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LncRNA LUCAT1激活自噬对肺腺癌A549干细胞影响的研究
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作者 王鑫 姜梅 +3 位作者 李乐瑶 李雷 王海伦 李亚军 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期11-18,共8页
目的探讨LncRNA LUCAT1在肺腺癌A549干细胞(A549/SC)中与细胞自噬调控的关系,及其对A549/SC增殖和迁移的影响。方法通过qRT-PCR检测A549/SC和肺腺癌A549亲本细胞(A549/MN)中LncRNA LUCAT1的表达情况。慢病毒转染构建稳定敲低LncRNA LUC... 目的探讨LncRNA LUCAT1在肺腺癌A549干细胞(A549/SC)中与细胞自噬调控的关系,及其对A549/SC增殖和迁移的影响。方法通过qRT-PCR检测A549/SC和肺腺癌A549亲本细胞(A549/MN)中LncRNA LUCAT1的表达情况。慢病毒转染构建稳定敲低LncRNA LUCAT1的A549/SC细胞株(sh-LUCAT1)及对照株(NC-sh LUCAT1);CCK8实验、克隆形成实验、Transwell迁移实验检测抑制LUCAT1表达后细胞增殖和迁移的变化。通过蛋白质印迹法检测各转染组细胞中干性和自噬相关蛋白的表达变化。2组样本比较采用独立样本t检验,采用单因素方差分析对组间差异比较结果进行检验。结果无血清悬浮培养法可富集得到A549/SC。与A549/MN相比,A549/SC中干性相关蛋白CD44、Nanog和Bmi-1表达水平均升高,均P<0.05。同时,A549/SC中自噬小体数量明显高于A549/MN(P<0.01),并且A549/SC中自噬相关蛋白Beclin 1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ较A549/MN表达增高,而p62蛋白表达较其亲本细胞偏低,均P<0.05。A549/SC中LUCAT1的mRNA相对表达量明显高于A549/MN(56.04±6.52 vs 1.04±0.38),t=14.600,P<0.001。抑制LUCAT1表达后,A549/SC的增殖、克隆形成及迁移能力均较对照组细胞明显减弱(P<0.01),同时干性相关蛋白CD44(t=3.006,P=0.040)、Nanog(t=6.666,P=0.003)、Bmi-1(t=7.294,P=0.002)和自噬相关蛋白Beclin 1(t=5.460,P=0.005)、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(t=4.748,P=0.009)表达下降,p62蛋白(t=2.929,P=0.043)表达升高,差异均有统计学意义。结论在A549/SC中存在高表达的LncRNA LUCAT1,LUCAT1可激活自噬从而促进A549/SC的增殖和迁移。 展开更多
关键词 肺癌 肺腺癌A549干细胞 肺癌相关转录本1 自噬
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