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宫颈癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义 被引量:9
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作者 王亦如 杜二球 《中国妇幼健康研究》 2020年第8期1065-1070,共6页
目的探讨宫颈癌组织中微小蛋白核糖核苷酸(miR-365)、miR-135a-5p及信号转导与转录激活因子(STAT)3的表达水平及意义。方法收集2016年1月至2019年6月间浙江省温岭市中医院收治的132例宫颈手术切除标本,其中宫颈癌75例(宫颈癌组)、宫颈... 目的探讨宫颈癌组织中微小蛋白核糖核苷酸(miR-365)、miR-135a-5p及信号转导与转录激活因子(STAT)3的表达水平及意义。方法收集2016年1月至2019年6月间浙江省温岭市中医院收治的132例宫颈手术切除标本,其中宫颈癌75例(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)30例(CIN组)、正常宫颈组织27例(对照组)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组miR-365、miR-135a-5p表达水平,采用免疫组化SP法检测各组STAT3表达水平,分析miR-365、miR-135a-5p及STAT3表达水平与宫颈癌临床病理特征间的关系。结果①宫颈癌组miR-365相对表达量均显著低于CIN组和对照组(t值分别为2.788、3.457,均P<0.05),而miR-135a-5p相对表达量均显著高于CIN组和对照组(t值分别为2.994、3.906,均P<0.05)。CIN组miR-365相对表达量显著低于对照组(t=2.753,P<0.05),而miR-135a-5p相对表达量显著高于对照组(t=2.805,P<0.05)。宫颈癌组织STAT3阳性率均显著高于CIN组和对照组(χ^2值分别为10.647、71.889,均P<0.01),而CIN组宫颈组织STAT3阳性率显著高于对照组(χ^2=24.211,P<0.01);②ROC曲线显示miR-135a-5p、miR-365及STAT3诊断宫颈癌的AUC分别为0.862、0.747、0.644,STAT3敏感性最高,miR-365特异性最高;③肿瘤直径≤5cm、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、有淋巴结转移者宫颈组织miR-365相对表达量较低(t值分别为-4.571、-5.457、3.349,均P<0.05),而miR-135a-5p相对表达量较高(t值分别为4.089、-10.100、-3.012,均P<0.05),差异均具有统计学意义。不同年龄、病理类型、分化程度、宫旁浸润患者miR-365、miR-135a-5p及STAT3表达水平比较差异均无统计学意义(t值-1.934~0.230,均P>0.05),不同肿瘤大小、FIGO分期及有无淋巴结转移患者STAT3比较差异均无统计学意义(χ^2值0.035~0.764,均P>0.05)。结论宫颈癌癌组织中的miR-365、miR-135a-5p及STAT3表达水平与其发病相关,miR-365、miR-135a-5p可用于评估病情进展情况。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-365 mir-135a-5p 信号转导与转录激活因子3
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miR-135a-5p通过调控Bcl-2/Bax通路对青光眼视网膜神经节细胞凋亡的作用机制 被引量:6
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作者 谢九冰 杨杉杉 +1 位作者 陈喜月 岳向东 《重庆医学》 CAS 2022年第8期1290-1296,共7页
目的探讨miR-135a-5p与Bcl-2/Bax间的关系及其对青光眼视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用和机制。方法建立BALB/C小鼠青光眼模型,检测眼压和视网膜RGCs数量及miR-135a-5p表达。实验用RGCs细胞分为miR-135a-5p组、空白组、miR-135a-5p抑... 目的探讨miR-135a-5p与Bcl-2/Bax间的关系及其对青光眼视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用和机制。方法建立BALB/C小鼠青光眼模型,检测眼压和视网膜RGCs数量及miR-135a-5p表达。实验用RGCs细胞分为miR-135a-5p组、空白组、miR-135a-5p抑制组,miR-135a-5p组转染miR-135a-5p mimic,空白组转染无意义序列miRNA-NC,miR-135a-5p抑制组转染si-miR-135a-5p。qRT-PCR检测miR-135a-5p表达水平,流式细胞术检测各组RGCs细胞凋亡率,CCK-8检测各组RGCs细胞活性,Western blot测定各组RGCs中Bcl-2、Bax蛋白表达。结果随着小鼠青光眼模型作用时间增加,小鼠视网膜内miR-135a-5p表达逐渐降低,RGCs活细胞数量逐渐降低(P<0.05);miR-135a-5p组miR-135a-5p表达水平及RGCs活性均高于空白组,空白组高于miR-135a-5p抑制剂组(P<0.05);miR-135a-5p组RGCs Bcl-2蛋白表达高于空白组,空白组高于miR-93-5p抑制剂组(P<0.05);miR-135a-5p组RGCs Bax蛋白表达水平低于空白组,空白组低于miR-135a-5p抑制剂组(P<0.05);miR-135a-5p组RGCs凋亡率低于空白组,空白组低于miR-135a-5p抑制剂组(P<0.05)。结论miR-135a-5p在青光眼RGCs中呈低表达,miR-135a-5p高表达能降低青光眼RGCs的凋亡,其机制可能是通过调控miR-135a-5p/Bcl-2/Bax轴实现。 展开更多
关键词 青光眼 神经节细胞 mir-135a-5p Bcl-2 BAX 细胞凋亡
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miR-135a-5p抑制胆囊癌细胞增殖的研究 被引量:7
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作者 殷保兵 王一飞 +3 位作者 杨光华 周华丁 马保金 蔡端 《外科理论与实践》 2014年第2期140-144,共5页
目的:探讨miR-135a-5p对胆囊癌的作用及其机制。方法:采用实时PCR检测miR-135a-5p和VLDLR在23对胆囊癌与癌旁组织的表达。采用miR-135a-5p模拟物转染胆囊癌细胞,通过细胞增殖(CCK-8)曲线、单克隆集落形成实验和细胞周期实验(流式细胞仪)... 目的:探讨miR-135a-5p对胆囊癌的作用及其机制。方法:采用实时PCR检测miR-135a-5p和VLDLR在23对胆囊癌与癌旁组织的表达。采用miR-135a-5p模拟物转染胆囊癌细胞,通过细胞增殖(CCK-8)曲线、单克隆集落形成实验和细胞周期实验(流式细胞仪),检测miR-135a-5p对胆囊癌细胞增殖的影响。用Western印迹和Luciferase双荧光素酶报告系统验证和VLDLR受miR-135a-5p的调控。结果:在23对胆囊癌与癌旁组织中,癌组织的miR-135a-5p表达水平低于癌旁组织。体外实验证实miR-135a-5p通过G1期阻滞抑制胆囊癌细胞的增殖,且可通过作用于VLDLR mRNA降低其蛋白质水平。结论:miR-135a-5p抑制胆囊癌的增殖,可能是胆囊癌治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-135a-5p 胆囊癌 增殖 极低密度脂蛋白受体
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男性不育患者精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平检测的价值
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作者 朱媛媛 卞玉莹 +4 位作者 徐天 邵永 张春妮 王成 顾万建 《临床检验杂志》 CAS 2023年第10期740-744,共5页
目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南... 目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUC^(ROC));相关性分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14,P<0.01;H=21.37,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低(U=687,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U=779,P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC分别为0.764(95%CI:0.675~0.854),0.711(95%CI:0.612~0.810)和0.782(95%CI:0.695~0.869),0.733(95%CI:0.637~0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p和miR-135b-5p为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。 展开更多
关键词 男性不育 精浆 mir-135a-5p mir-135b-5p
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miR-135a-5p通过调控CXCL12表达降低吗啡耐受
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作者 何华美 陆巍 《基础医学与临床》 CAS 2024年第5期665-672,共8页
目的研究miR-135a-5p调控CXCL12对C57BL/6J小鼠吗啡耐受的影响。方法将64只小鼠随机分为:对照(NS)组、吗啡耐受(MT)组、CXCL12沉默(CXCL12-siRNA)组、沉默阴性对照(NC-siRNA)组、miR-135a-5p激动剂(miR-agomir)组、激动剂阴性对照(miR-... 目的研究miR-135a-5p调控CXCL12对C57BL/6J小鼠吗啡耐受的影响。方法将64只小鼠随机分为:对照(NS)组、吗啡耐受(MT)组、CXCL12沉默(CXCL12-siRNA)组、沉默阴性对照(NC-siRNA)组、miR-135a-5p激动剂(miR-agomir)组、激动剂阴性对照(miR-NC)组、miR-135a-5p激动剂+CXCL12过表达(miR-agomir+LV-CXCL12)组、miR-135a-5p激动剂+过表达阴性对照(miR-agomir+LV-control)组。通过皮下注射给药建立吗啡镇痛耐受模型,采用温水甩尾法测定各组小鼠给药前和给药后的热甩尾时间(TL);造模结束后麻醉处死小鼠并取L4~L5脊髓组织,RT-qPCR检测miR-135a-5p及CXCL12 mRNA的表达,Western blot检测CXCL12蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-135a-5p、CXCL12的靶向关系。结果1)成功建立吗啡耐受小鼠模型,与NS组相比,MT组CXCL12 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),miR-135a-5p显著下调(P<0.05)。2)沉默Cxcl12及过表达miR-135a-5p均提高吗啡耐受小鼠热痛阈值,显著减缓吗啡耐受的发生发展(P<0.05)。3)与miR-NC相比,miR-agomir组CXCL12 mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05)。4)双荧光素酶报告基因实验显示miR-135a-5p靶向作用于Cxcl12。5)过表达CXCL12可逆转miR-135a-5p对吗啡耐受小鼠的热痛保护作用。结论miR-135a-5p通过靶向抑制CXCL12表达进而缓解吗啡耐受的形成。 展开更多
关键词 吗啡耐受 CXC趋化因子配体12(CXCL12) 微小RNA mir-135a-5p
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白山毛桃根提取物联合miR-135a-5p抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及迁移的机制
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作者 贾海燕 张志恒 刘玲 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第3期700-705,共6页
目的 探讨白山毛桃根提取物对宫颈癌细胞HeLa增殖、侵袭及迁移的影响及分子机制。方法 不同浓度的白山毛桃根提取物处理HeLa细胞,将miR-NC、miR-135a-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-135a-5p分别转染至HeLa细胞,将anti-miR-NC、anti-... 目的 探讨白山毛桃根提取物对宫颈癌细胞HeLa增殖、侵袭及迁移的影响及分子机制。方法 不同浓度的白山毛桃根提取物处理HeLa细胞,将miR-NC、miR-135a-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-135a-5p分别转染至HeLa细胞,将anti-miR-NC、anti-miR-135a-5p分别转染至HeLa细胞后用40 mg/ml白山毛桃根提取物处理细胞;噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移;qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-135a-5p的表达量;Western印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、p-磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和p-蛋白激酶B(Akt)蛋白表达量。结果 白山毛桃根提取物可显著降低细胞活力、克隆数、侵袭和迁移细胞数、miR-135a-5p表达和MMP2、MMP9、p-PI3K、p-Akt蛋白水平(P<0.05);转染anti-miR-135a-5p可降低细胞活力、克隆数、侵袭和迁移细胞数、MMP2、MMP9、p-PI3K、p-Akt蛋白水平(P<0.05),而转染miR-135a-5p mimics的作用与之相反;转染anti-miR-135a-5p可增强白山毛桃根提取物对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K/Akt信号通路的抑制作用。结论 白山毛桃根提取物可通过降低miR-135a-5p表达使PI3K/Akt通路失活,进而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 宫颈癌 白山毛桃根提取物 mir-135a-5p 磷脂酰肌醇-3激酶(pI3K)/蛋白激酶B(Akt)
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miR-135a-5p在子宫内膜癌中的表达及意义 被引量:4
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作者 冷洪锐 孔繁菲 马晓欣 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期485-488,共4页
目的探讨子宫内膜癌中miR-135a-5p的表达及意义。方法收集中国医科大学附属盛京医院妇产科2016年手术切除的子宫内膜癌组织55例以及对照组正常子宫内膜标本30例,运用实时PCR检测miR-135a-5p在子宫内膜癌组织以及正常子宫内膜标本的表达... 目的探讨子宫内膜癌中miR-135a-5p的表达及意义。方法收集中国医科大学附属盛京医院妇产科2016年手术切除的子宫内膜癌组织55例以及对照组正常子宫内膜标本30例,运用实时PCR检测miR-135a-5p在子宫内膜癌组织以及正常子宫内膜标本的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系及意义。结果子宫内膜癌组织中miR-135a-5p的表达水平低于正常子宫内膜组织,具有统计学差异(P=0.021);miR-135a-5p在子宫内膜癌中的表达与肿瘤的分化程度有关(P=0.008);结论miR-135a-5p在子宫内膜癌中低表达并且与子宫内膜癌的发生、发展有关。 展开更多
关键词 mir-135a-5p 子宫内膜癌 表达
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miR-135a-5p对氟他胺致隐睾小鼠胰岛素样因子3及睾酮表达的影响
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作者 杨远贵 安妮妮 +6 位作者 陈辉 何国庆 占雄 吴谋东 汪丹 王蔚 彭金普 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1662-1665,共4页
目的探讨miR-135a-5p对氟他胺导致的隐睾症小鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)和睾酮表达水平的影响。方法构建氟他胺致隐睾小鼠模型,将实验分为正常对照组、氟他胺组、氟他胺+miR-135a-5p敲降组及氟他胺+miR-135a-5p过表达组。用RT-q... 目的探讨miR-135a-5p对氟他胺导致的隐睾症小鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)和睾酮表达水平的影响。方法构建氟他胺致隐睾小鼠模型,将实验分为正常对照组、氟他胺组、氟他胺+miR-135a-5p敲降组及氟他胺+miR-135a-5p过表达组。用RT-qPCR法检测小鼠睾丸组织中miR-135a-5p和INSL3 mRNA的表达水平;用Western blot检测INSL3蛋白的表达水平;用ELISA法检测睾酮的表达水平。结果氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中miR-135a-5p、INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平均显著下调(P<0.05)。敲降miR-135a-5p可下调隐睾睾丸组织中INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平(P<0.01),而过表达miR-135a-5p则具有相反的结果。结论miR-135a-5p在氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中低表达,过表达miR-135a-5p可恢复INSL3和睾酮的表达水平。 展开更多
关键词 隐睾症 氟他胺 mir-135a-5p 胰岛素样因子3 睾酮
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circ_LARP4调控miR-135a-5p/PCDH9抑制膀胱癌细胞T24生物学行为
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作者 张萌 张盼 +3 位作者 李令勋 罗成君 晏萧 韦堂墙 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3197-3202,共6页
目的探讨circ_核糖核蛋白(LARP)4对膀胱癌细胞T24增殖、迁移和凋亡的影响及分子机制。方法选取膀胱癌患者的癌组织及癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_LARP4和miR-135a-5p的表达水平;Western印迹法检测原钙黏蛋白(PC... 目的探讨circ_核糖核蛋白(LARP)4对膀胱癌细胞T24增殖、迁移和凋亡的影响及分子机制。方法选取膀胱癌患者的癌组织及癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_LARP4和miR-135a-5p的表达水平;Western印迹法检测原钙黏蛋白(PCDH)9蛋白表达;将T24细胞随机分为pcDNA-circ_LARP4组、pcDNA组、anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组、pcDNA-circ_LARP4+miR-135a-5p组;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测集落形成数;细胞移动范围采用划痕实验进行检测;采用流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测circ_LARP4、miR-135a-5p、PCDH9之间的靶向关系。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中circ_LARP4和PCDH9蛋白的表达水平显著降低,miR-135a-5p表达水平显著升高(P<0.05)。过表达circ_LARP4或抑制miR-135a-5p表达,PCDH9蛋白表达水平升高,miR-135a-5p表达水平降低,T24增殖抑制率升高,集落形成数减少,迁移距离缩短,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-135a-5p可逆转circ_LARP4对T24细胞增殖、迁移的抑制和凋亡的诱导作用。circ_LARP4靶向miR-135a-5p,miR-135a-5p靶向PCDH9。结论circ_LARP4通过调控miR-135a-5p/PCDH9轴抑制膀胱癌细胞T24的增殖、迁移,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 circ_LARp4 mir-135a-5p pCDH9 膀胱癌 增殖 迁移
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miR-135a-5p在乳腺癌患者血清中的表达及意义 被引量:4
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作者 黄俊婷 潘利咸 朱俊琳 《重庆医学》 CAS 2019年第8期1330-1333,共4页
目的探讨miR-135a-5p在乳腺癌患者血清中的表达及意义。方法选取2017年1月至2018年1月该院收治的80例乳腺癌患者,50例乳腺增生患者及50例体检健康者为研究对象,均为女性,收集3组血清样本并分别检测其血清miR-135a-5p、糖类抗原125(CA125... 目的探讨miR-135a-5p在乳腺癌患者血清中的表达及意义。方法选取2017年1月至2018年1月该院收治的80例乳腺癌患者,50例乳腺增生患者及50例体检健康者为研究对象,均为女性,收集3组血清样本并分别检测其血清miR-135a-5p、糖类抗原125(CA125)表达水平,采用ROC曲线评价血清miR-135a-5p在乳腺癌中的诊断效能。结果乳腺癌患者血清miR-135a-5p的相对表达水平及CA125水平显著高于乳腺增生患者和体检健康者,差异有统计学意义(P<0.01);miR-135a-5p诊断乳腺癌的灵敏度、阳性预测值及阴性预测值均高于CA125,其诊断特异度与CA125相同;miR-135a-5p联合CA125诊断乳腺癌的灵敏度和阴性预测值均有所提升;乳腺癌患者血清miR-135a-5p相对表达水平与肿瘤的TNM分期及分化程度密切相关(P<0.05),而与患者的年龄、是否绝经、肿瘤大小、病理类型无明显相关性(P>0.05);采用ROC曲线评价血清miR-135a-5p在乳腺癌中的诊断效能,其曲线下面积为0.847(95%CI:0.609~0.973),诊断灵敏度为91.82%,特异度为77.35%。结论 miR-135a-5p在乳腺癌患者血清中表达明显上调,血清miR-135a-5p对乳腺癌诊断的敏感度和特异度均较高,或将成为乳腺癌临床诊断的生物学标志物之一。 展开更多
关键词 mir-135a-5p 乳腺肿瘤 血清 基因表达 诊断 鉴别
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HR-HPV宫颈上皮内瘤变术后miR-145、miR-135a-5p、miR-365的表达与HR-HPV转归的关系及预测价值 被引量:1
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作者 刘晓丽 毕颖 +2 位作者 王绍海 陈湘玲 唐军霞 《南昌大学学报(医学版)》 2022年第4期47-52,共6页
目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)宫颈上皮内瘤变(CIN)患者术后微小RNA-145(miR-145)、miR-135a-5p、miR-365的表达与HR-HPV转归的关系及预测价值。方法选取2019年2月至2021年3月武汉市红十字会医院和华中科技大学附属协和医院行手... 目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)宫颈上皮内瘤变(CIN)患者术后微小RNA-145(miR-145)、miR-135a-5p、miR-365的表达与HR-HPV转归的关系及预测价值。方法选取2019年2月至2021年3月武汉市红十字会医院和华中科技大学附属协和医院行手术治疗HR-HPV CIN患者98例,根据HR-HPV感染转归分为转阴组(n=48)、未转阴组(n=50)。比较2组一般资料、miR-145、miR-135a-5p、miR-365表达;采用多因素Logistic回归分析术后HR-HPV感染转归的影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析miR-145、miR-135a-5p、miR-365预测术后HR-HPV感染转归的价值。结果未转阴组miR-145、miR-365表达低于转阴组,miR-135a-5p表达高于转阴组(均P<0.05);miR-145、miR-365是转阴的保护因素,miR-135a-5p是转阴的危险因素(均P<0.05);miR-145、miR-135a-5p联合miR-365预测HR-HPV转阴的AUC(0.925)大于单独的miR-145(0.769)、miR-135a-5p(0.800)、miR-365(0.799);miR-145、miR-365高水平者持续感染风险分别是低水平者的0.449倍、0.465倍,miR-135a-5p高水平者持续感染风险是低水平者的3.712倍(均P<0.05)。结论CIN术后miR-145、miR-365表达降低和miR-135a-5p表达升高与HR-HPV转归密切相关,三者联合检测可能是早期预测HR-HPV感染转归的有效方法。 展开更多
关键词 mir-145 mir-135a-5p mir-365 高危型人乳头瘤病毒 宫颈上皮内瘤变术
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miR-135a-5p通过Smad4基因调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡 被引量:3
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作者 杜静 吴日然 +2 位作者 林秀峰 柯玩娜 高子轩 《热带医学杂志》 CAS 2020年第7期892-897,911,共7页
目的探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡。方法体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹... 目的探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡。方法体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-135a-5p、Smad4的表达量;分别用anti-miR-con、anti-miR-135a-5p、anti-miR-135a-5p与si-con、anti-miR-135a-5p与si-Smad4转染至卵巢颗粒细胞;甲基噻唑基四唑法(MTT)检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测过表达miR-135a-5p对野生型和突变型Smad4荧光素酶活性的影响;Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达量。结果与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,KGN细胞中miR-135a-5p的表达水平显著升高,Smad4 mRNA及蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与anti-miR-con组比较,anti-miR-135a-5p组细胞活力显著降低,克隆形成数显著减少,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著降低,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实miR-135a-5p能够抑制Smad4的3′-UTR区荧光素酶活性;与anti-miR-135a-5p+sicon组比较,anti-miR-135a-5p+si-Smad4组细胞活力显著升高,克隆形成数显著增多,细胞凋亡率显著降低,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论干扰miR-135a-5p可能通过靶向调控Smad4的表达从而抑制卵巢颗粒细胞增殖及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-135a-5p SMAD4 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 增殖 凋亡
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咪唑安定联合miR-135a-5p影响宫颈癌细胞HeLa增殖 迁移及侵袭的机制研究
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作者 叶露露 曾庆亮 《中国妇幼保健》 CAS 2023年第23期4685-4688,共4页
目的 探讨咪唑安定对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法 以RPMI-1640培养基对HeLa细胞常规培养,分别用25、50、100μmol/L的咪唑安定处理,记为低、中、高剂量组,常规培养的细胞作为NC组;将miR-135a-5p抑制剂及阴性... 目的 探讨咪唑安定对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法 以RPMI-1640培养基对HeLa细胞常规培养,分别用25、50、100μmol/L的咪唑安定处理,记为低、中、高剂量组,常规培养的细胞作为NC组;将miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞,记为anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组;miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞后用100μmol/L的咪唑安定处理,记为anti-miR-135a-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组。CCK-8检测细胞活性;Western blot法检测蛋白表达;克隆形成实验检测细胞克隆;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135a-5p表达水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭。结果 不同剂量咪唑安定处理后,HeLa细胞活性、CyclinD1、MMP2、MMP9表达、细胞克隆、迁移和侵袭数量、miR-135a-5p表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。下调miR-135a-5p降低HeLa细胞活性、MMP2、CyclinD1、MMP9表达、细胞克隆、迁移和侵袭数降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。下调miR-135a-5p可加强咪唑安定对HeLa细胞的作用。结论 咪唑安定联合miR-135a-5p可抑制宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 咪唑安定 mir-135a-5p 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭
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宫颈癌癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义 被引量:3
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作者 蔡晓磊 熊丽丽 梁静 《实验与检验医学》 CAS 2021年第2期298-301,共4页
目的探讨宫颈癌癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义。方法选取2016年6月-2018年7月在医院行宫颈癌手术切除的存档蜡块和癌旁正常组织(距病变部位>5cm处,且证实为无癌浸润)石蜡标本各90例作为研究对象。采用免疫组... 目的探讨宫颈癌癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义。方法选取2016年6月-2018年7月在医院行宫颈癌手术切除的存档蜡块和癌旁正常组织(距病变部位>5cm处,且证实为无癌浸润)石蜡标本各90例作为研究对象。采用免疫组化法检测宫颈癌组织中STAT3的表达,实时定量荧光聚合酶链反应(qPCR)检测miR-365、miR-135a-5p表达水平,分析miR-365、miR-135a-5p及STAT3与宫颈癌患者临床病理参数及预后的关系。结果miR-365在宫颈癌组织中的相对表达量低于癌旁组织,miR-135a-5p的相对表达量、STAT3的阳性表达率均高于癌旁组织(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移、高分化、直径≥5cm的宫颈癌组织中miR-365相对表达量分别高于FIGO分期I~II期、未合并淋巴结转移、低分化、直径<5cm的宫颈癌组织(P<0.05);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移的宫颈癌组织中miR-135a-5p相对表达量分别高于FIGO分期I~II期、未合并淋巴结转移的癌组织(P<0.05)。宫颈癌组织中miR-135a-5p的表达与STAT3呈显著正相关(r=0.388,P<0.05)。90例宫颈癌患者2年总生存率为66.67%(60/90),ROC曲线分析显示miR-365、miR-135a-5p及STAT3的曲线下面积(AUC)分别为0.855、0.735、0.549。结论miR-365、miR-135a-5p的表达水平均与临床分期、淋巴结转移相关,miR-365还与肿瘤大小、分化程度有关,miR-135a-5p的表达与STAT3具有显著相关性;其中miR-365、miR-135a-5p对患者预后的预测价值较高。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-365 STAT3 mir-135a-5p 预后
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丙型肝炎病毒调控ADAR1逃避先天免疫的机制研究
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作者 王本鑫 王福义 孟凡鑫 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第10期1213-1218,共6页
目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)调控ADAR1逃避先天免疫的潜在机制。方法通过siRNA敲低ADAR1(敲低组)或GFP(对照组)后,检测炎症因子和干扰素的mRNA水平、IFNγ的分泌水平和HCV的复制水平。HCV感染Huh7细胞(HCV组)或不感染Huh7细胞(MOCK组)后... 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)调控ADAR1逃避先天免疫的潜在机制。方法通过siRNA敲低ADAR1(敲低组)或GFP(对照组)后,检测炎症因子和干扰素的mRNA水平、IFNγ的分泌水平和HCV的复制水平。HCV感染Huh7细胞(HCV组)或不感染Huh7细胞(MOCK组)后,检测ADAR1的mRNA水平和蛋白水平,以及ADAR1的启动子活性。通过miRDB在线预测ADAR1的miRNA。HCV感染Huh7细胞后,检测上述miRNA的表达水平。过表达差异miRNA或negative control(对照组)后检测ADAR1的表达水平。结果与对照组比较,敲低组炎症因子和干扰素的mRNA水平均上升,IFNγ的分泌水平上升,HCV的复制水平下降(P<0.05)。与MOCK组比较,HCV组ADAR1在mRNA水平和蛋白水平均明显上升(P<0.05),但是,ADAR1的启动子活性没有明显变化(P>0.05)。miRDB在线分析发现有多种潜在靶向ADAR1的miRNA。HCV感染Huh7细胞后,通过实时荧光定量PCR检测上述miRNA,与对照组比较,hsa-miR-613、hsa-miR-206、hsa-miR-135b-5p、hsa-miR-135a-5p、hsa-miR-6803-5p、hsa-miR-4530、hsa-miR-3915的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达上述miRNA后,与对照组比较,hsa-miR-135b-5p和hsa-miR-135a-5p能够在mRNA水平减少ADAR1的表达(P<0.05)。与对照组比较,过表达hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均下降(P<0.05)、IFNγ的分泌水平上升(P<0.05)、HCV的复制水平下降(P<0.05);与对照组比较,敲低hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均上升,IFNγ的分泌水平下降,HCV的复制水平上升(P<0.05)。结论HCV感染后,Huh7细胞中hsa-miR-135a-5p和miR-135b-5p的表达水平下降,其靶向ADAR1 mRNA的3′端非编码区的水平下降,随后ADAR1的表达水平上升,抑制了宿主的先天免疫,促进了HCV的复制。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 ADAR1 先天免疫 mir-135a-5p mir-135b-5p
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Long non-coding RNA plasmacytoma variant translocation 1 linked to hypoxia-induced cardiomyocyte injury of H9c2 cells by targeting miR-135a-5p/forkhead box O1 axis 被引量:3
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作者 Jin-Juan Xu Wei-Hong Zheng +1 位作者 Jun Wang Yuan-Yuan Chen 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2020年第24期2953-2962,共10页
Background:Myocardial infarction occurs due to insufficient(ischemia)blood supply to heart for long time;plasmacytoma variant translocation 1(PVT1)is a long non-coding RNAs(lncRNAs)involved in the pathogenesis of vari... Background:Myocardial infarction occurs due to insufficient(ischemia)blood supply to heart for long time;plasmacytoma variant translocation 1(PVT1)is a long non-coding RNAs(lncRNAs)involved in the pathogenesis of various diseases,including heart disease;However,few studies have explored its role.The present study evaluated the effects of lncRNA PVT1 on hypoxic rat H9c2 cells.Methods:Hypoxic injury was examined by measuring cell viability and apoptosis by using cell counting kit-8 activity and flow cytometry assays.Gene expressions after hypoxia were estimated by quantitative real time polymerase chain reaction and the signaling pathway were explored by Western blot analysis.RNA immunoprecipitation and luciferase reporter assays were applied to examine the interactions among genes.Data were analyzed using t-test with one-way or two-way analysis of variance.Results:The lncRNA PVT1 is up-regulated in hypoxia-stressed H9c2 cells and knockdown of PVT1 mitigates hypoxia-induced injury in H9c2 cells.PVT1 acts as a sponge for miR-135a-5p and knockdown of PVT1 attenuated the increased hypoxia-induced injury by up-regulating miR-135a-5p.Forkhead box O1(FOXO1)was identified as a target of miR-135a-5p,and the expression was negatively regulated by miR-135a-5p.The exploration of the underlying mechanism demonstrated that knockdown of FOXO1 reversed PVT1/miR-135a-5p mediated hypoxia-induced injury in H9c2 cells.Conclusions:PVT1 plays a crucial role in hypoxia-injured H9c2 cells through sponging miR-135a-5p and then positively regulating FOXO1. 展开更多
关键词 Acute myocardial infarction pVT1 mir-135a-5p FOXO1
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miR-135a-5p通过抑制FOXOl的表达促进鼻咽癌的发生 被引量:1
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作者 周本益 戴珊 陈斌 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第3期187-193,共7页
目的确定miR-135u-5p与F0X01的靶向关系,探索miR-135a-5p和F0X01的相互作用对鼻咽癌的影响。方法体内实验:将鼻咽癌细胞5-8F细胞注射到裸鼠中构建鼻咽癌肿箱模型,将小鼠分为模型组和miR-135a-Sp anlagomir组,用RT-qPCR检测两组小鼠中miR... 目的确定miR-135u-5p与F0X01的靶向关系,探索miR-135a-5p和F0X01的相互作用对鼻咽癌的影响。方法体内实验:将鼻咽癌细胞5-8F细胞注射到裸鼠中构建鼻咽癌肿箱模型,将小鼠分为模型组和miR-135a-Sp anlagomir组,用RT-qPCR检测两组小鼠中miR-135a-5p和FOXOI的水平,检测肿瘤的重量和小鼠30 d内的存活率,免疫组化检测肿瘤组织中Ki67和Casps-3的表达:体外实验:RT-qPCR检测正常鼻咽细胞系NP69和鼻咽癌细胞系(CNE-2R.5-8F.C666-1.CNE-1)中miR-135a-5p和FOXOI的表达情况:分别用mifR-135a-5p inhibitor.NC inhibitor.sh-F0X01、sh-NC转染5-8F细胞,RT-qPCR检测转染效率,Westem印迹检测其中FOX0I蛋白的表达水平;用双荧光素酶报告基因实验检测F0XO1-WT和F0X01-MUT重组质粒对荧光素酶活性的影响:用Edu染色、流式细胞技术,Trunswell检测对照组,miR-135a-5p inhibir组、sh-FOX01组5-8F细胞的增殖、凋亡、侵袭能力。结果相对于模型组,注射miR-135u-5p antuyomir的模型小鼠体内miR-135a-5p的表达显著降低,面FOXOI却显著升高,肿瘤重量降低,小鼠30 d的存活率升高,Ki67的表达降低,Caspase-3表达升高;miR-135a-5p在正常鼻咽细胞中低表达,在鼻咽癌细胞中高表达,而F0X01却出现截然相反的表达趋势;转染milR-135a-5p inhibsior的鼻咽癌5-8F细胞中F0X01蛋白表达水平显著高于对照组和sh-F0X01组;野生型(F0X01-WT)相比于突变型(FOX01-MUT)能使荧光素酶活性显著下降;miR-135a-5p inhibhior组Fdu阳性细胞数和侵袭细胞数比对照组和sh-F0X01组显著减少,细胞洞亡率显著升商。结论miR-135a-5p通过靶向抑制FOX01表达促进鼻咽密的发生。 展开更多
关键词 mir-135a-5p F0 X01基因 鼻咽癌 增殖 凋亡 侵袭能力
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沉默MBNL1-AS1对H_(2)O_(2)诱导心肌细胞损伤的影响
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作者 郭亮 余新建 《河北医药》 CAS 2022年第15期2259-2262,2267,共5页
目的探讨lncRNA MBNL1-AS1对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的影响及分子机制。方法将H9C2细胞分为Con组、过氧化氢(H_(2)O_(2))组、H_(2)O_(2)+si-NC组、H_(2)O_(2)+si-MBNL1-AS1组、H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+miR-135a-5p组、H_(2... 目的探讨lncRNA MBNL1-AS1对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的影响及分子机制。方法将H9C2细胞分为Con组、过氧化氢(H_(2)O_(2))组、H_(2)O_(2)+si-NC组、H_(2)O_(2)+si-MBNL1-AS1组、H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+miR-135a-5p组、H_(2)O_(2)+si-MBNL1-AS1+anti-miR-NC组、H_(2)O_(2)+si-MBNL1-AS1+anti-miR-135a-5p组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MBNL1-AS1和miR-135a-5p的表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测KLF4蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测SOD活性和MDA含量;双荧光素酶报告实验检测MBNL1-AS1与miR-135a-5p,miR-135a-5p与KLF4的靶向关系。结果过氧化氢诱导的心肌细胞中MBNL1-AS1表达水平升高,miR-135a-5p表达水平降低,KLF4蛋白表达水平升高,细胞的凋亡率升高,MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.05)。沉默MBNL1-AS1或过表达miR-135a-5p,miR-135a-5p表达水平升高,KLF4蛋白表达水平降低,心肌细胞的凋亡率降低,MDA含量降低,SOD活性升高(P<0.05)。MBNL1-AS1靶向调控miR-135a-5p,miR-135a-5p靶向调控KLF4。抑制miR-135a-5p可逆转沉默MBNL1-AS1对H_(2)O_(2)诱导的H9C2损伤的作用。结论沉默MBNL1-AS1可能通过调控miR-135a-5p/KLF4抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 lncRNA MBNL1-AS1 mir-135a-5p 心肌细胞 凋亡 氧化应激
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FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 杨虓 陈冉 王晓明 《解放军医药杂志》 CAS 2022年第6期11-16,20,共7页
目的探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞... 目的探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞分别或联合转染si-NC、si-FOXD3-AS1-1、si-FOXD3-AS1-2、miR-NC、miR-135a-5p mimic、pcDNA3.1-FOXD3-AS1和miR-135a-5p inhibitor;行Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;行划痕闭合实验检测各组细胞迁移能力;行双荧光素酶实验检测靶向关系。建立裸鼠RCC移植瘤模型,分为si-FOXD3-AS1组和si-NC组,每组6只,建模后30 d处死测定移植瘤质量,采用免疫组织化学法检测Ki-67和E-cadherin阳性表达率。结果与癌旁组织比较,癌组织中FOXD3-AS1表达显著上升,miR-135a-5p表达显著下降(P<0.01)。FOXD3-AS1干扰显著降低细胞活力、侵袭数目和划痕闭合率(P<0.01)。FOXD3-AS1与miR-135a-5p存在靶向关系,FOXD3-AS1干扰可促进miR-135a-5p水平进而抑制ACHN细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05,P<0.01)。在裸鼠实验中,FOXD3-AS1干扰抑制移植瘤生长,抑制Ki-67和E-cadherin阳性表达(P<0.01)。结论FOXD3-AS1通过下调miR-135a-5p促进RCC细胞增殖、迁移和侵袭,FOXD3-AS1和miR-135a-5p可能成为RCC治疗的潜在靶标。 展开更多
关键词 肾细胞癌 FOXD3-AS1 mir-135a-5p 细胞增殖 细胞运动
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miR-135a-5p增强舌鳞状细胞癌细胞对奥沙利铂敏感性研究
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作者 卢娜 张强 +1 位作者 袁荃 王晓波 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第12期1191-1197,共7页
目的探讨miR-135a-5p增强舌鳞状细胞癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)敏感性的作用及其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测人口腔角质形成细胞(human oral keratinocyte,HOK)和舌鳞状细胞癌细胞系CAL-27、SCC9、SCC25细胞中mi... 目的探讨miR-135a-5p增强舌鳞状细胞癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)敏感性的作用及其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测人口腔角质形成细胞(human oral keratinocyte,HOK)和舌鳞状细胞癌细胞系CAL-27、SCC9、SCC25细胞中miR-135a-5p和B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,BMI1)mRNA相对表达量,采用Western blot法检测4种细胞BMI1蛋白相对表达量。对数生长期SCC25细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-135a-5p模拟物组(miR-135a-5p模拟物)和空白对照组(不进行转染操作),采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞miR-135a-5p和BMI1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测3组细胞BMI1蛋白相对表达量,采用荧光素酶报告实验检测miR-135a-5p与BMI1的靶向关系。SCC25细胞加入不同浓度L-OHP,采用CCK-8实验检测L-OHP对细胞的半数抑制浓度,确定L-OHP在后续实验中的浓度。对数生长期SCC25细胞再分为miR-NC+pcDNA-NC组(转染miR-NC和pcDNA-NC)、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组(转染miR-135a-5p模拟物和pcDNA-NC)、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组(转染miR-135a-5p模拟物和pcDNA-BMI1)、对照组(不进行转染操作),采用实时荧光定量PCR法检测细胞miR-135a-5p和BMI1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞BMI1蛋白相对表达量,采用EdU增殖实验检测细胞增殖情况,采用Transwell实验检测迁移细胞数和侵袭细胞数,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CAL-27、SCC9、SCC25细胞miR-135a-5p相对表达量(0.43±0.04、0.62±0.09、0.41±0.07)均低于HOK细胞(1.00±0.15)(P<0.05),BMI1 mRNA(4.57±0.67、2.64±0.59、5.82±0.87)和蛋白(0.61±0.22、0.34±0.28、1.00±0.24)相对表达量均高于HOK细胞(1.00±0.31、0.21±0.14)(P<0.05);与HOK细胞比较,SCC25细胞miR-135a-5p、BMI1 mRNA和蛋白相对表达量差异最大,选用SCC25细胞进行后续实验。miR-135a-5p模拟物组细胞miR-135a-5p相对表达量高于miR-NC� 展开更多
关键词 舌鳞状细胞癌 奥沙利铂 mir-135a-5p B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1 敏感性
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