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白花丹素对胶质瘤细胞生长侵袭的影响及机制研究 被引量：3
1
作者 柴昌 韩双印 宋来君 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期654-658,共5页
目的分析中药提纯制剂白花丹素对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响及其作用机制。方法体外常规培养SWO-38和U251细胞，应用0～50μmol／L白花丹素作用48h后，MTT检测细胞存活率的变化，计算半数抑制浓度fIC如；应用0、2．5、5、10... 目的分析中药提纯制剂白花丹素对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响及其作用机制。方法体外常规培养SWO-38和U251细胞，应用0～50μmol／L白花丹素作用48h后，MTT检测细胞存活率的变化，计算半数抑制浓度fIC如；应用0、2．5、5、10μmol／L白花丹素处理细胞48h后。流式细胞仪检测细胞凋亡；划痕实验检测细胞侵袭迁移能力；Western blotting检测细胞中SOX2蛋白的表达：实时荧光定量PCR检测细胞miR200b、miR200c、miR-203和miR-21表达的变化。结果MTT显示O～50μmol/L白花丹素处理SWO-38、U251细胞后细胞存活率逐渐下降，IC50分别为6．8μmol／L和7．4μmol／L；0、2．5、5、10μmol／L白花丹素作用SWO-38、U251细胞48h后凋亡细胞的比例逐渐增加，细胞中miR200b、miR200c和miR-203的表达逐渐增加，差异有统计学意义（P〈0．051；划痕实验显示白花丹素作用后两株细胞的侵袭能力下降；Western blotting结果显示SOX2蛋白的表达降低。结论白花丹素抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭迁移，促进其凋亡，可能与其升高miR200b、miR200c和miR-203的表达，降低SOX2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 白花丹素 SOX-2 mir200b mir200c mir-203 mir-21
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miR200c对卵巢上皮性癌细胞转移潜能影响及其机制探讨 被引量：6
2
作者 吴小华 许鹏宇 +3 位作者 杨波 王娜 陈亚楠 周楠 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期420-423,共4页
目的:探讨miR200c对卵巢癌细胞SKOV3和HO-8910转移潜能的影响及其调控机制。方法:人工合成miR200cmimic(实验组)和对照无关序列(阴性对照组),用脂质体将其转入SKOV3和HO-8910细胞,以SKOV3和HO-8910为空白对照,培养48h后,应用RT-PCR技术... 目的:探讨miR200c对卵巢癌细胞SKOV3和HO-8910转移潜能的影响及其调控机制。方法:人工合成miR200cmimic(实验组)和对照无关序列(阴性对照组),用脂质体将其转入SKOV3和HO-8910细胞,以SKOV3和HO-8910为空白对照,培养48h后,应用RT-PCR技术检测miR200c的相对表达;采用Transwell小室装置检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞中上皮向间质转化相关蛋白ZEB1、E-cadherin和Vimentin的表达;同时应用酶联免疫吸附实验检测间皮素和CA125的表达变化。结果:miR200c表达与空白对照组比较,SKOV3-mimic组为297.40±5.26倍,F=77.571,P<0.001;HO-8910-mimic组为348.57±6.50倍,F=63.563,P<0.001。侵袭到滤膜下的细胞数SKOV3-mimic组为74.20±7.44,低于空白对照组和阴性对照组,F=48.413,P<0.001;HO-8910-mimic组为98.67±7.62,低于空白对照组和阴性对照组,F=55.133,P<0.001。迁移到滤膜下的细胞数SKOV3-mimic组为56.27±6.36,低于空白对照组和阴性对照组,F=55.354,P<0.001;HO-8910-mimic组为91.33±5.75,亦低于空白对照组和阴性对照组,F=60.374,P<0.001。SKOV3-mimic组E-cadherin蛋白相对表达量为155.36±18.52,较对照组高,F=62.451,P=0.002,ZEB1和Vimentin蛋白表达降低,P值分别为0.003和0.005;HO-8910-mimic组E-cadherin蛋白相对表达量为149.90±38.53,较对照组高,F=54.536,P=0.002,ZEB1和Vimentin蛋白表达降低,P值分别为0.006和0.005。转染miR200cmimic后,SKOV3中CA125表达降低了33.2%,F=35.646,P=0.005,间皮素表达降低了39.6%,F=25.625,P=0.006;HO-8910中CA125表达降低了37.2%,F=27.426,P=0.007,间皮素表达降低了41.2%,F=33.735,P=0.005。结论:miR200c可通过miR200c/ZEB1/E-cadherin和间皮素/CA125通路抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 mir200c 间皮素 E钙粘连蛋白
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miR200家族在乳腺癌患者血浆中表达水平的检测及其临床意义 被引量：1
3
作者 商琰红 潘禹辰 +4 位作者 贾志芳 王玥琦 杨娜 赵丹 姜晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期383-388,共6页
目的:检测microRNA200 (miR200)家族在乳腺癌患者和正常人血浆中表达水平,评价其对乳腺癌筛查、进展和预后评估的潜在价值。方法:收集82例乳腺癌患者(乳腺癌组)和30名健康女性(对照组)的血浆标本,提取血浆中的微小RNAs (miRNAs),逆转录... 目的:检测microRNA200 (miR200)家族在乳腺癌患者和正常人血浆中表达水平,评价其对乳腺癌筛查、进展和预后评估的潜在价值。方法:收集82例乳腺癌患者(乳腺癌组)和30名健康女性(对照组)的血浆标本,提取血浆中的微小RNAs (miRNAs),逆转录后采用实时荧光定量PCR法检测2组受试对象血浆中miR200家族(miR200a、miR200b、miR200c、miR141和miR429)的表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆中miRNAs的诊断价值,分析乳腺癌患者血浆miRNAs表达水平与临床病理参数的关系;采用Cox风险比例模型进行生存分析。结果:乳腺癌组患者血浆中miR141表达水平低于对照组(P<0.01),ROC曲线下面积(AUC)为0.717 (P<0.01);miR200b表达水平低于对照组(P=0.006),AUC为0.685(P=0.003);但miR200a、miR200c和miR429表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P=0.268,P=0.075,P=0.872)。联用miR141和miR200b时,AUC为0.735,比单用miR141稍有提升。miR200家族的表达水平与乳腺癌临床病理特征和术后总生存期无关联(P>0.05)。结论:miR200b和miR141有可能作为乳腺癌诊断的分子生物学指标。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 微小RNAS microRNA200家族 mir200a mir200b mir200c mir141 mir429
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miR200c、E-Cad和ZEB1在子痫前期患者胎盘组织中的差异表达 被引量：3
4
作者 王豫红 高玲 《黔南民族医专学报》 2016年第2期79-83,共5页
目的:探讨miR200c和E-Cad、ZEB1的靶向关系。方法:采用qRT-PCR检测子痫前期患者和正常妊娠者胎盘组织miR200c和E-Cad、ZEB1表达;western blotting检测E-Cad和ZEB1蛋白水平表达。结果:qRT-PCR结果显示,与正常妊娠者比较,子痫前期患者胎... 目的:探讨miR200c和E-Cad、ZEB1的靶向关系。方法:采用qRT-PCR检测子痫前期患者和正常妊娠者胎盘组织miR200c和E-Cad、ZEB1表达;western blotting检测E-Cad和ZEB1蛋白水平表达。结果:qRT-PCR结果显示,与正常妊娠者比较,子痫前期患者胎盘组织中miR200c的表达水平显著增高,E-Cad mRNA表达水平显著升高,ZEB1 mRNA表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。western blotting结果显示,与正常妊娠者比较,子痫前期患者E-Cad蛋白水平显著升高,ZEB1蛋白水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:miR200c调控E-Cad和ZEB1的表达。 展开更多
关键词 子痫前期 胎盘组织 mir200c E-钙粘素 锌指结合蛋白1
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冬凌草甲素调控miR-200c/EZH2轴抑制黑色素瘤细胞上皮-间质转化的机制研究
5
作者 赵汴霞 任红 +1 位作者 晋佳路 曹杰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第5期67-76,共10页
目的 探究冬凌草甲素调控微小RNA200c(miR-200c)/组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)轴抑制黑色素瘤细胞(A375细胞)上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对A375细胞活力的影响;将A375细胞分为对照... 目的 探究冬凌草甲素调控微小RNA200c(miR-200c)/组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)轴抑制黑色素瘤细胞(A375细胞)上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对A375细胞活力的影响;将A375细胞分为对照组、冬凌草甲素组、mimic control组、miR-200c mimics组、冬凌草甲素+inhibitor control组、冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组,qRT-PCR检测miR-200c、EZH2 mRNA表达情况;免疫印迹法检测EZH2及EMT相关蛋白表达情况;黏附实验检测A375细胞黏附能力;Transwell实验检测A375细胞侵袭及迁移能力;荧光素酶报告基因实验检测miR-200c与EZH2的靶向关系;构建移植瘤裸鼠模型,检测肿瘤质量;免疫组化法分析EMT相关蛋白表达情况。结果 A375细胞存活率随冬凌草甲素浓度的增加以剂量依赖性显著降低(P<0.05),由于40μmol/L冬凌草甲素接近半数抑制浓度,因此选取40μmol/L冬凌草甲素进行后续实验;与对照组相比,冬凌草甲素组、miR-200c mimics组A375细胞中miR-200c、钙粘附蛋白E(E-cadherin)表达水平显著增加,EZH2 mRNA及蛋白表达水平、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达水平、迁移细胞数、侵袭细胞数、黏附细胞数显著降低(P<0.05);与对照组、mimic control组相比,miR-200c mimics组EZH2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);miR-200c沉默可逆转冬凌草甲素对A375细胞的作用;与对照组相比,冬凌草甲素组肿瘤质量、EZH2 mRNA、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平显著降低,miR-200c、E-cadherin蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与冬凌草甲素组相比,冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组肿瘤质量、EZH2 mRNA、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平显著增加,miR-200c、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论 冬凌草甲素可能通过促进miR-200c/EZH2轴来抑制A375细胞的EMT及肿瘤生长。 展开更多
关键词 黑色素瘤细胞 冬凌草甲素 微小RNA200c 组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2 上皮-间质转化
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miR200c过表达对寡灶型转移细胞株体外特性的影响
6
作者 陈俊良 孙志卫 +1 位作者 王健宇 邢若曦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期2486-2491,共6页
目的探索miR200c稳定过表达对寡灶型转移肿瘤细胞株体外癌症生物学特性的影响。方法通过慢病毒感染建立稳定上调miR200c表达的寡灶型转移细胞株MDA-435-OL-miR200c(实验组),并同时建立阴性对照组(感染空质粒LV3NC)和阳性对照组(多灶型... 目的探索miR200c稳定过表达对寡灶型转移肿瘤细胞株体外癌症生物学特性的影响。方法通过慢病毒感染建立稳定上调miR200c表达的寡灶型转移细胞株MDA-435-OL-miR200c(实验组),并同时建立阴性对照组(感染空质粒LV3NC)和阳性对照组(多灶型细胞株MDA-435-POL),通过CCK-8增殖曲线测定、琼脂平板克隆实验、Transwell小室迁移和侵袭实验来阐明上调miR200c对寡灶型转移细胞体外特性的影响以及上调目的基因后寡灶型与多灶型转移细胞株体外癌症生物学特性的不同和联系。结果在稳定寡灶转移细胞株中过表达miR200c对细胞体外克隆形成率为(0.69±0.02),迁移细胞数为(21.20±2.35),侵袭细胞数为(56.80±5.22),均较阴性对照组显著增加(P<0.05),与阳性对照组体外特性基本一致。但miR200c过表达对增殖能力没有显著的影响。结论寡灶型细胞株稳定上调miR200c后体外克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力均有所提高,且呈现出多灶型细胞株的特性。 展开更多
关键词 mir200c 寡灶转移 多灶转移
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miR 200c-3p CXCR6与乳腺癌患者总生存期无病生存期的相关性研究 被引量：1
7
作者 李珊珊 夏重升 +3 位作者 苏修军 李扬 李雪芹 山长平 《济宁医学院学报》 2019年第5期309-314,共6页
目的探讨miR 200c-3p、CXCR6与乳腺癌患者的总生存期、无病生存期的关系。方法选取2013-2015年在我院接受放化疗的乳腺癌患者120例(三阴VS非三阴乳腺癌各60例),获取该120患者的临床病理资料及术后组织石蜡切片,通过固定组织RNA提取试剂... 目的探讨miR 200c-3p、CXCR6与乳腺癌患者的总生存期、无病生存期的关系。方法选取2013-2015年在我院接受放化疗的乳腺癌患者120例(三阴VS非三阴乳腺癌各60例),获取该120患者的临床病理资料及术后组织石蜡切片,通过固定组织RNA提取试剂盒提取乳腺癌石蜡组织切片中的总RNA,再通过All-inOneTM miRNA定量PCR检测试剂盒检测乳腺癌石蜡组中miR 200c-3p的表达,同时应用免疫组化方法检测肿瘤组织中CXCR6的表达,根据miR-200c-3p及CXCR6不同的表达情况将120例乳腺癌患者分为4组,分析四组患者的生存情况,并分析miR 200c-3p及CXCR6表达高低与乳腺癌患者生存期的关系。结果miR-200c-3p低表达患者与高表达患者的总生存期(P=0.428)及无病生存期(P=0.542)均无差异;CXCR6高表达患者的总生存期差于低表达患者(P=0.006),CXCR6高表达组的无病生存期差于低表达组(P=0.042);四组患者的总生存期存在差异(P=0.022),无病生存期无差异(P=0.160)。两两比较显示CXCR6高表达miR-200c-3p高表达组的总生存期短于CXCR6低表达miR-200c-3p高表达组及CXCR6低表达miR-200c-3p低表达组,P值分别为0.002、0.001。结论乳腺癌患者miR 200c-3p表达与预后无明显关系,CXCR6表达高低与总生存期及无病生存期相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir200c-3p cXcR6 总生存期 无病生存期
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miRNA-200c对卵巢癌细胞侵袭能力影响观察 被引量：11
8
作者 鲁艳明 银铎 +3 位作者 王宁 李翔 李一宁 张淑兰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期732-735,共4页
目的:探讨miRNA-200c的表达对卵巢癌细胞侵袭能力的影响,并初步分析其可能的作用机制。方法:应用Lipofectamine 2000瞬时上调ES-2细胞中miR-200c的表达,并通过荧光定量PCR验证;Transwll侵袭小室检测细胞侵袭能力的变化;生物信息学的方... 目的:探讨miRNA-200c的表达对卵巢癌细胞侵袭能力的影响,并初步分析其可能的作用机制。方法:应用Lipofectamine 2000瞬时上调ES-2细胞中miR-200c的表达,并通过荧光定量PCR验证;Transwll侵袭小室检测细胞侵袭能力的变化;生物信息学的方法预测miR-200c的靶基因,同时荧光素酶报告基因实验验证E盒结合锌指蛋白2(zinc finger E-box bingding homeobox 2,ZEB2)是miR-200c的靶基因;蛋白印迹法检测E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达水平。结果:pre-miR-200c转染ES-2细胞后,转染组miR-200c的表达(4.82±1.73)较对照组(1.00±0.16)明显升高,t=-67.28,P<0.001;上调miR-200c后,转染组(27.70±1.19)与对照组(57.30±2.01)相比,细胞的侵袭能力明显减弱,t=11.17,P<0.001;蛋白印迹法的结果显示,转染组ZEB2的表达水平为0.38±0.015,较对照组的0.66±0.024明显下降,t=94.67,P<0.001。采用生物信息学的方法预测ZEB2是miR-200c的靶基因;且荧光素酶报告实验结果证实,共转染野生型荧光素酶质粒和pre-miR-200c,与其他各组相比,荧光素酶活性明显降低,差异有统计学意义,P<0.001;转染pre-miR-200c后,转染组E-钙黏蛋白的表达(0.75±0.023)较对照组(0.32±0.014)明显增加,t=-97.77,P<0.001,波形蛋白的表达为0.28±0.010,较对照组0.67±0.129明显降低,t=71.64,P<0.001。结论:miR-200c能通过靶向ZEB2抑制人卵巢癌细胞的侵袭能力,其异常表达与卵巢癌细胞的生物学行为密切相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 mir-200c 细胞侵袭 ZEB2
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miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2蛋白的相关性 被引量：11
9
作者 苏纯 李巧云 张薇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第18期3057-3059,共3页
目的:探讨miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2的相关性。方法:选取113例子宫内膜癌组织和癌旁组织标本,40例正常子宫内膜癌组织作为对照组,检测组织中miR-200c表达量,以及ZEB2基因和蛋白表达量,利用反义寡核苷酸技术抑制子宫内膜... 目的:探讨miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2的相关性。方法:选取113例子宫内膜癌组织和癌旁组织标本,40例正常子宫内膜癌组织作为对照组,检测组织中miR-200c表达量,以及ZEB2基因和蛋白表达量,利用反义寡核苷酸技术抑制子宫内膜癌RL95-2细胞株中miR-200c表达,检测其对细胞侵袭力的影响,以及细胞中ZEB2基因和蛋白表达。结果:子宫内膜癌组织中miR-200c表达量、ZEB2基因和蛋白表达量均高于癌旁组织和对照组(P<0.05);反义miR-200c转染组穿膜细胞数少于阴性对照组和脂质体组(P<0.05);反义miR-200c转染组细胞中ZEB2基因和蛋白表达量均低于阴性对照组和脂质体组(P<0.05)。结论 :miR-200c在子宫内膜癌组织中呈高表达,可能是通过调控ZEB2而促进肿瘤细胞的浸润和转移。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 MI R-200c ZEB2 相关性
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胃癌组织TGF-β对miR-200c/141表达影响的研究 被引量：9
10
作者 周欣亮 王玉栋 +3 位作者 张难 赵连梅 施明亮 单保恩 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2017年第8期552-556,共5页
目的 TGF-β能够诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化,促进肿瘤发生侵袭转移。miR-200c/141能够抑制上皮间质转化的发生。但TGF-β在胃癌中的表达情况及其对miR-200c/141表达影响尚不清楚。本研究旨在探讨胃癌组织中TGF-β表达水平与胃癌患者... 目的 TGF-β能够诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化,促进肿瘤发生侵袭转移。miR-200c/141能够抑制上皮间质转化的发生。但TGF-β在胃癌中的表达情况及其对miR-200c/141表达影响尚不清楚。本研究旨在探讨胃癌组织中TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系,及对miR-200c和miR-141表达影响。方法收集河北医科大学第四医院普外科2012-05-01-2013-01-01胃癌根治性手术切除标本64例,采用qRT-PCR技术检测TGF-β、miR-200c及miR-141在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达。分析TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系及与miR-200c和miR-141水平的相关性。TGF-β处理胃癌细胞株SGC-7901,观察其对miR-200c和miR-141表达的影响。结果 TGF-β在胃癌组织中的表达上调率为66.67%,其在胃癌组织中的表达显著高于癌旁非癌组织[Median,Interquartile Range(2.50,2.43:0.84,0.42);P=0.005]。miR-200a、miR-200b、miR-429、miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达下调率分别为53.13%、48.44%、50.00%、78.13%和76.19。miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达显著低于癌旁非癌组织,均P<0.001。miR-200c和miR-141的表达存在正相关关系,r=0.840,P<0.001。TGF-β表达水平与miR-200c和miR-141的表达水平呈显著负相关关系,均P<0.001。TGF-β能够诱导胃癌细胞株SGC-7901中miR-200c和miR-141表达显著降低。TGF-β的表达水平与淋巴结转移情况及脉管瘤栓情况存在显著相关性,与患者性别、年龄、组织学分级、TNM分期、肿瘤侵袭深度和肿瘤远处转移情况无相关性,均P>0.05。结论胃癌组织中表达上调的TGF-β可通过诱导miR-200c和miR-141表达的降低在胃癌的侵袭转移过程中发挥作用。 展开更多
关键词 胃癌 TGF-Β mir-200c mir-141 临床病理特征
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胃癌患者血清miR-200b和miR-200c水平变化及临床意义 被引量：8
11
作者 陈志凯 傅松维 +1 位作者 鲍舟君 李卓栋 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第5期201-203,206,共4页
目的观察胃癌患者血清miR-200b和miR-200c水平变化特点,探讨其临床意义。方法回顾性分析浙江省舟山医院自2012年1月~2014年6月消化内科及胃肠外科收治的84例胃癌患者为研究对象（观察组）,选择30例健康人为对照组。采用qRT-PCR检测所有... 目的观察胃癌患者血清miR-200b和miR-200c水平变化特点,探讨其临床意义。方法回顾性分析浙江省舟山医院自2012年1月~2014年6月消化内科及胃肠外科收治的84例胃癌患者为研究对象（观察组）,选择30例健康人为对照组。采用qRT-PCR检测所有研究对象血清miR-200b和miR-200c水平,比较2组间血清miR-200b和miR-200c水平差异,探讨胃癌患者血清miR-200b和miR-200c水平与其临床及病理特点之间的关系。结果胃癌组血清miR-200b和miR-200c水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。胃癌患者不同年龄、性别、分化程度和浸润深度之间血清miR-200b和miR-200c水平差异无统计学意义;较高临床分期及合并淋巴结转移的患者血清miR-200b和miR-200c水平明显低于较低临床分期和无淋巴结转移者,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。血清miR-200b和miR-200c水平诊断胃癌的AUC分别为0.826（95%CI：0.741~0.911,P〈0.001）和0.856（95%CI：0.778~0.935,P〈0.001）。结论胃癌患者血清miR-200b和miR-200c水平明显降低,并且与临床分期和淋巴结转移密切相关,检测血清miR-200b和miR-200c水平有助于判断胃癌并判断预后。 展开更多
关键词 胃癌 血清 mir-200b mir-200c 临床意义
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MicroRNA-200c通过TGF-β/Smad通路抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原合成 被引量：9
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作者 孙慧娟 蒙喜永 胡纯婷 《中国美容医学》 CAS 2012年第9期1539-1542,共4页
目的:探讨mi croRNA-200c(miR-200c)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成的影响,并阐明其涉及的TGF-β/Smad通路机制。方法:将mi R-200c mi mics用oligofectami脂质体转染经TGF-β1诱导的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,Cell Counting Kit-8(CC... 目的:探讨mi croRNA-200c(miR-200c)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成的影响,并阐明其涉及的TGF-β/Smad通路机制。方法:将mi R-200c mi mics用oligofectami脂质体转染经TGF-β1诱导的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞增殖变化;3H-脯氨酸掺入法测胶原蛋白水平的变化。相关蛋白表达变化和TGF-β1分泌表达变化分别用Western blot和ELISA法检测。结果:mi R-200c明显抑制经TGF-β1诱导的人瘢痕疙瘩纤维细胞的增殖和胶原合成;mi R-200c能明显减低磷酸化Smad2和Smad3的蛋白表达水平及抑制博莱霉素诱导的TGF-β1分泌。结论:miR-200c能明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成,其机制可能与抑制TGF-β/Smad通路相关。 展开更多
关键词 mir-200c 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 转化生长因子-Β1 Smads基因
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血清微小RNA-200C、微小RNA-101、肝肠钙黏蛋白和糖类抗原72-4联合检测对胃癌的诊断价值 被引量：7
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作者 王晓阳 谢爱敏 郎少磊 《安徽医药》 CAS 2021年第4期805-809,共5页
目的探究血清微小RNA-200C(miR-200C)、微小RNA-101(miR-101)、肝肠钙黏蛋白(CDH17)及糖类抗原72-4(CA72-4)联合诊断胃癌的价值。方法选择2017年1月至2019年2月三门峡市中心医院收治的150例胃癌病人及同期收治的50例胃良性疾病病人及50... 目的探究血清微小RNA-200C(miR-200C)、微小RNA-101(miR-101)、肝肠钙黏蛋白(CDH17)及糖类抗原72-4(CA72-4)联合诊断胃癌的价值。方法选择2017年1月至2019年2月三门峡市中心医院收治的150例胃癌病人及同期收治的50例胃良性疾病病人及50例健康体检者作为研究对象,分别纳入胃癌组、胃良性疾病组及对照组,采用实时荧光定量-反转录聚合酶链式反应检测血清miR-200C、miR-101水平,采用酶联免疫吸附法、电化学发光免疫分析法检测血清CDH17及CA72-4浓度,分析各指标与胃癌临床参数的关系及其诊断价值。结果胃癌组病人血清miR-200C[(1.10±0.22)(0.68±0.15)、(0.95±0.20)]、miR-101[1.45(0.29,2.01)、0.30(0.10,0.65)、1.32(0.33,1.85)]表达水平显著低于良性组及对照组,CDH17[38.59(18.59,68.66)、88.12(33.25,152.12)、41.74(25.14,75.45)]、CA72-4[5.22(3.09,15.14)、17.15(6.71,32.12)、6.42(2.71,17.63)]水平显著高于良性组及对照组(P<0.05)。血清miR-200C、miR-101、CDH17与胃癌病人浸润深度、淋巴结转移、脉管浸润、临床分期相关(P<0.05);CA72-4与胃癌病人淋巴结转移相关(P<0.05)。miR-200C、miR-101、CDH17及CA72-4诊断胃癌的曲线下面积分别为0.899、0.904、0.871、0.793;其中miR-101诊断曲线下面积最大。miR-200C、miR-101、CDH17分别联合CA72-4诊断胃癌的曲线下面积为0.956、0.947、0.961,四种联合诊断曲线下面积最大,其曲线下面积为0.995。结论 miR-200C、miR-101、CDH17、CA72-4对胃癌有一定诊断效能,相比于单项检测常见肿瘤标志物CA72-4,miR-200C、miR-101、CDH17诊断价值更高,临床上可通过联合多种指标共同诊断以提高诊断效能。 展开更多
关键词 胃肿瘤 微RNAS 钙黏着糖蛋白类 mir-200c mir-101 肝肠钙黏蛋白 肿瘤标志物 诊断
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miR-200c通过靶向下调FOXC1逆转宫颈癌细胞顺铂耐药性的机制研究 被引量：8
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作者 熊汉真 谭学贤 +3 位作者 刘少颜 罗秋萍 李雨濛 李玲君 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2019年第7期486-489,494,共5页
目的:探讨miR-200c通过调控叉头框转录因子C1(FOXC1)影响宫颈癌细胞对顺铂敏感性的机制研究。方法:qRT-PCR法检测miR-200c在宫颈癌顺铂耐药组织和细胞中的表达水平。CCK-8和Annexin V-FITC/PI双染流式术检测过表达miR-200c对宫颈癌细胞... 目的:探讨miR-200c通过调控叉头框转录因子C1(FOXC1)影响宫颈癌细胞对顺铂敏感性的机制研究。方法:qRT-PCR法检测miR-200c在宫颈癌顺铂耐药组织和细胞中的表达水平。CCK-8和Annexin V-FITC/PI双染流式术检测过表达miR-200c对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响;双荧光素酶报告基因验证miR-200c与FOXC1的靶向作用关系;进一步实验,探讨miR-200c通过靶向FOXC1对HeLa/DDP细胞恶性生物学行为的影响。结果:miR-200c在宫颈癌耐药组织和HeLa/DDP细胞中均低表达。过表达miR-200c可显著抑制HeLa/DDP细胞增殖和促进细胞凋亡。双荧光素酶报告基因证实,miR-200c靶向作用FOXC1并下调其表达水平。过表达miR-200c通过靶向下调FOXC1进而显著抑制HeLa/DDP细胞增殖和诱导细胞凋亡,从而增强HeLa/DDP细胞对顺铂的敏感性。结论:miR-200c通过下调FOXC1表达增强宫颈癌HeLa/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 宫颈癌 顺铂 mir-200c FOXc1 耐药性
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miR-200c通过靶向细胞能量代谢和多种信号通路调控三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为 被引量：8
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作者 杨月 陈龙 +1 位作者 方婷 章丹丹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期9-18,共10页
目的:考察miR-200c对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖、凋亡和迁移的影响及其代谢相关的分子机制。方法:以过表达miR-200c的MDA-MB-231(miR-200c-231)细胞、无过表达miR-200c的阴性对照细胞miR-N... 目的:考察miR-200c对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖、凋亡和迁移的影响及其代谢相关的分子机制。方法:以过表达miR-200c的MDA-MB-231(miR-200c-231)细胞、无过表达miR-200c的阴性对照细胞miR-NC-231及其移植瘤裸鼠模型为研究对象,qPCR检测细胞和移植瘤组织中miR-200c及其他相关基因的表达水平,免疫组化技术分析瘤组织中Ki67阳性细胞数量,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blotting检测细胞及组织中增殖、迁移和代谢相关信号通路多种蛋白的表达,Seahorse能量代谢检测仪检测细胞的基础耗氧率(oxygen comsumpition rate,OCR)、细胞外酸度(extracellular acidification rate,ECAR)和代谢表型变化,液相质谱联用技术检测细胞中代谢产物的变化。结果:miR-200c-231细胞及其移植瘤组织中miR-200c表达较miR-NC-231细胞显著增加(P<0.05或P<0.01),miR-200c-231移植瘤质量和体积均显著下降、瘤组织中Ki67阳性细胞数明显减少(P<0.01),miR-200c-231细胞的迁移能力下降、细胞凋亡率提高(均P<0.01)。同时伴随着ZEB1/2、Vimentin、cyclinD1的表达下调及cleaved PARP表达的提高(P<0.05或P<0.01),STAT1/3和NF-κB的磷酸化水平降低(均P<0.05)而cAMP通路蛋白的磷酸化水平提高(P<0.05)。miR-200c-231细胞的OCR提高和ECAR降低、色氨酸2,3-加二氧酶(tryptophan-2,3-dioxygenase 2,TDO2)表达下降(P<0.05或P<0.01),细胞内10种抗肿瘤代谢物质含量提高(P<0.05或P<0.01)。结论:miR-200c靶向TDO2调控TNBC细胞MDA-MB-231胞内抗肿瘤代谢产物水平、促使细胞代谢类型由依赖糖酵解为主向有氧呼吸类型转化,并失活STAT3和NF-κB通路而激活c AMP通路,从而影响MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 mir-200c 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 增殖 迁移 凋亡 能量代谢 STAT3信号通路
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血清miR-200C单独或联合CEA、CA-199和CA-724检测对胃癌患者的诊断价值 被引量：8
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作者 陈昱倩 孙蓉 吴昊 《临床和实验医学杂志》 2021年第22期2399-2402,共4页
目的探讨血清miR-200C、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-199(CA-199)和糖类抗原-724(CA-724)对胃癌患者的单一或联合检测的诊断价值。方法回顾性选择2018年6月至2020年11月南京中医药大学附属南京市中西医结合医院确诊并收治的胃癌患者83例为... 目的探讨血清miR-200C、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-199(CA-199)和糖类抗原-724(CA-724)对胃癌患者的单一或联合检测的诊断价值。方法回顾性选择2018年6月至2020年11月南京中医药大学附属南京市中西医结合医院确诊并收治的胃癌患者83例为研究组,另选择同期来院进行健康体检的正常人51例作为对照组。分别于胃癌患者手术当天、术后第7天、健康受试者体检当天早晨采抽取5 mL空腹静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测两组受试者血清中miR-200C相对表达水平,采用电化学发光免疫分析仪测定CEA、CA-199和CA-724水平,分析胃癌患者术前血清中miR-200C表达水平与病理特征间的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线判断各因子对胃癌的诊断价值。结果研究组胃癌患者血清中miR-200C相对表达水平(0.668±0.191)明显低于对照组(1.106±0.237),差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移为N_(2)~N_(3)期的胃癌患者血清中miR-200C表达水平明显低于N_(0)~N_(1)期的患者,TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者血清中miR-200C表达水平明显低于Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。术前胃癌患者血清中miR-200C相对表达水平(0.668±0.191)明显低于术后胃癌患者(0.843±0.207),差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-200C检测胃癌的曲线下面积(AUC)为0.772,灵敏度及特异度分别为79.01%和68.63%;CEA检测胃癌的AUC为0.678,灵敏度及特异度分别为36.14%和84.31%;CA-199检测胃癌的AUC为0.641,灵敏度及特异度分别为37.35%和82.35%;CA-724检测胃癌的AUC为0.615,灵敏度及特异度分别为38.55%和80.39%;miR-200C检测胃癌的AUC明显高于CEA、CA-199和CA-724(P<0.05);四者联合检测胃癌的AUC为0.905,灵敏度及特异度分别为91.57%和74.51%。结论miR-200C在胃癌患者血清中的表达水平呈下降趋势;血清miR-200C水平与患者淋巴结转移及TNM分期有关;血清miR-200C作为胃癌诊断标志 展开更多
关键词 胃癌 mir-200c 癌胚抗原 糖类抗原 诊断价值
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复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达及作用机制研究 被引量：7
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作者 卢恒聪 李镇宇 +1 位作者 邓敏峰 曹志恺 《中国医学创新》 CAS 2020年第12期1-5,共5页
目的:探讨各级别及复发胶质瘤中miRNA-200c(miR-200c)的表达及可能机制。方法:收集本院收治的43例胶质瘤手术患者肿瘤切除标本,按照组织学分级不同将43例胶质瘤手术患者分为低级别胶质瘤组15例、高级别胶质瘤组22例、复发胶质瘤组6例,... 目的:探讨各级别及复发胶质瘤中miRNA-200c(miR-200c)的表达及可能机制。方法:收集本院收治的43例胶质瘤手术患者肿瘤切除标本,按照组织学分级不同将43例胶质瘤手术患者分为低级别胶质瘤组15例、高级别胶质瘤组22例、复发胶质瘤组6例,另选取10例正常脑组织标本为对照组。使用RT-PCR检测各级别初发胶质瘤及复发胶质瘤患者肿瘤组织中miR-200c的表达水平,通过Western blotting检测肿瘤干性指标(CD133、Nestin)及上皮间充质转化(EMT)标志物(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)在各组织中的表达。结果:各组miR-200c表达水平随着胶质瘤级别升高逐渐降低,两两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);各组Nestin表达水平随着胶质瘤级别升高逐渐升高,E-cadherin表达水平随着胶质瘤级别升高逐渐降低,两两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);高级别胶质瘤组、复发胶质瘤组CD133表达水平均较对照组、低级别胶质瘤组显著升高(P<0.05);高级别胶质瘤组、复发胶质瘤组N-cadherin、Vimentin表达水平均较对照组显著升高(P<0.05),且复发胶质瘤组N-cadherin、Vimentin表达水平均较低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组显著升高(P<0.05)。结论:miR-200c在复发及高级别胶质瘤中表达下降,其缺失可能诱导EMT使肿瘤干性增加,可作为高级别及复发胶质瘤治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 mir-200c 复发胶质瘤 上皮间充质转化 胶质瘤肿瘤干细胞
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miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞 被引量：1
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作者 徐永良 刘贵波 +3 位作者 马英 李明秋 潘艳明 张大伟 《智慧健康》 2023年第23期130-133,共4页
目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结... 目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结直肠癌细胞增殖活性的情况。结果培养1d、2d、3d,阴性对照模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b模拟物、miR-200c模拟物、miR-200b/c模拟物(P<0.05),阴性对照抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂、miR-200b/c抑制剂(P<0.05),miR-200b模拟物、miR-200c模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b/c模拟物(P<0.05),miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b/c抑制剂(P<0.05)。结论miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖,可以作为潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 细胞增殖 mir-200b mir-200c 靶向调节 肝细胞生长因子 机制
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基因芯片法检测血清中多组miRNAs对胰腺癌的诊断价值 被引量：2
19
作者 易楠 金丹丹 +5 位作者 纪易斐 江枫 鲍柏军 肖明兵 陈宇翔 王志炜 《中国临床研究》 CAS 2022年第11期1498-1502,共5页
目的探讨血清miR-212、miR-21、miR-193b、miR-200c和miR-181d对胰腺癌的诊断价值。方法收集2018年7月至2021年8月南通大学附属医院43例胰腺炎患者(胰腺炎组),76例胰腺癌患者(胰腺癌组)及59例正常人(正常组)的血清,利用自建基因芯片法... 目的探讨血清miR-212、miR-21、miR-193b、miR-200c和miR-181d对胰腺癌的诊断价值。方法收集2018年7月至2021年8月南通大学附属医院43例胰腺炎患者(胰腺炎组),76例胰腺癌患者(胰腺癌组)及59例正常人(正常组)的血清,利用自建基因芯片法检测研究对象血清miR-212、miR-21、miR-193b、miR-200c和miR-181d水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析5种miRNAs单独及联合诊断胰腺癌的效能。结果相较于正常组及胰腺炎组,胰腺癌组5种miRNA水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,5种miRNA均有较高的ROC曲线下面积(AUC),根据各自最佳临界值,miR-212、miR-21、miR-193b、miR-200c和miR-181d对胰腺癌诊断的敏感度分别为68.40%、67.11%、61.80%、69.70%和68.40%,特异度分别为86.30%、85.29%、74.50%、87.30%和88.20%,其中miR-200c敏感度最高,miR-181d特异度最高。两两联合检测结果显示,灵敏度最高的是miR-21/miR-200c和miR-21/miR-181d(92.11%),特异度最高的是miR-200c/miR-181d(79.41%)。结论利用自建基因芯片检测提示,miR-212、miR-21、miR-193b、miR-200c和miR-181d在胰腺癌患者血清中水平升高,其可作为胰腺癌诊断的血清标记物,联合检测可提高胰腺癌的诊断灵敏度。 展开更多
关键词 胰腺癌 基因芯片 微小核糖核酸 mir-212 mir-21 mir-193b mir-200c mir-181d
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miR-200c促进肝星状细胞活化诱导肝纤维化的机制 被引量：6
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作者 马腾飞 华赟鹏 +2 位作者 李巧 蔡秀琴 马超峰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期497-501,共5页
【目的】探讨mi R-200c在肝星状细胞(HSC)活化、增殖、迁移及促肝纤维化中的作用。【方法】慢病毒转染的方法构建过表达mi R-200c的稳定细胞株(LX2-200c)和空质粒对照组(LX2-nc),RT-PCR检测LX2-200c和LX2-nc细胞上mi R-200c和Ⅰ型胶原... 【目的】探讨mi R-200c在肝星状细胞(HSC)活化、增殖、迁移及促肝纤维化中的作用。【方法】慢病毒转染的方法构建过表达mi R-200c的稳定细胞株(LX2-200c)和空质粒对照组(LX2-nc),RT-PCR检测LX2-200c和LX2-nc细胞上mi R-200c和Ⅰ型胶原蛋白的表达,Western Blot检测LX2-200c和LX2-nc细胞的活化标志分子α-SMA和Vimentin的变化,CCK-8实验检测增殖情况,划痕实验检测迁移情况。【结果】野生型LX2细胞中mi R-200c呈低表达,mi R-200c的过表达促进了HSC上α-SMA和Vimentin表达的增加,并使HSC的增殖和迁移能力增强,另外,ECM重要组成成分Ⅰ型胶原蛋白的表达也显著增加(P=0.0031)。【结论】mi R-200c可以促进HSC的活化、增殖、迁移以及ECM的分泌,进而参与了肝纤维化的过程。 展开更多
关键词 肝星状细胞 mir-200c 肝纤维化
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