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MiR-5047在乳腺癌细胞增殖迁移中的作用及表达调控 被引量：4
1
作者 路玉祥 李元 +4 位作者 方丹丹 王学博 杨万鹏 楚元奎 杨华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期9-17,共9页
探讨miR-5047在乳腺癌细胞中的表达及其在乳腺癌细胞增殖和迁移中的作用,并明确地西他滨在miR-5047表达调控中的作用。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人乳腺癌细胞系和正常乳腺上皮细胞MCF10A中miR-5047的表达水平;将miR-5047模拟物(... 探讨miR-5047在乳腺癌细胞中的表达及其在乳腺癌细胞增殖和迁移中的作用,并明确地西他滨在miR-5047表达调控中的作用。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人乳腺癌细胞系和正常乳腺上皮细胞MCF10A中miR-5047的表达水平;将miR-5047模拟物(mimic),阴性对照(NC)分别转染至MDA-MB-231和MCF7细胞,经平板克隆实验、MTT实验、划痕愈合实验检测乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,通过qRT-PCR和Western blot检测相关基因表达及蛋白水平。使用浓度5μmol/L和10μmol/L的地西他滨分别处理MDA-MB-231和MCF-7细胞,经qRT-PCR检测不同浓度和处理时间条件下地西他滨对miR-5047表达的影响。同时,通过形态观察和Western blot检测地西他滨对乳腺癌细胞上皮间质转化的影响。与正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,miR-5047在乳腺癌细胞中表达均显著下调。miR-5047过表达可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,促进上皮细胞标志物E-cadherin的表达,抑制间质细胞标志物Vimentin的表达。不同浓度地西他滨处理MDA-MB-231和MCF7细胞后,miR-5047表达均增强,且10μmol/L作用48 h效果最显著。地西他滨可诱导MDA-MB-231细胞向上皮样转变。miR-5047在乳腺癌细胞系中表达显著下调,过表达miR-5047可抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,地西他滨可促进乳腺癌细胞中miR-5047的表达,并诱导细胞向上皮样转变。 展开更多
关键词 mir-5047 乳腺癌 地西他滨 细胞增殖/迁移 上皮间质转化
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地西他滨逆转人乳腺癌细胞中miR-5047基因甲基化状态的研究
2
作者 楚元奎 路玉祥 +4 位作者 方丹丹 杨丽 李元 郭乐 杨华 《宁夏医学杂志》 CAS 2021年第4期289-291,I0002,共4页
目的探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047表达及其启动子甲基化状态的影响。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR法分别检测人乳腺正常MCF-10A细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中miR-5047的表达水平及miR-5047启动子区的甲基... 目的探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047表达及其启动子甲基化状态的影响。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR法分别检测人乳腺正常MCF-10A细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中miR-5047的表达水平及miR-5047启动子区的甲基化状态。用5μmol/L和10μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231细胞,MSP法检测miR-5047启动子区的甲基化状态,qRT-PCR法检测miR-5047的表达。结果与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A相比,乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中miR-5047呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231细胞中miR-5047启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047表达水平则显著升高。结论地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047的表达。 展开更多
关键词 乳腺癌 地西他滨 mir-5047 去甲基化 甲基化特异性PCR
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