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miR-515对凝集素-2的调控作用以及宫内膜间质细胞生物学行为的影响
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作者 葛维媛 晋晓丽 于力 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期58-62,共5页
目的探讨微小RNA-515(micro RNA-515,miR-515)对凝集素2(Intelectin 2,ITLN2)的调控作用以及对子宫内膜间质细胞(endometrial stroma cells,ESCs)生物学行为的影响。方法 分离ESCs细胞并进行传代培养,分为对照组(转染NC)、过表达组(转染... 目的探讨微小RNA-515(micro RNA-515,miR-515)对凝集素2(Intelectin 2,ITLN2)的调控作用以及对子宫内膜间质细胞(endometrial stroma cells,ESCs)生物学行为的影响。方法 分离ESCs细胞并进行传代培养,分为对照组(转染NC)、过表达组(转染miR-155 mimics)、抑制组(转染miR-515inhibitor)和逆转组(转染miR-515mimics+pcDNA-ITLN2),检测各组ESCs增殖、凋亡、侵袭和转移情况,以及RNA和蛋白的表达。结果 过表达组细胞增殖、迁移细胞个数和侵袭细胞个数显著升高、凋亡率显著下降(P <0.05);抑制组细胞增殖、迁移细胞个数和侵袭细胞个数值显著下降,凋亡率显著上升(P <0.05)。过表达组miR-515表达显著升高,ITLN2 mRNA和ITLN2蛋白表达显著下降(P <0.05);抑制组miR-515表达显著下降,ITLN2mRNA和ITLN2蛋白表达显著上升(P <0.05);逆转组介于过表达组和抑制组之间(P <0.05)。野生型ITLN2+miR-515的荧光强度显著下降(P <0.05)。结论 miR-515可以负调控ITLN2的表达,促进ESCs细胞的增殖、侵袭和转移,抑制ESCs细胞的凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-515 凝集素2 子宫内膜间质细胞 荧光素酶报告基因实验 卵巢型子宫内膜异位症
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LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究 被引量:1
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作者 李亮 李建忠 +2 位作者 张丹杰 马跃峰 李少民 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期38-47,共10页
目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT... 目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。 展开更多
关键词 肺癌 microRNA-370-3p 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1 荧光素酶报告基因实验 AKT
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