mg／L，最佳转染时间为转染后72h。 展开更多
关键词 RNA干扰 慢病毒 组织蛋白酶B 小鼠脑微血管内皮细胞 转染率
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人淋巴细胞转输SCID小鼠抗人脑胶质瘤特性分析 被引量：1
6
作者 衣服新 黄强 +3 位作者 董军 兰青 周丽英 孙志方 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期338-340,共3页
目的　探讨人外周血淋巴细胞转输给T和B淋巴细胞均先天性缺乏的SCID鼠后抗胶质瘤的免疫学特征。方法　采用APAAP、间接荧光原位杂交和流式细胞计数等检测转输在SCID鼠体内的人淋巴细胞分布、亚群变化和抗胶质瘤细胞毒活性。结果　尾静... 目的　探讨人外周血淋巴细胞转输给T和B淋巴细胞均先天性缺乏的SCID鼠后抗胶质瘤的免疫学特征。方法　采用APAAP、间接荧光原位杂交和流式细胞计数等检测转输在SCID鼠体内的人淋巴细胞分布、亚群变化和抗胶质瘤细胞毒活性。结果　尾静脉转输后人CD3+、CD8+和HLA Dr+等具有细胞毒活性细胞大部分分布在外周血和脾脏中 ,而腹腔转输者大部分在腹腔。这些细胞的功能维持 1周时达高峰 ,在第 2周下降时重复转输又可得到加强并具攻击肿瘤活性。 展开更多
关键词 SCID鼠 人淋巴细胞 脑肿瘤 免疫治疗 脑胶质瘤
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基质金属蛋白酶-9在结核性脑膜炎小鼠中的表达及其意义 被引量：1
7
作者 丁桂兰 李小鹏 +4 位作者 黄呈辉 罗金亮 王俊井 李传友 张伦理 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期705-709,共5页
目的分析基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在小鼠结核性脑膜炎病理生理过程中的表达特点及其意义。方法侧脑室注射结核分枝杆菌H37RV悬液的16只小鼠作为模型组，注射等量0．9％氯化钠溶液的16只小鼠作为对照组，30d后处死。分别进行脑组织结... 目的分析基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在小鼠结核性脑膜炎病理生理过程中的表达特点及其意义。方法侧脑室注射结核分枝杆菌H37RV悬液的16只小鼠作为模型组，注射等量0．9％氯化钠溶液的16只小鼠作为对照组，30d后处死。分别进行脑组织结核分枝杆菌培养、病理学观察，明胶酶谱法检测MMP-9活性，检测血脑屏障通透性和脑组织含水量，免疫荧光染色脑组织MMP-9、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）和整合素aM（OX-42）。采用t检验比较两组间的差异。结果模型组小鼠注射菌量为（1．271±0．111）×10。菌落形成单位（cfu）／只，感染30d后脑组织匀浆培养出结核分枝杆菌，菌量为（4．900±1．407）×10。cfu／mL，光学显微镜下见蛛网膜下腔和脑室扩张，大量炎性细胞浸润。模型组小鼠脑组织MMP-9条带累积吸光度（A）值为478214-19932，对照组为10082±3544，差异有统计学意义（f=3．728，P=0．010）。模型组小鼠脑组织伊文斯兰（EB）含量为（11．8±3．6）bLg／g，对照组为（4．7±3．4）／tg／g，差异有统计学意义（t=2．887，P=0．028）。模型组小鼠脑组织含水量为0．849土0．035，对照组为0．775±0。037，差异有统计学意义（t=2．925，P=0．026）。免疫荧光染色显示感染后小鼠脑组织高表达MMP-9、GFAP和OX-42，且MMP-9与GFAP和0X-42均明显重合。结论MMP-9在结核性脑膜炎小鼠脑组织中活性增强，并参与破坏血脑屏障，导致组织水肿、炎性细胞渗出，小胶质细胞-星形胶质细胞网络参与MMP-9的分泌。 展开更多
关键词 结核 脑膜 基质金属蛋白酶9 小鼠 血脑屏障 小神经胶质细胞 星形胶质细胞
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