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毛竹miR164b前体的克隆及其在叶形态建成中的功能分析 被引量:3
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作者 王丽丽 李利超 +2 位作者 孙化雨 赵韩生 高志民 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期551-557,共7页
microRNA(miRNA)参与植物多种生理代谢过程,在调控植物形态建成中发挥着重要作用。miR164作为植物特有的miRNA,其主要的靶基因是NAC转录因子,参与调控植物茎、叶顶端分生组织的建立、器官的分化和植株衰老等过程。本研究以毛竹(Phyllost... microRNA(miRNA)参与植物多种生理代谢过程,在调控植物形态建成中发挥着重要作用。miR164作为植物特有的miRNA,其主要的靶基因是NAC转录因子,参与调控植物茎、叶顶端分生组织的建立、器官的分化和植株衰老等过程。本研究以毛竹(Phyllostachys edulis(Carr.)Lehaie)为材料,从中分离出miR164b的前体序列(82 bp),二级结构分析结果发现该前体序列能够形成稳定的茎环结构,其成熟序列(21 bp)产生于茎环结构5'端的臂上,且碱基具有较高的保守性。本研究还构建了由Ca MV 35S启动,包含毛竹miR164b前体序列的植物表达载体,并转化野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh),获得了转基因植株。结果表明,转基因植株生长瘦弱,莲座叶数量明显减少,叶片变小且叶片边缘锯齿减少,更加光滑。实时定量PCR分析结果显示,转基因拟南芥中毛竹miR164b的表达量极显著上升,而拟南芥内源靶基因CUC1与CUC2的表达量极显著下降。表明毛竹miR164b通过调节CUC1和CUC2的表达来参与植物叶形态建成过程。研究结果可为利用miRNA开展竹子分子育种提供参考。 展开更多
关键词 毛竹 mir164b 前体 叶形态建成
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火龙果miR164b-NAC调控关系在非生物胁迫下的应答作用 被引量:1
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作者 余欢欢 杨鵾 +2 位作者 沈天娇 侯黔东 文晓鹏 《生物技术》 CAS 2021年第3期209-216,共8页
[目的]探究火龙果中miR164b及其靶基因NAC在应答非生物胁迫下的表达模式和调控机制。[方法]利用PCR技术克隆hpo-miR164b前体序列及HpNAC序列。采用在线网站对hpo-miR164b、HpNAC进行生物信息学分析,运用qRT-PCR方法探究hpo-miR164b及Hp... [目的]探究火龙果中miR164b及其靶基因NAC在应答非生物胁迫下的表达模式和调控机制。[方法]利用PCR技术克隆hpo-miR164b前体序列及HpNAC序列。采用在线网站对hpo-miR164b、HpNAC进行生物信息学分析,运用qRT-PCR方法探究hpo-miR164b及HpNAC在高温42℃、低温4℃、100 mmol/L NaCl及0.38 mmol/L ABA等非生物胁迫下的转录变化规律。[结果]获得长度为334 bp的hpo-MIR164b茎环前体,该序列可形成典型的茎环结构,hpomiR164b和hpo-miR164b*位于两个相反臂上;HpNAC基因的开放阅读框为1092 bp,编码363个氨基酸,保守结构域NAM位于ORF的49-423 bp位置。qRT-PCR结果表明,在高温和高盐处理下,hpo-miR164b均上调表达;在低温处理下,hpo-miR164b先下调后上调;而在ABA处理下,hpo-miR164b上调表达。HpNAC的表达趋势则与hpo-miR164b相反。[结论]hpo-miR164对HpNAC基因具有负调控作用,且miR164-NAC在火龙果应答非生物逆境过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 火龙果 mir164 HpNAC 非生物胁迫 表达分析
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