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干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫 被引量：2
1
作者 刘天玥 韩晨颖 +4 位作者 胡尘辰 毛司懿 孙元杰 杨舒雅 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期303-310,共8页
目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制.方法使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平.采用RNA干扰技术(RNAi)沉... 目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制.方法使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平.采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HCT-116和SW480人结直肠癌细胞的IGF2BP2表达,实时定量PCR检测沉默效果.敲低IGF2BP2后,集落形成实验、CCK-8实验、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞集落形成和增殖能力,Transwell^(TM)实验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测IGF2BP2、MYC、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达.Western blot法测定IGF2BP2、MYC的蛋白表达,RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(RIP-qPCR)检测HCT-116细胞中IGF2BP2与MYC mRNA结合能力.结果TCGA数据库结果表明,IGF2BP2和MYC在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,且IGF2BP2高表达的结直肠癌患者生存期更短.沉默IGF2BP2后,HCT-116和SW480细胞的活力、增殖、迁移能力降低.IGF2BP2敲低组MYC、TGF-β、IL-10的mRNA表达显著降低,而TNF-αmRNA表达升高;MYC蛋白表达及mRNA稳定性均显著下降.RIP-qPCR结果表明IGF2BP2能够与MYC mRNA结合.结论干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫. 展开更多
关键词 结直肠癌 胰岛素样生长因子2 mrna结合蛋白2(igf2bp2) MYC 肿瘤细胞增殖 肿瘤细胞迁移 肿瘤免疫微环境
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m^(6)A阅读蛋白IGF2BP1对食管鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响及其机制探讨
2
作者 孙姗 潘英杰 +5 位作者 谭劲松 杨航 彭利红 冯刚 刘康 宋桂芹 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1078-1092,共15页
本研究旨在探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞体外功能的影响及其作用机制。利用TIMER2.0数据库、... 本研究旨在探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞体外功能的影响及其作用机制。利用TIMER2.0数据库、免疫组化及实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析IGF2BP1在ESCC组织和癌旁组织中的蛋白及mRNA水平。采用siRNA敲低IGF2BP1在KYSE30和TE-1细胞中的表达,利用CCK-8实验、平板集落形成实验、划痕愈合实验、Transwell实验以及流式细胞术检测敲低IGF2BP1对细胞功能的影响。利用Western blot检测敲低IGF2BP1对上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白及PI3K/AKT通路磷酸化水平的影响。利用STRING、GEPIA数据库筛选出与IGF2BPl蛋白互作的其余N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)甲基化酶并进行差异表达分析。通过RM2Target、SRAMP数据库预测下游靶基因及其m^(6)A修饰位点。结果显示,IGF2BP1在ESCC组织和细胞中高表达(P<0.05或P<0.001);敲低IGF2BP1后KYSE30和TE-1细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱(P<0.05或P<0.001),细胞凋亡增多(P<0.05或P<0.001),同时促进E-cadherin的表达(P<0.05或P<0.01),抑制N-cadherin、Vimentin的表达(P<0.05或P<0.01)以及PI3K/AKT通路的磷酸化(P<0.05或P<0.01);锌指CCCH结构域蛋白13(zinc finger CCCH domain containing protein 13,ZC3H13)与IGF2BP1蛋白互作且在ESCC中的表达水平与IGF2BP1正相关;ZC3H13和IGF2BP1共同调控的潜在靶基因CNNM2、KIAA1549、SP3均具有高可信度的m^(6)A修饰位点。本研究提示,IGF2BP1可能通过m^(6)A依赖的方式与其余m^(6)A甲基化酶协调作用,激活PI3K/AKT通路的磷酸化而促进ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,并促进EMT进程,发挥致癌作用。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 胰岛素样生长因子-2 mrna结合蛋白1(igf2bp1) N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A) 增殖 侵袭 凋亡
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TRIM19泛素化IGF2BP3对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响 被引量：1
3
作者 王琪 廖振蓉 +2 位作者 罗德平 余瑛 李荣 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期170-173,共4页
目的探讨三方基序蛋白(TRIM)19对胰岛样生长因子-2 mRNA结合蛋白(IGF2BP)3的影响及对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为对照组、过表达TRIM19组(转染TRIM19)、敲减TRIM19组(转染TRIM19-inhibitor),通过Western印迹... 目的探讨三方基序蛋白(TRIM)19对胰岛样生长因子-2 mRNA结合蛋白(IGF2BP)3的影响及对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为对照组、过表达TRIM19组(转染TRIM19)、敲减TRIM19组(转染TRIM19-inhibitor),通过Western印迹对IGF2BP3的表达进行检测,通过免疫共沉淀对TRIM19的泛素化情况进行检测,以确定TRIM19与IGF2BP3之间的相互关系,以噻唑蓝(MTT)实验对细胞的增殖情况进行检测,Transwell对VSMC细胞的迁移情况进行测定。结果与对照组及敲减TRIM19组相比,过表达TRIM19组的细胞活力、迁移能力显著下降(P<0.05),内源IGF2BP3的表达量显著减少(P<0.05),与对照组相比,敲减TRIM19组的细胞活力、迁移能力显著上升(P<0.05)。TRIM19与IGF2BP3之间存在一定的相互作用,过表达TRIM19可增加IGF2BP3的泛素化程度。结论TRIM19可增加IGF2BP3的泛素化程度,从而抑制卵巢癌细胞的增殖及迁移。 展开更多
关键词 三方基序蛋白(TRIM)19 胰岛样生长因子-2 mrna结合蛋白(igf2bp)3 泛素化 卵巢癌细胞
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