乳腺癌组织中miR-199b-5p、miR-597的表达及临床意义 被引量：10

1

作者 焦东晓 乔敏 +2 位作者 吕复君 孟玉新 冀峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1109-1114,共6页

目的检测乳腺癌组织中微小RNA-199b-5p(miR-199b-5p)、微小RNA-597(miR-597)的表达,同时分析miR-199b-5p、miR-597表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系,并分析其早期诊断的价值。方法收集95例乳腺癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PC... 目的检测乳腺癌组织中微小RNA-199b-5p(miR-199b-5p)、微小RNA-597(miR-597)的表达,同时分析miR-199b-5p、miR-597表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系,并分析其早期诊断的价值。方法收集95例乳腺癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-199b-5p、miR-597的相对表达量,分析miR-199b-5p、miR-597表达与乳腺癌临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-199b-5p、miR-597表达对患者术后5年总生存率的影响,并采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析miR-199b-5p和miR-597表达对患者早期诊断的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,miR-199b-5p、miR-597在乳腺癌组织中的表达均降低(P均<0. 05)。miR-199b-5p低表达与有淋巴结转移和较高TNM分期有关(P均<0. 05); miR-597低表达与肿瘤低分化、有淋巴结转移和较高TNM分期有关(P均<0. 05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果表明,miR-199b-5p、miR-597低表达患者的总生存率均分别低于miR-199b-5p、miR-597高表达患者(P均<0. 05)。此外,miR-199b-5p和miR-597对乳腺癌早期诊断的ROC曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0. 813和0. 721,联合诊断的敏感度和特异度分别为0. 825、0. 813。结论乳腺癌组织中,miR-199b-5p和miR-597表达降低与淋巴结转移、病情恶化、低生存率相关,miR-199b-5p和miR-597有望成为乳腺癌早期诊断和预后预测靶标。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 mir-199b-5p mir-597 早期诊断 预后

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H12、RS13和RL6在miR-199b-5p敲除小鼠卵巢中的表达研究 被引量：1

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作者 袁秀秀 王煜 《中国生育健康杂志》 2024年第1期48-53,共6页

目的探讨组蛋白H1变体(H12)、核糖体蛋白S13(RS13)和核糖体蛋白L6(RL6)在miR-199b-5p敲除小鼠卵巢中的表达变化。方法(1)自行繁育miR-199b-5p敲除(Knockout,KO)和野生型(Wild-type,WT)C57BL/6小鼠,分别记录两组雌鼠产仔情况(2)基因型鉴... 目的探讨组蛋白H1变体(H12)、核糖体蛋白S13(RS13)和核糖体蛋白L6(RL6)在miR-199b-5p敲除小鼠卵巢中的表达变化。方法(1)自行繁育miR-199b-5p敲除(Knockout,KO)和野生型(Wild-type,WT)C57BL/6小鼠,分别记录两组雌鼠产仔情况(2)基因型鉴定验证分组,取性成熟期小鼠(鼠周龄为11~13周)卵巢用于验证实验。(3)用实时荧光定量PCR(qPCR)检测每组小鼠(n=10)卵巢组织中H12、RS13和RL6的mRNA表达水平变化。(4)用蛋白免疫印迹法(WB)检测每组小鼠(n=3)卵巢组织中H12、RS13和RL6的蛋白表达水平变化。结果(1)共统计半年内两组雌鼠产仔情况:WT组生产27窝,平均每窝产仔数为(8.15±0.41)只;KO组生产28窝,平均每窝产仔数为6.43±0.32只,与WT组比较,KO组雌鼠产仔数显著下降(P=0.004),差异有统计学意义。(2)qPCR结果示:与WT组比较,KO组卵巢组织中H12(P=0.038)、RS13(P=0.011)和RL6(P=0.009)的mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义。(3)WB结果示:与WT组比较,KO组小鼠卵巢组织中H12(P=0.014)蛋白表达水平显著升高,而RS13(P=0.005)和RL6(P=0.009)蛋白表达水平显著下降,差异均有统计学意义。结论敲除miR-199b-5p可能影响H12、RL6和RS13基因的表达使小鼠卵巢储备能力下降。 展开更多

关键词 mir-199b-5p 基因敲除 卵巢 小鼠

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姜黄素通过miR-199b-5p抑制结肠癌SW1116细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量：7

3

作者 凌元亮 徐磊 吴辰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期957-964,共8页

目的探索姜黄素通过miR-199b-5p调控结肠癌SW1116细胞的增殖、迁移和侵袭的生物学作用及其相关机制。方法采用0、5、10、15和20μmol·L^-1的姜黄素处理SW1116细胞24 h,使用EDU染色和Transwell分别测定增殖、迁移和侵袭;RT-qPCR法检... 目的探索姜黄素通过miR-199b-5p调控结肠癌SW1116细胞的增殖、迁移和侵袭的生物学作用及其相关机制。方法采用0、5、10、15和20μmol·L^-1的姜黄素处理SW1116细胞24 h,使用EDU染色和Transwell分别测定增殖、迁移和侵袭;RT-qPCR法检测miR-199b-5p的表达;Western blot检测PAK4、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达。采用miR-199b-5p抑制剂转染SW1116细胞后,再用20μmol·L^-1的姜黄素处理24 h,使用EDU染色和Transwell分别测定增殖、迁移和侵袭的影响。使用双荧光素酶报告基因测定法确定miR-199b-5p是否靶向PAK4编码基因的3′-非翻译区(3′-UTR)。结果姜黄素浓度依赖性抑制SW1116细胞的增殖、迁移和侵袭,且在此过程中伴随的miR-199b-5p表达升高,PAK4、p-MEK/MEK和p-ERK/ERK的表达降低。敲减miR-199b-5p能部分逆转姜黄素对SW1116细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。PAK4是miR-199b-5p的靶基因,且miR-199b-5p负调节PAK4的表达。结论姜黄素通过miR-199b-5p/PAK4/MEK/ERK轴抑制结肠癌SW1116细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 姜黄素 mir-199b-5p 结肠癌 pAK4 增殖 细胞迁移 细胞侵袭

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lncRNA LUCAT1通过miR-199b-5p/AKAP1信号轴促进肝癌进展的机制

4

作者 金璞 谷从阳 陈涛 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2024年第2期61-72,共12页

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)通过miR-199b-5p/A激酶锚定蛋白1(A-kinase anchoring protein 1,AKAP1)信号轴促进肝癌转移的机制。方法收集2020年1月... 目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)通过miR-199b-5p/A激酶锚定蛋白1(A-kinase anchoring protein 1,AKAP1)信号轴促进肝癌转移的机制。方法收集2020年1月至2021年10月在成都市新都区人民医院进行手术治疗的80例肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者的肝癌及癌旁组织标本,采用RT-qPCR检测LUCAT1、miR-199b-5p、AKAP1 mRNA水平。将Huh7、HepG2细胞进行不同转染,pHRi-si-NC、pHRi-si-LUCAT1分别转染至Huh7、HepG2细胞,pHRi-si-LUCAT1和pHRi-anti-miR-NC、pHRi-si-LUCAT1和pHRi-anti-miR-199b-5p、pHRi-si-LUCAT1和pHRi-NC、pHRi-si-LUCAT1和pHRi-AKAP1分别共转染至Huh7、HepG2细胞。双荧光素酶报告验证LUCAT1对miR-199b-5p、miR-199b-5p对AKAP1的调控关系;EdU染色、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR检测细胞LUCAT1、miR-199b-5p和AKAP1 mRNA水平;Western blot检测细胞Ki67、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9水平。向20只裸鼠皮下注射已转染pHRi-si-LUCAT1的Huh7细胞悬液,30 d后测定移植瘤体积、质量、LUCAT1、miR-199b-5p、AKAP1 mRNA、Ki67、MMP-2、MMP-9水平。结果①与癌旁组织相比,HCC组织LUCAT1(1.51±0.53比1.13±0.72;t=3.802,P<0.001)、AKAP1 mRNA(3.73±0.97比1.28±0.76;t=17.783,P<0.001)水平显著升高,miR-199b-5p(1.21±0.53比3.56±1.02;t=18.286,P<0.001)水平显著降低。②转染pHRi-si-LUCAT1后,miR-199b-5p水平显著升高(Huh7:3.71±0.28比1.00±0.10,t=15.787,P=0.004;HepG2:3.49±0.25比1.00±0.11,t=15.790,P=0.004),LUCAT1(Huh7:0.34±0.05比1.00±0.06,t=14.637,P=0.005;HepG2:0.41±0.06比1.00±0.07,t=11.084,P=0.008)和AKAP1 mRNA水平显著降低(Huh7:0.52±0.05比1.00±0.09,t=8.075,P=0.015;HepG2:0.55±0.06比1.00±0.13,t=5.444,P=0.032);细胞EdU阳性率、划痕愈合率和细胞侵袭数均显著降低(P均<0.05);Ki67(Huh7:0.24±0.03比0.92±0.06,t=17.558,P=0.003;HepG2:0.10±0.03比0.51±0.03,t=16.738,P=0.004)、MMP-2(H 展开更多

关键词 肺癌相关转录物1 mir-199b-5p A激酶锚定蛋白1 肝细胞癌 转移

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miR-199b-5p在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中作用机制

5

作者 张冬 李宗英 +1 位作者 高原 肖娜 《生物技术》 CAS 2024年第2期227-231,260,共6页

[目的]探索miR-199b-5p在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中的作用机制。[方法]选择92只雄性大鼠,随机分为空白对照组、DN组、慢病毒对照组、miR-199b-5p敲低组,造模结束后第12 w处死大鼠。对比上述4组大鼠在肾组织病理学、肾功能指标,Klotho... [目的]探索miR-199b-5p在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中的作用机制。[方法]选择92只雄性大鼠,随机分为空白对照组、DN组、慢病毒对照组、miR-199b-5p敲低组,造模结束后第12 w处死大鼠。对比上述4组大鼠在肾组织病理学、肾功能指标,Klotho、Wnt、β-catenin等相关蛋白表达差异。[结果] DN组、慢病毒对照组的miR-199b-5p表达高于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组高于空白对照组(1.08±0.24、3.27±0.12、3.22±0.53、1.62±0.15;P<0.05);DN组、慢病毒对照组的Scr、BUN、β-catenin、α-SMA、MMP-7均显著高于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组高于空白对照组(78.66±2.12 vs 61.14±3.78;14.04±1.09 vs 9.26±1.73;32.33±2.57 vs 27.23±1.78;0.97±0.02 vs 0.34±0.35;3.49±0.28 vs 1.43±0.23;P<0.05);而DN组、慢病毒对照组的Klotho明显低于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组低于空白对照组(23.18±3.12 vs 31.99±3.09;P<0.05)。[结论]降低miR-199b-5p表达可以上调糖尿病肾纤维化Klotho表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路从而让α-SMA和MMP-7表达下降,进而延缓肾脏纤维化,改善肾功能指标,因此该通路可能是临床上治疗糖尿病肾纤维化的新靶点。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 肾脏 纤维化 大鼠 mir-199b-5p KLOTHO WNT Β-CATENIN

原文传递

CREM基因在miR-199b-5p敲除小鼠精液和睾丸中的表达研究

6

作者 袁秀秀 王煜 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期111-117,共7页

目的:探讨miR-199b-5p基因敲除对雄性小鼠精液和睾丸中CREM表达水平的影响。方法:选miR-199b-5p基因敲除(KO)雄性小鼠和野生型(WT)雄性C57BL/6小鼠。观察2组小鼠体重和睾丸指数。HE染色观察睾丸结构变化。显微镜下观察精子形态及计数精... 目的:探讨miR-199b-5p基因敲除对雄性小鼠精液和睾丸中CREM表达水平的影响。方法:选miR-199b-5p基因敲除(KO)雄性小鼠和野生型(WT)雄性C57BL/6小鼠。观察2组小鼠体重和睾丸指数。HE染色观察睾丸结构变化。显微镜下观察精子形态及计数精子浓度。数据库预测CREM与miR-199b-5p的靶向关系。RT-qPCR和Western印迹法分别检测2组小鼠睾丸中CREM mRNA和蛋白表达水平变化。结果:两组之间小鼠体重和睾丸指数无明显变化;与WT组比较,KO组小鼠精液精子计数稍下降,但无统计学差异(P>0.05);精液涂片示KO组精子浓度较WT组稀疏,但无统计学差异(P>0.05);睾丸病理示:与WT组比较,KO组睾丸体积较小,睾丸组织正常,生精小管可见各级生精细胞和支持细胞,生精小管界膜、管径无明显异常;数据库预测CREM基因是miR-199b-5p的靶基因;RT-qPCR结果示:与WT组比较,KO组雄鼠精液和睾丸组织中CREM mRNA表达水平均明显下降(P<0.05),差异有统计学意义。Western印迹结果显示:与WT组比较,KO组雄鼠睾丸组织中CREM蛋白表达水平明显下降(P<0.05),差异有统计学意义。随访半年,统计两组雄性小鼠出生数,发现KO组雄鼠的出生数较WT组明显下降(P<0.05)。结论:miR-199b-5p敲除小鼠精液和睾丸中CREM基因表达下调,推测miR-199b-5p可能靶向作用于CREM基因进而影响雄性小鼠的生育功能。 展开更多

关键词 mir-199b-5p CREM基因 精液 睾丸

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肾元颗粒影响糖尿病小鼠肾脏中miR-199b-5p与钙磷代谢的研究 被引量：6

7

作者 詹理睿 王小琴 +4 位作者 邹新蓉 陈立 王岚 凌河 万亚琴 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第11期2819-2823,共5页

目的:探讨肾元颗粒对糖尿病小鼠肾脏中miR-199b-5p/Klotho/FGFR-1/EGR-1通路及钙磷代谢的影响。方法:链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导小鼠糖尿病模型,模型成功后随机分为肾元颗粒组[4.55 g/(kg·d)]10只和模型对照组10只,另设... 目的:探讨肾元颗粒对糖尿病小鼠肾脏中miR-199b-5p/Klotho/FGFR-1/EGR-1通路及钙磷代谢的影响。方法:链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导小鼠糖尿病模型,模型成功后随机分为肾元颗粒组[4.55 g/(kg·d)]10只和模型对照组10只,另设空白对照组10只。给予相应药物灌胃8周,给药前后检测血糖以及血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、钙(Ca)和磷(P),采用RT-q PCR检测肾脏组织中miR-199b-5p、Klotho、FGFR-1和EGR-1核糖核酸表达情况,采用western-blot(WB)法检测Klotho、FGFR-1和EGR-1蛋白表达情况,检测小鼠右下肢平均骨密度。结果:用药后与空白对照组相比,模型对照组P、SCr升高(P<0.05),Ca、骨密度明显降低(P<0.05),同时miR-199b-5p和EGR-1表达上调(P<0.05),Klotho和FGFR-1表达下调(P<0.05)。用药后与模型对照组比较,肾元颗粒组P、SCr降低(P<0.05),Ca升高(P<0.05),miR-199b-5p、EGR-1表达下调(P<0.05),Klotho、FGFR-1表达上调(P<0.05)。结论:肾元颗粒缓解糖尿病肾损害和改善钙磷代谢异常的作用机制,或与miR-199b-5p/Klotho/FGFR-1/EGR-1通路有关。 展开更多

关键词 肾元颗粒 mir-199b-5p 钙磷代谢 KLOTHO

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MiR-100-5p和miR-199b-5p靶向结合mTOR诱导结肠癌细胞自噬 被引量：5

8

作者 薛淑慧 石萌 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第2期179-183,共5页

目的:研究结肠癌(CRD)细胞中miR-100-5p和miR-199b-5p与mTOR诱导的自噬之间的关系。方法:选取人CRC SW480细胞株,分别用miR-100-5p和miR-199b-5p的mimics和抑制剂转染SW480细胞,采用实时定量PCR检测转染后2种miRNA的表达量、自噬基因Bec... 目的:研究结肠癌(CRD)细胞中miR-100-5p和miR-199b-5p与mTOR诱导的自噬之间的关系。方法:选取人CRC SW480细胞株,分别用miR-100-5p和miR-199b-5p的mimics和抑制剂转染SW480细胞,采用实时定量PCR检测转染后2种miRNA的表达量、自噬基因Beclin1和LC3的表达量,CCK-8检测细胞存活率,流式细胞技术检测细胞凋亡率,荧光素酶实验检测2种miRNA与mTOR之间的关系。结果:与对照组比较,转入miR-100-5p和miR-199b-5p mimics的SW480细胞中Beclin1和LC3的表达水平显著增加(P<0.05),经miR-100-5p和miR-199b-5p mimics转染的SW480细胞生长更慢(P<0.05),同时细胞凋亡率增加(P<0.05);荧光素酶报告基因结果显示,与对照组相比,miR-100-5p和miR-199b-5p mimics组的miR-100-5p和miR-199b-5p表达水平都显著降低,表明mTOR 3’UTR区可能是miR-100-5p and miR-199b-5p的结合部位。结论:miR-100-5p和miR-199b-5p可能通过靶向mTOR诱导SW480细胞的自噬死亡。 展开更多

关键词 mir-100-5p mir-199b-5p 自噬 MTOR 结肠癌

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miR-199b-5p在头颈癌细胞中的表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响 被引量：6

9

作者 王茜 李光辉 +1 位作者 郭嘉 孙强 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期265-269,共5页

目的:明确mi R-199b-5p差异表达在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发生、发展中的作用并探讨其生物学功能。方法:检测128例HNSCC组织中mi R-199b-5p的表达,通过Kaplan-Meier生存分析,分析临床病理参数与mi R-199b-5p表达水平之间的关系。通过mi... 目的:明确mi R-199b-5p差异表达在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发生、发展中的作用并探讨其生物学功能。方法:检测128例HNSCC组织中mi R-199b-5p的表达,通过Kaplan-Meier生存分析,分析临床病理参数与mi R-199b-5p表达水平之间的关系。通过mi RNA异常表达对HNSCC细胞生长、侵袭和迁移能力以及克隆形成的影响,检测HNSCC细胞中mi RNA的功能。采用SPSSl9.0软件包对数据进行t检验。结果:在79例淋巴结转移的HNSCC组织中,mi R-199b-5p的表达水平为1.68±0.21;在49例非淋巴结转移的HNSCC组织中,其表达水平为2.64±0.24,差异显著(P=0.001)。在HNSCC患者中,高表达mi R-199b-5p的患者总体存活率显著增高(P=0.01),且高表达水平的mi R-199b-5p可以显著抑制头颈鳞癌细胞的侵袭和转移。结论:作为抑癌基因,mi R-199b-5p在HNSCC的发生、发展中起着关键作用。 展开更多

关键词 mir-199b-5p 头颈鳞癌 转移 侵袭

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乳腺癌组织中miR-199b-5p和MTA1表达水平与临床病理特征和预后的关系 被引量：1

10

作者 吴海滨 马志强 +4 位作者 张冠男 李帅 苗雅云 湛喜梅 王文胜 《广东医学》 CAS 2023年第8期941-946,共6页

目的 检测乳腺癌组织中miR-199b-5p与MTA1表达情况,并分析其表达水平与临床病理特征和预后关系。方法 选取2017年10月至2018年10月期间河南大学第一附属医院收治的行乳腺切除手术的乳腺癌患者135例作为研究对象,取其癌组织与癌旁组织分... 目的 检测乳腺癌组织中miR-199b-5p与MTA1表达情况,并分析其表达水平与临床病理特征和预后关系。方法 选取2017年10月至2018年10月期间河南大学第一附属医院收治的行乳腺切除手术的乳腺癌患者135例作为研究对象,取其癌组织与癌旁组织分别作为癌旁组织组与乳腺癌组,qRT-PCR法测定癌组织与癌旁组织miR-199b-5p、MTA1 mRNA水平,免疫组化法分析组织MTA1阴阳性,分析miR-199b-5p、MTA1表达与乳腺癌患者年龄、绝经情况(是、否)、肿瘤直径(<2 cm、≥2 cm)、临床分期(Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期)、分子分型(Lumina A/B型、HER-2阳性型、三阴性型)、淋巴结转移(是、否)关系。结果 与癌旁组织组相比,乳腺癌组癌组织miR-199b-5p水平降低,MTA1 mRNA水平升高(P<0.05);与癌旁组织组相比,乳腺癌组MTA1阳性率升高(P<0.05);乳腺癌患者癌组织miR-199b-5p表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);MTA1表达与临床分期、淋巴结转移、分子分型有关(P<0.05);乳腺癌患者治疗后进行5年随访,miR-199b-5p低表达患者5年内累积生存率(71.8%)低于miR-199b-5p高表达患者(89.1%)(log Rankχ^(2)=6.661,P=0.010);MTA1阳性患者5年内累积生存率(71.6%)低于MTA1阴性患者(90.2%)(log Rankχ^(2)=7.590,P=0.006);单因素COX分析表明,肿瘤直径、临床分期、分子分型、淋巴结转移、miR-199b-5p、MTA1是影响乳腺癌预后不良的危险因素(P<0.05);多因素COX回归分析显示,临床分期、淋巴结转移、miR-199b-5p、MTA1水平是影响乳腺癌预后的危险因素(P<0.05)。结论 乳腺癌患者miR-199b-5p低表达,MTA1 mRNA与阳性率高于癌旁组织,miR-199b-5p低水平、MTA1阳性表达与乳腺癌患者临床病理特征淋巴结转移、肿瘤分期以及患者预后密切相关,两者可能是乳腺癌患者预后不良的预测靶基因。 展开更多

关键词 乳腺癌 mir-199b-5p 临床病理 预后

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miR-199b-5p调控C1GALT1对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：3

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作者 夏童 向婷 +1 位作者 谢海龙 佘兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第3期257-266,共10页

目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在... 目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在胃癌中的表达情况。细胞进行分组(1)SiRNA转染:空白对照组1、Si-NC组、Si组(3、5、8μM);(2)双荧光素酶实验分组:MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-mu组、MI+h-C1GALT1-3UTR-mu组;(3)miRNA转染:MI组、 MI-NC组、空白对照组2;IN组、IN-NC组,空白对照组3;(4)共转染:空载体组、Si-C1GALT1组、Si-C1GALT1+miR-199b-5p inhibitor。Western blot检测SiRNA抑制C1GALT1的表达,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测SiRNA干扰C1GALT1对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。预测能与其存在负向调控的miRNAs,双荧光素酶报告基因实验验证C1GALT1与miR-199b-5p之间的靶向关系。转染miR-199b-5pmimics/inhibitor后用Western blot检测转染后C1GALT1的表达情况,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测miR-199b-5p对胃癌BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过Si-C1GALT1和miR-199b-5p inhibitor共转染检测其对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力影响。结果 生物信息学提示C1GALT1在胃癌中存在高表达,通过SiRNA抑制C1GALT1表达后,发现C1GALT1低表达会使胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭能力[(0.270±0.005)%、(534.0±24.1)个、(156.0±42.5)个]低于空白对照组1[(0.519±0.012)%、(783.0±12.8)个、(460.0±19.4)个]与Si-NC组[(0.523±0.001)%、(744.0±8.6)个、(477.0±26.9)个],差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素报告显示,miR-199b-5p能靶向结合C1GALT1。miR-199b-5p mimics降低BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.01);miR-199b-5p inhibitor提高BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.05)。miR-199b-5p mimics组BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭能力[(0.256±0.002)%、(145±5.7 展开更多

关键词 胃癌 bGC-823细胞 mir-199b-5p C1GALT1 增殖 侵袭 迁移

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miR-199b-5p调控HAPLN1对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响 被引量：2

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作者 韩朝辉 龙静 +2 位作者 刘洁玲 陈学 王静 《河北医药》 CAS 2022年第19期2896-2901,共6页

目的研究miR-199b-5p调控HAPLN1对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响。方法体外培养人宫颈癌细胞HeLa,通过逐步增加培养液中顺铂的浓度来诱导建立人宫颈癌顺铂耐药细胞株HeLa/DDP,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验检测HeLa和HeLa/DDP中miR-19... 目的研究miR-199b-5p调控HAPLN1对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响。方法体外培养人宫颈癌细胞HeLa,通过逐步增加培养液中顺铂的浓度来诱导建立人宫颈癌顺铂耐药细胞株HeLa/DDP,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验检测HeLa和HeLa/DDP中miR-199b-5p的表达水平;将HeLa/DDP细胞随机分为对照组、miR-199b-5p mimics组、顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组、顺铂+miR-199b-5p mimics组,分组转染细胞后,通过CCK-8实验检测细胞增殖情况,计算其生存率;通过流式细胞实验检测细胞凋亡情况,计算其凋亡率;通过qRT-PCR实验测定细胞miR-199b-5p和HAPLN1、MDR1 mRNA水平;通过免疫印迹实验测定细胞HAPLN1和耐药蛋白P-gp的蛋白表达水平。结果与HeLa细胞比较,miR-199b-5p在HeLa/DDP细胞中表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞生存率明显降低,凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-199b-5p mimics组、顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞生存率及凋亡率无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05);与miR-199b-5p mimics组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞生存率明显降低,凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞生存率及凋亡率无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组、miR-199b-5p mimics组miR-199b-5p明显升高,HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05);与顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组比较,miR-199b-5p mimics组和顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞miR-199b-5p明显升高,HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论促进miR-199b-5p表达,可下调HAPLN1和耐药基因P-gp、MDR1表达,增强顺铂对人宫� 展开更多

关键词 mir-199b-5p HApLN1 宫颈癌 顺铂 耐药性

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二氢杨梅素对人晶状体上皮细胞增殖、凋亡的影响及分子机制研究 被引量：2

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作者 付婷婷 栾红 +2 位作者 徐衍红 秦贵娟 刘兵 《世界临床药物》 CAS 2022年第7期844-850,共7页

目的 探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对人晶状体上皮细胞SRA01/04增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法 将SRA01/04细胞分为正常对照(normal control,NC)组、DMY组、anti-miR-NC组、anti-miR-199b-5p组、miR-NC组、miR-199b-5p组... 目的 探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对人晶状体上皮细胞SRA01/04增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法 将SRA01/04细胞分为正常对照(normal control,NC)组、DMY组、anti-miR-NC组、anti-miR-199b-5p组、miR-NC组、miR-199b-5p组、DMY+miR-NC组和DMY+miR-199b-5p组。通过定量反转录聚合酶链反应检测miR-199b-5p的表达水平。采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。结果 DMY可抑制SRA01/04细胞增殖,诱导细胞凋亡(P<0.05),并可促进SRA01/04细胞miR-199b-5p的表达(P<0.05)。过表达miR-199b-5p可抑制SRA01/04细胞增殖,诱导细胞凋亡(P<0.05)。抑制miR-199b-5p表达可促进SRA01/04细胞增殖,抑制细胞凋亡(P<0.05),且能够逆转DMY对SRA01/04细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(P<0.05)。结论 DMY可抑制人晶状体上皮细胞SRA01/04增殖,诱导细胞凋亡,其机制与上调miR-199b-5p表达相关。 展开更多

关键词 二氢杨梅素 mir-199b-5p 人晶状体上皮细胞 增殖 凋亡

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MiR-199b-5p过表达在肾小球足细胞中的作用及基因表达特征 被引量：2

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作者 龚向前 鱼敏逸 +4 位作者 陈俊宇 顾欣雨 李善文 张爱青 甘卫华 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第6期519-522,共4页

目的:研究miR-199b-5p在足细胞凋亡过程中的功能及miR-199b-5p过表达足细胞中的基因表达谱特征,探讨足细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养小鼠足细胞,用lipofectamine 2000分别在小鼠足细胞中瞬时转染miR-199b-5p过表达质粒(miR-199... 目的:研究miR-199b-5p在足细胞凋亡过程中的功能及miR-199b-5p过表达足细胞中的基因表达谱特征,探讨足细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养小鼠足细胞,用lipofectamine 2000分别在小鼠足细胞中瞬时转染miR-199b-5p过表达质粒(miR-199b-5p mimics)、miR-199b-5p过表达质粒阴性对照(NC)组。用qRT-PCR检测miR-199b-5p在足细胞中表达水平。用流式细胞仪检测足细胞凋亡的变化。运用高通量测序分析转染miR-199b-5p mimics后足细胞中差异表达基因,并对miR-199b-5p靶基因进行基因功能(GO)富集分析和信号通路(Pathway)富集分析。结果:qRT-PCR结果显示,转染miR-199b-5p mimics足细胞中miR-199b-5p表达水平较对照组升高(P <0. 05)。流式细胞仪检测结果显示,NC组细胞凋亡率(32. 97±1.45)%,转染mimics组细胞凋亡率(25.51±0.94)%较对照组下降(P<0.05)。高通量测序发现,过表达miR-199b-5p足细胞中有106个基因表达较对照组降低大于1.5倍。基因功能富集分析结果显示miR-199b-5p靶基因可能通过NF-κB及TNF等信号通路,调控肌动蛋白骨架稳定性等多个方面抑制足细胞凋亡。结论:过表达miR-199b-5p能抑制足细胞凋亡,可能通过对其靶基因的调控在足细胞损伤的过程中发挥保护作用。 展开更多

关键词 mir-199b-5p 足细胞 基因表达谱特征 凋亡

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miR-199b-5p在2型乳头状肾细胞癌合并下腔静脉瘤栓中的表达及功能

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作者 丁振山 周晓峰 马潞林 《中日友好医院学报》 CAS 2021年第2期81-84,F0002,共5页

目的:探讨miR-199b-5p在2型乳头状肾细胞癌(PRCC)合并下腔静脉瘤栓患者中的表达及其功能。方法:应用miRNA芯片检测2型PRCC合并及不合并下腔静脉瘤栓各10例患者的miRNA差异表达谱。应用RT-qPCR在22对样本中对差异表达的候选基因进行扩大... 目的:探讨miR-199b-5p在2型乳头状肾细胞癌(PRCC)合并下腔静脉瘤栓患者中的表达及其功能。方法:应用miRNA芯片检测2型PRCC合并及不合并下腔静脉瘤栓各10例患者的miRNA差异表达谱。应用RT-qPCR在22对样本中对差异表达的候选基因进行扩大样本验证。使用miR-199b-5p的过表达质粒(miR-199b-5p-up)和阴性对照质粒(NC)分别转染CAKI-2和CAL-54细胞,检测2组细胞的增殖及侵袭能力变化情况,细胞增殖抗原(Ki67)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达。结果:与不合并下腔静脉瘤栓的2型PRCC组织样本相比,合并瘤栓的癌组织中miR-199b-5p显著下调(P<0.05)。与NC组相比,miR-199b-5p-up组CAKI-2和CAL-54细胞的增殖和侵袭能力均降低(P<0.05)。对照组和合并下腔静脉瘤栓组的癌组织样本中,Ki67和MMP2表达分别显著高于miR-199b-5p-up组和不合并下腔静脉瘤栓组(均P<0.05)。结论:肾癌中miR-199b-5p下调可能通过调控Ki67和MMP2介导2型PRCC下腔静脉瘤栓的形成。 展开更多

关键词 mir-199b-5p 2型乳头状肾细胞癌 静脉瘤栓

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LncRNA LUCAT1介导的miR-199b-5p/MAPKAPK3轴在甲状腺乳头状癌发展中的调控作用及机制

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作者 郭宏鹏 李尤 +2 位作者 张金辉 张艺彤 孙成林 《解剖科学进展》 CAS 2024年第2期170-174,共5页

目的探究lncRNA LUCAT1对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和EMT的影响,并进一步探究miR-199b-5p/MAPKAPK3轴在其中发挥的作用。方法RT-qPCR检测甲状腺乳头状癌组织及癌旁组织中LUCAT1、miR-199b-5p和MAPKAPK3表达;生物... 目的探究lncRNA LUCAT1对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和EMT的影响,并进一步探究miR-199b-5p/MAPKAPK3轴在其中发挥的作用。方法RT-qPCR检测甲状腺乳头状癌组织及癌旁组织中LUCAT1、miR-199b-5p和MAPKAPK3表达;生物信息学预测miR-199b-5p与LUCAT1或MAPKAPK3的潜在结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-199b-5p与LUCAT1或MAPKAPK3结合。将TPC-1细胞分为sh-NC组、sh-LUCAT1组、sh-LUCAT1+inhibitor NC组、sh-LUCAT1+miR-199b-5p inhibitor组和sh-LUCAT1+miR-199b-5p inhibitor+sh-MAPKAPK3组;Western blot检测各组细胞MAPKAPK3蛋白表达水平;CCK-8实验检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;Western blot方法检测各组细胞EMT相关蛋白表达水平。结果甲状腺乳头状癌组织中LUCAT1和MAPKAPK3高表达,且miR-199b-5p低表达;miR-199b-5p与LUCAT1和MAPKAPK3结合;敲减LUCAT1降低TPC-1细胞MAPKAPK3表达,抑制TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并促进细胞凋亡;抑制miR-199b-5p逆转了敲减LUCAT1对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用及细胞凋亡的促进作用;敲减MAPKAPK3逆转了抑制miR-199b-5p对敲减LUCAT1的TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的促进作用及细胞凋亡的抑制作用。结论lncRNALUCAT1可能通过竞争结合miR-199b-5p上调MAPKAPK3表达促进甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT并抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 LncRNA LUCAT1 甲状腺乳头状癌 mir-199b-5p/MApKApK3轴 增殖 迁移 侵袭 凋亡 上皮间质转化

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罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制 被引量：2

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作者 王铭 司小萌 +3 位作者 陈欢 郭培霞 张朔 梁玉柱 《安徽医药》 CAS 2020年第12期2347-2351,共5页

目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、anti⁃miR⁃NC组、anti⁃miR⁃199b⁃5p组、中剂量罗哌卡因+miR⁃199b⁃5p组和中... 目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、anti⁃miR⁃NC组、anti⁃miR⁃199b⁃5p组、中剂量罗哌卡因+miR⁃199b⁃5p组和中剂量罗哌卡因+miR⁃NC组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、P21、B细胞淋巴瘤/白血病⁃2(Bcl⁃2)、Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)表达水平,实时荧光定量逆转录PCR(RT⁃qPCR)检测细胞中miR⁃199b⁃5p表达水平。结果与对照组比较,低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组MG63细胞增殖能力[(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)]、Cyclin D1蛋白[(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)]表达降低(P<0.05),而P21[(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)]蛋白表达升高(P<0.05),中剂量罗哌卡因组Bcl⁃2蛋白[(0.20±0.02)比(0.76±0.07)]及miR⁃199b⁃5p[(0.13±0.01)比(0.82±0.08)]的表达降低(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(23.51±2.42)%比(7.66±0.75)%]和Bax蛋白[(0.89±0.09)比(0.28±0.03)]表达升高(P<0.05)。与anti⁃miR⁃NC组比较,anti⁃miR⁃199b⁃5p组MG63细胞增殖能力[(0.64±0.06)比(0.98±0.09)]及Cyclin D1蛋白[(0.40±0.04)比(0.95±0.09)]和Bcl⁃2蛋白[(0.36±0.03)比(0.76±0.07)]的表达降低(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(19.56±1.58)%比(7.66±0.75)%]及P21[(0.53±0.05)比(0.14±0.01)]和Bax[(0.71±0.07)比(0.28±0.03)]的蛋白表达升高(P<0.05)。与中剂量罗哌卡因+miR⁃NC组比较,中剂量罗哌卡因+miR⁃199b⁃5p组MG63细胞增殖能力[(0.58±0.06)比(0.36±0.03)]及Cyclin D1蛋白[(0.71±0.07)比(0.40±0.04)]和Bcl⁃2蛋白[(0.53±0.05)比(0.21±0.02)]的表达升高(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(12.68±1.23)%比(23.35±2.34)%]及P21[(0.37±0.03)比(0.72±0. 展开更多

关键词 骨肉瘤 罗哌卡因 细胞周期蛋白D1 基因 bcl⁃1 mir⁃199b⁃5p 细胞增殖 凋亡

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hsa-miR-199b-5p与足细胞损伤的生物信息学分析 被引量：1

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作者 鱼敏逸 龚向前 +6 位作者 朱仙艺 陆晓羽 何瑞 顾靖钏 陈俊宇 张爱青 甘卫华 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第6期389-393,共5页

目的：初步论述miR-199b-5p的生物学功能。方法：首先我们应用miRbase、UCSC等数据库，对miR-199b-5p的序列进行了保守性分析；然后选择miranda、miRDB及TargetScan三个数据库预测hsa-miR-199b-5p的靶基因，取其交集；最后运用基因GO功... 目的：初步论述miR-199b-5p的生物学功能。方法：首先我们应用miRbase、UCSC等数据库，对miR-199b-5p的序列进行了保守性分析；然后选择miranda、miRDB及TargetScan三个数据库预测hsa-miR-199b-5p的靶基因，取其交集；最后运用基因GO功能注释以及KEGG信号转导通路富集分析，探究miR-199b-5p靶基因可能相关的细胞功能和信号通路。结果：生物信息学分析发现，miR-199b-5p具有多种功能，其多个潜在靶基因涉及足细胞损伤发生、发展过程。结论：miR-199b-5p可能与慢性肾脏病（Chronic Kidney Disease，CKD）的发病机制相关，并为临床治疗提供了可能的潜在的新靶点。 展开更多

关键词 hsa-mir-199b-5p 慢性肾脏病 足细胞 生物信息学 靶基因

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新肾病1号方调控miR-199b-5p抑制肾小管上皮间充质转化改善肾纤维化的作用研究

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作者 曾聪聪 俞文秀 +2 位作者 王成功 姜程曦 程锦国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1600-1608,共9页

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻... 目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻方法建立大鼠肾纤维化模型,给予药物干预14 d后,检测各组大鼠肾功能;苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肾脏组织病理变化;对假手术组、模型组和新肾病1号方高剂量组大鼠肾脏组织进行miRNA测序,筛选差异表达miRNAs,qRT-PCR验证,并进行靶基因的基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,生物信息学分析miRNAs与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、肾纤维化的关联性。免疫荧光法和Western blotting检测肾组织EMT相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,新肾病1号方组大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均明显降低(P<0.05、0.01),肾组织病理变化有所改善。miRNA测序分析发现,miR-199b-5p在模型组表达上调,而在新肾病1号方高剂量组表达下调,qRT-PCR验证了其mRNA相对表达量与测序结果基本一致;miR-199b-5p的靶基因中与EMT、肾纤维化相关功能的90个。与模型组比较,新肾病1号方组肾组织中EMT相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,αSMA)和波形蛋白(Vimentin)表达下调(P<0.05、0.001),E-钙黏蛋白(E-cadherin)和紧密连接蛋白-1(Zonula occludens1,ZO-1)表达上调(P<0.05)。结论新肾病1号方可能通过下调miR-199b-5p表达,抑制EMT,从而发挥抗肾纤维化的作用。 展开更多

关键词 新肾病1号方 上皮间充质转化 肾纤维化 RNA测序 mir-199b-5p 柴胡皂苷 黄芪甲苷 盐酸小檗碱

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