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Differentiation of isolated human umbilical cord mesenchymal stem cells into neural stem cells 被引量:22
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作者 Song Chen Wei Zhang +6 位作者 Ji-Ming Wang Hong-Tao Duan Jia-Hui Kong Yue-Xin Wang Meng Dong Xue Bi Jian Song 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2016年第1期41-47,共7页
AIM:To investigate whether umbilical cord human mesenchymal stem cell(UC-MSC)was able to differentiate into neural stem cell and neuron.·METHODS:The umbilical cords were o btained from pregnant women with the... AIM:To investigate whether umbilical cord human mesenchymal stem cell(UC-MSC)was able to differentiate into neural stem cell and neuron.·METHODS:The umbilical cords were o btained from pregnant women with their written consent and the approval of the Clinic Ethnics Committee.UC-MSC were isolated by adherent culture in the medium contains 20%fetal bovine serum(FBS),then they were maintained in the medium contain 10%FBS and induced to neural cells in neural differentiation medium.We investigated whether UC-MSC was able to differentiate into neural stem cell and neuron by using flow cytometry,reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR)and immunofluorescence(IF)analyzes.·R ESULTS:A substantial number of UC-MSC was harvested using the tissue explants adherent method at about 2wk.Flow cytometric study revealed that these cells expressed common markers of MSCs,such as CD105(SH2),CD73(SH3)and CD90.After induction of differentiation of neural stem cells,the cells began to form clusters;RT-PCR and IF showed that the neuron specific enolase(NSE)and neurogenic differentiation 1-positive cells reached 87.3%±14.7%and 72.6%±11.8%,respectively.Cells showed neuronal cell differentiation after induced,including neuron-like protrusions,plump cell body,obviously and stronger refraction.RT-PCR and IF analysis showed that microtubule-associated protein 2(MAP2)and nuclear factor-M-positive cells reached 43.1%±10.3%and 69.4%±19.5%,respectively.·CONCLUSION:Human umbilical cord derived MSCs can be cultured and proliferated and differentiate into neural stem cells,which may be a valuable source for cell therapy of neurodegenerative eye diseases. 展开更多
关键词 human umbilical cord mesenchymal stemcells neural stem cells NEURON neurodegenerative eye diseases
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补肾活血汤促骨折端间充质干细胞体外迁移及CCR2表达的研究 被引量:18
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作者 王斌 罗毅文 +1 位作者 黄永铨 刘亚梅 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2015年第8期1-5,共5页
目的:探讨补肾活血汤对骨折端间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)体外迁移及表面受体CC类趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor-2,CCR2)表达的影响。方法:补肾活血汤灌胃治疗大鼠股骨中段骨折模型7、14、21d,分别取骨折... 目的:探讨补肾活血汤对骨折端间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)体外迁移及表面受体CC类趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor-2,CCR2)表达的影响。方法:补肾活血汤灌胃治疗大鼠股骨中段骨折模型7、14、21d,分别取骨折端MSCs进行培养,传至第3代采用Transwell体外迁移实验检测补肾活血汤对骨折端MSCs体外迁移的影响,Western Blot、qPCR检测CCR2的表达。结果:补肾活血汤治疗后第7、14天,骨折端MSCs体外迁移能力明显加强,与模型组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。第21天,骨折端MSCs体外迁移能力明显减弱,与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot、qPCR结果显示,补肾活血汤治疗第7天,治疗组CCR2的表达明显高于模型组、对照组(P<0.05)。第14天,CCR2的表达略有上升,与治疗后7d比较,差异无统计学意义(P>0.05),但治疗组仍显著高于模型组、对照组(P<0.05)。第21天,CCR2的表达有所下降,与治疗后7d比较,差异有统计学意义(P<0.05)。但治疗组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验结果还表明,对照组CCR2的表达均处于低水平,7、14、21d比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾活血汤可以促进大鼠骨折愈合过程中MSCs的体外迁移,其相关机制可能与上调CCR2的表达、激活MCP-1/CCR2信号轴有关。 展开更多
关键词 补肾活血汤 间充质干细胞 体外迁移 CCR2
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内质网应激通路与骨质疏松相关性的研究进展 被引量:16
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作者 芮敏劼 郑苏阳 +1 位作者 郭杨 马勇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期877-882,共6页
内质网应激是一种普遍存在于各种细胞内的应激反应。内质网应激可从不同途径影响骨代谢平衡,但其具体机制仍未明确,内质网应激与骨质疏松的关系需要进一步研究。文中首先介绍ERS通路,然而分别就胰腺β细胞、成骨细胞、破骨细胞、间充质... 内质网应激是一种普遍存在于各种细胞内的应激反应。内质网应激可从不同途径影响骨代谢平衡,但其具体机制仍未明确,内质网应激与骨质疏松的关系需要进一步研究。文中首先介绍ERS通路,然而分别就胰腺β细胞、成骨细胞、破骨细胞、间充质干细胞等方面阐述内质网应激与骨质疏松的关系,最后展望治疗骨质疏松药物的研究方向。 展开更多
关键词 内质网应激 骨质疏松 胰腺Β细胞 成骨细胞 破骨细胞 间充质干细胞
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Histone methyltransferases and demethylases:regulators in balancing osteogenic and adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells 被引量:12
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作者 Peng Deng Qian-Ming Chen +1 位作者 Christine Hong Cun-Yu Wang 《International Journal of Oral Science》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期197-204,共8页
Mesenchymal stem cells (MSCs) are characterized by their self-renewing capacity and differentiation potential into multiple tissues. Thus, management of the differentiation capacities of MSCs is important for MSC-ba... Mesenchymal stem cells (MSCs) are characterized by their self-renewing capacity and differentiation potential into multiple tissues. Thus, management of the differentiation capacities of MSCs is important for MSC-based regenerative medicine, such as craniofacial bone regeneration, and in new treatments for metabolic bone diseases, such as osteoporosis. In recent years, histone modification has been a growing topic in the field of MSC lineage specification, in which the Su(var)3-9, enhancer-of-zeste, trithorax (SET) domain-containing family and the Jumonji C (JmjC) domain-containing family represent the major histone lysine methyltransferases (KMTs) and histone lysine demethylases (KDMs), respectively. In this review, we summarize the current understanding of the epigenetic mechanisms by which SET domain-containine KMTs and JmiC domain-containinlz KDMs balance the osteogenic and adipogenic differentiation of MSCs. 展开更多
关键词 ADIPOGENESIS histone methylation histone lysine methyltransferase histone lysine demethylase mesenchymal stemcells osteogenesis
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龙岩山麻鸭胚胎肝间充质干细胞的分离、培养和鉴定
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作者 张月 吴琼 +4 位作者 王蕾 向仕玺 林明昕 吴凯琪 林睿愉 《特产研究》 2024年第4期8-11,共4页
为探索龙岩山麻鸭体外细胞保存方式,本研究建立了胚胎肝间充质干细胞的体外培养体系,从而达到利用细胞保护优异物种资源的目的。选用18~20日龄健康龙岩山麻鸭鸭胚通过胰蛋白酶消化分离出肝间充质干细胞(LMSCs),进行体外培养,细胞形态观... 为探索龙岩山麻鸭体外细胞保存方式,本研究建立了胚胎肝间充质干细胞的体外培养体系,从而达到利用细胞保护优异物种资源的目的。选用18~20日龄健康龙岩山麻鸭鸭胚通过胰蛋白酶消化分离出肝间充质干细胞(LMSCs),进行体外培养,细胞形态观察。通过免疫荧光检测CD29和CD44表面标记物,并进行阳性率分析。龙岩山麻鸭胚胎LMSCs体外增殖能力良好。LMSCs阳性表达了CD29和CD44,阳性表达率分别为95.20%和93.46%。体外分离培养出龙岩山麻鸭胚胎LMSCs,可为水禽干细胞研究提供研究思路,并为龙岩山麻鸭种质资源保护和利用提供参考。 展开更多
关键词 龙岩山麻鸭 肝脏 间充质干细胞 免疫荧光
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Differentiation of human olfactory mucosa mesenchymal stem cells into photoreceptor cells in vitro 被引量:3
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作者 Wen Lu Da Duan +2 位作者 Zacharia Ackbarkhan Ming Lu Min-Li Huang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2017年第10期1504-1509,共6页
AIM:To investigate whether the human olfactory mucosa mesenchymal stem cells(OM-MSCs)can differentiate into photoreceptor cells in vitro.METHODS:Through the olfactory mucosa adherent method,olfactory mucosa was is... AIM:To investigate whether the human olfactory mucosa mesenchymal stem cells(OM-MSCs)can differentiate into photoreceptor cells in vitro.METHODS:Through the olfactory mucosa adherent method,olfactory mucosa was isolated,cultured and identified in vitro among mesenchymal stem cells.The cell surface markers were analyzed by flow cytometry,induced to differentiate into retinal photoreceptor cells in vitro,and the expression of rhodopsin was observed and identified by Immunofluorescence and Western blot methods.RESULTS:OM-MSCs from human were spindle cellbased,and showing radial colony arrangement.OM-MSCs were negative for CD34,CD45 and CD105,but positive for CD73 and CD90.Following induction,a strong positive reaction was produced by photoreceptor specific marker rhodopsin in the cells.CONSLUSION:This novel finding demonstrates that OM-MSCs can be cultured and expanded in vitro.They possess biological characteristics of mesenchymal stem cells,and have the ability to be induced into retinal cells. 展开更多
关键词 human olfactory mucosa mesenchymal stemcells DIFFERENTIATION retinal cells
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hBDNF基因修饰骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 刘凯 刘文革 +1 位作者 王振宇 姚志鹏 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期375-380,共6页
目的探讨人脑源性神经营养因子(humanbrain-derivedneurotrophicfactor,hBDNF)基因修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)移植入大鼠体内后在脊髓损伤区的存活情况、hBDNF蛋白的表达情况及其对大鼠脊髓损伤后神经细胞... 目的探讨人脑源性神经营养因子(humanbrain-derivedneurotrophicfactor,hBDNF)基因修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)移植入大鼠体内后在脊髓损伤区的存活情况、hBDNF蛋白的表达情况及其对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响。方法240只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、损伤组、hBDNF-大鼠MSCs(rMSCs)组和空载体-rMSCs组,每组60只。用Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。造模后7d,于L4。,间隙蛛网膜下腔向hBDNF-rMSCs组、空载体-rMSCs组和损伤组分别注射等体积的hBDNF基因修饰rMSCs悬液、空载体基因修饰rMSCs悬液和PBS。移植后1,2,3,7和14d分别取损伤脊髓组织,用荧光显微镜观察带有增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因的rMSCs在体内的存活分布情况,用Westernblot法检测hBDNF蛋白的表达水平,以原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞的凋亡情况。结果hBDNF-rMSCs组和空载体-rMSCs组均检测到EGFP基因表达的绿色荧光信号;hBDNF-rMSCs组表达hBDNF蛋白,其表达水平随时间而变化,移植后2d即可检测到hBDNF蛋白表达,移植后7dhBDNF表达量最高,此后逐渐下降;移植后2,3,7和14d,hBDNF-rMSC组TUNEL阳性细胞数量最少,空载体-rMSCs组次之,损伤组相对较多,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论脊髓损伤后hBDNF基因修饰rMSCs经蛛网膜下腔移植能聚集生长在脊髓损伤区域,并表达hBDNF蛋白;hBDNF基因修饰rMSCs能够抑制神经细胞的凋亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 脑源性神经营养因子 骨髓间充质干细胞 基因治疗 凋亡
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骨髓间充质干细胞对大鼠减体积肝移植术后肝细胞再生与修复的作用 被引量:2
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作者 宋晓静 宋红丽 +3 位作者 郑卫萍 王政禄 龚慧宾 沈中阳 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第2期184-188,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠减体积肝移植术后肝脏再生与修复的影响。方法采用生化、免疫组化等方法检测术后不同时间的血清和肝脏标本。(1)取同周龄Wistar大鼠骨髓体外培养BMSCs,标记CSFE荧光后制备悬液;(2)建立大鼠50%减... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠减体积肝移植术后肝脏再生与修复的影响。方法采用生化、免疫组化等方法检测术后不同时间的血清和肝脏标本。(1)取同周龄Wistar大鼠骨髓体外培养BMSCs,标记CSFE荧光后制备悬液;(2)建立大鼠50%减体积肝移植模型(供体鼠为SD大鼠,受体鼠为Wistar大鼠),分为实验组(取BMSCs悬液经门静脉植入)和对照组(取等量生理盐水经门静脉注射),观察大鼠生存状态,测量肝再生的相关指标。结果 (1)成功分离培养BMSCs;(2)术后2h,大鼠均自由活动饮水;(3)实验组肝组织中存在大量BMSCs,术后第2、3 d实验组肝体比显著高于对照组。病理显示:实验组肝细胞损伤较对照组轻微。结论植入BMSCs后,可以促进大鼠减体积肝移植术后肝细胞增殖和修复。 展开更多
关键词 骨髓细胞 间质干细胞 肝移植 肝再生
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携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞及其成脂分化 被引量:3
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作者 李世龙 刘毅 惠玲 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第6期999-1003,共5页
背景:胰岛素是成脂诱导剂的重要组成成分。然而胰岛素存在半衰期,会随着体内代谢不断灭活及降解,植入体内的细胞或材料无法像体外那样以更换培养液来达到目的。实验拟通过转染胰岛素基因,使转染后的干细胞稳定分泌胰岛素,促进其成脂分... 背景:胰岛素是成脂诱导剂的重要组成成分。然而胰岛素存在半衰期,会随着体内代谢不断灭活及降解,植入体内的细胞或材料无法像体外那样以更换培养液来达到目的。实验拟通过转染胰岛素基因,使转染后的干细胞稳定分泌胰岛素,促进其成脂分化。目的:探讨携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞后对其成脂分化能力的影响。方法:取第3代人脐带间充质干细胞,以感染复数为20转染腺病毒载体。实验分为4组:对照组为第4代人脐带间充质干细胞;实验组1为腺病毒转染的第4代人脐带间充质干细胞;实验组2为第4代人脐带间充质干细胞+成脂诱导液;实验组3为腺病毒转染的第4代人脐带间充质干细胞+成脂诱导液。结果与结论:转染48h后实验组1和实验组3的人脐带间充质干细胞在荧光显微镜下显现弱荧光,72h后荧光较强。经脂肪诱导培养液培养14d后,实验组1,2,3油红O染色后显微镜下呈红色,对照组未见脂滴形成,实验组1可见一些细小脂滴形成;实验组3与实验组2相比,脂滴大且多,定量分析显示,实验组3油红O染色阳性的面积和吸光度大于实验组2(P<0.05)。由此说明携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞后可促进其成脂能力。 展开更多
关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 人胰岛素基因 间充质干细胞 腺病毒载体 基因转染 细胞分化 其他基金 干细胞图片文章
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重组腺病毒Ad5hBDNFEGFP的构建及体外转染大鼠间充质干细胞后基因表达 被引量:2
10
作者 王长昇 林建华 +1 位作者 吴朝阳 张立群 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期637-640,663,共5页
目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标志基因、人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因为目的基因的重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs),探讨转染效率及转染基因的表达情况。方法:构建穿梭质粒p... 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标志基因、人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因为目的基因的重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs),探讨转染效率及转染基因的表达情况。方法:构建穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP;利用AdMax包装系统,穿梭质粒与骨架质粒共转染293细胞,同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,经反复感染293细胞扩增病毒。SD大鼠骨髓,体外分离、培养rMSCs,流式细胞仪检测rMSCs表面标记物;不同感染复数(MOI)的重组腺病毒转染第3代rMSCs,检测转染率及hBDNF蛋白的表达变化。结果:PCR、酶切鉴定及测序证实穿梭质粒和重组腺病毒载体成功构建。rMSCs流式细胞仪检测CD34、 CD45阴性表达,CD29、 CD90阳性表达。腺病毒体外转染rMSCs后荧光显微镜下可见绿色荧光信号表达,免疫印迹法检测出hBDNF蛋白的表达;绿色荧光表达强度、转染率及hBDNF蛋白的表达水平均随着腺病毒MOI的增加而增加,最佳MOI为100。结论:体外成功构建Ad5-hBDNF-EGFP,并能有效转染rMSCs,成功获取基因工程干细胞,hBDNF及EGFP基因均可在该细胞中得到有效表达。 展开更多
关键词 腺病毒载体 人脑源性神经营养因子 增强型绿色荧光蛋白 骨髓间充质干细胞 基因修饰
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间充质干细胞全身输注联合局部介入治疗系统性红斑狼疮股骨头缺血性坏死临床分析 被引量:2
11
作者 李慧 张育 魏华 《中国药物与临床》 CAS 2016年第8期1110-1113,共4页
目的观察间充质干细胞(MSCs)全身输注联合局部介入治疗系统性红斑狼疮(SLE)患者股骨头缺血性坏死(ONFH)的临床疗效。方法选择4例SLE股骨头坏死患者,经皮-股动脉穿刺经旋股内动脉灌注MSCs悬液,同时静脉输注MSCs。间隔2周再进行第2次治疗... 目的观察间充质干细胞(MSCs)全身输注联合局部介入治疗系统性红斑狼疮(SLE)患者股骨头缺血性坏死(ONFH)的临床疗效。方法选择4例SLE股骨头坏死患者,经皮-股动脉穿刺经旋股内动脉灌注MSCs悬液,同时静脉输注MSCs。间隔2周再进行第2次治疗。评估治疗前及治疗后半年SLE疾病活动性、疼痛、行走距离、关节功能、磁共振成像(MRI)评价等指标。结果短期随访(6个月),4例疼痛改善及关节活动度均改善,1例影像学无改善。随访终点(3年),治疗组4例中1例发生股骨头塌陷。结论 MSCs灌注治疗股骨头坏死安全,无不良反应,短期内有效率高,长期随访可降低股骨头塌陷发生率,本研究为小样本观察,临床可进一步扩大病例数,以期作为一种新技术进行广泛开展。 展开更多
关键词 股骨头坏死 间质干细胞 介入治疗
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骨髓间充质干细胞干预再生障碍性贫血患者树突状细胞的成熟分化 被引量:1
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作者 张乐琴 肖扬 +3 位作者 蒋祖军 肖浩文 李力 庞妍 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第19期3443-3448,共6页
背景:骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞增殖的影响国内仅见少量报道,而骨髓间充质干细胞是否通过调节树突状细胞来影响再生障碍性贫血患者T细胞的增殖,国内未见报道,其机制值得深入研究。目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障... 背景:骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞增殖的影响国内仅见少量报道,而骨髓间充质干细胞是否通过调节树突状细胞来影响再生障碍性贫血患者T细胞的增殖,国内未见报道,其机制值得深入研究。目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者树突状细胞的免疫调节作用。方法:将培养第5天的再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞来源的树突状细胞与第3代健康人骨髓间充质干细胞混合培养,加入脂多糖、肿瘤坏死因子促树突状细胞成熟,应用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞与未成熟、成熟树突状细胞共培养前后树突状细胞表面标志表达。结果与结论:未成熟的树突状细胞在脂多糖的刺激诱导下与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达无变化(P>0.05);成熟树突状细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达降低(P<0.05)。结果说明骨髓间充质干细胞可抑制再生障碍性贫血患者单核细胞来源的树突状细胞的发育和成熟,进而发挥调节再生障碍性贫血患者的免疫作用。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 贫血 再生障碍性 骨髓 间充质干细胞 共培养 单个核细胞 树突状细胞 免疫表型 抑制 免疫调节
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糖皮质激素促间充质干细胞的成骨效应 被引量:1
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作者 董平 肖苒 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第14期2625-2632,共8页
背景:糖皮质激素是有效的免疫抑制和抗炎症药物而广泛应用于临床,然而长期服用后也会引起一些不良反应如骨质疏松症。糖皮质激素通过促进成骨细胞与骨细胞的凋亡,同时抑制间充质干细胞向成骨细胞分化,导致成骨细胞数量减少;然而在一定... 背景:糖皮质激素是有效的免疫抑制和抗炎症药物而广泛应用于临床,然而长期服用后也会引起一些不良反应如骨质疏松症。糖皮质激素通过促进成骨细胞与骨细胞的凋亡,同时抑制间充质干细胞向成骨细胞分化,导致成骨细胞数量减少;然而在一定的条件下,糖皮质激素又能够促进间充质干细胞表达成骨细胞标志基因诱导其向成骨方向分化。目的:对以地塞米松为代表的糖皮质激素在间充质干细胞成骨分化中发挥的作用以及可能的分子机制进行综述。方法:由第一作者检索PubMed数据库1978至2012年有关地塞米松和间充质干细胞成骨分化的文献,英文关键词"Mesenchymal stem cell,dexamethasone,osteogenesis,osteoporosis,Runx2,BMP,Noggin,GILZ,glucocorticoid receptor"以不同的组合方式查找,排除重复性的研究,最终保留55篇进行归纳综述。结果与结论:地塞米松能够调节Runx2,Noggin以及亮氨酸拉链蛋白等基因调控间充质干细胞成骨分化。当糖皮质激素作用于间充质干细胞时,可能由糖皮质激素受体介导其生理作用,也可能在糖皮质激素与其受体结合之前就受到11β-羟甾类脱氢酶的调节。另外,生理剂量(10-8mol/L)的地塞米松能促进间充质干细胞成骨分化,药理剂量(≥10-7mol/L)有抑制作用。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞学术探讨 糖皮质激素 地塞米松 间充质干细胞 成骨分化 糖皮质激素受体 RUNX2 NOGGIN 亮氨酸拉链蛋白 国家自然科学基金
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纤维型肌动蛋白对间充质干细胞衰老的调节作用及其机制 被引量:1
14
作者 俞冬升 蔡大敏 +4 位作者 陈婕妤 吕方怡 花扣珍 银国利 王俊娟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期483-486,693,694,共6页
目的:探讨纤维型肌动蛋白(F-actin)调节人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)衰老的作用,初步阐明hBMSCs衰老的分子生物学机制。方法:将分离得到的hBMSCs进行体外培养并分为对照组(P2代hBMSCs)、F-actin抑制剂组(2.5μmol·L^(-1) F-acti... 目的:探讨纤维型肌动蛋白(F-actin)调节人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)衰老的作用,初步阐明hBMSCs衰老的分子生物学机制。方法:将分离得到的hBMSCs进行体外培养并分为对照组(P2代hBMSCs)、F-actin抑制剂组(2.5μmol·L^(-1) F-actin抑制剂Latrunculin B处理P2代hBMSCs 1h)和P11代hBMSCs组(P2代hBMSCs连续传代得到P11代hBMSCs)。成骨、成脂和成软骨诱导液诱导各组hBMSCs,采用茜素红染色、SO染色和油红O染色确定诱导效果。免疫荧光染色观察各组hBMSCs中Ki67阳性细胞数、F-actin的形态和聚合情况、YAP在细胞内的亚细胞定位。SA-β-Gal染色检测各组hBMSCs中SA-β-Gal染色阳性细胞数。结果:茜素红染色、SO染色和油红O染色,hBMSCs具有成骨、成脂和成软骨分化的能力。免疫荧光染色和SA-β-Gal染色,对照组hBMSCs中的微丝纤维束较多较粗,F-actin长度较长,YAP主要集中在细胞核(YAP在细胞核内为活化态);与对照组比较,P11代hBMSCs组中Ki67阳性细胞数较少,SA-β-Gal阳性细胞较多,F-actin更短更细,YAP主要集中在胞浆,且YAP出核的细胞SA-β-Gal染色呈阳性;F-actin抑制剂组hBMSCs中YAP出核失活,SA-β-Gal染色阳性的hBMSCs衰老细胞更多。结论:抑制YAP入核可以促进hBMSCs衰老,F-actin可以通过调节YAP活性影响hBMSCs衰老。 展开更多
关键词 间充质干细胞 纤维型肌动蛋白 YAP蛋白 衰老
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骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞移植促进血流重建的比较 被引量:1
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作者 佟铸 谷涌泉 +6 位作者 李建新 张淑文 李学锋 郭连瑞 郭建明 汪忠镐 张建 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第4期623-625,共3页
目的:比较骨髓间充质细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM/MSC)和骨髓源内皮祖细胞(Bone Marrow Endothelialprogenitor cells,BM/EPC)移植促进血流重建的效果,为进一步优化骨髓干细胞移植治疗肢体缺血提供理论基础。方法:获取L... 目的:比较骨髓间充质细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM/MSC)和骨髓源内皮祖细胞(Bone Marrow Endothelialprogenitor cells,BM/EPC)移植促进血流重建的效果,为进一步优化骨髓干细胞移植治疗肢体缺血提供理论基础。方法:获取Lewis大鼠骨髓单个核细胞,在体外培养分化为MSC和EPC。采用Lewis大鼠建立单侧后肢缺血模型。在模型建立后3天,将0.8mlD-Hanks液注入大鼠缺血侧后肢,为对照组(n=6);将8×106个骨髓MSC植入大鼠缺血侧后肢,为MSC组(n=6);将体外培养的8×106个EPC植入大鼠缺血侧后肢,为EPC组(n=6)。细胞移植后3周行缺血大鼠后肢动脉造影,检测缺血侧后肢侧支血管数;获取缺血侧后肢腓肠肌,分别行CD31和α-SMA免疫组化染色,计算毛细血管密度和小动脉密度。结果:MSC组与EPC组侧支血管数无显著性差异,二者均高于对照组;EPC组毛细血管密度明显高于MSC组,二者均高于对照组;MSC组与EPC组小动脉密度无显著性差异,二者均高于对照组。结论:骨髓间充质干细胞移植和内皮祖细胞移植均能够明显促进血流重建,而且骨髓间充质干细胞在治疗肢体缺血性疾病中的优势应该受到重视。 展开更多
关键词 间充质干细胞 内皮祖细胞 细胞移植 肢体缺血
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人EPO基因真核表达载体的构建及其在人脐血间充质干细胞中的表达
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作者 夏桂枝 张国成 +1 位作者 陈新民 洪新如 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第6期504-507,共4页
目的:构建人EPO基因真核表达载体并转染人脐血间充质干细胞,获得稳定表达人EPO的人脐血间充质干细胞.方法:从人胎肝细胞中提取总RNA,经过RTPCR方法扩增人EPO全长cDNA,应用基因重组技术将EPO cDNA基因亚克隆至pcDNA3真核表达载体内,以酶... 目的:构建人EPO基因真核表达载体并转染人脐血间充质干细胞,获得稳定表达人EPO的人脐血间充质干细胞.方法:从人胎肝细胞中提取总RNA,经过RTPCR方法扩增人EPO全长cDNA,应用基因重组技术将EPO cDNA基因亚克隆至pcDNA3真核表达载体内,以酶切和测序方法鉴定重组质粒pcDNA3-EPO构建的正确性,再将pcDNA3-EPO经脂质体介导转染人脐血间充质干细胞,经G418筛选后获得稳定转染EPO基因的人脐血间充质干细胞,用RT-PCR,Western Blot和细胞免疫化学方法鉴定外源人EPO基因在人脐血间充质干细胞中的表达.结果:酶切和测序结果均证实pcDNA3-EPO构建正确,RT-PCR,Western blot和细胞免疫化学结果显示转染人EPO基因的人脐血间充质干细胞体外能表达EPO.结论:构建成功人EPO基因真核表达载体,转染人脐血间充质干细胞后在体外可获得稳定表达. 展开更多
关键词 细胞生成素 胎血 间质干细胞 转染
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骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤
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作者 颜滨 余铮 +1 位作者 李振宇 闫洪印 《深圳中西医结合杂志》 2007年第3期146-149,共4页
目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对脊髓损伤与修复的作用与机制及细胞移植的方法与途径。方法:实验组为将体外培养SD大鼠的MSCs经绿色荧光蛋白(GFP)转染标记后显微注射于脊髓横断模型的脊髓损伤处,并以无血清培养基注射动物为对照... 目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对脊髓损伤与修复的作用与机制及细胞移植的方法与途径。方法:实验组为将体外培养SD大鼠的MSCs经绿色荧光蛋白(GFP)转染标记后显微注射于脊髓横断模型的脊髓损伤处,并以无血清培养基注射动物为对照组。12周后观察移植细胞的分化情况,并通过行为学、组织学及免疫组化的方法评价脊髓功能变化。结果:实验组MSCs移植12周后,脊髓功能明显恢复。结论:骨髓间充质干细胞移植对脊髓的损伤修复具有明显作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 移植 脊髓损伤 细胞培养
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许旺细胞培养液诱导NRG1蛋白转染骨髓基质干细胞向类神经元样细胞的转化
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作者 丁冬 梁军 张际绯 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第50期8061-8065,共5页
背景:国内外研究人员已经利用化学方法或单纯与许旺细胞共培养方法成功将骨髓基质干细胞诱导为许旺细胞样细胞,但仍存在一些弊端,前者对细胞有一定毒性,后者诱导速度慢,耗时较长。目的:探讨大鼠的许旺细胞培养液诱导NRG1转染的骨髓基质... 背景:国内外研究人员已经利用化学方法或单纯与许旺细胞共培养方法成功将骨髓基质干细胞诱导为许旺细胞样细胞,但仍存在一些弊端,前者对细胞有一定毒性,后者诱导速度慢,耗时较长。目的:探讨大鼠的许旺细胞培养液诱导NRG1转染的骨髓基质干细胞分化成神经组织细胞的可行性。方法:利用NRG1转染骨髓基质干细胞,待生长状态稳定后,将培养液更换为许旺细胞的培养液,置于37℃、体积分数为5%CO2培养箱中培养。结果与结论:经许旺细胞培养液诱导10 d后,光镜下可观察到NRG1转染的骨髓基质干细胞胞体开始回缩,呈梭形,出现许旺细胞样细胞,呈岛屿状紧密排列,免疫荧光染色鉴定诱导后细胞S-100、NSE和GFAP呈阳性表达,NSE表达阳性率为25.32%,GFAP表达阳性率为38.69%,S-100表达阳性率为35.99%,结果表明许旺细胞分泌的细胞因子和NRG1蛋白共作用可以诱导骨髓基质干细胞高效地向神经组织细胞分化,并表达许旺细胞、神经元和胶质细胞表面抗原。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 许旺细胞 神经调节蛋白1 干细胞 骨髓干细胞 NRG1 诱导 神经组织细胞
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超声辅助VEGF165转染骨髓间充质干细胞的实验研究
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作者 汪涛 季军 +1 位作者 周文 凌庆 《河北医学》 CAS 2005年第8期675-677,共3页
目的:探讨骨髓间充质干细胞定向分化血管内皮细胞的可行性研究。方法:采用超声辅助电穿法,将VEGF165基因的质粒PEGFP-C1转染至骨髓间充质干细胞,转染后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况。结果:超声辅助转染5h后可见细胞内有... 目的:探讨骨髓间充质干细胞定向分化血管内皮细胞的可行性研究。方法:采用超声辅助电穿法,将VEGF165基因的质粒PEGFP-C1转染至骨髓间充质干细胞,转染后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况。结果:超声辅助转染5h后可见细胞内有GFP表达,10h后可达高峰。结论:VEGF基因转染骨髓间充质干细胞后,骨髓间充质干细胞内有GFP表达,提示细胞转染成功,骨髓间充质干细胞定向分化为血管内皮细胞具有可行性。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 间充质干细胞 绿色荧光蛋白 转染
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Adipose-derived mesenchymal stem cell transplantation promotes adult neurogenesis in the brains of Alzheimer's disease mice 被引量:18
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作者 Yufang Yan Tuo Ma +3 位作者 Kai Gong Qiang Ao Xiufang Zhang Yao Gong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第8期798-805,共8页
In the present study, we transplanted adipose-derived mesenchymal stem cells into the hippo-campi of APP/PS1 transgenic Alzheimer's disease model mice. Immunofluorescence staining revealed that the number of newly ge... In the present study, we transplanted adipose-derived mesenchymal stem cells into the hippo-campi of APP/PS1 transgenic Alzheimer's disease model mice. Immunofluorescence staining revealed that the number of newly generated (BrdU+) cells in the subgranular zone of the dentate gyrus in the hippocampus was signiifcantly higher in Alzheimer's disease mice after adipose-de-rived mesenchymal stem cell transplantation, and there was also a significant increase in the number of BrdU+/DCX+neuroblasts in these animals. Adipose-derived mesenchymal stem cell transplantation enhanced neurogenic activity in the subventricular zone as well. Furthermore, adipose-derived mesenchymal stem cell transplantation reduced oxidative stress and alleviated cognitive impairment in the mice. Based on these ifndings, we propose that adipose-derived mes-enchymal stem cell transplantation enhances endogenous neurogenesis in both the subgranular and subventricular zones in APP/PS1 transgenic Alzheimer's disease mice, thereby facilitating functional recovery. 展开更多
关键词 nerve regeneration stem cells Alzheimer's disease adipose-derived mesenchymal stemcells cell transplantation cognitive impairment oxidative stress NEUROGENESIS 863 Program neuralregeneration
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