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miRNA-371改善腹膜透析相关腹膜纤维化作用及机制研究
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作者 热孜万古丽·阿布都拉 赛福丁·木沙 +2 位作者 马萧萧 迪丽娜尔·木拉提 姜鸿 《临床军医杂志》 CAS 2024年第7期725-730,共6页
目的探究微小RNA(miRNA)-371对体内外腹膜纤维化的影响及其作用机制。方法将人腹膜间皮细胞(HPMC)分为对照组、模型组、miRNA-371 mimic组、miRNA-371 mimic阴性对照(NC)组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定HPMC中miRNA-371表达,CCK-8法检... 目的探究微小RNA(miRNA)-371对体内外腹膜纤维化的影响及其作用机制。方法将人腹膜间皮细胞(HPMC)分为对照组、模型组、miRNA-371 mimic组、miRNA-371 mimic阴性对照(NC)组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定HPMC中miRNA-371表达,CCK-8法检测HPMC增殖,细胞免疫荧光染色观察HPMC内胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)蛋白表达,蛋白质免疫印记测定HPMC中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3蛋白表达。将20只大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、miRNA-371 mimic组、miRNA-371 mimic-NC组,每组各5只,苏木精-伊红染色和马松染色观察大鼠腹膜组织病理学形态变化,免疫组化染色观察腹膜组织CollagenⅠ蛋白表达,蛋白质免疫印记测定腹膜组织中TGF-β1、Smad2/3蛋白表达。结果体外细胞实验结果显示,与模型组比较,miRNA-371 mimic组HPMC中miRNA-371表达量显著上调(P<0.05),细胞增殖率显著上升(P<0.05),CollagenⅠ荧光强度显著减少(P<0.05),TGF-β1、Smad2/3蛋白表达量显著下调(P<0.05);而miRNA-371 mimic-NC组HPMC中miRNA-371表达量、细胞增殖率、CollagenⅠ荧光强度及TGF-β1、Smad2/3蛋白表达量均未发生显著变化(P>0.05)。体内动物实验结果显示,与模型组比较,miRNA-371 mimic组大鼠腹膜组织病理变化得到较大改善,纤维化面积显著减少(P<0.05),CollagenⅠ蛋白表达显著减少(P<0.05),TGF-β1、Smad2/3蛋白表达量也显著下调(P<0.05);而miRNA-371 mimic-NC组大鼠腹膜组织病变情况未见明显改善,纤维化面积、CollagenⅠ蛋白表达及TGF-β1、Smad2/3蛋白表达量也均未发生显著变化(P>0.05)。结论miRNA-371能够在体外和体内抑制腹膜纤维化,该作用机制与调控TGF-β1/Smad2/3途径有关。 展开更多
关键词 腹膜纤维化 人腹膜间皮细胞 mirna-371 转化生长因子-β1/Smad2/3途径
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