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小反刍动物慢病毒通用PCR检测方法的建立与初步评价 被引量:3
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作者 杨义琴 吴建勇 +4 位作者 古努尔.吐尔逊 李建军 杨学云 贾斌 王登峰 《草食家畜》 2018年第2期13-19,共7页
为建立通用的小反刍动物慢病毒(山羊关节炎-脑炎病毒和梅迪-维斯纳病毒)病原学检测技术方法,本研究对Gen Bank公布的31株小反刍动物慢病毒前病毒基因组序列进行比对,筛选出vif基因上约150 bp的序列作为诊断标记物并设计简并引物;通过全... 为建立通用的小反刍动物慢病毒(山羊关节炎-脑炎病毒和梅迪-维斯纳病毒)病原学检测技术方法,本研究对Gen Bank公布的31株小反刍动物慢病毒前病毒基因组序列进行比对,筛选出vif基因上约150 bp的序列作为诊断标记物并设计简并引物;通过全基因合成方法获得该序列作为PCR反应的阳性对照模板,以此建立了小反刍动物慢病毒PCR检测方法,研究结果初步证实其可用于山羊关节炎-脑炎病毒和梅迪-维斯纳病毒野毒株RNA和前病毒DNA的检测,说明该方法有望用于我国小反刍动物慢病毒病的检测与流行病学调查。 展开更多
关键词 小反刍动物慢病毒 梅迪-维斯纳病毒 山羊关节炎-脑炎病毒 聚合酶链式反应 检测方法
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绵羊梅迪-维斯纳病毒CA-TM融合蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:1
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作者 陈思旭 张培 +2 位作者 史晓娜 刘然 刘淑英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1290-1297,共8页
为建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体检测方法,本研究利用DNAStar生物学软件对MVV衣壳蛋白(CA)和MVV跨膜蛋白(TM)的抗原表位分析,利用重叠延伸PCR(SOE PCR)获得CA-TM融合基因,构建表达质粒p Easy-E1-CA-TM,将其转化大肠杆菌... 为建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体检测方法,本研究利用DNAStar生物学软件对MVV衣壳蛋白(CA)和MVV跨膜蛋白(TM)的抗原表位分析,利用重叠延伸PCR(SOE PCR)获得CA-TM融合基因,构建表达质粒p Easy-E1-CA-TM,将其转化大肠杆菌BL21后诱导蛋白表达并纯化,经SDS-PAGE检测结果显示,得到重组CA-TM蛋白(rCA-TM),r CA-TM以包涵体形式表达。以获得的rCA-TM作为包被抗原,采用方阵法优化各反应条件,建立了MVV间接ELISA检测方法。利用该方法检测羊临床常见病原阳性血清,结果显示,除MVV阳性血清以外,口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体等绵羊临床常见病原的阳性血清均为阴性,特异性较强,且该方法能识别感染MVV病畜体内产生的CA蛋白和TM蛋白抗体。将MVV阳性血清2倍倍比稀释(1:500~1:32 000)后,分别利用建立的MVV间接ELISA方法及商品化MVV抗体ELISA试剂盒检测,结果显示商品化MVV抗体ELISA试剂盒最低可检测出1:40 00倍稀释的阳性血清,而本研究建立的间接ELISA方法最低可检测出1:16 000倍稀释的阳性血清,敏感性较高。重复性试验结果显示,该方法批内、批间试验的变异系数分别为3.6%~6.9%、2.3%~8.5%,均小于10%,重复性较好。利用本实验建立的MVV间接ELISA方法和商品化MVV抗体ELISA试剂盒对69份绵羊临床样品检测,结果显示,本实验建立的ELISA方法检测出31份阳性样品,38份阴性样品;商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出37份阳性样品,32份阴性样品。二者的阳性符合率为83.7%,阴性符合率为100%,总符合率为91.3%。本研究首次基于MVV rCA-TM建立了MVV间接ELISA检测方法,且该方法能够分别识别CA蛋白抗体和TM蛋白抗体,不仅减少了因为血清转换而导致血清抗体检测不准确的影响,还扩大了检测范围,为内蒙地区绵羊梅迪-维斯纳病的诊断及净化提供了检测手段。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 间接ELISA方法 原核表达 融合蛋白
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绵羊慢病毒自然感染绵羊的硬化性淋巴细胞性乳腺炎 被引量:10
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作者 邓普辉 简子健 +1 位作者 刘君明 阿合贾提 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1994年第1期6-8,共3页
7头来自新疆南部某绵羊慢病毒(OvLV)感染的羊场的绵羊用于本研究。用琼脂凝胶免疫扩散检查绵羊血清中对绵羊进行性肺炎(OPP)病毒(OPPV)的抗体,结果表明有6例呈阳性,1例阴性,抗体效价在3年中呈下降趋势。4例血... 7头来自新疆南部某绵羊慢病毒(OvLV)感染的羊场的绵羊用于本研究。用琼脂凝胶免疫扩散检查绵羊血清中对绵羊进行性肺炎(OPP)病毒(OPPV)的抗体,结果表明有6例呈阳性,1例阴性,抗体效价在3年中呈下降趋势。4例血清学阳性边菜羊和1例阴性和田羊有不同程度的硬化性(纤维性)淋巴细胞性乳腺炎,小叶内有不等的淋巴细胞浸润,导管周围无淋巴滤泡形成,小叶间大量纤维组织增生。7例的肺、脑、关节、血管均无OvLV性特异性病变。从血清学阳性羊的外周血白细胞中未分离到OvLV。 展开更多
关键词 绵羊 病毒 淋巴 细胞性 乳腺炎
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IL-2和绵羊梅迪-维斯纳病病毒核心蛋白Gag核酸疫苗联合免疫小鼠的免疫应答 被引量:6
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作者 丁忠庆 沈荣显 +2 位作者 相文华 赵丽荣 赵立平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期204-207,共4页
构建绵羊梅迪-维斯纳病病毒(MVV)核心蛋白Gag核酸疫苗并与IL-2联合免疫小鼠,为评价其诱导的体液和细胞免疫应答。将MVV gag基因与羊IL-2基因分别插入到核酸疫苗载体质粒pcDNA5.0中,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,并经酶... 构建绵羊梅迪-维斯纳病病毒(MVV)核心蛋白Gag核酸疫苗并与IL-2联合免疫小鼠,为评价其诱导的体液和细胞免疫应答。将MVV gag基因与羊IL-2基因分别插入到核酸疫苗载体质粒pcDNA5.0中,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,并经酶切以及测序鉴定。分别用阳性质粒pcDNA5.0-Gag、空载体pcDNA5.0及pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2共免疫BALB/C小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体以及IFN-γ和IL-4水平,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖。结果表明pcDNA5.0-IL-2联合免疫组小鼠血清抗体效价和IFN-γ、IL-4水平高于pcDNA5.0-Gag免疫组,与空载体pcDNA5.0对照组相比有显著差异(P<0.01)。且pcDNA5.0-Gag单独免疫组及与IL-2联合免疫组小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数均高于空载体pcDNA5.0对照组。因此,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,用其联合免疫BALB/C小鼠所诱导的免疫反应以特异性细胞免疫应答为主,同时可产生体液免疫,且IL-2发挥了免疫佐剂的作用,为进一步将其用于MVV的防治奠定了基础。 展开更多
关键词 绵羊梅迪-维斯纳病病毒 GAG基因 IL-2 核酸疫苗
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羊慢病毒及其抗性基因研究进展 被引量:6
5
作者 管峰 石国庆 +1 位作者 赵进 王一民 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1204-1210,共7页
羊慢病毒也称小反刍动物慢病毒,主要包括绵羊梅迪–维斯纳病毒和山羊关节炎–脑炎病毒,二者主要感染绵羊和山羊,目前该病在世界范围内流行并给养羊业带来很大的经济损失。研究表明,不同绵羊品种对慢病毒易感性存在差异,这种差异表明易... 羊慢病毒也称小反刍动物慢病毒,主要包括绵羊梅迪–维斯纳病毒和山羊关节炎–脑炎病毒,二者主要感染绵羊和山羊,目前该病在世界范围内流行并给养羊业带来很大的经济损失。研究表明,不同绵羊品种对慢病毒易感性存在差异,这种差异表明易感性不同的绵羊可能存在遗传多样性的差异。全基因组关联分析发现绵羊跨膜蛋白TMEM154(Transmembrane protein 154)基因中的一个点突变E35K与抗病力高度相关,可以作为绵羊抗病选育的分子标记。文章详述了绵羊TMEM154基因E35K突变对抗病力的影响和当前慢病毒抗病基因研究概况,包括锌指家族、趋化因子受体CCR5、三重基序蛋白TRIM5α、载脂蛋白B m RNA剪辑酶催化多肽样蛋白3、多能发育相关基因2和4,并简要介绍了羊慢病毒特征和我国羊慢病毒病的流行状况,以期为我国绵羊养殖业和抗病选育提供参考。 展开更多
关键词 羊慢病毒 梅迪-维斯纳病毒(MVV) TMEM154基因 突变 抗病性
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内蒙古绵羊梅迪-维斯纳病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:5
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作者 李慧萍 张良 +2 位作者 徐斯日古楞 王多智 刘淑英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期828-833,共6页
为建立一种检测内蒙古地区绵羊梅迪-维斯纳病毒(MVV)的TaqMan荧光定量PCR方法,根据高度保守的gag基因序列设计特异性引物和探针,通过对反应条件和反应体系的优化,建立了快速检测MVV的TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果显示,扩增相关系数... 为建立一种检测内蒙古地区绵羊梅迪-维斯纳病毒(MVV)的TaqMan荧光定量PCR方法,根据高度保守的gag基因序列设计特异性引物和探针,通过对反应条件和反应体系的优化,建立了快速检测MVV的TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果显示,扩增相关系数为0.999,对重组标准质粒的最低检测量为1.0×100 copies/μL,对羊的其他肺炎表现常见病原核酸无扩增反应;利用该方法对内蒙古地区12份疑似病例的肺组织进行检测,其中3份为MVV阳性。结果表明,本研究建立的实时荧光定量PCR方法在MVV的快速、准确诊断中具有良好的应用前景,也将为内蒙古地区防控梅迪-维斯纳病提供可靠的检测手段。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 TaqMan实时荧光定量PCR 内蒙古地区 应用
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新疆卡拉库尔羊梅迪/维斯那病毒感染的病理学观察 被引量:5
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作者 易海清 阿合买提.买买提 +3 位作者 邓普辉 白莉 张辉 曲立春 《动物医学进展》 CSCD 2006年第2期75-78,共4页
对来自3个自然感染梅迪/维斯那病毒羊场的7只新疆卡拉库尔羊进行病理学研究。在临床观察期间,试验羊仅出现轻微的与梅迪/维斯那病毒有关的临床症状。病理组织学观察表明,5例血清学阳性羊发生了不同程度的乳腺病理学变化,与其他器官的组... 对来自3个自然感染梅迪/维斯那病毒羊场的7只新疆卡拉库尔羊进行病理学研究。在临床观察期间,试验羊仅出现轻微的与梅迪/维斯那病毒有关的临床症状。病理组织学观察表明,5例血清学阳性羊发生了不同程度的乳腺病理学变化,与其他器官的组织切片观察比较,未见到淋巴组织样间质性肺炎(LIP)、脉管炎、关节炎及滑膜炎病变,表明乳腺是最敏感的靶器官。根据邓普辉等对乳腺炎严重度和分型的描述,新疆卡拉库尔羊乳腺炎病变的严重度均低于其他毒株感染的乳腺炎,从病理学上证实新疆卡拉库尔羊为梅迪/维斯那病毒的低敏感品种。 展开更多
关键词 梅迪/雏斯那病毒 卡拉库尔羊 乳腺炎 病理学
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内蒙古地区绵羊梅迪-维斯纳病毒全基因组序列的测定与分析 被引量:4
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作者 赵玲 王振玲 +4 位作者 史晓娜 段续接 张良 李慧萍 刘淑英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1140-1145,共6页
为了解内蒙古地区绵羊梅迪-维斯纳病毒(MVV)的分子结构特征和遗传变异情况,本研究利用Illumina Hiseq 4000二代测序技术对MVV阳性绵羊病肺组织进行病毒全基因组测定,并对全基因组特征、gag和env及其编码的氨基酸序列进行系统进化分析。... 为了解内蒙古地区绵羊梅迪-维斯纳病毒(MVV)的分子结构特征和遗传变异情况,本研究利用Illumina Hiseq 4000二代测序技术对MVV阳性绵羊病肺组织进行病毒全基因组测定,并对全基因组特征、gag和env及其编码的氨基酸序列进行系统进化分析。结果显示,获得全长9193 bp的MVV全基因组序列,命名为NM1111,并上传GenBank获得基因登录号MW248464;全基因组、gag和env核苷酸序列与参考株的相应核苷酸序列的同源性分别为75.8%~81.4%、77.1%~86.8%和67.7%~75.5%;基于gag序列的系统进化分析,NM1111与A2型MVV聚为一支,属于A2型;Gag蛋白的主要同源区(MHR)存在D^(296)E的突变,Env蛋白变异程度较大,表面蛋白V4区存在氨基酸插入,SU5抗原表位在氨基端有一个完全保守的基序(VRAYTYGV),在羧基端有一个高度可变的基序。本研究提供了中国地区首个绵羊MVV完整序列,为中国地区MVV分子生物学特性研究提供基础参考。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 二代测序技术 GAG ENV 遗传变异
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基于CA-TM融合蛋白的梅迪-维斯纳病毒胶体金免疫层析检测方法的建立与应用
9
作者 陈思旭 包磊 +2 位作者 李慧萍 张良 刘淑英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1002-1009,共8页
旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白(r CA-TM)标记检测线,以鸡Ig Y抗体标记质控线,以重组链球菌蛋白(r-SPG)与鸡Ig Y用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶... 旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白(r CA-TM)标记检测线,以鸡Ig Y抗体标记质控线,以重组链球菌蛋白(r-SPG)与鸡Ig Y用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶体金免疫层析快速检测方法,并通过特异性、敏感性、稳定性以及临床应用对其检测效果进行评价。结果显示,成功表达、纯化并获得了r CA-TM;成功建立的胶体金免疫层析法特异性试验结果显示不能检测除MVV以外的如口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体、布鲁菌等绵羊常见病原;敏感性试验结果显示最低可检出2400倍稀释的MVV阳性血清;稳定性试验结果显示在模拟6个月避光常温密封保存后的试纸条仍具有良好的检测性能。利用建立的MVV胶体金检测法和广泛应用于MVV检测的进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒对40份疑似病例血清样品进行对比检测,结果显示:用胶体金检测方法检出MVV抗体阳性血清17份,阴性血清23份;用进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出阳性血清16份,阴性血清24份,二者相比整体符合率为97.5%。综上,成功建立了MVV胶体金免疫层析快速检测方法,该方法研制的检测试纸条性能良好、便于储存、适合现场快速检测和批量检测,对MVV的监测、防控有重要意义,为内蒙古地区MVV的净化提供了新的检测方案。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 原核表达 融合蛋白 胶体金 免疫层析
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梅迪-维斯纳病毒在绵羊4种细胞中的增殖特性
10
作者 方卉 史晓娜 +1 位作者 陈思旭 刘淑英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期833-844,共12页
为了解梅迪-维斯纳病毒(MVV)感染绵羊不同组织细胞的偏好性及其在不同细胞中的增殖情况,将MVV A2毒株接种绵羊成纤维细胞(OAR-L1)、绵羊脉络丛细胞(SCP)、绵羊滋养层细胞(STCs)、羊胎肾细胞(FLK-BLV),通过间接免疫荧光试验、PCR、Wester... 为了解梅迪-维斯纳病毒(MVV)感染绵羊不同组织细胞的偏好性及其在不同细胞中的增殖情况,将MVV A2毒株接种绵羊成纤维细胞(OAR-L1)、绵羊脉络丛细胞(SCP)、绵羊滋养层细胞(STCs)、羊胎肾细胞(FLK-BLV),通过间接免疫荧光试验、PCR、Western-blot试验观察不同时间点细胞病变特征及检测MVV感染细胞后CA蛋白相对表达量,判断病毒在细胞中增殖情况。结果显示,SCP、OAR-L1这2种细胞在接毒组中可持续增殖,SCP出现多核合胞体细胞、拉丝等病变,并且细胞随着病毒感染时间的延长死亡程度增加;OAR-L1出现拉丝且细胞随着病毒感染时间延长死亡明显,未出现典型病变多核合胞体,对照组及空白组细胞状态良好,未见显著差异。FLK-BLV、STCs这2种细胞接毒组、对照组及空白组均未见明显变化。间接免疫荧光结果显示,SCP、OAR-L1这2种细胞接毒组出现绿色荧光,而FLK-BLV、STCs接毒组与对照组、空白组均未出现绿色荧光。SCP、OAR-L1细胞随着病毒感染时间延长,绿色荧光面积逐渐扩大,SCP接毒9 d后绿色荧光面积达到90%以上,为最佳感染时间;OAR-L1接毒12 d后绿色荧光面积达到90%以上,为最佳感染时间。Western-blot结果显示在25 ku处有明显条带,经ImageJ灰度值分析,CA蛋白相对表达量水平随着接毒时间的延长逐渐上调,与对照组和空白组有极显著差异(P<0.0001)。综上,本研究发现SCP、OAR-L1这2种细胞在感染MVV A2毒株后随着感染时间的延长病毒蛋白表达量逐渐升高,MVV在以上2种细胞中可持续感染,并找到1株细胞系可以持续感染生产慢病毒。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 细胞培养 增殖特性 致病变特性
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梅迪-维斯纳病毒Gag蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立 被引量:3
11
作者 张彦红 肖盛中 +4 位作者 李岩 杨艳 姜蒙蒙 蒙亚琦 盛金良 《动物医学进展》 北大核心 2020年第5期25-28,共4页
Gag蛋白是梅迪-维斯纳病毒(MVV)的主要结构蛋白,也是诊断梅迪-维斯纳病的主要靶蛋白。为建立MVV抗体间接ELISA检测方法,利用大肠埃希菌将含Gag基因的质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞中,最终获得高效表达的Gag蛋白,进一步进行ELISA条件的... Gag蛋白是梅迪-维斯纳病毒(MVV)的主要结构蛋白,也是诊断梅迪-维斯纳病的主要靶蛋白。为建立MVV抗体间接ELISA检测方法,利用大肠埃希菌将含Gag基因的质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞中,最终获得高效表达的Gag蛋白,进一步进行ELISA条件的优化。所建立的方法敏感性试验显示在阳性血清1∶3 200倍稀释时仍能检出,其组内与组间变异系数均低于10%,具有良好的重复性。对162份临床血清样品进行检测,同时用购自法国IDVET公司的间接ELISA进行比较,符合率达到89.65%。应用该方法对新疆地区1个种羊场和1个育肥羊场的294份羊血清样品进行了检测,结果显示MVV抗体阳性率分别为10.5%和1.77%,表明种羊场中MVV感染率高于育肥羊场,该研究结果可为MVV抗体检测试剂盒的开发提供支持。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 GAG蛋白 间接酶联免疫吸附试验
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梅迪-维斯纳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 张太翔 凌宗帅 +8 位作者 孙涛 袁涛 徐彪 梁成珠 刘文鹏 孙军 王洪兵 肖越强 杨慧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期163-165,共3页
为建立检测梅迪-维斯纳病毒(MVV)的TaqMan实时荧光定量PCR方法,本研究根据MVV核苷酸保守序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有MVV目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示:5.0×105~5.0×101拷贝范围内定... 为建立检测梅迪-维斯纳病毒(MVV)的TaqMan实时荧光定量PCR方法,本研究根据MVV核苷酸保守序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有MVV目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示:5.0×105~5.0×101拷贝范围内定量PCR均有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为50拷贝。对羊的其他病毒核酸均无扩增反应。本研究建立的实时定量PCR方法,灵敏度高,特异性好,在MVV的快速检测中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 实时荧光定量PCR TAQMAN探针
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新疆部分地区梅迪维斯纳病毒感染的血清学调查
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作者 张彦红 李岩 +5 位作者 杨艳 张哲 吕文华 钱天皓 蒙亚琦 盛金良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2022-2026,共5页
旨在了解新疆地区梅迪维斯纳病的流行现状和特点,本研究于2017—2019年从新疆阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁收集2647份羊血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行梅迪维斯纳病抗体检测,对不同地区、品种、性别来源... 旨在了解新疆地区梅迪维斯纳病的流行现状和特点,本研究于2017—2019年从新疆阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁收集2647份羊血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行梅迪维斯纳病抗体检测,对不同地区、品种、性别来源绵羊的梅迪维斯纳病抗体阳性率进行统计分析。结果显示,阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为28.95%(121/418)、0.67%(5/751)、2.50%(2/80)、4.91%(8/163)、1.14%(3/264)、1.22%(1/82)和17.10%(152/889);其中,阿勒泰羊、和田羊、哈萨克羊、美利奴羊、萨福克羊、小尾寒羊的梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为0.35%(1/288)、1.14%(3/264)、22.87%(231/1010)、13.86%(42/303)、1.85%(13/702)和2.50%(2/80);新疆本土品种羊与引进品种羊血清梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为0.79%(8/1015)、1.58%(15/947);公羊与母羊梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为3.59%(34/946)、15.17%(258/1701)。本研究结果分析表明,需要对梅迪维斯纳病进行早期检疫,及时发现并淘汰病羊,改善饲养管理条件,这对促进羊产业健康发展具有重要意义。 展开更多
关键词 新疆 梅迪维斯纳病(MVD) 梅迪维斯纳病毒(MVV) 血清学调查
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绵羊梅迪-维斯纳病毒CA蛋白可溶性表达、多克隆抗体制备及鉴定 被引量:1
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作者 李慧萍 陈思旭 +2 位作者 张良 史晓娜 刘淑英 《畜牧与饲料科学》 2022年第5期1-6,共6页
[目的]制备绵羊梅迪-维斯纳病毒(maedi-visna virus,MVV)衣壳蛋白(capsid protein,CA)多克隆抗体,并鉴定其特异性。[方法]根据MVV内蒙古分离株CA基因序列设计特异性引物,扩增CA基因,构建重组质粒;对CA重组蛋白进行原核表达及纯化,制备兔... [目的]制备绵羊梅迪-维斯纳病毒(maedi-visna virus,MVV)衣壳蛋白(capsid protein,CA)多克隆抗体,并鉴定其特异性。[方法]根据MVV内蒙古分离株CA基因序列设计特异性引物,扩增CA基因,构建重组质粒;对CA重组蛋白进行原核表达及纯化,制备兔源MVV CA重组蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定其抗体效价,利用Western blot和免疫组化方法对其进行特异性鉴定。[结果]成功构建MVV CA重组蛋白原核表达系统,纯化后的目的蛋白大小约27 kDa;间接ELISA方法测定制备的多克隆抗体效价为1∶8192;Western blot检测感染MVV绵羊的病肺组织,在25 kDa处出现特异性条带;免疫组化结果显示感染MVV绵羊的病肺中巨噬细胞的胞浆内有明显棕黄色阳性信号。[结论]利用获得的可溶性重组MVV CA蛋白制备的多克隆抗体具有较好特异性,可为MVV血清学诊断技术提供检测抗体。 展开更多
关键词 绵羊 梅迪-维斯纳病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体
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梅迪-维斯纳病毒研究进展 被引量:1
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作者 张念章 储岳峰 +3 位作者 赵萍 高鹏程 贺英 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第3期104-107,共4页
梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免... 梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免疫逃避机理及引起宿主的免疫反应,并对未来的防控研究工作进行展望。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 病原学 致病机理 免疫学
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梅迪-维斯纳病毒gag蛋白的原核表达及其交叉反应原性 被引量:1
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作者 古努尔·吐尔逊 王登峰 +5 位作者 杨学云 魏玉荣 李建军 孟肖潇 洪都孜·波拉提 吴建勇 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期978-983,共6页
为鉴定适用于中国小反刍动物慢病毒(Small ruminants lentivirus viruses,SRLVs)血清学诊断的通用蛋白标记物,本研究以梅迪-维斯纳病毒(Maedi-Visna virus,MVV)四川株为模板扩增获得gag基因序列,使用生物信息学方法分析其与中国山羊关节... 为鉴定适用于中国小反刍动物慢病毒(Small ruminants lentivirus viruses,SRLVs)血清学诊断的通用蛋白标记物,本研究以梅迪-维斯纳病毒(Maedi-Visna virus,MVV)四川株为模板扩增获得gag基因序列,使用生物信息学方法分析其与中国山羊关节炎-脑炎病毒(Caprine arthritis encephalitis virus,CAEV)分离株gag蛋白氨基酸序列和抗原表位相似性,构建gag基因重组表达载体并转入BL21(DE3)宿主菌进行诱导表达,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting确定其大小、分布和反应原性。结果显示,MVV gag蛋白氨基酸序列与中国CAEV分离株的相似性为74.7%~74.9%,它的11个抗原表位与CAEV gag蛋白的12个抗原表位存在较高的序列相似性,推测其可作为中国SRLVs血清学诊断的通用蛋白质标记物;SDS-PAGE检测结果显示,重组gag蛋白大小约为55000,主要以包涵体形式存在,Western blotting显示该蛋白可与MVV和CAEV感染动物血清发生免疫反应,证实了蛋白序列分析结果。该研究结果可为研制中国SRLVs通用血清学检测技术方法奠定基础。 展开更多
关键词 梅迪-维斯纳病毒 GAG蛋白 原核表达 交叉反应原性 抗原表位
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新疆绵羊梅迪病毒理化特性的鉴定
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作者 呼西旦 符子华 +4 位作者 李淑霞 易中 胡尔玛西 王进成 龚成润 《西北农业学报》 CAS CSCD 1993年第3期87-90,共4页
应用微量细胞培养技术对分离的新疆绵羊梅迪(Magi)病毒CMV—1株作了理化特性的鉴定。研究结果表明,CMV—1株是一个有囊膜的反转录病毒,pH3、60℃30min易于灭活,对胰蛋白酶敏感,二价阳离子无保护作用。这些特性与Magi-visna病毒完全一致... 应用微量细胞培养技术对分离的新疆绵羊梅迪(Magi)病毒CMV—1株作了理化特性的鉴定。研究结果表明,CMV—1株是一个有囊膜的反转录病毒,pH3、60℃30min易于灭活,对胰蛋白酶敏感,二价阳离子无保护作用。这些特性与Magi-visna病毒完全一致。证明CMV—1毒株属反转病毒科,慢病毒亚科,Magi-Visna群。 展开更多
关键词 理化特性 羊病 梅迪病毒 绵羊 新疆
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