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TLR7激动剂经lnc-DC/STAT3而非lnc-THRIL途径刺激肾癌患者PBMCs增强抗肿瘤作用 被引量：1
1
作者 吴波 陈林 +6 位作者 何平林 叶鑫 吴建军 陈果 刁建军 张汉超 陈亮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期56-60,共5页
目的:探讨Toll样受体7激动剂gardiquimod刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)抗肿瘤的作用机制。方法:将肾癌患者外周血单个核细胞和肾癌细胞共同培养,使用TLR7激动剂刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs),将TLR7激动剂激活的PBMCs转染... 目的:探讨Toll样受体7激动剂gardiquimod刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)抗肿瘤的作用机制。方法:将肾癌患者外周血单个核细胞和肾癌细胞共同培养,使用TLR7激动剂刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs),将TLR7激动剂激活的PBMCs转染shRNA(lnc-DC/STAT3)和shRNA(lnc-THRIL)并分为4组:对照组、TLR7激动剂组、shRNA lncDC组和shRNA lnc-THRIL组。应用Real-time PCR检测lnc-DC和lnc-THRIL表达量;Western blot检测STAT3、p-STAT3、P21、P27表达量;Cr释放实验检测PBMCs抗肿瘤细胞活性变化;流式细胞术检测肾癌细胞周期变化。结果:TLR7激动剂刺激PBMCs组中lnc-DC的mRNA水平表达量明显增高,shRNA lnc-DC组lnc-DC表达量较对照组明显降低,shRNA lnc-THRIL组lnc-THRIL表达量较对照组明显降低(P<0.05);抗肿瘤相关指标分子表达增加;与对照组相比,TLR7组中肾癌细胞的P27蛋白表达量明显增加,而P21蛋白表达量无明显变化,TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组P27蛋白表达量与TLR7组明显降低(P<0.05),与对照组相比差异无统计学意义;TLR7激动剂+shRNA lnc-THRIL组较TLR7激动剂组的P21和P27表达量均有降低;TLR7激动剂3个实验组中STAT3蛋白表达量无明显差异,pSTAT3在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PBMCs对肾癌细胞的杀伤率在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组较另外两实验组明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TLR7激动剂经lnc-DC/STAT3而非lnc-THRIL途径刺激肾癌患者PBMCs增强抗肿瘤作用,pSTAT3表达量与抗肿瘤增殖密切相关,并可能影响P27周期调节蛋白表达导致肾癌细胞周期停滞。 展开更多
关键词 肾癌 TOLL样受体7 lnc-dc STAT3 lnc-THRIL 外周血单个核细胞
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长链非编码RNA lnc-DC的生物信息学分析与验证 被引量：1
2
作者 胡雪停 吴晓凤 徐祥 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第10期1328-1334,共7页
目的通过生物信息学分析获取人类长链非编码RNA lnc-DC的相关信息,初步验证并讨论其意义。方法利用NCBI数据库获取lnc-DC的基本信息及其在人类正常组织中的表达数据;利用UCSC数据库获取lnc-DC基因上游5端启动子序列并通过JASPAR预测结... 目的通过生物信息学分析获取人类长链非编码RNA lnc-DC的相关信息,初步验证并讨论其意义。方法利用NCBI数据库获取lnc-DC的基本信息及其在人类正常组织中的表达数据;利用UCSC数据库获取lnc-DC基因上游5端启动子序列并通过JASPAR预测结合的转录因子;获取lnc-DC的二级结构并通过catRAPID预测其结合蛋白,利用富集工具Enrichr对lnc-DC结合蛋白进行富集分析;通过原位杂交(FISH)检验lnc-DC在皮肤组织中的表达;运用siRNA干扰和实时定量PCR检测验证转录因子GATA3对lnc-DC的调控作用。结果NCBI数据库显示长链非编码RNA lnc-DC在食管和皮肤中高表达,原位杂交确证lnc-DC在皮肤组织中高表达;软件预测显示GATA3等转录因子可结合到lnc-DC基因启动子区域,运用siRNA干扰表明GATA3确实可调控lnc-DC的表达;软件预测显示lnc-DC可与U2AF2、HNRDL、TIAR、PTBP1、TIA1等蛋白结合,其结合蛋白主要富集于RNA剪接通路,调控RNA加工成熟的过程。结论生物信息学分析能预测lnc-DC的转录调控因子及发挥作用的结合蛋白,表明lnc-DC可能在皮肤正常功能维持中发挥关键作用并受转录因子GATA3的调控。 展开更多
关键词 生物信息学 长链非编码RNA lnc-dc GATA3 皮肤
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