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艾灸督脉对APP/PS1双转基因小鼠mTOR/TFEB通路介导的自噬溶酶体功能及lncRNA H19表达的影响 被引量：4
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作者 贾玉梅 朱才丰 +6 位作者 杨坤 贺成功 吴洋洋 王玲 宋任飞 张佳玉 王弛 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期665-672,共8页
目的:观察艾灸督脉穴对APP/PS1双转基因小鼠自噬溶酶体功能及长链非编码RNA H19(lncRNA H19)的影响,探讨艾灸治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:6月龄健康雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾灸+抑制剂组和雷帕霉素... 目的:观察艾灸督脉穴对APP/PS1双转基因小鼠自噬溶酶体功能及长链非编码RNA H19(lncRNA H19)的影响,探讨艾灸治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:6月龄健康雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾灸+抑制剂组和雷帕霉素组,每组13只,同时选取13只6月龄健康雄性C57BL/6J小鼠作为对照组。艾灸组予隔附子饼灸“百会”及悬灸“大椎”“风府”,15 min/d;艾灸+抑制剂组在艾灸组基础上给予腹腔注射3-甲基腺嘌呤1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1);雷帕霉素组仅腹腔注射雷帕霉素2 mg·kg^(-1)·d^(-1)。以上各组均每日干预1次,共2周。以Morris水迷宫实验检测干预前后小鼠学习记忆能力;透射电镜观察小鼠海马组织自噬体形成;免疫组织化学法检测小鼠海马区β-淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))蛋白表达;荧光定量PCR法检测小鼠海马组织lncRNA H19、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转录因子EB(TFEB)、溶酶体水解酶Cathepsin D、溶酶体关联膜蛋白1(LAMP1)mRNA的表达;Western blot法检测小鼠海马组织mTOR、TFEB、Cathepsin D、LAMP1、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、p62蛋白表达。结果:治疗前,与正常组比较,模型组、艾灸组、艾灸+抑制剂组和雷帕霉素组逃避潜伏期延长(P<0.05)。治疗后,与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05);海马神经元细胞质内自噬泡减少,自噬溶酶体结构破坏;Aβ_(1-42)蛋白表达、lncRNA H19表达、mTOR mRNA和蛋白表达、p62蛋白表达均升高(P<0.05),TFEB、Cathepsin D、LAMP1 mRNA和蛋白表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均降低(P<0.05)。与模型组和艾灸+抑制剂组比较,艾灸组和雷帕霉素组逃避潜伏期缩短(P<0.05);海马神经元细胞质内自噬泡较多,自噬溶酶体结构清晰完整;Aβ_(1-42)蛋白表达、lncRNA H19表达、mTOR mRNA和蛋白表达、p62蛋白表达均降低(P<0.05),TFEB、Cathepsin D、LAMP1 mRNA和蛋白表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均� 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 艾灸 学习认知能力 自噬 长链非编码RNA H19 mtor/tfeb通路 海马
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基于脂噬介导的mTOR/TFEB信号通路探讨当归红芪超滤物干预糖尿病肾病作用机制
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作者 高婷 李荣科 +3 位作者 万生芳 张磊 张小琳 徐庆全 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第6期66-72,共7页
目的以当归红芪超滤物干预糖尿病肾病模型大鼠,探讨其对糖尿病肾病脂噬的效应机制。方法50只SPF级雄性Wistar大鼠随机选取7只为空白组,其余43只采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高脂高糖饲料喂养制备糖尿病肾病模型。将成模大鼠... 目的以当归红芪超滤物干预糖尿病肾病模型大鼠,探讨其对糖尿病肾病脂噬的效应机制。方法50只SPF级雄性Wistar大鼠随机选取7只为空白组,其余43只采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高脂高糖饲料喂养制备糖尿病肾病模型。将成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(17.9 mg/kg)和中药低、中、高剂量组(1.5、3、6g/kg),分别灌胃相应溶液,连续12周。检测大鼠随机血糖、体质量及24h尿蛋白含量,生化检测糖化血清蛋白(GSP)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)含量,HE染色观察肾组织形态变化,Masson染色观察肾组织纤维化情况,透射电镜观察肾组织超微结构,RT-qPCR检测肾组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3(LC3B)mRNA表达,Westernblot检测肾组织mTOR、转录因子EB(TFEB)、p-TFEB、LC3B蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠随机血糖显著升高(P<0.01),体质量显著减少(P<0.01),24h尿蛋白含量显著升高(P<0.01),GSP、SCr、BUN、TG、TC、LDL-C、FFA含量显著升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P<0.01);肾小管上皮细胞空泡变性、胞质空泡化、有大量炎性细胞浸润,胶原纤维增多且分布杂乱,脂滴数量增加,自噬体数量减少;肾组织mTORmRNA表达显著升高(P<0.01),LC3BmRNA表达显著降低(P<0.01),mTOR、p-TFEB蛋白表达显著升高(P<0.01),TFEB、LC3BⅡ蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠给药12周随机血糖、24h尿蛋白含量降低,体质量增加,GSP、SCr、BUN、TG、TC、LDL-C、FFA含量降低,HDL-C含量升高;肾组织炎性细胞浸润、纤维化、脂滴沉积有不同程度缓解,肾组织mTORmRNA表达降低,LC3BmRNA表达升高,mTOR、p-TFEB蛋白表达降低,TFEB、LC3BⅡ蛋白表达升高,其中厄贝沙坦组和中药高剂量组差异均有统计学意义(P< 展开更多
关键词 糖尿病肾病 当归红芪超滤物 脂噬 mtor/tfeb信号通路 大鼠
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丹七片调控mTOR-ULK1/TFEB自噬通路保护阿霉素诱导心肌损伤的作用机制 被引量：6
3
作者 王晓平 江艳艳 +3 位作者 李伟利 孙乾斌 张倩 王勇 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期3946-3951,共6页
目的:探讨丹七片对阿霉素诱导心肌损伤(DIMI)的保护作用及调控机制。方法:18只DIMI小鼠随机分成模型组、丹七片组和普伐他汀组,每组6只,另取6只C57BL/6小鼠作为正常对照组。丹七片组和普伐他汀组分别予1.5g/kg丹七片和40mg/kg普伐他汀... 目的:探讨丹七片对阿霉素诱导心肌损伤(DIMI)的保护作用及调控机制。方法:18只DIMI小鼠随机分成模型组、丹七片组和普伐他汀组,每组6只,另取6只C57BL/6小鼠作为正常对照组。丹七片组和普伐他汀组分别予1.5g/kg丹七片和40mg/kg普伐他汀混悬液灌胃,模型组和正常对照组予蒸馏水灌胃,连续干预4周。超声和HE检测心功能,电镜和GFP-mRFP-LC3腺病毒转染检测自噬通量,Western blot检测自噬相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,丹七片组显著提高DIMI小鼠的射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)(P<0.01,P<0.05);HE染色显示,丹七片有效改善心肌细胞排列紊乱和心肌纤维溶解的情况;电镜结果提示,丹七片组显著减少自噬溶酶体的累积。体外GFP-mRFP-LC3荧光结果表明,丹七片通过减少自噬溶酶体的累积和促进自噬体的形成恢复阿霉素阻断的自噬流;此外,丹七片组显著上调Beclin1和LAMP1(P<0.05),下调p-mTOR和p-ULK1(P<0.05),促进TFEB入核(P<0.01);联合mTOR激动剂MHY1485后,丹七片的调控作用均消失。结论:丹七片通过mTOR-ULK1/TFEB通路分阶段调控自噬保护DIMI。 展开更多
关键词 阿霉素 心肌损伤 丹七片 自噬 mtor-ULK1tfeb通路 中药复方 肿瘤心脏病
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