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猪ADSL基因克隆及其在部分组织中的mRNA定量表达 被引量:8
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作者 刘基伟 徐日福 +4 位作者 李奎 白丽景 应正宙 唐中林 杨述林 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第6期22-27,共6页
试验以通城猪为研究对象,在对猪ADSL基因全长编码区cDNA片段进行克隆、序列测定、与GenBank中已收录的其他14种动物的ADSL全长编码区序列进行同源性分析,并构建系统发生树的基础上,采用实时(相对)定量PCR方法对刚出生和65日龄两个不同... 试验以通城猪为研究对象,在对猪ADSL基因全长编码区cDNA片段进行克隆、序列测定、与GenBank中已收录的其他14种动物的ADSL全长编码区序列进行同源性分析,并构建系统发生树的基础上,采用实时(相对)定量PCR方法对刚出生和65日龄两个不同生长发育时期的通城猪心、肝、肾脏、背最长肌4种组织的ADSL基因表达谱进行分析。结果表明,所克隆的ADSL基因片段大小为1 548 bp(GenBank登录号:GU249574),其中包含一长为1 455 bp的完整阅读框,通过核酸序列分析发现,该基因编码484个氨基酸;与GenBank中已收录的猪ADSL基因序列同源性最高,达99.9%;与恒河猴和黑猩猩的序列同源性最低,分别为66.3%和41.3%;15种动物的20条ADSL全长CDS序列聚类分布为两个主支。刚出生时的通城猪ADSL基因在心、肝、肾脏组织的mRNA表达水平均高于65日龄通城猪的心、肝、肾脏组织中的mRNA表达;然而,其背最长肌的ADSL基因mRNA表达水平则低于65日龄的通城猪。本结果为猪ADSL基因的生物学功能研究和遗传进化研究提供了分子依据。 展开更多
关键词 ADSL基因 克隆 肾脏组织 mrna expression 定量表达 pig 通城猪 序列同源性 mrna表达水平 GENBANK 背最长肌 日龄 核酸序列分析 编码区序列 系统发生树 同源性分析 研究对象 序列测定 收录 片段
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草鱼小肽转运载体PepT1基因的克隆与表达特征 被引量:8
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作者 冯军厂 刘臻 +3 位作者 鲁双庆 聂国兴 周玲 孙浪 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期276-285,共10页
采用同源克隆和RACE技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PepT1基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为2 762 bp,包含141 bp的5′UTR序列,479 bp的3′UTR序列,2 142 bp开放阅读框,编码713个氨基酸;草鱼与鲫(Carassius auratus)、斑马鱼(Da... 采用同源克隆和RACE技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PepT1基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为2 762 bp,包含141 bp的5′UTR序列,479 bp的3′UTR序列,2 142 bp开放阅读框,编码713个氨基酸;草鱼与鲫(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)的核苷酸同源性分别为77.6%和74.0%,氨基酸同源性分别为78.0%和76.7%;与其他物种的核苷酸同源性为53.9%~59.1%,而氨基酸的同源性为57.2%~61.8%。经预测,其编码蛋白的分子量为79.29 kD,等电点为5.87,该蛋白具有与哺乳动物十分相似的11个螺旋跨膜结构,跨膜区氨基酸高度保守;系统进化分析表明,草鱼PepT1基因与鲫鱼和斑马鱼的亲缘关系最近;利用Real-time PCR技术检测了该基因的时空表达,结果显示,PepT1在草鱼前肠组织表达量最高,其次是肌肉组织;草鱼出膜7 d后PepT1 mRNA表达量相对稳定;昼夜节律研究发现,肠道PepT1基因夜间的表达量较白天高。本研究旨在为小肽转运载体PepT1介导肠道转运小肽调控草鱼对饲料蛋白消化吸收的分子机理提供理论基础。 展开更多
关键词 草鱼 PepT1cDNA 分子特征 mrna表达丰度
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Study on differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction 被引量:7
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作者 TANG Rongmei CHEN Bowei +2 位作者 YI Jian LIU Baiyan LIN Huashan 《Digital Chinese Medicine》 2021年第4期305-315,共11页
Objective To analyze the differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction(ACI)and clarify the changes in gene expression related to cerebral infarction injury and the p... Objective To analyze the differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction(ACI)and clarify the changes in gene expression related to cerebral infarction injury and the potential serum markers.Methods Four patients with ACI and five healthy people were enrolled in the PhaseⅠstudy.After serum isolation from peripheral blood,exosomes were extracted with exosomes kits,highthroughput detection of m RNA was performed with gene chips,and differentially expressed m RNAs were screened.Gene Ontology(GO)functional analysis and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway enrichment analysis were performed simultaneously.Furthermore,real-time polymerase chain reaction(q RT-PCR)was used to verify the expression levels of the screened differential m RNAs in the serum exosomes collected in PhaseⅡfrom 32 patients each in the ACI case and normal control groups.Results In the PhaseⅠstudy,there were 248 differentially expressed m RNAs(fold change≥2.0,P<0.05)among five patients in the normal control group and four patients in the case group,of which the expression of 242 was upregulated and that of six was downregulated.The results of GO functional enrichment analysis mainly included behavior regulation,cell connection,and antioxidant activity.The results of KEGG pathway enrichment analysis mainly included ribosomes,proteasomes,oxytocin signaling pathways,and oxidative phosphorylation.After researching and screening based on relevant literature,it was found that among the genes with significant differential expression,H3 F3 B m RNA may be associated with and might play an important role in ACI.The q RT-PCR method was used to detect the H3 F3 B mRNA expression in serum exosomes of 32 patients each in the normal control and case groups in PhaseⅡ;the expression was significantly higher in serum exosomes of the case group than in those of the normal control group(P<0.001).H3 F3 B mRNA expression in serum exosomes of the case group positively correlated with age,the Nation 展开更多
关键词 Acute cerebral infarction(ACI) EXOSOMES mrna expression profile Gene chip H3F3B
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2-十三烷酮诱导棉铃虫(Helicoverpa armigera)细胞色素P450 CYP6B6时空表达规律的研究 被引量:5
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作者 刘小宁 李芬 +1 位作者 张学涛 朱燕 《干旱区研究》 CSCD 北大核心 2014年第5期978-983,共6页
植物次生物质2-十三烷酮能够诱导棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6基因的过量表达,以6龄棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫为对象,研究2-十三烷酮对棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6的诱导作用,并对其表达规律进行了初探。分别采用实时荧光定量PCR(q... 植物次生物质2-十三烷酮能够诱导棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6基因的过量表达,以6龄棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫为对象,研究2-十三烷酮对棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6的诱导作用,并对其表达规律进行了初探。分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组化的方法,分析棉铃虫在终浓度为10 mg·g-1的2-十三烷酮胁迫下,不同时间及不同组织部位CYP6B6基因在mRNA水平和蛋白水平上的表达变化规律。qRTPCR结果显示:用添加了2-十三烷酮的人工饲料饲喂棉铃虫不同时间后,在头壳中CYP6B6 mRNA的表达量一直低于对照组,到48 h时与对照组具有显著差异(t4=15.32,P=0.000 1);在脂肪体中随着时间的推移,表达量呈升高趋势,在36 h已过量表达(t4=7.627,P=0.001 6);在24 h时体壁和中肠组织的表达量分别较对照组提高了2.06倍和7.16倍,之后表达量均呈现先降低后升高的趋势,且在48 h时达到最大。免疫组化结果显示:在棉铃虫幼虫组织中发现CYP6B6蛋白在体壁、脂肪体、中肠中均有表达,相比之下在体壁中表达量较高。该研究为深入了解棉铃虫P450 CYP6B6的表达调控机制及其参与杀虫剂抗性的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 棉铃虫(Helicoverpa armigera) 细胞色素P450CYP6B6 2-十三烷酮 mrna水平 蛋白水平 表达规律
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黄芪多糖联合二甲双胍对衰老糖尿病小鼠肝脏mRNA表达谱的影响及功能分析 被引量:5
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作者 刘佳佳 李丹丹 +2 位作者 赵翊 吴玉泓 王晶 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1043-1046,共4页
目的探讨黄芪多糖联合二甲双胍治疗衰老糖尿病的分子机制。方法高糖高脂饲料联合链脲佐菌素诱导自然衰老小鼠建立衰老糖尿病模型,将实验小鼠分为衰老对照组、衰老糖尿病模型组、二甲双胍治疗组、黄芪多糖联合二甲双胍治疗组。检测各组... 目的探讨黄芪多糖联合二甲双胍治疗衰老糖尿病的分子机制。方法高糖高脂饲料联合链脲佐菌素诱导自然衰老小鼠建立衰老糖尿病模型,将实验小鼠分为衰老对照组、衰老糖尿病模型组、二甲双胍治疗组、黄芪多糖联合二甲双胍治疗组。检测各组小鼠血清胰岛素变化,胰腺组织胰岛素分泌情况及胰腺组织的形态学变化;利用生物信息学工具分析衰老对照组、衰老糖尿病模型组、黄芪多糖联合二甲双胍治疗组小鼠的肝脏组织差异mRNA功能。结果黄芪多糖联合二甲双胍治疗相比二甲双胍单药组可显著升高衰老糖尿病小鼠的血清胰岛素含量(P<0.05),改善胰腺腺泡细胞水肿和促进胰岛形态的恢复。芯片结果显示,差异mRNA,Tob2、Tmem100及Usp15等显著差异表达且对它们的靶miRNA具有较强调控作用。经过功能注释,发现差异mRNA在BMP信号通路、cGMP-PKG信号通路及GnRH信号通路中显著富集。结论黄芪多糖联合二甲双胍可能通过调控BMP信号通路、cGMP-PKG信号通路,Tob2,Usp15及Tmem100基因改善肝脏组织损伤,对缓解衰老糖尿病所致损伤具有研究潜能。 展开更多
关键词 衰老糖尿病 二甲双胍 黄芪多糖 mrna表达谱
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Comparative profiling of the transcriptional response to soybean cyst nematode infection of soybean roots by deep sequencing 被引量:5
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作者 LI XiaoYan WANG Xue +3 位作者 ZHANG ShaoPeng LIU DaWei DUAN YuXi DONG Wei 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2011年第18期1904-1911,共8页
To gain insight into the changes in the transcriptome of soybean roots during soybean cyst nematode (SCN) infection, we conducted genome-wide gene expression profiling using serial analysis of gene expression (SAGE) c... To gain insight into the changes in the transcriptome of soybean roots during soybean cyst nematode (SCN) infection, we conducted genome-wide gene expression profiling using serial analysis of gene expression (SAGE) combined with Solexa sequencing. More than 3 million tags were generated from the SCN-infected and uninfected roots, and 366941 and 314591 clean UniTags were obtained from SCN-infected and uninfected samples, respectively. In the SCN-infected sample, 48249 UniTags represented 18114 reference genes. In the uninfected control, 46290 UniTags represented 19323 reference genes. Comparison of tag frequencies identified 1405 genes that were expressed at greater levels in SCN-infected roots than in uninfected roots, and 1191 genes that were expressed at lower levels. Quantitative real-time PCR analyses confirmed the changes in mRNA levels observed in our sequencing analyses. A comparable number of genes were upand down-regulated in response to nematode infection, indicating that down-regulation of some genes might be essential in the plant response to nematodes. Our SAGE results showed significant changes in expression of many unreported genes involved in nematode infection. Approximately 7% of tags mapped to the antisense strand of genes, indicating widespread antisense transcription. 展开更多
关键词 大豆孢囊线虫 线虫感染 测序分析 转录 根系深度 基因表达分析 反应 mrna水平
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PGC-1α differentially regulates the mRNA expression profiles of genes related to myofiber type specificity in chicken 被引量:5
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作者 SHAN Yan-ju JI Gai-ge +5 位作者 ZOU Jian-min ZHANG Ming TU Yun-jie LIU Yi-fan JU Xiao-jun SHU Jing-ting 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第8期2083-2094,共12页
Previous studies on mammals showed that peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α(PGC-1α)played a prominent role in regulating muscle fiber type transition and composition.However,the role of P... Previous studies on mammals showed that peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α(PGC-1α)played a prominent role in regulating muscle fiber type transition and composition.However,the role of PGC-1αin chicken muscle has seldom been explored.To investigate the effect of PGC-1αon chicken skeletal muscles in this study,the PGC-1αgene was overexpressed or silenced in chicken primary myoblasts by using lentivirus,and then the effects of the PGC-1αgene overexpression and knockdown on the mRNA expression profile of genes related to myofiber type specificity were examined during fiber formation.The results showed that overexpression of PGC-1αfrom proliferation to differentiation was accompanied by the up-regulated expression of Pax7,MyoD,and CnAα,which was significantly(P<0.01)increased after one day of transfection(1 I).The enhancement of MyoG,MEF2 c,and MyHC SM expression lagged,which was improved significantly(P<0.01)after four days of transfection(1 I3 D).Overexpression of PGC-1αdecreased(P<0.01)the MyHC FWM expression after four days of transfection(1 I3 D),and it had no significant impact(P>0.05)on the expression of CnB1,NFATc3,and MyHC FRM during myofiber formation.The effective silence(P<0.01)of PGC-1αby lentivirus mediating short hairpin RNA(shRNA)was detected after four days of transfection(1 I3 D)in cultures,and the lack of its function in chicken primary myoblasts significantly(P<0.01)down-regulated the expression of Pax7,MyoD,CnAα,MyoG,MEF2 c,and MyHC SM,significantly(P<0.01)up-regulated the expression of MyHC FWM,and had no significant impact(P>0.05)on the expression of CnB1,NFATc3,and MyHC FRM.These results indicated that the role of PGC-1αin regulating the fiber type specificity of chicken skeletal muscles might be similar to that in mammals,which interplayed with key genes related to myocyte differentiation and calcineurin signaling pathway. 展开更多
关键词 PGC-1αgene CHICKEN myofiber type specificity mrna expression profile
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Comprehensive analysis of long non-coding RNA and mRNA expression profile in rectal cancer 被引量:4
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作者 De-Zhong Wang Guan-Yang Chen +1 位作者 Yi-Feng Li Neng-Wei Zhang 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2020年第11期1312-1321,共10页
Background::Rectal cancer(RC)is a malignant tumor that seriously threatens human health.Long non-coding RNAs(lncRNAs)play a vital role in tumor regulation.Nevertheless,their exact expression features and functions rem... Background::Rectal cancer(RC)is a malignant tumor that seriously threatens human health.Long non-coding RNAs(lncRNAs)play a vital role in tumor regulation.Nevertheless,their exact expression features and functions remain obscure,and therefore was the aim of the current study.Methods::We utilized the Affymetrix human GeneChip to screen differentially expressed profiles of lncRNAs and mRNAs from the cancer tissues and matched paracancer tissues of 6 RC patients.Gene Ontology(GO)and pathway enrichment analyses identified crucial functions and pathways of the aberrantly expressed mRNAs.We used quantitative real-time polymerase chain reaction to verify the significant expression differences of 11 candidate lncRNAs between the cancer and paracancer tissues.LncRNA-mRNA coexpression networks were built by calculating the Pearson correlation value to identify significant correlation pairs.Online bioinformatics tools GEPIA2,ONCOMINE,and PROGgeneV2 were used to mine the expression and prognosis of three crucial mRNAs and six verified lncRNAs.Competing endogenous RNA networks were constructed by predicting microRNA response elements and calculating free energy.Results::We found 1658 differentially expressed lncRNAs(778 up-regulated and 880 down-regulated)and 1783 aberrantly expressed mRNAs(909 up-regulated and 874 down-regulated).GO and pathway enrichment analyses revealed the vital functions of the differentially expressed mRNAs,including cell proliferation,cell migration,angiogenesis,and cellular response to zinc ion.The canonical signaling pathways mainly included the interleukin-17,cell cycle,Wnt,and mineral absorption signaling pathways.Six lncRNAs including AC017002.2(P=0.039),cancer susceptibility 19(CASC19)(P=0.021),LINC00152(P=0.013),NONHSAT058834(P=0.007),NONHSAT007692(P=0.045),and ENST00000415991.1(P=0.045)showed significant differences in expression levels between the cancer tissue and paracancer tissue groups.AC017002.2,NONHSAT058834,NONHSAT007692,and ENST00000415991.1 have not yet been reported in RC.The crucia 展开更多
关键词 lncRNA mrna expression profile Rectal cancer
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人体心肌内和血液中衰老相关长链非编码RNA的综合分析 被引量:4
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作者 田佳瑜 程子超 +1 位作者 赵锦阳 范谦 《中国医药》 2019年第5期673-676,共4页
目的探讨人类心肌和血液标本中长链非编码RNA(lncRNA)和mRNA的表达谱,分析人体心肌和血液标本中富集的与衰老相关的lncRNA,预测其潜在生物学功能和通路。方法对19对祖孙(老年组和青年组)的38份血液样本和7例接受心脏手术患者的心肌组织... 目的探讨人类心肌和血液标本中长链非编码RNA(lncRNA)和mRNA的表达谱,分析人体心肌和血液标本中富集的与衰老相关的lncRNA,预测其潜在生物学功能和通路。方法对19对祖孙(老年组和青年组)的38份血液样本和7例接受心脏手术患者的心肌组织进行lncRNA和mRNA基因微阵列分析,筛选老年组和青年组血液标本差异性表达的lncRNA和mRNA,对血液样本中的差异基因、血液样本中富集的基因及心肌组织样本中富集的基因求交集并绘制Venn图,对筛选出的心肌衰老相关的差异基因进行通路分析,利用共表达网络分析筛选出起核心作用的mRNA和lncRNA,并推测哪些mRNA和lncRNA之间具有调控关系。结果在人类心肌标本中共检测到75 434个lncRNA和20 666个mRNA,在人类血液标本中共检测到75 434个lncRNA及20 666个mRNA,其中老年组与青年组差异性表达的lncRNA 2 835个,差异性表达的mRNA 959个。筛选血液标本中富集的lncRNA共24 281个、心肌标本中富集的lncRNA共23 980个与血液标本中具有衰老差异的lncRNA的交集,共得到可代表与心肌衰老相关的差异lncRNA720个;筛选血液标本中富集的5 554个mRNA、心肌标本中富集的4 520个mRNA与血液标本中具有衰老相关差异的959个mRNA的交集,共得到可以代表与心肌衰老相关的差异mRNA 63个。通过共表达网络图辅助发现lncRNA与mRNA之间可能存在的作用关系,找到影响mRNA表达的lncRNA,有助于发现网络中起中心调控作用的lncRNA及其可能存在的新作用机制。结论基因微阵列分析人类心肌和血液中lncRNA的表达谱,并对其进行潜在功能及通路的预测和分析,可为未来lncRNA和心肌衰老的相关研究提供参考及帮助。 展开更多
关键词 衰老 长链非编码RNA mrna 基因表达谱
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增殖期婴儿血管瘤mRNA表达谱分析及信号网络构建 被引量:3
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作者 王誉都 李鹏 +1 位作者 高亚 黄强 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第2期96-101,共6页
目的:分析增殖期婴儿血管瘤(IH)mRNA表达谱,并构建增殖期婴儿血管瘤调控的信号通路网络。方法:收集2017年3月—2017年9月西安交通大学第二附属医院小儿外科手术治疗的9例IH患儿手术切除标本,依据分期不同分为增生期组(n=5)和消退期组(n=... 目的:分析增殖期婴儿血管瘤(IH)mRNA表达谱,并构建增殖期婴儿血管瘤调控的信号通路网络。方法:收集2017年3月—2017年9月西安交通大学第二附属医院小儿外科手术治疗的9例IH患儿手术切除标本,依据分期不同分为增生期组(n=5)和消退期组(n=4),病例均经病理确诊,比较两组mRNA表达谱差异,分析两组差异基因的GO(Gene Ontology)以及两组主要差异基因信号通路变化。结果:通过GO富集分析得出差异基因在基因的分子功能(MF),参与的生物过程(BP)和所处于的细胞组成(CC)三大类信息中的分布,成功构建GO富集功能图;通过KEGG数据库进行Pathway注释,筛选出差异基因、靶基因富集的显著性信号通路,根据信号通路间的关联关系成功构建Pathway之间的信号转导网络。结论:基因芯片方法检测增殖期和消退期mRNA表达谱可成功筛选差异基因,GO富集分析、KEGG数据库注释等生物信息学方法可通过差异基因筛选出显著性信号调控通路,并构建信号转导网络。 展开更多
关键词 婴儿血管瘤 mrna 表达谱 信号网络
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Isolation, Identification and Tissue Expression Profile Analysis of One Novel Differentially Expressed Sequence Tag in the Longissimus dorsi Muscle from Meishan, Meishan × Large White Hybrid and Large White Pigs 被引量:2
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作者 LIUYong-gang XIONGYuan-zhu DENGChang-yan 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第11期856-861,共6页
In order to detect the molecular mechanism of heterosis in pigs, the mRNA differential display technique was performed to investigate the differences of gene expression in the Longissimus dorsi tissue from Meishan, ... In order to detect the molecular mechanism of heterosis in pigs, the mRNA differential display technique was performed to investigate the differences of gene expression in the Longissimus dorsi tissue from Meishan, Meishan × Large White hybrid and Large White pigs with nine 3'-end anchored primers in combination with ten 5'-end arbitrary primers and nearly 3000 reproducible bands were examined. One novel expressed sequence tag (EST4, GenBank accession number: AY553914) that was differentially expressed in Meishan, Meishan× Large White hybrid and Large White pigs was isolated from the Longissimus dorsi muscle tissue and identified through semi-quantitative RT-PCR. BLAST analysis revealed that the 350 bp long EST (EST4) was not homologous to any of the known porcine genes. Tissue expression profile analyses showed that the EST4 was expressed in most of tissues.LIU Yong-gang, Ph D candidate 展开更多
关键词 mrna differential display Semi-quantitative RT-PCR Tissue expression profile ANALYSIS
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Cloning and analysis of differentially expressed ESTs in swine muscle tissue 被引量:2
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作者 LI Chongsheng CHEN Yaosheng WANG Chong LI Jiaqi 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期342-348,共7页
The obvious difference in muscle growth; meat quality traits exists between Chinese indigenous pig; exotic pigs. In order to study the reason of these phenotypic differences; search the potential gene related to growt... The obvious difference in muscle growth; meat quality traits exists between Chinese indigenous pig; exotic pigs. In order to study the reason of these phenotypic differences; search the potential gene related to growth; meat quality traits, silver-stained mRNA differential display technique was used to detect the difference with mRNA of loin-eye muscle tissue from maturity pigs of Lantang in Guangdong Province; Large Yorkshire. One of the newly discovered expressed sequence tag (ESTsp3) was analyzed by using bioinformatic technique. The results showed: (1) nearly 2000 cDNA fragments were detected with 30 primer pairs,; 6 differentially expressed ESTs in the Ioin-eye muscle tissues from the two breeds were isolated; obtained. The differential fragments were cloned; sequenced. The all sequences were recorded in the GenBank. (2) The 786 bp fragment of ESTsp3 was obtained with in silico elongation system, the ORF analysis revealed that it existed as an 83 aa complete open reading frame,; the elongation sequences were verified by RT-PCR. The analysis of in silico expression profile showed that ESTsp3 is expressed in various growth stages; in most tissues; organs, such as soft tissue, skin, skeletal muscle; kidney, but with variant expression quantity. 展开更多
关键词 pig muscle mrna differential display in silico expression profile.
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非小细胞肺癌mRNA的表达谱分析 被引量:2
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作者 王丽 施雪霏 +4 位作者 袁冬梅 杨雯 陈子 刘春花 宋勇 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第9期769-773,共5页
目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织和正常肺组织中mRNA的表达差异,并进行生物信息学分析。方法采用基因芯片技术对3例NSCLC组织和3例正常肺组织的mRNA进行检测,筛选差异表达基因,进一步对差异表达基因进行Gene Ontoloty(GO)分析和信号通... 目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织和正常肺组织中mRNA的表达差异,并进行生物信息学分析。方法采用基因芯片技术对3例NSCLC组织和3例正常肺组织的mRNA进行检测,筛选差异表达基因,进一步对差异表达基因进行Gene Ontoloty(GO)分析和信号通路分析。结果在20 716条目的基因中共发现两种组织差异表达基因896条,其中593条基因表达增加,303条基因表达降低;生物信息学分析表明上述差异性表达的mRNA参与了NSCLC重要的生物学调节功能和通路。结论基因芯片技术可以筛选出NSCLC组织和正常肺组织间差异表达的基因,mRNA在NSCLC组织和正常肺组织间的表达水平有明显差异,差异性表达的mRNA参与了NSCLC重要的生物学功能。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mrna 芯片分析 基因表达谱
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重度子痫前期差异miRNA和mRNA表达谱的构建与整合分析 被引量:2
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作者 孙波 董洁 +1 位作者 骆琦 洪普 《中国妇幼保健》 CAS 2016年第14期2802-2805,共4页
目的探讨重度子痫前期和正常妊娠胎盘组织差异微小RNA(miRNA)及其靶基因在重度子痫前期致病机制中的作用。方法选择剖宫产分娩的重度子痫前期患者和正常妊娠孕妇各5例,应用芯片技术分别检测重度子痫前期和正常妊娠胎盘组织miRNA和mRNA... 目的探讨重度子痫前期和正常妊娠胎盘组织差异微小RNA(miRNA)及其靶基因在重度子痫前期致病机制中的作用。方法选择剖宫产分娩的重度子痫前期患者和正常妊娠孕妇各5例,应用芯片技术分别检测重度子痫前期和正常妊娠胎盘组织miRNA和mRNA的表达情况,并对差异miRNA和mRNA表达谱进行整合分析,确定在重度子痫前期胎盘组织中差异表达的miRNA的靶基因,并应用生物分子功能注释系统V3.0(MAS V3.0)明确靶基因的生物学功能。结果通过miRNA表达谱芯片筛选出81个差异表达的miRNA,其中80个表达上调,1个表达下调;通过mRNA表达谱芯片筛选出660个差异表达基因,其中256个表达上调,404个表达下调。由于miRNA对其靶基因的负调控作用,通过数据库分析预测及整合分析,得到了56个miRNA靶基因、142个miRNA-靶基因对。这些靶基因涉及离子转运、细胞粘附、血压调节、氧化还原、缺氧反应、炎症反应和信号转导等多方面功能,以及紧密连接、细胞周期、Wnt信号通路、MAPK信号通路、神经活性配体-受体相互作用等多个信号传导通路。结论重度子痫前期患者胎盘组织中差异表达的miRNA及其调控的靶基因可能与重度子痫前期的病及病理生理过程相关。 展开更多
关键词 重度子痫前期 胎盘 表达谱 MIRNA mrna
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系统性红斑狼疮患者血清学mRNA表达谱差异研究及生物信息学分析 被引量:1
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作者 张静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期1636-1639,共4页
目的:分析系统性红斑狼疮(SLE)患者血清学mRNA表达谱差异情况,并对核心基因进行功能分析。方法:采用生物信息学技术分析来自GEO数据库的38例SLE患者和32例健康志愿者血清学样本,筛选显著差异表达mRNA,并对其进行生物学通路和GO分析,并... 目的:分析系统性红斑狼疮(SLE)患者血清学mRNA表达谱差异情况,并对核心基因进行功能分析。方法:采用生物信息学技术分析来自GEO数据库的38例SLE患者和32例健康志愿者血清学样本,筛选显著差异表达mRNA,并对其进行生物学通路和GO分析,并构建相互作用网络。结果:共筛选出39个显著差异表达mRNA,其中TNFSF10表达上调最为显著,G0S2表达下调最为显著。生物学通路和GO分析均显示这些差异表达基因主要参与干扰素信号转导和病毒反应及增殖过程。TNFSF10与其他差异表达基因相互作用错综复杂,而G0S2未显示。结论:TNFSF10和G0S2可能是SLE的核心基因,其中TNFSF10可能联合其他基因共同致病,而G0S2则可能单独致病。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 mrna 表达谱 生物信息学
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HIV转录激活复制过程中差异表达LncRNA和mRNA筛选及初步分析 被引量:1
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作者 邵冰 邵弘 +6 位作者 杜娟 宋波 台志艳 林元龙 迟宗 杨颜泽 王福祥 《中国病毒病杂志》 CAS 2018年第5期353-358,共6页
目的探讨长链非编码LncRNA和mRNA在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)转录激活过程中的表达情况。方法从公共数据平台Gene Expression Omnibus(GEO)下载HIV相关LncRNA+mRNA基因芯片数据集GSE74818。对其中感染时间在... 目的探讨长链非编码LncRNA和mRNA在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)转录激活过程中的表达情况。方法从公共数据平台Gene Expression Omnibus(GEO)下载HIV相关LncRNA+mRNA基因芯片数据集GSE74818。对其中感染时间在18h和30h的芯片探针进行重新分析,筛选出HIV从整合到基因组中到转录形成成熟病毒这一过程中差异表达的LncRNA和mRNA。采用R软件Limma包分析LncRNA和mRNA基因表达谱。结果从经过归一化、过滤和去除重复探针后筛选出1 366个差异表达基因,其中LncRNA 297个,mRNA 1 069个。LncRNA中表达上调的有188个,表达下调的有109个。mRNA表达上调的有530个,有539个表达下调。对差异表达的mRNA进行GO基因富集分析发现,在生物学过程中:主要富集在核小体、染色质组装、核小体组织、负性正性基因表达调控、表观遗传、染色质沉默等条目中;在细胞组分过程中:主要富集在核染色质、蛋白-DNA复合物、核小体、DNA包装复合物等条目中;在分子功能过程中:主要富集在蛋白异二聚体激活、核小体DNA结合条目中。KEGG pathway富集分析结果显示:差异表达的mRNA主要富集在系统性红斑狼疮、类固醇生物合成、酒精中毒、病毒致肿瘤、P53信号通路等中。结论 HIV从整合到基因组到形成成熟病毒这一过程中存在LncRNA和mRNA的差异表达,差异表达的RNA主要涉及到基因的转录调控过程和免疫通路调控过程。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV) 基因表达谱 转录复制 LncRNA mrna
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牦牛BoLA-I基因mRNA及其相关miRNAs在牦牛不同组织器官中表达分析 被引量:1
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作者 徐业芬 孙宏宇 +9 位作者 索朗斯珠 牛家强 贡嘎 郭敏 王玉恒 张鹏宇 张雷 旦巴次仁 王刚 罗润波 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期47-56,共10页
为了解牦牛BoLA-I基因mRNA组织表达谱,并探索可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,利用RT-PCR技术对牦牛BoLA-I基因mRNA在牦牛肝、脾、肺、肾、肌肉、卵巢、小肠、下颌淋巴结、大肠和肠系膜淋巴结等10种组织的表达谱进行分析,再通过Targetscan和... 为了解牦牛BoLA-I基因mRNA组织表达谱,并探索可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,利用RT-PCR技术对牦牛BoLA-I基因mRNA在牦牛肝、脾、肺、肾、肌肉、卵巢、小肠、下颌淋巴结、大肠和肠系膜淋巴结等10种组织的表达谱进行分析,再通过Targetscan和miRBase软件来预测可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,检测其在10种牦牛组织中的表达情况。结果表明:BoLA-I基因mRNA在检测的10种牦牛组织中均有表达,尤其在免疫器官组织中广泛表达,在牦牛的肠系膜淋巴结组织表达水平极显著高于小肠和大肠组织(P<0.01);预测到的可能靶定牦牛BoLA-I基因的miRNA共有28个,从中选择了6个进行组织表达谱分析,发现bta-miR-759、bta-miR-142-5p、bta-miR-665、bta-miR-2322-5p、bta-miR-199a-3p与牦牛BoLA-I基因共表达;除卵巢外,bta-miR-219-5p在其他组织中均有表达,且在肝脏组织中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01)。bta-miR-142-5p在肠系膜淋巴结中表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。由此推测,牦牛BoLA-I基因及其预测的miRNA可能在牦牛组织中起重要作用。 展开更多
关键词 牦牛 BoLA-I mrna miRNA 组织表达谱
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乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者lncRNA表达谱分析
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作者 李小梅 李荣华 +2 位作者 符小玉 李颖 傅蕾 《生命科学研究》 CAS CSCD 2021年第3期249-258,共10页
为了分析乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure,HBVACLF)患者与乙肝携带者(asymptomatic carrier,ASC)间差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),探究lncRNA在HBV-ACLF... 为了分析乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure,HBVACLF)患者与乙肝携带者(asymptomatic carrier,ASC)间差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),探究lncRNA在HBV-ACLF中的功能,选取5例HBV-ACLF患者和5例ASC患者,应用高通量测序检测其外周血中lncRNA及信使RNA(messenger RNA,mRNA)的表达谱,筛选出在两组间差异表达的lncRNA及mRNA,并进一步对差异表达的lncRNA进行生物信息学分析。结果显示,与ASC组相比,HBV-ACLF组中共发现了131个异常表达的lncRNA,表达上调的lncRNA有114个,表达下调的lncRNA有17个,其中lncRNA PIGC上调最显著。GO分析表明,差异表达的lncRNA主要参与病毒复制、固有免疫、小分子物质代谢等生物学过程;KEGG分析发现,差异表达的lncRNA主要参与核黄素代谢、类固醇激素生物合成、果糖和甘露糖代谢、卟啉和叶绿素代谢、叶酸生物合成、氨基酸和核苷酸代谢等信号通路。Cis预测提示,lncRNA PIGC能调控mRNA ENST00000484368的表达。本研究筛选出了在HBV-ACLF患者中差异表达的lncRNA谱,并发现lncRNA很可能通过调节肝细胞的小分子代谢及肝脏免疫反应在HBV-ACLF中发挥作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA(lncRNA) 信使RNA(mrna) 表达谱 乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF) 高通量测序
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脑神经胶质瘤替莫唑胺耐药circRNA-miRNA-mRNA调控网络的构建 被引量:6
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作者 朱琳 《安徽医药》 CAS 2021年第7期1414-1418,共5页
目的筛选脑神经胶质瘤替莫唑胺耐药细胞株U87/TR与亲本细胞株U87的环状RNA(circRNA)差异表达谱以及构建关键环状RNA(circRNA)-微小RNA(miRNA)-信使RNA(mRNA)调控网络。方法2020年1—6月,应用circRNAs芯片检测神经胶质瘤替莫唑胺耐药细胞... 目的筛选脑神经胶质瘤替莫唑胺耐药细胞株U87/TR与亲本细胞株U87的环状RNA(circRNA)差异表达谱以及构建关键环状RNA(circRNA)-微小RNA(miRNA)-信使RNA(mRNA)调控网络。方法2020年1—6月,应用circRNAs芯片检测神经胶质瘤替莫唑胺耐药细胞circRNAs差异表达谱,并进行RT-PCR验证。用miRanda数据库预测circRNA-miRNA靶向结合关系,通过miRanda v5、TargetScan、miBase数据库预测靶基因,Cytoscape软件构建circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结果circRNA芯片结果显示,与U87细胞比较,U87/TR细胞有313个差异有统计学意义表达的circRNAs(P<0.05),其中145个显著上调,168个明显下调;RT-qPCR验证结果与芯片结果相符。miRNA靶位点预测结果显示,关键上调人环状RNAhsa_circRNA_009054,hsa_circRNA_104338(n=3,t=12.09、9.52,P=0.007、0.011)以及下调hsa_circRNA_016459,hsa_circRNA_101975(n=3,t=13.86、7.75,P=0.005、0.016)可与hsa-miR-33a-5p,hsa-miR-15b-3p以及hsa-miR-193b-5p,hsa-miR-23a-5p等多个miRNAs靶向结合,关键circRNA-miRNA-mRNA调控网络包括4个关键circRNAs,20个关键miRNAs,以及278个关键mRNAs。结论circRNA在脑神经胶质瘤替莫唑胺耐药细胞中异常表达,hsa_circRNA_009054,hsa_circRNA_104338以及hsa_circRNA_016459,hsa_circRNA_101975等关键circRNA可能通过circRNA-miRNA-mRNA调控网络参与脑神经胶质瘤替莫唑胺的耐药过程。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 替莫唑胺 抗药性 肿瘤 circRNA差异表达谱 circRNA-miRNA-mrna调控网络
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草鱼APN基因的克隆及表达特征 被引量:3
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作者 冯军厂 聂国兴 +3 位作者 刘臻 张建社 王赏初 鲁双庆 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期859-867,共9页
氨肽酶N(APN)是肽酶M1家族的成员之一,在蛋白质的消化中发挥重要作用。采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼APN基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为3258bp,包含27bp的5UTR序列,552bp的3UTR序列,2679bp开放阅读框,编码892个氨基酸;草鱼与... 氨肽酶N(APN)是肽酶M1家族的成员之一,在蛋白质的消化中发挥重要作用。采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼APN基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为3258bp,包含27bp的5UTR序列,552bp的3UTR序列,2679bp开放阅读框,编码892个氨基酸;草鱼与斑马鱼基因同源性和编码氨基酸同源性分别为81.5%和75.4%,与其他动物同源性分别为58.8%~61.2%和54.3%~60.2%。经预测,其编码蛋白的分子量为100.61ku,等电点为5.14,该蛋白具有与哺乳动物十分相似的1个螺旋跨膜结构,但跨膜区氨基酸同源性较低;系统进化分析表明,草鱼APN基因与斑马鱼的亲缘关系最近;利用Real-timePCR技术检测了该基因的发育表达,结果显示草鱼出膜4d后APNmRNA表达量相对稳定;APN在草鱼前肠、中肠和后肠均有较高的表达量,以前肠组织表达量最高;昼夜节律研究发现,肠道APN基因06:00-18:00的表达量较18:00-06:00高。 展开更多
关键词 草鱼 APNcDNA 分子特征 mrna表达模式
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