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锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割 被引量：1
1
作者 何斌 杨唐俊 +5 位作者 金欢胜 王祥卫 刘素英 曾毅 金锡御 宋波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期465-468,共4页
目的：探讨膀胱癌多药耐药性逆转的新方法。方法：应用计算机对mdrlmRNA二级结构进行模拟，设计针对mdrlmRNA1959位GUC的“锤头状”（Hammerhead）核酶（Ribozyme1，RZ1）基因，定点克隆于质粒pGEMEX-1的BamHⅠ和EcoRⅠ位点上；将mdrlcD... 目的：探讨膀胱癌多药耐药性逆转的新方法。方法：应用计算机对mdrlmRNA二级结构进行模拟，设计针对mdrlmRNA1959位GUC的“锤头状”（Hammerhead）核酶（Ribozyme1，RZ1）基因，定点克隆于质粒pGEMEX-1的BamHⅠ和EcoRⅠ位点上；将mdrlcDNA864bp的片段亚克隆于pGEMEX-1的HindⅢ和EcoRⅠ位点上，mdrlcDNA1383bp片段亚克隆于pGEMEX-1的EcoRⅠ位点上，在T3启动子作用下体外转录成RZ1、864nt和1430nt的mdrlmRNA。结果：RZ1在体外分别将864nt和I430nt的mdrlmRNA切割成两个片段，切割温度在42℃和52℃两个条件下切割效率差异不明显。结论：核酶对底物的体外切割活性取决于核酶切割位点的选择，与底物长度无关。 展开更多
关键词 多药耐药性 核酶 膀胱肿瘤 mdrl-mrna
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酪氨酸激酶抑制剂逆转K562／A02细胞多药耐药的研究 被引量：3
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作者 单学赟 陈宝安 +12 位作者 夏国华 许文林 丁家华 高冲 孙耘玉 王骏 程坚 赵刚 鲍文 宋慧慧 高峰 王飞 王雪梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期90-95,共6页
本研究旨在比较酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Imatinib)、尼洛替尼(Nilotinib)对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。用RT-PCR法检测各组mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA表达;用Western blot法检测各组P-gp、P210蛋白表达;用流式细胞术检测各组细胞... 本研究旨在比较酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Imatinib)、尼洛替尼(Nilotinib)对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。用RT-PCR法检测各组mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA表达;用Western blot法检测各组P-gp、P210蛋白表达;用流式细胞术检测各组细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积。结果表明:0.0625μmol/L伊马替尼、5nmol/L尼洛替尼对K562/A02细胞无明显细胞毒性,伊马替尼和尼洛替尼上述剂量单独作用48小时均下调mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA、P-gp、P210蛋白的表达,且尼洛替尼较伊马替尼作用更强。荧光强度检测显示,K562/A02细胞经伊马替尼、尼洛替尼单独处理48小时后,其细胞内DNR浓度分别为K562细胞中的7.85%、12.02%。结论:酪氨酸激酶抑制剂具有很好的逆转细胞耐药作用,且尼洛替尼较伊马替尼逆转作用更强。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶抑制剂 伊马替尼 尼洛替尼 MDR1基因 BCR-ABL基因 P-gp P210蛋白
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