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长期传代培养对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响 被引量:10
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作者 张权 张亚奇 +3 位作者 饶巍 周端鹏 韩兵 武栋成 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第1期42-52,共11页
该课题研究长期体外传代培养对人脐带间充质干细胞重要生物学属性的影响。采用组织块法分离人脐带间充质干细胞,体外反复传代培养后比较第5、10、20代细胞的主要生物学属性:采用细胞计数法与流式细胞仪检测不同代次细胞增殖活性和表面... 该课题研究长期体外传代培养对人脐带间充质干细胞重要生物学属性的影响。采用组织块法分离人脐带间充质干细胞,体外反复传代培养后比较第5、10、20代细胞的主要生物学属性:采用细胞计数法与流式细胞仪检测不同代次细胞增殖活性和表面免疫标志物;染色体常规核型分析和微阵列分析检测其基因稳定性;成脂、成骨诱导分化检测其多向分化潜能;定量RT-PCR检测端粒酶反转录基因hTERT的表达; SA-β-gal活性确定细胞老化状态。第5、10、20代脐带间充质干细胞呈现相同的增殖曲线,各代次干细胞的增殖速率无显著性差异。不同培养代次的脐带间充质干细胞表面均呈现CD105、CD90、CD44、CD73高表达, CD19、CD34、CD45及HLA-DR不表达或低表达。基因稳定性分析证实三个代次干细胞均为正常二倍体核型,染色体基因组未发生基因拷贝数缺失、重复和大片段纯合子现象。成脂和成骨分化潜能以及hTERT表达均未见显著性差异。SA-β-gal活性检测显示,随培养代次的增加,脐带间充质干细胞开始呈现衰老征象,尤以第20代明显。体外反复传代长期培养对人脐带间充质干细胞的基本生物学属性、基因稳定性及其多向分化潜能均无显著性影响。过度长期培养有可能导致干细胞老化,活性降低。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 长期培养 基因稳定性 诱导分化
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长期培养后小鼠造血基质细胞差异表达基因的筛选 被引量:6
2
作者 张咏 崔春萍 +4 位作者 鱼咏涛 李玉珍 魏汉东 任爱辉 赵士富 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期177-182,共6页
为了进一步研究长期培养体系 (long termculture ,LTC)中造血基质细胞调控造血的分子基础及其作用机制 ,并发现新型造血调控因子 ,以LTC体系培养后小鼠骨髓造血基质细胞 (LTC St)为被扣除杂交组 ,以未经培养的小鼠骨髓细胞 (BMC)为扣除... 为了进一步研究长期培养体系 (long termculture ,LTC)中造血基质细胞调控造血的分子基础及其作用机制 ,并发现新型造血调控因子 ,以LTC体系培养后小鼠骨髓造血基质细胞 (LTC St)为被扣除杂交组 ,以未经培养的小鼠骨髓细胞 (BMC)为扣除杂交组 ,采用抑制性扣除杂交法 (SSH)进行杂交 ,将杂交产物克隆并测序 ,进行生物信息学分析。结果 :获得了 131个差异表达EST克隆 ,这些克隆代表了 2 6种已知或部分已知的不同基因和 7条无任何线索的全新基因 ,5条具有完整开放阅读框架 ,无功能线索的新基因中 3条有信号肽。结论 :通过本实验得到了LTC体系中特异性表达的一个消减文库 ,获得了几条可能与造血调控相关的新型基因或EST 。 展开更多
关键词 骨髓造血基质细胞 长期培养 差异基因表达 抑制性差异杂交 造血功能
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Dynamic Investigation on Chromosome Aberration of a Human Retinoblastoma Cell Line SO-Rb_(50) 被引量:2
3
作者 Baoxiang Qu~1 , Zilan Zhuo~1 Yuzhen Yi~2 , Guanguang Feng~2 , Jianliang Zheng~2,Qiwan Liang~1 , Yongping Li~2 1 Cancer center, Sun Yat-Sen University of medical Sciences Guangzhou 510060, China 2 Zhongshan Ophthalmic Center, Sun Yat-Sen University of Medical Sciences Guangzhou 510060, China 《眼科学报》 1993年第1期38-39,37,共3页
G-banding and karyotype analyses of cells in seventeen passages of SO-Rb_(50) during a long period of culture for about four years were performed. Three chromosome markers 13q14^-, 1p36^+ and 12p13^+ were found. Cells... G-banding and karyotype analyses of cells in seventeen passages of SO-Rb_(50) during a long period of culture for about four years were performed. Three chromosome markers 13q14^-, 1p36^+ and 12p13^+ were found. Cells possessed 13q14^- reduced to zero after the 200th passage while 1p^+ and 12p^+ cells increased to 100% after 30 and 200 passages respectively. Abnormal chromosomes, ring chromosomes, chromosome radiuses and double minutes were also observed. These chromosomal changes were more often seen b... 展开更多
关键词 dynamic cytogenetic analysis retinoblastoma cell line long term culture
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MIP-1β,TGF-β抗体对人基质细胞支持的脐血CD34^+细胞扩增的作用 被引量:2
4
作者 吴英理 张翼军 张林生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期352-355,共4页
目的 研究MIP 1 β ,TGF β抗体对人基质细胞支持的脐血CD34 + 细胞扩增的作用。方法 免疫磁珠法分选脐血中CD34 + 细胞 ,接种到预先照射的基质层上。分为 4组 :MIP 1 β( 30 0ng/ml)组 ,TGF β抗体 ( 2 0 μg/ml)组 ,MIP 1 β +TGF ... 目的 研究MIP 1 β ,TGF β抗体对人基质细胞支持的脐血CD34 + 细胞扩增的作用。方法 免疫磁珠法分选脐血中CD34 + 细胞 ,接种到预先照射的基质层上。分为 4组 :MIP 1 β( 30 0ng/ml)组 ,TGF β抗体 ( 2 0 μg/ml)组 ,MIP 1 β +TGF β抗体 ( 5 μg/ml)组和对照组 (不加细胞因子 )。第 5天半换液并加入MIP 1 β ,TGF β抗体 ( 2 0 μg/ml)和MIP 1 β +TGF β抗体 ( 5 μg/ml)。第 1 0天结束培养。第 5、1 0天收获细胞分别做细胞计数 ,集落培养法检测造血祖细胞数量 ,流式细胞术检测CD34 + 细胞数。结果 MIP 1 β组第 5、1 0天有核细胞数 ,造血祖细胞数 ,CD34 + 细胞数与对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。TGF β抗体组 ( 2 0 μg/ml)及MIP 1 β +TGF β抗体 ( 5 μg/ml)组第 5天有核细胞数与对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,第 1 0天有核细胞数与对照组相比差异显著 (P <0 .0 5 )。第 5、1 0天造血祖细胞数 ,CD34 + 细胞数与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 与对照组相比 ,MIP 1 β对人基质细胞支持的脐血CD34 + 细胞无明显的体外扩增作用。在TGF β抗体 ( 2 0 μg/ml)或MIP 1 β +TGF β抗体 ( 5 μg/ml)作用下 ,人基质细胞支持的脐血CD34 + 细胞可在 1 0d内扩增 1~ 3倍。 展开更多
关键词 脐血 体外扩增 巨噬细胞炎症蛋白-1β CD34^+细胞 转化生长因子-β抗体 细胞培养 MIP-1Β TGF-β
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长期体外扩增降低胎盘绒毛膜间充质干细胞的免疫调节功能 被引量:1
5
作者 杨舟鑫 及月茹 +3 位作者 韩之波 王有为 孟磊 韩忠朝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1552-1556,共5页
本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方... 本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方法检测其IFN-γ的分泌水平。实时定量PCR的方法检测CV-MSC细胞中COX-2,HGF和HLA-G的表达。结果显示:经过长期传代后,虽然CV-MSC的基本细胞形态和大部分表面标记如CD31,CD34,CD44,CD45,CD62L,CD73,CD90,CD105,CD117,CD151,CD235a,CD271和HLA-DR等都没有明显的变化,但其表面CD49d表达明显上调,长期传代后其免疫调节功能明显下降,免疫调节相关的分子COX-2和HGF的表达也略有下调,而HLA-G表达并未明显的变化。结论:长期体外扩增改变CV-MSC的CD49d的表达,并降低CV-MSC的免疫调节功能。 展开更多
关键词 长期培养 胎盘绒毛膜间充质干细胞 免疫调节
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大鼠真皮间充质干细胞的体外长期培养及胶原海绵对其生长的影响 被引量:11
6
作者 史春梦 程天民 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第4期660-663,共4页
从新生大鼠真皮组织中分离多能干细胞 ,体外长期传代培养 ,观察细胞形态和超微结构的变化 ,检测细胞增殖和分化能力的改变及胶原基质对细胞生长的影响 ,揭示体外长期传代培养对大鼠真皮间充质干细胞生物学性状的影响。结果表明 :大鼠真... 从新生大鼠真皮组织中分离多能干细胞 ,体外长期传代培养 ,观察细胞形态和超微结构的变化 ,检测细胞增殖和分化能力的改变及胶原基质对细胞生长的影响 ,揭示体外长期传代培养对大鼠真皮间充质干细胞生物学性状的影响。结果表明 :大鼠真皮组织中的间充质干细胞体外培养至 180 d,传至 2 5代的细胞仍具有干细胞的特征 :形态均一 ,细胞核结构原始 ,细胞器不发达 ;体外增殖迅速 ,保持了向成骨细胞和软骨细胞分化的潜能 ;胶原基质成分可促进细胞的生长 ,而胶原海绵支架更利于细胞的三维生长。结论是体外长期传代培养后大鼠真皮间充质干细胞仍保持良好的干细胞特性 。 展开更多
关键词 真皮 多能干细胞 体外长期培养 胶原 细胞增殖 细胞分化 超微结构
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体外长期培养的人脐血造血细胞表面标志的动态分析 被引量:9
7
作者 文珠 戴育成 +1 位作者 胡爱国 李洁 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期285-288,共4页
目的:探讨脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机。方法:用造血干细胞因子,重组人白细胞介素(rIL)3,rIL1β和rIL6长期培养人脐血造血细胞,并对其表面标志进行动态观察。结果:CD3+和CD20+的T、B淋... 目的:探讨脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机。方法:用造血干细胞因子,重组人白细胞介素(rIL)3,rIL1β和rIL6长期培养人脐血造血细胞,并对其表面标志进行动态观察。结果:CD3+和CD20+的T、B淋巴细胞培养第7天升高,14天后下降至低水平维持。CD34+细胞培养7天后增多,14天达高峰,继而下降在一定水平维持。CD33+细胞培养第7天显著增多,1421天达高峰,第28天明显下降。CD42b+细胞培养21天开始增多,28天达高峰,第35天仍处于较高水平。HLADR+细胞培养1421天时稍有增高。结论:含有上述细胞生长因子的培养体系能够扩增脐血造血细胞并维持其存活。培养1421天造血细胞数量最多、状态最佳。 展开更多
关键词 胎血 造血细胞 培养 表面标志 体外扩增
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人胎盘CD133^+细胞具有LTC-IC集落启动细胞特性 被引量:2
8
作者 刘虹麟 陈代雄 +5 位作者 方宁 章涛 刘祖林 刘金伟 万卫红 祁莹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期125-128,共4页
本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期... 本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期培养体系中,以检测测试细胞中长期培养启动细胞(LTC-IC)的发生率及其增殖分化能力。结果表明:人胎盘CD133+细胞群中含有LTC-IC,其发生率为1/645;LTC-IC具有增殖分化为粒-单集落形成单位(CFU-GM)和混合集落形成单位(CFU-Mix)的能力;在所有LTC-IC阳性孔中,产生CFU-GM的孔占总阳性孔的71.4%,产生CFU-GM和CFU-Mix的孔占总阳性孔的28.6%。结论:人胎盘组织CD133+细胞群中存在LTC-IC,并具有造血早期祖细胞集落形成能力。 展开更多
关键词 CD133^+细胞 长期培养启动细胞 造血干/祖细胞 磁珠激活细胞分选 胎盘
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脐血造血细胞体外维持和扩增的实验研究 被引量:1
9
作者 王红卫 缪竞诚 +4 位作者 杨吉成 盛伟华 李丽娥 彭明发 查纪坤 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期247-250,共4页
探讨胎儿、儿童、成人骨髓基质细胞对脐血造血细胞体外长期生存的维持能力 ,以及细胞因子组合在基质接触和无基质的培养体系中扩增脐血干、祖细胞的效应 .将连续二次Ficoll Hypaque分离的脐血单个核细胞(MNCs)接种至经辐照预处理的各种... 探讨胎儿、儿童、成人骨髓基质细胞对脐血造血细胞体外长期生存的维持能力 ,以及细胞因子组合在基质接触和无基质的培养体系中扩增脐血干、祖细胞的效应 .将连续二次Ficoll Hypaque分离的脐血单个核细胞(MNCs)接种至经辐照预处理的各种骨髓基质细胞上 ,持续培养 6周 ,定期检测祖细胞 (CFC)和长期培养起始细胞 (LTC IC) ;使用干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 (IL) 3、IL 6组合 ,在基质接触和无基质体系中 ,扩增脐血干、祖细胞 .结果表明 :①成人骨髓基质细胞能更有效地维持脐血 2周、4周CFCs的数量 ,在 10 5初始接种MNCs中 ,产量分别为 6 4 5± 11 3和 43 6± 7 6 ;而胎儿骨髓基质细胞对脐血LTC ICs表现出更强的支持作用 ,其LTC ICs的产量为 18 5± 5 2 .②成人基质细胞接触的扩增体系 ,CFCs扩增最为显著 ,其CFCs的产量为扩增前的 8 4倍 ;胎儿基质接触的扩增体系能够更有效地扩增LTC ICs ,其产量为扩增前的 3 9倍 .基于上述结果 ,认为不同发育阶段的骨髓基质细胞对脐血CFCs和LTC ICs的生存 ,表现出不同的维持效应 ;基质接触的扩增体系更适合于脐血原始造血细胞的扩增 . 展开更多
关键词 造血细胞 骨髓基质细胞 体外扩增 脐血 体外维持
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人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性 被引量:1
10
作者 杨吉成 盛伟华 +3 位作者 李丽娥 董宁征 杨宗华 王晓东 《中国病毒学》 CSCD 2000年第4期336-341,共6页
为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ... 为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒 ,脊髓灰质炎病毒、I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感 ,能产生明显的CPE ,其效价 (TCID50 )可达10 - 3~ 10 - 4,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对病毒敏感性至少比儿童高 2倍 ,比成人高 4倍 ,即胎儿>儿童 >成人 ,但对B3型柯萨奇病毒均不敏感。我们的研究结果不仅可为人骨髓基质细胞体外长期培养提供了确实可行的简便方法 ,而且为该细胞对病毒的敏感性提供了实验依据 ,并为该细胞的利用开辟了新的应用前景。 展开更多
关键词 人骨髓基质肌样细胞 体外长期培养 病毒 敏感性
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在骨髓长期培养中基质细胞间的相互关系 被引量:1
11
作者 齐淑玲 李卫萍 +5 位作者 刘杰文 马月霞 刘津华 傅津 王文杰 宋增璇 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期159-162,T010,11,共6页
本实验观察,在骨髓长期培养中各种基质细胞间的相互关系和特殊的连接结构。免疫电镜观察表明,上皮样基质细胞具有分泌纤维结合蛋白(Fn)的功能,后者在细胞与基质及细胞间的连接中起介导作用。
关键词 长期 培养 骨髓细胞 细胞连接
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B_3HM细胞内活性物质对小鼠造血的作用
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作者 姜学英 张丽艳 +2 位作者 李侠 蔡辉国 宋增璇 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-19,共3页
目的 观察B3HM细胞条件培养液 (B3HM CM )和细胞匀浆组分对小鼠造血细胞的作用。寻找其中可能存在的诱导造血细胞发生恶性转化的活性物质。方法 将B3HM CM加到小鼠骨髓长期培养体系中 ,定期计数细胞生长情况 ;用B3HM CM或经差速离心... 目的 观察B3HM细胞条件培养液 (B3HM CM )和细胞匀浆组分对小鼠造血细胞的作用。寻找其中可能存在的诱导造血细胞发生恶性转化的活性物质。方法 将B3HM CM加到小鼠骨髓长期培养体系中 ,定期计数细胞生长情况 ;用B3HM CM或经差速离心法分离的B3HM细胞匀浆组分注射经照射处理的小鼠 ,观察小鼠存活情况和造血细胞的变化。结果 B3HM CM在骨髓培养体系中促巨核细胞增殖 ,在小鼠体内促造血细胞增多。B3HM细胞匀浆第 3组分可诱发小鼠白血病。 展开更多
关键词 B3HM细胞 条件培养液 骨髓细胞 造血细胞 动物实验 细胞活性物质 细胞增殖刺激因子
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深低温保存对脐血长期培养起始细胞含量的影响
13
作者 郑滨 仇志根 +1 位作者 范华骅 袁纪军 《临床血液学杂志》 CAS 2001年第3期99-100,共2页
目的 :探讨深低温保存对脐血长期培养起始细胞 (L ong term culture initial cell,L TC- IC)含量的影响。方法 :利用 6 %羟乙基淀粉法分离脐血单个核细胞 ,采用基质细胞直接接触培养系统和 CFU- GM检测方法检测新鲜脐血和深低温保存的... 目的 :探讨深低温保存对脐血长期培养起始细胞 (L ong term culture initial cell,L TC- IC)含量的影响。方法 :利用 6 %羟乙基淀粉法分离脐血单个核细胞 ,采用基质细胞直接接触培养系统和 CFU- GM检测方法检测新鲜脐血和深低温保存的脐血中长期培养起始细胞和造血祖细胞。结果 :脐血深低温保存复苏后 ,CFU- GM由97± 5个 / 1× 10 5 MNC减少到 84± 13个 / 1× 10 5 MNC,回收率为 (83± 12 ) % ;L TC- IC87± 2 0个 / 1× 10 5 MNC减少到 6 8± 33个 / 1× 10 5 MNC,回收率为 (76± 33) %。结论 :深低温保存后 ,脐血中 L TC- IC的含量减少 ,但脐血仍保存大部分造血功能。 展开更多
关键词 低温 造血干细胞 脐血
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长期耕作施肥对白浆土磷组分及其有效性的影响 被引量:49
14
作者 向春阳 马艳梅 田秀平 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期48-52,共5页
采用顾益初等无机磷和Bowman Cole有机磷分级体系 ,对长期施肥和耕作的白浆土中无机和有机磷组分及其与土壤有效磷的关系进行了研究。结果表明 ,白浆土耕层全磷含量为 4 6 1.6 0mg kg ,其中无机磷占土壤全磷 5 8.0 8% ,其余为有机磷。... 采用顾益初等无机磷和Bowman Cole有机磷分级体系 ,对长期施肥和耕作的白浆土中无机和有机磷组分及其与土壤有效磷的关系进行了研究。结果表明 ,白浆土耕层全磷含量为 4 6 1.6 0mg kg ,其中无机磷占土壤全磷 5 8.0 8% ,其余为有机磷。无机磷和有机磷各组分含量高低顺序分别为O P >Fe P >Al P >Ca1 0 P >Ca2 P >Ca8 P和MLOP >MROP >HROP >LOP ;长期施用有机肥可以增加土壤Fe P、Al P、Ca2 P及有机磷各组分的含量 ;施化肥对土壤有机磷影响不大 ,但对提高土壤O P、Fe P和Al P的含量有一定效果 ;长期秸秆还田使Fe P、Al P、MROP和HROP增加 ,而长期不施肥除HROP变化不大外 ,其余各组分无机和有机磷都处于消耗状态 ;免耕比普翻和深松更利于土壤Ca2 P、Ca1 0 P、O P、MROP和HROP的积累 ;相关和通径分析表明 ,土壤有效磷与Fe P、Al P、LOP和MLOP之间呈显著正相关 ;Ca2 P、Fe P、Al P、LOP、MROP和MLOP对土壤有效磷均有一定的正效应。 展开更多
关键词 白浆土 无机磷组分 有机磷组分 长期耕作和施肥
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玉米胚性愈伤组织的长期继代及其染色体分析 被引量:31
15
作者 向凤宁 张举仁 +1 位作者 陈惠民 郑晓健 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期157-163,共7页
对5种基因型幼胚诱导的愈伤组织继代培养表明,玉米胚性愈伤组织的长期继代受基因型,培养基成分,激素,培养条件的影响。适时继代,逐代筛选对胚性保持起重要作用。适当降低培养温度(12±2℃)有利于愈伤组织的保存和胚性保... 对5种基因型幼胚诱导的愈伤组织继代培养表明,玉米胚性愈伤组织的长期继代受基因型,培养基成分,激素,培养条件的影响。适时继代,逐代筛选对胚性保持起重要作用。适当降低培养温度(12±2℃)有利于愈伤组织的保存和胚性保持,可以减少愈伤组织长期继代所需的物质和工作量。长期继代培养的胚性愈伤组织,胚状体发生能力和植株再生率无显著变化,但正常苗的再生频率显著下降。观察愈伤组织细胞染色体发现:(1)基因型对不同倍性细胞的比例有明显影响。(2)随着继代时间的延长,二倍体细胞下降,四倍体和非二倍体细胞增多。(3)愈伤组织中出现多种染色体结构变异,这些结构变异有可能导致非整倍体细胞的形成。 展开更多
关键词 玉米 愈伤组织 继代培养 染色体
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BDNF、NGF对体外长期培养的胚基底前脑胆碱能神经元的影响 被引量:12
16
作者 金国华 田美玲 +3 位作者 秦建兵 黄镇 徐慧君 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期337-341,T058,共6页
本文探讨了脑源性神经营养因子、神经生长因子对体外长期培养的胚基底前脑胆碱能神经元是否具有延缓退变的作用。实验分为脑源性神经营养因子组、神经生长因子组、脑源性神经营养因子加神经生长因子组及单纯对照组。取孕 17d SD大鼠胚... 本文探讨了脑源性神经营养因子、神经生长因子对体外长期培养的胚基底前脑胆碱能神经元是否具有延缓退变的作用。实验分为脑源性神经营养因子组、神经生长因子组、脑源性神经营养因子加神经生长因子组及单纯对照组。取孕 17d SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于 2 4孔培养板中 ,按分组加入含相应神经营养因子和不含神经营养因子的 DMEM培养液 ,分别于体外培养 12、18、2 4、3 0 d后进行乙酰胆碱酯酶组织化学反应。显微镜下计数各孔中乙酰胆碱酯酶阳性神经元数 ,每孔随机测量和计数 2 5个乙酰胆碱酯酶阳性神经元的平均胞体直径、发出的突起数和最长突起长度。数据用方差分析和 SNK检验进行统计学处理。结果显示 ,在培养的 4个时期 ,含脑源性神经营养因子组、神经生长因子组和脑源性神经营养因子加神经生长因子组的各项数据均明显地优于单纯对照组 ;脑源性神经营养因子加神经生长因子组的各项数据 ,特别是最长突起长度优于单独使用脑源性营养因子或神经生长因子组。提示 :脑源性神经营养因子和神经生长因子不仅对体外培养的胚胆碱能神经元发育生长具有促进作用 ,而且还可延缓体外长期培养的大鼠胚基底前脑胆碱能神经元的退变 ; 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 神经生长因子 胆碱能神经元 神经元退变 长期细胞培养 胚基底前脑 大鼠 AD
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Manipulation of spermatogonial stem cells in livestock species 被引量:7
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作者 Filipp Savvulidi Martin Ptacek +1 位作者 Karina Savvulidi Vargova Ludek Stadnik 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期833-850,共18页
We are entering an exciting epoch in livestock biotechnology during which the fundamental approaches(such as transgenesis, spermatozoa cryopreservation and artificial insemination) will be enhanced based on the modern... We are entering an exciting epoch in livestock biotechnology during which the fundamental approaches(such as transgenesis, spermatozoa cryopreservation and artificial insemination) will be enhanced based on the modern understanding of the biology of spermatogonial stem cells(SSCs) combined with the outstanding recent advances in genomic editing technologies and in vitro cell culture systems. The general aim of this review is to outline comprehensively the promising applications of SSC manipulation that could in the nearest future find practical application in livestock breeding. Here, we will focus on 1) the basics of mammalian SSC biology;2) the approaches for SSC isolation and purification;3) the available in vitro systems for the stable expansion of isolated SSCs;4) a discussion of how the manipulation of SSCs can accelerate livestock transgenesis;5) a thorough overview of the techniques of SSC transplantation in livestock species(including the preparation of recipients for SSC transplantation,the ultrasonographic-guided SSC transplantation technique in large farm animals, and the perspectives to improve further the SSC transplantation efficiency), and finally, 6) why SSC transplantation is valuable to extend the techniques of spermatozoa cryopreservation and/or artificial insemination. For situations where no reliable data have yet been obtained for a particular livestock species, we will rely on the data obtained from studies conducted in rodents because the knowledge gained from rodent research is translatable to livestock species to a great extent. On the other hand, we will draw special attention to situations where such translation is not possible. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Genome editing LIVESTOCK TRANSGENESIS long-term culture systems Male GERMLINE STEM cells Recipient preparation Sertoli CELLS Spermatogonial STEM CELLS Ultrasonographic-guided CANNULATION
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间充质干细胞改善长期培养人胰岛功能的体外研究
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作者 郑琳怡 冯淑怡 +2 位作者 宋益康 林悦 傅红兴 《实用器官移植电子杂志》 2024年第4期325-328,共4页
目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对长期培养的人胰岛功能的改善作用。方法将hUC-MSCs根据不同浓度分成3组:104组、105组、106组,每组平行三孔接种于12孔板中,经培养24 h贴壁后,各孔... 目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对长期培养的人胰岛功能的改善作用。方法将hUC-MSCs根据不同浓度分成3组:104组、105组、106组,每组平行三孔接种于12孔板中,经培养24 h贴壁后,各孔分别加入150 IEQ培养了17 d的人胰岛,以无hUC-MSCs的胰岛培养为对照组。经37℃,5%CO_(2)培养24 h后,比较不同组胰岛外形、活性和静态葡萄糖刺激胰岛素释放指数(insulin release index,GSI)。结果培养后,各组胰岛形态紧实,106组培养液有较多细胞成膜片漂浮,105组胰岛活性显著高于对照组胰岛(P<0.01),106组胰岛活性相对较差(P<0.01)。105组胰岛的葡萄糖刺激GSI与对照组具有显著性差异(3.63±0.16比2.52±0.10,P<0.01),其余两组人胰岛GSI与对照组无显著性差异。结论hUC-MSCs可以改善长期培养后人胰岛细胞团的体外活性和功能,但与MSCs细胞浓度有关。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 人胰岛 长期培养 功能
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脯氨酸对小麦愈伤组织生长的促进效应 被引量:6
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作者 陈克贵 朱庆麟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期134-137,共4页
添加脯氨酸培养,选得长期继代培养的小麦愈伤组织,与对照比较生长较快,且脯氨酸明显促进其生长。初步分析测定表明,加入脯氨酸,愈伤组织硝酸还原酶和蔗糖酶活性都有所下降,但培养基中有大量氨态氮和葡萄糖,可供其吸收利用,从而愈伤组织... 添加脯氨酸培养,选得长期继代培养的小麦愈伤组织,与对照比较生长较快,且脯氨酸明显促进其生长。初步分析测定表明,加入脯氨酸,愈伤组织硝酸还原酶和蔗糖酶活性都有所下降,但培养基中有大量氨态氮和葡萄糖,可供其吸收利用,从而愈伤组织过氧化氢酶活性大大提高,说明脯氨酸增强了小麦愈伤组织代谢活力,这与TTC法测定其活力结果一致。 展开更多
关键词 小麦 脯氨酸 愈伤组织
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长期培养的人脐带间充质干细胞PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3的表达 被引量:6
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作者 毛文哲 许超 +4 位作者 李扬秋 陈少华 柳菁 刘俊 廖继东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1051-1056,共6页
目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。... 目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养hUC-MSCs;收集第3、8、18、28和33代细胞及培养上清,用qRT-PCR、ELISA及Western bloting检测PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3 mRNA和蛋白水平。结果:(1)hUC-MSCs PCNA、IL-6、IL-11 mRNA及IL-6、IL-11蛋白的表达随培养传代次数增加而减少,第33代较第3代分别降低了33%、56%、37%和50.3%、58.9%,差异显著(均P<0.01)。(2)各代间galectin-3 mRNA表达无显著差异(P>0.05),且各代间蛋白表达亦无明显差异。结论:(1)体外长期传代培养过程中hUC-MSCs增殖能力和支持造血能力可能逐渐减弱甚至丧失。(2)体外长期传代培养可能对hUC-MSCs的免疫调节功能无显著影响,这有待进一步的实验验证。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 长期培养 增殖细胞核抗原 白细胞介素6 白细胞介素11 半乳糖凝集素3
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