背景Circ_0044516在胃癌中高表达,抑制circ_0044516能促进胃癌细胞增殖和诱导凋亡.生物学软件预测miR-516a-5p与circ_0044516相互结合,miR-516a-5p在非小细胞肺癌低表达,但是在胃癌细胞研究暂不清楚.本研究主要探究circ_0044516靶向调控...背景Circ_0044516在胃癌中高表达,抑制circ_0044516能促进胃癌细胞增殖和诱导凋亡.生物学软件预测miR-516a-5p与circ_0044516相互结合,miR-516a-5p在非小细胞肺癌低表达,但是在胃癌细胞研究暂不清楚.本研究主要探究circ_0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.目的探究circ_0044516是否靶向调控miR-516a-5p及对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法qRT-PCR实验检测胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞SNU-16、HGC-27中circ_0044516、miR-516a-5p表达水平.将HGC-27细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circ_0044516组(转染si-circ_0044516)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-516a-5p组(转染miR-516a-5p)、si-circ_0044516+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0044516和anti-miR-NC)、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p组(共转染si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p).定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)实验检测circ_0044516和miR-516a-5p表达水平;噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验检测细胞增殖;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测p21、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0044516和miR-516a-5p靶向关系.结果与胃上皮细胞GES-1相比,circ_0044516在胃癌细胞SNU-16、HGC-27中表达水平增加,miR-516a-5p表达水平降低.沉默circ_0044516或过表达miR-516a-5p降低胃癌细胞存活率、迁移细胞数,增加细胞凋亡率,增加p21、Bax蛋白表达,降低Bcl-2、MMP2蛋白表达.circ_0044516靶向负调控miR-516a-5p的表达,抑制miR-516a-5p可以部分回复沉默circ_0044516对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.结论Circ_0044516可通过靶向负调控miR-516a-5p抑制胃癌细胞增殖和迁移,并诱导细胞凋亡.展开更多
文摘背景Circ_0044516在胃癌中高表达,抑制circ_0044516能促进胃癌细胞增殖和诱导凋亡.生物学软件预测miR-516a-5p与circ_0044516相互结合,miR-516a-5p在非小细胞肺癌低表达,但是在胃癌细胞研究暂不清楚.本研究主要探究circ_0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.目的探究circ_0044516是否靶向调控miR-516a-5p及对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法qRT-PCR实验检测胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞SNU-16、HGC-27中circ_0044516、miR-516a-5p表达水平.将HGC-27细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circ_0044516组(转染si-circ_0044516)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-516a-5p组(转染miR-516a-5p)、si-circ_0044516+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0044516和anti-miR-NC)、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p组(共转染si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p).定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)实验检测circ_0044516和miR-516a-5p表达水平;噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验检测细胞增殖;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测p21、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0044516和miR-516a-5p靶向关系.结果与胃上皮细胞GES-1相比,circ_0044516在胃癌细胞SNU-16、HGC-27中表达水平增加,miR-516a-5p表达水平降低.沉默circ_0044516或过表达miR-516a-5p降低胃癌细胞存活率、迁移细胞数,增加细胞凋亡率,增加p21、Bax蛋白表达,降低Bcl-2、MMP2蛋白表达.circ_0044516靶向负调控miR-516a-5p的表达,抑制miR-516a-5p可以部分回复沉默circ_0044516对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.结论Circ_0044516可通过靶向负调控miR-516a-5p抑制胃癌细胞增殖和迁移,并诱导细胞凋亡.
