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活体心肌细胞NAD(P)H荧光的光谱分辨的荧光寿命光谱研究
1
作者 程颖 ANEBA Swida +7 位作者 Swida CHORVAT Jr.Dusan Jr.Dusan BASSIEN-Capasa Valerie Valerie 臧伟进 CHORVATOVA Alzbeta Alzbeta 《透析与人工器官》 2012年第4期20-37,共18页
目的 研究实验动物心肌线粒体氧化还原状态,监测缺血时线粒体功能改变的早期信号.方法 线粒体呼吸链主要电子供应者烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸,或NAD(P)H荧光为无创荧光标记,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)检测紫外光(UV)激发... 目的 研究实验动物心肌线粒体氧化还原状态,监测缺血时线粒体功能改变的早期信号.方法 线粒体呼吸链主要电子供应者烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸,或NAD(P)H荧光为无创荧光标记,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)检测紫外光(UV)激发的心肌自发荧光(AF)光谱和荧光寿命.结果 需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7 ns,1.2～1.9 ns和8.0～13.0 ns描述心肌AF.相关衰减光谱(DAS)显示4个NAD(P)H荧光固有光谱,分别为峰值470 nm的短荧光寿命池,及450 nm,470 nm和490 nm的中间和长荧光寿命池.酮体增加线粒体NADH产量,提高AF强度,但不改变荧光寿命.线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF强度和缩短平均荧光寿命.氧化磷酸化解偶联剂Dinitrophenol (DNP),显著降低AF强度,在520 nm处增宽荧光光谱并显著延长平均荧光寿命.这些结果和NADH荧光动力学离体实验(in vitro)及模拟缺血状态实验有可比性.结论 研究可解释NADH构象改变,以及从NADH到异戎酸脱氢酶(LipDH)结合的黄素蛋白间能量转移的荧光动力学变化.光谱分辨的荧光寿命显微技术提供了在细胞水平上研究心肌能量代谢或线粒体功能障碍的新工具. 展开更多
关键词 NAD(P)H 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
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应用心肌自发荧光评估存活心肌线粒体氧化代谢状态
2
作者 程颖 任明明 +3 位作者 刘云奇 Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 《华西医学》 CAS 2009年第7期1767-1771,共5页
目的：应用心肌自发荧光（AF）研究心肌线粒体氧化代谢状态，监测线粒体功能改变的早期信号。方法：烟酰胺腺嘌呤（磷酸）二核苷酸ENAD（P）HI作为荧光探针，用光谱分辨的时间相关单光子计数（TCSPC）记录375nm紫外激光激发的心肌AF光... 目的：应用心肌自发荧光（AF）研究心肌线粒体氧化代谢状态，监测线粒体功能改变的早期信号。方法：烟酰胺腺嘌呤（磷酸）二核苷酸ENAD（P）HI作为荧光探针，用光谱分辨的时间相关单光子计数（TCSPC）记录375nm紫外激光激发的心肌AF光谱和荧光寿命，测试影响线粒体呼吸时AF动态衰减。结果：在420～560nm光谱区域，至少需用3个荧光寿命池0．4～0．7ns，1．2～1．9ns和8．0～13．0ns描述细胞AF。线粒体呼吸阻断剂鱼藤酮可显著增加AF强度，缩短平均荧光寿命。氧化磷酸化解偶联剂二硝基酚可显著降低AF强度，在520nm处增宽荧光光谱，延长平均荧光寿命。这些结果和NADH荧光动力学离体实验（invitro）有可比性。结论：光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD（P）H荧光有很好的重复性，在细胞水平上增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍的知识，为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
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光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学对心肌氧化代谢的评估
3
作者 程颖 任明明 +4 位作者 牛延艳 乔建华 Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1191-1200,共10页
应用光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学研究心肌细胞线粒体氧化代谢状态,监测病理情况下线粒体功能改变的早期信号。研究将NAD(P)H作为无创荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数记录375nm紫外光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和寿命,测... 应用光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学研究心肌细胞线粒体氧化代谢状态,监测病理情况下线粒体功能改变的早期信号。研究将NAD(P)H作为无创荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数记录375nm紫外光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和寿命,测试影响NADH生产或线粒体呼吸时AF动态衰减。结果显示:在420～560nm光谱区域,需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7ns、1.2～1.9ns和8.0～13.0ns描述细胞AF。酮体增加NADH水平,提高AF强度,但不改变荧光寿命。线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF强度,缩短平均荧光寿命。氧化磷酸化解偶联剂(DNP),显著降低AF强度,在520nm处增宽荧光光谱,延长平均荧光寿命。这些结果和NADH荧光动力学离体实验(invitro)有可比性。研究证实光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD(P)H荧光有很好的重复性,增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍在细胞水平上的知识,为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
原文传递
运动心脏重塑过程中细胞凋亡现象的活细胞观察 被引量：21
4
作者 袁箭峰 常芸 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期348-351,共4页
为了探讨运动心脏重塑过程中细胞凋亡现象，采用流式细胞技术对不同强度耐力训练及力竭运动后大鼠心肌细胞凋亡情况进行了活细胞观察。结果显示：１运动训练可使大鼠心肌细胞凋亡增加，且与运动强度有关，提示运动性心肌肥大的重塑发生... 为了探讨运动心脏重塑过程中细胞凋亡现象，采用流式细胞技术对不同强度耐力训练及力竭运动后大鼠心肌细胞凋亡情况进行了活细胞观察。结果显示：１运动训练可使大鼠心肌细胞凋亡增加，且与运动强度有关，提示运动性心肌肥大的重塑发生过程有心肌细胞凋亡参与；２反复大强度训练和力竭运动后大鼠心肌细胞凋亡现象的显著增加，可能是运动性心肌微损伤的病理机制之一；３系统训练对心肌细胞凋亡的发生未见明显的保护作用。 展开更多
关键词 运动心脏 大强度训练 心肌活细胞 细胞凋亡 流式细胞术
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运动性肥大心肌活细胞胞浆游离Ca^(2+)动态变化的激光共聚焦研究以及局部IGF-Ⅰ和AngⅡ的变化 被引量：4
5
作者 田振军 张小玲 张志琪 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期644-648,共5页
目的 :研究运动与心脏重塑过程中心肌胞浆游离Ca2 +([Ca2 +]c)动态变化的生物学机制。方法 :采用激光扫描共聚焦显微技术 (LSCM)对STDInCa2 +荧光试剂负载的运动肥大心肌活细胞 [Ca2 +]c 动态变化进行研究 ,采用放射免疫测定运动小鼠心... 目的 :研究运动与心脏重塑过程中心肌胞浆游离Ca2 +([Ca2 +]c)动态变化的生物学机制。方法 :采用激光扫描共聚焦显微技术 (LSCM)对STDInCa2 +荧光试剂负载的运动肥大心肌活细胞 [Ca2 +]c 动态变化进行研究 ,采用放射免疫测定运动小鼠心肌局部IGF -Ⅰ和AngⅡ含量。结果 :运动肥大心肌 [Ca2 +]c 变化表现为基值稳态和峰值显著升高 ,达峰时间延长 (P <0 0 0 1)。心肌局部IGF -Ⅰ和AngⅡ显著升高 (P <0 0 0 1)。结论 :运动性心肌肥大与 [Ca2 +]c 变化、机械信号、IGF -Ⅰ和AngⅡ关系密切 ,机械信号、IGF -Ⅰ和AngⅡ可能是引起 [Ca2 +]c 显著升高 ,增强心肌收缩能力的胞外刺激因素。 展开更多
关键词 运动性心肌肥大 心肌活细胞 胞浆游离钙 激光扫描共聚焦显微技术 IGF-Ⅰ AngⅡ
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