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南蛇藤素对脂多糖诱导的人牙周膜干细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响
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作者 刘洁 王文洁 常颖 《北京口腔医学》 CAS 2024年第1期11-15,共5页
目的 探讨南蛇藤素(Cel)对微小RNA(miR)-223-3p/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖、凋亡和炎症反应的影响。方法 分别给予不同浓度的Cel(1、2、4μmol/L)培养经1μg/ml LPS... 目的 探讨南蛇藤素(Cel)对微小RNA(miR)-223-3p/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖、凋亡和炎症反应的影响。方法 分别给予不同浓度的Cel(1、2、4μmol/L)培养经1μg/ml LPS诱导的hPDLSCs,以未处理的hPDLSCs作为对照组。采用MTT法检测细胞存活率,选取合适的Cel浓度用于后续实验研究。将对数生长期hPDLSCs分为对照组、LPS组、Cel组(2μmol/L),采用LipofectamineTM2000转染试剂盒在Cel组的基础上转染细胞miR-223-3p inhibitor及阴性对照(inhibitor NC),并命名为Cel+inhibitor NC组、Cel+miR-223-3p inhibitor组。分别检测以上各组细胞凋亡、增殖以及炎症因水平;q RT-PCR检测各组细胞中miR-223-3p表达水平,Western blot检测细胞中NLRP3蛋白及凋亡蛋白-天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)表达;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-223-3p、NLRP3靶向关系。结果 2μmol/L Cel作用细胞后其活力最高。与对照组相比,LPS组细胞存活率、mi R-223-3p表达显著下降,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1表达显著升高(P<0.05);与LPS组相比,Cel组细胞存活率、miR-223-3p表达显著升高,TNF-α、IL-1β、IL-6含量、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1表达显著降低(P<0.05);与Cel+inhibitor NC组相比,Cel+miR-223-3p inhibitor组LPS组细胞存活率、miR-223-3p表达显著下降,TNF-α、IL-1β、IL-6含量、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1表达显著升高(P<0.05)。结论 Cel可以促进LPS诱导的hPDLSCs增殖,抑制细胞凋亡及炎症反应,可能与上调miR-223-3p、抑制NLRP3表达有关。 展开更多
关键词 南蛇藤素 mir-223-3p/nlrp3 人牙周膜干细胞 增殖、凋亡 炎症反应
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海巴戟天对PCOS作用及机制的初步研究
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作者 许宝丹 付彦博 彭芸花 《中国现代医生》 2024年第8期68-73,共6页
目的利用超高效液相色谱-串联质谱技术(ultra-performanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定海巴戟天化学成分,进一步实验验证海巴戟天调控miR-223-3p/NLRP3信号通路抑制多囊卵巢综合征(polycysticovarysynd... 目的利用超高效液相色谱-串联质谱技术(ultra-performanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定海巴戟天化学成分,进一步实验验证海巴戟天调控miR-223-3p/NLRP3信号通路抑制多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome,PCOS)大鼠炎症反应。方法采用UPLC-MS/MS分析海巴戟天化学成分。动物实验:SD雌性大鼠采用随机数字表分为3组:正常对照组(n=5)、PCOS模型组(n=5)和海巴戟天灌胃组(n=5)。HE染色观察大鼠卵巢组织学形态,ELISA方法测定大鼠睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizinghormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、白细胞介素(interleukin,IL)表达水平,RT-qPCR法检测大鼠miR-223-3p、NLRP3的m RNA表达,Westernblot法检测大鼠NLRP3的蛋白表达。结果UPLC-MS/MS鉴定出海巴戟天化学成分有641种,包括木犀草素、芹菜素、大黄素等多种成分。与正常对照组比较,PCOS模型组卵巢颗粒细胞层数减少,卵泡囊性扩张,闭锁卵泡增多,T、LH水平升高(P<0.05),FSH水平降低(P<0.05),IL-18、IL-1β水平升高(P<0.05),卵巢组织miR-223-3p mRNA表达降低(P<0.01),NLRP3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01);与PCOS模型组相比,海巴戟天灌胃组各级卵泡比例正常,颗粒细胞层数增多,T、LH水平降低(P<0.05),FSH水平升高(P<0.05),IL-18、IL-1β水平降低(P<0.05),卵巢组织miR-223-3p mRNA表达升高(P<0.05),NLRP3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论海巴戟天能够改善PCOS大鼠卵巢病理状态,改变异常性激素及降低IL-18、IL-1β水平,其机制可能是通过调控miR-223-3p/NLRP3信号通路抑制PCOS大鼠炎症反应。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 海巴戟天 超高效液相色谱-质谱 mir-223-3p/nlrp3信号通路 模型大鼠
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