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G蛋白β、γ亚基对M2受体的磷酸化的影响
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作者 潘晓蔚 田芙蓉 邹黎明 《沈阳医学院学报》 2009年第4期203-207,共5页
目的:探讨G蛋白β、γ亚基在调节G蛋白偶联受体激酶活性的重要作用和G蛋白β、γ亚基影响M2受体磷酸化新的作用机制。方法:利用四个柱层析分离G蛋白α亚基与G蛋白β、γ亚基;将纯化的G蛋白β、γ亚基、GRK-2,[γ-P32]标记的ATP与mAChR2... 目的:探讨G蛋白β、γ亚基在调节G蛋白偶联受体激酶活性的重要作用和G蛋白β、γ亚基影响M2受体磷酸化新的作用机制。方法:利用四个柱层析分离G蛋白α亚基与G蛋白β、γ亚基;将纯化的G蛋白β、γ亚基、GRK-2,[γ-P32]标记的ATP与mAChR2,共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。结果:G蛋白β、γ亚基在没有激动剂存在的情况下明显增强M2受体的磷酸化。氨甲酰胆碱明显增强M2受体的磷酸化,阿托品或肝素(GRK2抑制剂)完全阻断M2受体的磷酸化。M2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,这种依赖关系呈明显的剂量关系。结论:G蛋白β、γ亚基是通过上调GRK2活性增强M2受体的磷酸化的。说明Gβγ同Gα一样均可引起效应蛋白的激活,在细胞信号转导中起同样重要作用,共同介导一系列的生物学效应。 展开更多
关键词 G蛋白βγ亚基 G蛋白偶联受体 G蛋白偶联受体激酶 磷酸化 胆碱能M2受体
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胆碱能受体和肾上腺素能受体磷酸化的调节作用机制研究
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作者 李继 邹黎明 《沈阳医学院学报》 2009年第1期13-18,共6页
目的:研究受体激活剂或抑制剂影响G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)介导的胆碱能m2受体和β2肾上腺素能受体膜蛋白(β2-AR)磷酸化的调节机制。探讨兴奋剂使m2受体和β2-AR受体活化,引发受体磷酸化级联反应,进而影响蛋白激酶催化受体磷酸化的起... 目的:研究受体激活剂或抑制剂影响G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)介导的胆碱能m2受体和β2肾上腺素能受体膜蛋白(β2-AR)磷酸化的调节机制。探讨兴奋剂使m2受体和β2-AR受体活化,引发受体磷酸化级联反应,进而影响蛋白激酶催化受体磷酸化的起始机制。方法:制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱m2受体;分别将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p32]ATP与受体激活剂或抑制剂共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果。结果:m2受体激活剂氨甲酰胆碱明显增强m2受体的磷酸化,而m2受体抑制剂阿托品或肝素(GRK2抑制剂)完全阻断了m2受体的磷酸化。m2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,呈明显的剂量依赖关系;β2-AR的激活剂特布他林增强肾上腺素能受体的磷酸化,而肝素可完全阻断β2-AR的磷酸化;并且证实氨甲酰胆碱对mAChR2,特布他林对β2-AR磷酸化的增强作用是选择性的作用结果;HEL299细胞磷酸化实验结果也显示氨甲酰胆碱可以增强HEL299细胞m2受体的磷酸化,阿托品可以抑制HEL299细胞m2受体的磷酸化。结论:实验证实氨甲酰胆碱、特布他林和阿托品等一些m2受体和β2-AR的激活剂及抑制剂对M2受体和β2-AR磷酸化的调节作用。提示激活剂增强m2受体和β2-AR的磷酸化可能是这些受体活化一个重要部分,由此开始加速受体敏感性下调,受体耐受性增强。 展开更多
关键词 胆碱能受体 肾上腺素能受体 磷酸化 G蛋白偶联受体激酶
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M_2受体抗体在支气管哮喘发病中的实验性研究 被引量:1
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作者 张小琴 岳红梅 魏彩虹 《兰州大学学报(医学版)》 CAS 2006年第1期11-13,共3页
目的测定Wistar大鼠外周血中Ma受体的自身抗体,观察地塞米松对M2受体的自身抗体影响以及M2受体的自身抗体在哮喘发病中的可能机制。方法以卵白蛋白致敏制备Wistar大鼠哮喘模型, 分为健康对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以细胞外第二... 目的测定Wistar大鼠外周血中Ma受体的自身抗体,观察地塞米松对M2受体的自身抗体影响以及M2受体的自身抗体在哮喘发病中的可能机制。方法以卵白蛋白致敏制备Wistar大鼠哮喘模型, 分为健康对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,分别通过SA-ELISA检测各组大鼠外周血中的M2受体的自身抗体,计算抗体阳性率和抗体滴度的几何均数; 观察各组动物哮喘发作症状、末次卵白蛋白致敏攻击24 h内支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的数量及支气管肺组织病理学改变。结果哮喘模型组的M2受体自身抗体阳性率为66.7%,明显高于对照组的8.3%和地塞米松组的16.7%(P<0.05);哮喘模型组自身抗体阳性患者的抗体滴度为1-105,明显高于对照组的1-20和地塞米松组的1-30(P<0.05)。在哮喘模型组中,M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度明显高于健康对照组与地塞米松组,地塞米松组的BALF中的嗜酸性粒细胞与哮喘组相比有明显减少,地塞米松组的气道炎症程度轻于哮喘组。结论应用地塞米松可以降低M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度,提示M2受体的自身抗体可能参与哮喘的病理生理过程。 展开更多
关键词 哮喘 M2受体 M2受体抗体 动物模型
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