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不同检测体系下骨髓源间充质干细胞迁移特征的比较 被引量:1
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作者 王新均 唐俊明 +6 位作者 孔霞 郭凌郧 杨建业 郑飞 陈龙 黄永章 王家宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期404-407,共4页
为研究不同检测体系下骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移特征的差异,本研究利用Boydenchamber观察hSDF-1对MSC迁移的影响是否存在浓度依赖性;观察上述体系经50nmol渥曼青霉素(wortmannin),10μmol/LLY294002,50μmol/LPD98059,10μmol/LU7312... 为研究不同检测体系下骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移特征的差异,本研究利用Boydenchamber观察hSDF-1对MSC迁移的影响是否存在浓度依赖性;观察上述体系经50nmol渥曼青霉素(wortmannin),10μmol/LLY294002,50μmol/LPD98059,10μmol/LU73122,126μmol/LAMD3100以及50nmol/L维拉帕米等处理MSC后对MSC迁移的影响。结果表明:MSC迁移能力随着hSDF-1α浓度的递增而逐渐增强,并且发现Wortmannin、LY294002、PD98059、U70312、AMD3100、Verapamil对MSC迁移均有影响,其中U73122、AMD3100对MSC迁移阻断的效应最显著。结论:SDF-1/CXCR4所介导的MSC迁移可能与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)和蛋白激酶C(PKC)等信号途径有关。 展开更多
关键词 间充质干细胞 培养细胞迁移 boyden chanber迁体系 蛋白激酶C 信号转导 SDF-1 CXCR4
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大鼠脂肪间充质干细胞的分化潜能鉴定及XIAP基因修饰 被引量:1
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作者 白耀邦 李博 +2 位作者 陈庆良 姜楠 陈晓波 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第8期799-801,I0003,共4页
目的分离培养扩增大鼠脂肪源间充质干细胞(ADSCs),以活体标记并鉴定其分化潜能,了解ADSCs的X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因修饰的可行性。方法无菌条件下取大鼠一侧腹股沟脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离培养ADSCs,胰酶消化法传代扩增。检... 目的分离培养扩增大鼠脂肪源间充质干细胞(ADSCs),以活体标记并鉴定其分化潜能,了解ADSCs的X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因修饰的可行性。方法无菌条件下取大鼠一侧腹股沟脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离培养ADSCs,胰酶消化法传代扩增。检测细胞分化为脂肪细胞、软骨细胞及成骨细胞的潜能,转染XIAP表达质粒进入ADSCs,通过Western blotting等方法检测XIAP的表达能力。结果 ADSCs呈长梭形漩涡样生长,细胞流式鉴定显示CD29、CD44、CD90、CD105均呈高表达,并在特定诱导剂下分化为脂肪细胞、软骨细胞或成骨细胞。XIAP转染后显像经XIAP基因修饰的脂肪间充质干细胞在PVDF膜的相应分子质量区域出现相应的条带。结论脂肪源干细胞易于培养和传代扩增,并可活体标记,具有多向分化潜能,可作为组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 间质干细胞 脂肪组织 X连锁凋亡抑制蛋白质 软骨细胞 成骨细胞 细胞分化 大鼠 WISTAR
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间充质干细胞的生物学特性及临床应用(英文) 被引量:4
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作者 殷海斌 田新 +1 位作者 杨春会 高晓慧 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第14期2282-2289,共8页
背景:间充质干细胞的临床应用是干细胞移植研究的热点,但其安全性和有效性仍存在争议。目的:回顾总结近年来对于间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景的研究。方法:计算机检索Pubmed(1990年1月至2013年11月)和中国知网数据库(2011年... 背景:间充质干细胞的临床应用是干细胞移植研究的热点,但其安全性和有效性仍存在争议。目的:回顾总结近年来对于间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景的研究。方法:计算机检索Pubmed(1990年1月至2013年11月)和中国知网数据库(2011年至2013年),检索关键词为"间充质干细胞;分离培养;表面抗体;诱导分化;临床应用"。结果与结论:间充质干细胞可表达多种表面抗原,但没有特异性,同时其具有自我更新和向骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞和神经细胞等的多向分化能力。由于其多向分化潜力,且能分泌多种细胞因子,还具有免疫调节能力,已成为再生医学、血液学和免疫学方面细胞疗法的候选细胞。间充质干细胞临床试验已处于第三期,尽管数据还不多,已发现存在利于肿瘤生长和转移、增加侵袭性真菌感染等方面问题。即使如此,其在血液系统恶性肿瘤等疾病面方面仍存在良好的应用前景。所以,找出间充质干细胞在体内的作用原理及修复其产生的不良影响是目前干细胞移植研究的重点。 展开更多
关键词 间充质干细胞 临床应用 生物学特性 血液系统恶性肿瘤 侵袭性真菌感染 干细胞移植 计算机检索 免疫调节能力
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依达拉奉体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化 被引量:1
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作者 李玉美 余资江 +5 位作者 康朝胜 余彦 孙宝飞 朱俊德 肖朝伦 刘鲜林 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-183,共7页
目的采用密度梯度离心和差速贴壁法体外分离、培养、纯化及鉴定成年Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和依达拉奉联合诱导MSCs定向分化为神经元样细胞。方法选用1月龄健康雄性Wistar大鼠,采用Percoll... 目的采用密度梯度离心和差速贴壁法体外分离、培养、纯化及鉴定成年Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和依达拉奉联合诱导MSCs定向分化为神经元样细胞。方法选用1月龄健康雄性Wistar大鼠,采用Percoll分离液密度梯度离心法获取骨髓中的MSCs,通过差速贴壁法反复传代培养、纯化,取第3代细胞采用流式细胞术、免疫细胞化学等方法检测MSCs的纯度,利用bFGF联合依达拉奉诱导MSCs向神经元样细胞分化,并通过扫描电镜、免疫细胞化学等对诱导后的细胞进行鉴定。结果第3代MSCs经免疫细胞化学及流式细胞仪等检测,间充质干细胞特异性的标记物CD44表达阳性,不表达造血干细胞及白细胞的特异性标记物CD34、CD45,MSCs纯度高达95.5%。诱导分化后扫描电镜检测可观察到典型的神经元样细胞结构;免疫细胞化学检测发现,细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE),不表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),Nestin的表达随着细胞成熟而减弱。结论密度梯度离心和差速贴壁法可获得高纯度的MSCs;依达拉奉能高效地定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经元样细胞 依达拉奉 免疫组织化学 流式细胞术 扫描电镜 大鼠
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嗅鞘细胞和骨髓基质细胞的联合培养研究
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作者 吴立生 吴仕峰 《山东医学高等专科学校学报》 2008年第1期1-3,F0003,共4页
目的探讨体外联合培养嗅鞘细胞(OECs)和骨髓基质细胞(BMSCs)的可行性及形态学观察。方法将原代培养的OECs和BMSCs消化制成细胞悬液,以相同比例接种,接种密度为104/ml。10 d后将联合培养的细胞置于倒置相差显微镜下进行形态学观察,并于... 目的探讨体外联合培养嗅鞘细胞(OECs)和骨髓基质细胞(BMSCs)的可行性及形态学观察。方法将原代培养的OECs和BMSCs消化制成细胞悬液,以相同比例接种,接种密度为104/ml。10 d后将联合培养的细胞置于倒置相差显微镜下进行形态学观察,并于鉴定前2 d加入细胞掺入剂BrdU,应用P75抗体和BrdU抗体对联合培养的细胞进行免疫荧光鉴定。结果联合培养的细胞在24 h内均完全贴壁,培养5 d后镜下可见细胞形态主要有3种:①双极、三极或多极形;②短梭形,突起较短;③扁圆形或不规则形。到第10天时部分细胞相互编织成网,部分细胞生长呈条索状,相互平行。荧光鉴定显示:荧光双标阳性者(既发红色荧光又发绿色荧光)为OECs,只发红色荧光而不发绿色荧光者为BMSCs。结论OECs与BMSCs在体外可以很好的联合培养,生物学特性均保持不变,为体内联合移植奠定了基础。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 骨髓基质细胞 联合细胞培养
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糖基化终末产物对小鼠骨髓间充质干细胞增殖及相关基因P27、cyclinD1的影响
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作者 孙传锋 邓超 +3 位作者 印奇志 柳海 周嵩琳 徐清 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期880-882,886,共4页
目的:探讨糖基化终末产物(AGEs)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖能力以及相关基因P27、cyclinD1的影响。方法:全骨髓法培养小鼠骨髓间充质干细胞;成骨、成脂诱导骨髓间充质细胞,对其进行干细胞鉴定;将培养出的骨髓间充质干细胞与不... 目的:探讨糖基化终末产物(AGEs)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖能力以及相关基因P27、cyclinD1的影响。方法:全骨髓法培养小鼠骨髓间充质干细胞;成骨、成脂诱导骨髓间充质细胞,对其进行干细胞鉴定;将培养出的骨髓间充质干细胞与不同浓度的AGEs共培养,MTT检测不同浓度下骨髓间充质干细胞增殖的改变;实时定量聚合酶链反应(Real time PCR)检测AGEs刺激后P27、cyclin D1表达的改变。结果:小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导21d后茜素红染色出现钙化结节;成脂诱导21d后油红O染色出现脂滴;MTT显示不同浓度的AGEs(10、50、100、200mg/L)均能抑制BMSCs的增殖差异有统计学意义(P<0.05),且随着浓度的增加抑制越明显;Real time PCR结果显示:AGEs(50mg/L)刺激3d后P27mRNA的表达水平较对照组升高,cyclinD1mRNA的表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AGEs能抑制小鼠骨髓间充质干细胞的增殖并能改变P27、cyclinD1mRNA的表达。 展开更多
关键词 糖基化终末产物 小鼠骨髓间充质干细胞 增殖
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