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MicroRNA-136靶向CD163抑制CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞极化的作用研究
被引量：
4
1
作者
韩晨阳
杨毅
+2 位作者
李文燕
王瑾
郭丽
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2019年第1期1-8,共8页
目的:研究微小RNA(miR-136)通过靶向CD163抑制CD68^+M0巨噬细胞向CD68^+CD163^+M2巨噬细胞极化的作用机制。方法:采用流式细胞术检测20例肝细胞肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞的比例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检...
目的:研究微小RNA(miR-136)通过靶向CD163抑制CD68^+M0巨噬细胞向CD68^+CD163^+M2巨噬细胞极化的作用机制。方法:采用流式细胞术检测20例肝细胞肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞的比例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肿瘤及癌旁组织中miR-136的水平。分离人脾脏中CD68^+M0巨噬细胞,将细胞分为对照组(Control),miRNA模拟物组(miRNA mimic)和miRNA抑制物组(miRNA inhibitor)。IL-4和IL-13 10ng/m L诱导巨噬细胞M2型极化。采用流式细胞术检测CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例,Western blot检测细胞中CD163、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达以及M2巨噬细胞标志物精氨酸酶(Arg1)的表达,机制研究中检测JAK/STAT信号中蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导子与转录激活子1 (STAT1)和STAT6的水平,PI3K/AKT信号中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)的表达。荧光素酶报告基因法确定miR-136与CD163的靶向关系。结果:肝癌组织中M2型巨噬细胞比例显著高于癌旁组织,而miR-136的表达显著低于癌旁组织,两者表达具有负相关。荧光素酶报告基因结果显示CD163是miR-136的靶基因。miRNA mimic组中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例显著低于miRNA inhibitor组,与Control组比较无统计学差异。机制检测中发现miRNA mimic中JAK1、STAT6、PI3K、AKT1低表达,说明miR-136可以间接抑制JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1的表达,抑制M2巨噬细胞极化。结论:miR-136可以靶向CD163抑制M2型巨噬细胞极化,其作用机制与JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1抑制有关,这是M2巨噬细胞在肝癌免疫中的调节机制之一。
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关键词
微小RNA-136
CD163
M2型巨噬细胞
荧光素酶报告基因
下载PDF
职称材料
低氧胁迫下鲢miR-17a-5p及其靶基因分析
2
作者
李晓晖
冯翠
+2 位作者
王巧欣
邹桂伟
梁宏伟
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期136-149,共14页
为了探究miR-17a-5p在鲢低氧胁迫下的功能,在前期鲢small RNA测序的基础上对鲢miR-17a-5p进行靶基因预测及功能富集分析,通过双荧光素酶活性验证其与HIF-1α的靶向关系,并检测低氧胁迫下miR-17a-5p和其靶基因在鲢肝脏、脑、心脏和鳃四...
为了探究miR-17a-5p在鲢低氧胁迫下的功能,在前期鲢small RNA测序的基础上对鲢miR-17a-5p进行靶基因预测及功能富集分析,通过双荧光素酶活性验证其与HIF-1α的靶向关系,并检测低氧胁迫下miR-17a-5p和其靶基因在鲢肝脏、脑、心脏和鳃四个组织中的动态表达特征。结果显示,鲢miR-17a-5p在不同物种间高度保守,预测出381个miR-17a-5p的潜在靶基因显著富集在硫代谢、mTOR信号通路以及萜类骨架的生物合成3个KEGG信号通路上。miR-17a-5p可与HIF-1αmRNA的3′UTR结合,并降低HIF-1αmRNA水平,低氧胁迫下miR-17a-5p的表达呈下降趋势,而HIF-1α表达则呈上升趋势;3个显著富集KEGG通路中的11个miR-17a-5p潜在靶基因在低氧胁迫过程中的不同组织中的表达,尤其是肝脏中的表达,除SGK1外,均呈显著上升趋势。研究表明,低氧胁迫下鲢各组织中miR-17a-5p的表达下调减弱了其对靶基因的抑制作用,进而导致HIF-1α、ddit4和Lrp5等响应低氧胁迫的基因表达上调。本研究为低氧胁迫下鲢miRNA的表达与调控机制提供新见解,也为培育耐低氧的鲢新品系(种)提供了参考。
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关键词
鲢
miR-17a-5p
低氧
双荧光素酶
靶基因
信号通路
下载PDF
职称材料
题名
MicroRNA-136靶向CD163抑制CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞极化的作用研究
被引量：
4
1
作者
韩晨阳
杨毅
李文燕
王瑾
郭丽
机构
嘉兴市第二医院
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2019年第1期1-8,共8页
基金
浙江省科技厅实验动物项目(2017C37174)
浙江省卫生厅面上项目(2018KY804)
嘉兴市科技计划项目(2018AY32007)
文摘
目的:研究微小RNA(miR-136)通过靶向CD163抑制CD68^+M0巨噬细胞向CD68^+CD163^+M2巨噬细胞极化的作用机制。方法:采用流式细胞术检测20例肝细胞肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞的比例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肿瘤及癌旁组织中miR-136的水平。分离人脾脏中CD68^+M0巨噬细胞,将细胞分为对照组(Control),miRNA模拟物组(miRNA mimic)和miRNA抑制物组(miRNA inhibitor)。IL-4和IL-13 10ng/m L诱导巨噬细胞M2型极化。采用流式细胞术检测CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例,Western blot检测细胞中CD163、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达以及M2巨噬细胞标志物精氨酸酶(Arg1)的表达,机制研究中检测JAK/STAT信号中蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导子与转录激活子1 (STAT1)和STAT6的水平,PI3K/AKT信号中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)的表达。荧光素酶报告基因法确定miR-136与CD163的靶向关系。结果:肝癌组织中M2型巨噬细胞比例显著高于癌旁组织,而miR-136的表达显著低于癌旁组织,两者表达具有负相关。荧光素酶报告基因结果显示CD163是miR-136的靶基因。miRNA mimic组中CD68^+CD163^+M2巨噬细胞比例显著低于miRNA inhibitor组,与Control组比较无统计学差异。机制检测中发现miRNA mimic中JAK1、STAT6、PI3K、AKT1低表达,说明miR-136可以间接抑制JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1的表达,抑制M2巨噬细胞极化。结论:miR-136可以靶向CD163抑制M2型巨噬细胞极化,其作用机制与JAK1-STAT6以及PI3K-AKT1抑制有关,这是M2巨噬细胞在肝癌免疫中的调节机制之一。
关键词
微小RNA-136
CD163
M2型巨噬细胞
荧光素酶报告基因
Keywords
MicroRNA-136
CD163
M2
macrophages
luciferase
reporter
genes
分类号
R965.2 [医药卫生—药理学]
R730 [医药卫生—药学]
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职称材料
题名
低氧胁迫下鲢miR-17a-5p及其靶基因分析
2
作者
李晓晖
冯翠
王巧欣
邹桂伟
梁宏伟
机构
中国水产科学研究院长江水产研究所
华中农业大学湖北洪山实验室
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期136-149,共14页
基金
国家现代农业产业技术体系专项(CARS-45)
湖北省洪山实验室开放课题(2021hskf014)
中国水产科学研究院基本科研业务费专项(YFI202211,2020TD33)。
文摘
为了探究miR-17a-5p在鲢低氧胁迫下的功能,在前期鲢small RNA测序的基础上对鲢miR-17a-5p进行靶基因预测及功能富集分析,通过双荧光素酶活性验证其与HIF-1α的靶向关系,并检测低氧胁迫下miR-17a-5p和其靶基因在鲢肝脏、脑、心脏和鳃四个组织中的动态表达特征。结果显示,鲢miR-17a-5p在不同物种间高度保守,预测出381个miR-17a-5p的潜在靶基因显著富集在硫代谢、mTOR信号通路以及萜类骨架的生物合成3个KEGG信号通路上。miR-17a-5p可与HIF-1αmRNA的3′UTR结合,并降低HIF-1αmRNA水平,低氧胁迫下miR-17a-5p的表达呈下降趋势,而HIF-1α表达则呈上升趋势;3个显著富集KEGG通路中的11个miR-17a-5p潜在靶基因在低氧胁迫过程中的不同组织中的表达,尤其是肝脏中的表达,除SGK1外,均呈显著上升趋势。研究表明,低氧胁迫下鲢各组织中miR-17a-5p的表达下调减弱了其对靶基因的抑制作用,进而导致HIF-1α、ddit4和Lrp5等响应低氧胁迫的基因表达上调。本研究为低氧胁迫下鲢miRNA的表达与调控机制提供新见解,也为培育耐低氧的鲢新品系(种)提供了参考。
关键词
鲢
miR-17a-5p
低氧
双荧光素酶
靶基因
信号通路
Keywords
Hypophthalmichthys
molitrix
miR-17a-5p
hypoxia
dual-
luciferase
reporter
assay
target
genes
pathway
分类号
S965.113 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MicroRNA-136靶向CD163抑制CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞极化的作用研究
韩晨阳
杨毅
李文燕
王瑾
郭丽
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2019
4
下载PDF
职称材料
2
低氧胁迫下鲢miR-17a-5p及其靶基因分析
李晓晖
冯翠
王巧欣
邹桂伟
梁宏伟
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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