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LncRNA SNHG20通过miR-520f-3p调控胆管癌细胞增殖和侵袭 被引量:8
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作者 关沧海 刘浪 +3 位作者 史武江 王健岗 钟翔宇 姜兴明 《中国癌症防治杂志》 CAS 2021年第4期389-394,共6页
目的探讨lncRNA SNHG20和miR-520f-3p对胆管癌细胞增殖和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法收集2012年3月至2014年3月在哈尔滨医科大学附属第二医院手术切除的20例胆管癌患者肿瘤组织及相应癌旁组织,利用脂质体转染技术分别将si-SNHG2... 目的探讨lncRNA SNHG20和miR-520f-3p对胆管癌细胞增殖和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法收集2012年3月至2014年3月在哈尔滨医科大学附属第二医院手术切除的20例胆管癌患者肿瘤组织及相应癌旁组织,利用脂质体转染技术分别将si-SNHG20、miR-520f-3p mimics和miR-520f-3p inhibitor及其对照质粒转染至胆管癌CCLP-1细胞,构建过表达和沉默细胞模型。利用qRT-PCR分别检测胆管癌组织和相应癌旁正常组织,以及胆管癌细胞系CCLP-1、QBC939、RBE、TFK-1和正常胆管上皮细胞系HIBEC中SNHG20与miR-520f-3p的表达水平。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证SNHG20与miR-520f-3p的靶向关系。结果分别与癌旁组织和正常胆管上皮细胞系HIBEC比较,SNHG20在胆管癌组织和胆管癌细胞系CCLP-1、QBC939、RBE、TFK-1中的表达升高(P<0.05),而miR-520f-3p表达降低(P<0.05)。与si-NC组比较,敲低SNHG20后CCLP-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。SNHG20可以靶向作用并调控miR-520f-3p的表达,敲低miR-520f-3p能逆转下调SNHG20对CCLP-1细胞增殖和侵袭的抑制作用(t=10.533,P=0.002;t=8.683,P=0.037)。结论LncRNA SNHG20能靶向作用于miR-520f-3p,进而调控胆管癌细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胆管癌 长链非编码RNA SNHG20 mir-520f-3p 增殖 迁移 侵袭
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miR-520f-3p靶向LAMA3对结直肠癌细胞增殖、迁移的影响
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作者 苏雪梅 钟平玉 孙银平 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第2期475-480,共6页
目的探讨miR-520f-3p靶向层黏连蛋白(LAMA)3对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测病理组织样本、正常结直肠细胞FHC及CRC细胞SW480、LOVO、HCT116、HT29中miR-520f-3p表达;Western... 目的探讨miR-520f-3p靶向层黏连蛋白(LAMA)3对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测病理组织样本、正常结直肠细胞FHC及CRC细胞SW480、LOVO、HCT116、HT29中miR-520f-3p表达;Western印迹检测病理组织样本中LAMA3蛋白表达。将对数生长期的LOVO细胞分为对照组、inhibitor NC组、miR-520f-3p inhibitor组、mimics NC组、miR-520f-3p mimics组、miR-520f-3p mimics+pcDNA组、miR-520f-3p mimics+pcDNA-LAMA3组;qRT-PCR检测各组细胞中miR-520f-3p表达;CCK-8法检测各组细胞增殖;划痕实验检测各组细胞迁移;Western印迹检测各组细胞中LAMA3、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达;荧光素酶报告基因实验检测miR-520f-3p与LAMA3的靶向关系;采用裸鼠皮下注射上述LOVO细胞以构建裸鼠体内成瘤模型,分为对照组、inhibitor NC组、miR-520f-3p inhibitor组、mimics NC组、miR-520f-3p mimics组、miR-520f-3p mimics+pcDNA组、miR-520f-3p mimics+pcDNA-LAMA3组,注射3 w后处死裸鼠,称量肿瘤质量。结果miR-520f-3p在CRC组织和SW480、LOVO、HCT116、HT29细胞中低表达,且在LOVO细胞中表达量最低,差异有统计学意义(P<0.05),因此,选用LOVO细胞为研究对象;与对照组、inhibitor NC组比较,miR-520f-3p inhibitor组miR-520f-3p表达显著降低,OD450值(24、48 h)、划痕愈合率、LAMA3、PCNA、CyclinD1、MMP-2蛋白表达及裸鼠体内肿瘤质量显著升高(P<0.05);与对照组比较,miR-520f-3p mimics组LOVO细胞中miR-520f-3p表达水平显著升高,OD450值(24、48 h)、划痕愈合率、LAMA3、PCNA、CyclinD1、MMP-2蛋白表达及裸鼠体内肿瘤质量显著降低(P<0.05);与miR-520f-3p mimics组比较,miR-520f-3p mimics+pcDNA-LAMA3组LOVO细胞中miR-520f-3p表达水平差异无统计学意义(P>0.05),OD450值(24、48 h)、划痕愈合率、LAMA3、PCNA、CyclinD1、MMP-2蛋白表达及裸鼠体内肿瘤质量显著升高(P<0.05)。� 展开更多
关键词 mir-520f-3p 层黏连蛋白3 结直肠癌 细胞增殖 细胞迁移
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MiR-520f-3p inhibits epithelial-mesenchymal transition of colorectal cancer cells by targeting Yes-associated protein 1 被引量:1
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作者 LIJUN JIANG WENMIN JI +2 位作者 YAJIE GONG JIAJUN LI JINCHUN LIU 《BIOCELL》 SCIE 2023年第8期1803-1810,共8页
Background:Colorectal cancer(CRC)is one of the most common malignancies.Early diagnosis is the key to effective treatment of CRC.Since microRNAs(miRNAs)can be used as biomarkers of CRC,the objective of this work was t... Background:Colorectal cancer(CRC)is one of the most common malignancies.Early diagnosis is the key to effective treatment of CRC.Since microRNAs(miRNAs)can be used as biomarkers of CRC,the objective of this work was to examine the effect of miR-520f-3p,which targets YAP1(Yes-associated protein 1),on the ability of CRC cells to proliferate,invade,migrate,and undergo epithelial-mesenchymal transition(EMT).Methods:A miR-520f-3p mimic was used to overexpress miR-520f-3p in HT29 cells.To establish the tumor-bearing mouse model,transfected HT29 cells were subcutaneously implanted into BALB/c-nu nude mice,and YAP1 and miR-520f-3p levels were determined using qRT‒PCR.The viability,invasion ability,and migration ability of cells were evaluated by CCK-8,Transwell,and wound healing assays.Apoptosis was detected by flow cytometry and TUNEL assays.The regulatory link between miR-520f-3p and the YAP1 gene was examined by dual-luciferase reporter assay.Tumor tissues with positive Ki-67 expression were identified by immunohistochemistry.Vimentin,E-cadherin,and YAP1 expression were evaluated by western blotting.Results:MiR-520f-3p overexpression could inhibit proliferation,invasion,migration,and EMT and induce apoptosis in HT29 cells.YAP1 was found as a target of miR-520f-3p.The inhibitory effects of miR-520f-3p on proliferation,invasion,migration,and EMT may be reversed by overexpressing YAP1.In tumor-bearing mice,miR-520f-3p overexpression reduced the Ki-67 level,increased apoptosis,and prevented tumor development and spread.Conclusion:By targeting YAP1,miR-520f-3p may be capable of suppressing CRC cell proliferation,invasion,migration,and EMT,providing a novel therapeutic target for the disease. 展开更多
关键词 Colorectal cancer Epithelial interstitial transformation mir-520f-3p YAp1
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miR-520f-3p靶向MCL1抑制结肠癌细胞生长及移植瘤发生 被引量:3
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作者 陶正贵 杜静虎 +3 位作者 田葵 王东华 胡凤琪 陈满宇 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期3526-3532,共7页
目的探讨miR-520f-3p对结肠癌细胞生长及移植瘤发展的作用及机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠癌组织和细胞中miR-520f-3p的mRNA表达。将miR-NC、miR-520f-3p mimic、miR-520f-3p inhibitor质粒分别转染进入HT-29细... 目的探讨miR-520f-3p对结肠癌细胞生长及移植瘤发展的作用及机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠癌组织和细胞中miR-520f-3p的mRNA表达。将miR-NC、miR-520f-3p mimic、miR-520f-3p inhibitor质粒分别转染进入HT-29细胞,克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式检测细胞凋亡率,Western印迹检测Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、cleaved caspase-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。将裸鼠分为Control组、miR-NC组、miR-520f-3p mimic组、miR-520f-3p inhibitor组,在每只裸鼠左腋下皮下注射各转染的结肠癌HT-29细胞,30 d后处死。观察移植瘤体积并测定其重量,TUNEL检测细胞凋亡率,免疫组化检测Ki67阳性表达水平,Western印迹检测Ki67、PCNA、caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。双荧光素酶报告检测靶向关系,Western印迹检测髓样细胞白血病蛋白(MCL)1蛋白表达水平。将miR-520f-3p mimic与pc-NC或pc-MCL1质粒联合转染进入HT-29细胞,克隆形成实验检测细胞生长能力,流式检测细胞凋亡率,Western印迹检测Ki67、PCNA、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果与正常结肠组织和细胞相比,结肠癌组织和细胞中miR-520f-3p mRNA表达显著下调(P<0.01),选取HT-29细胞做后续实验。与Control组相比,miR-520f-3p mimic组HT-29克隆细胞数目显著减少,细胞凋亡率显著增加,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著下调,cleaved caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著上调(均P<0.01);miR-520f-3p inhibitor组HT-29克隆细胞数目显著增加,细胞凋亡率显著减少,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著上调,cleaved caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著下调(均P<0.01)。与Control组相比,miR-520f-3p mimic组HT-29移植瘤重量和体积显著减少,细胞凋亡率显著增加,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著下调,cleaved caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著上调(均P<0.01);miR-520f-3p inhibitor组HT-29移植瘤重量、体� 展开更多
关键词 mir-520f-3p 髓样细胞白血病蛋白(MCL)1 结肠癌 移植瘤 增殖 凋亡
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MiR-520f-3p靶向SOX9抑制结肠癌的恶性进展
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作者 许鸣超 侯鹏飞 张令巧 《湖北科技学院学报(医学版)》 2021年第6期491-495,F0003,共6页
目的探究miR-520f-3p与SOX9之间的调控关系及其影响结肠癌细胞恶性进展的分子机制。方法qRT-PCR检测细胞中miR-520f-3p和SOX9 mRNA的表达水平。Western blot检测结肠癌细胞中SOX9蛋白的表达水平。利用CCK8实验、细胞划痕实验以及Transw... 目的探究miR-520f-3p与SOX9之间的调控关系及其影响结肠癌细胞恶性进展的分子机制。方法qRT-PCR检测细胞中miR-520f-3p和SOX9 mRNA的表达水平。Western blot检测结肠癌细胞中SOX9蛋白的表达水平。利用CCK8实验、细胞划痕实验以及Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果miR-520f-3p在结肠癌细胞中的表达显著下调,SOX9的表达显著上调,两者具有靶向结合关系。上调miR-520f-3p抑制了SOX9的表达水平。miR-520f-3p抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,同时过表达miR-520f-3p和SOX9后,结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力得到恢复。结论miR-520f-3p靶向SOX9抑制结肠癌细胞的恶性进展,miR-520f-3p很可能是治疗结肠癌的新靶点。 展开更多
关键词 mir-520f-3p SOX9 结肠癌 增殖 迁移 侵袭
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