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食品中单增李氏菌实时荧光PCR检测鉴定方法的建立 被引量：40
1
作者 金大智 谢明杰 曹际娟 《辽宁师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第1期73-76,共4页
运用实时荧光PCR(Real timePCR)技术建立了对食品中单增李氏菌进行检测的快速方法,设计的引物和探针的序列特异性强,省去凝胶电泳的繁琐,降低了污染的可能性.在对26种病原菌进行检测过程中,运用实时荧光PCR法和经典培养法进行比较,结果... 运用实时荧光PCR(Real timePCR)技术建立了对食品中单增李氏菌进行检测的快速方法,设计的引物和探针的序列特异性强,省去凝胶电泳的繁琐,降低了污染的可能性.在对26种病原菌进行检测过程中,运用实时荧光PCR法和经典培养法进行比较,结果表明用实时荧光PCR法检测单核细胞增多李斯特氏菌,更快速、敏感、特异性更高. 展开更多
关键词 食品鉴定 单核细胞增生性李斯特氏菌 实时荧光PCR检测方法 经典培养法 病原菌 食物中毒
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食品中单增李斯特菌快速、敏感、特异PCR检测方法的建立 被引量：23
2
作者 王海艳 刘中学 +2 位作者 刘虹 赵林立 甄宏太 《检验检疫科学》 2006年第1期3-6,共4页
〔目的〕建立食品中单增李斯特菌的PCR检测方法。〔方法〕根据单增李斯特菌的hlyA基因和李斯特菌属的16sRNA基因各设计了一对引物,两对引物组合建立PCR方法,用人工污染食品对该方法进行验证,于37℃经24h预增菌和24h增菌后直接进行PCR分... 〔目的〕建立食品中单增李斯特菌的PCR检测方法。〔方法〕根据单增李斯特菌的hlyA基因和李斯特菌属的16sRNA基因各设计了一对引物,两对引物组合建立PCR方法,用人工污染食品对该方法进行验证,于37℃经24h预增菌和24h增菌后直接进行PCR分析。〔结果〕在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中单增李斯特菌的检出限为1cfu/25g(mL),在原奶和生肉中的检出限分别为1￣10cfu/25mL和25cfu/25g。〔结论〕该方法快速、敏感、特异,适合不同类型食品的常规检测分析,可用于食品工业中单增李斯特菌的检测。 展开更多
关键词 食品 单增李斯特菌 PCR 检测
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胶体金试纸快速检测食品中单增李斯特菌 被引量：21
3
作者 崔焕忠 张辉 王兴龙 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期239-242,共4页
制备单增李斯特菌(Lm)特异性单克隆抗体,研制胶体金试纸,快速检测食品中Lm。所研制的胶体金试纸具有较高的特异性,不与绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌同属菌及大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌异属菌发生交叉反应;... 制备单增李斯特菌(Lm)特异性单克隆抗体,研制胶体金试纸,快速检测食品中Lm。所研制的胶体金试纸具有较高的特异性,不与绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌同属菌及大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌异属菌发生交叉反应;对Lm纯培养物检测的灵敏度为3.9×105CFU/mL;4℃保质期在120d以上;对自来水、牛奶、生肉制品、蔬菜、冷冻虾仁和面包模拟样品检测的灵敏度为3.9×105CFU/mL。该试纸具有快速、敏感、特异的优点,可用于食品中Lm的快速检测。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 单克隆抗体 胶体金试纸 检测
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单核细胞增生性李斯特菌PCR快速检测方法建立及应用 被引量：19
4
作者 巢国祥 徐勤 +2 位作者 周晓辉 唐丽华 焦新安 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第9期797-800,共4页
目的　通过扩增hly基因PCR法建立快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌 (Lm )方法。 方法 :用PCR法扩增hly基因来检测标准菌株及临床分离的Lm的纯培养物和模拟污染的生猪肉、水和牛奶 ,并应用于实际食品检验工作中进行验证。结果　 34株Lm... 目的　通过扩增hly基因PCR法建立快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌 (Lm )方法。 方法 :用PCR法扩增hly基因来检测标准菌株及临床分离的Lm的纯培养物和模拟污染的生猪肉、水和牛奶 ,并应用于实际食品检验工作中进行验证。结果　 34株Lm的PCR结果呈阳性 ,而其它李斯特菌 ,包括英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、西尔李斯特菌、威儿李斯特菌和格氏李斯特菌以及非李斯特菌均未出现特异性的片段。表明所扩增的hly基因 3’末段 82 7bp的DNA片段对Lm具有较高的特异性。PCR法对Lm纯培养物的检测限达 10 5CFU/ml,对模拟污染生猪肉、水和牛奶的 30℃ 16h改良LEB增菌培养液用PCR法检测 ,结果检测限达 10CFU/ 2 5 g(ml)。进一步研究表明该PCR扩增体系能检测出 6 .5pg的LmDNA ,整个检测过程只需 2 4h。采用该法对扬州市区 16 9份食品样品检测 ,8份样品Lm呈阳性且结果与传统的生化鉴定方法完全一致。结论　扩增hly基因的PCR法对Lm的鉴定具有特异性强、灵敏度高、速度快和易操作等优点 。 展开更多
关键词 单核细胞增生性李斯特菌(Lm) 快速检测 PCR
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即食食品中单核细胞增生李斯特菌的血清学分型和毒力基因分析 被引量：20
5
作者 马彦宁 赵悦 +1 位作者 郭云昌 卓勤 《中国食品卫生杂志》 2017年第1期14-18,共5页
目的掌握即食食品中单核细胞增生李斯特菌(简称单增李斯特菌)的血清型、谱系和感染相关基因的分布。方法以全国食源性致病菌监测网中2007—2009年自即食食品分离的226株单增李斯特菌为研究对象,采用传统的血清学分型技术和等位基因特异... 目的掌握即食食品中单核细胞增生李斯特菌(简称单增李斯特菌)的血清型、谱系和感染相关基因的分布。方法以全国食源性致病菌监测网中2007—2009年自即食食品分离的226株单增李斯特菌为研究对象,采用传统的血清学分型技术和等位基因特异性寡核苷酸PCR方法(ASO-PCR)研究其血清学分型,并采用PCR方法检测其与感染相关的基因。结果 226株单增李斯特菌血清学分型结果显示,1/2a、1/2b、1/2c、4b为主要血清型,比例分别为41.59%(94/226)、40.71%(92/226)、10.62%(24/226)和5.31%(12/226)。引起人类疾病的常见血清型1/2a、1/2b和4b菌株占87.61%(198/226)。谱系Ⅰ菌株为105株,谱系Ⅱ菌株为120株,谱系Ⅲ菌株为1株;我国绝大部分即食食品中单增李斯特菌分离株的感染相关基因缺失率较低,只有个别菌株缺失感染相关基因。结论本研究通过对分离自即食食品中的单增李斯特菌进行血清学分型、谱系分析和感染相关基因的检测,提示我国需要加强食品场所卫生管理,降低单增李斯特菌对即食食品的感染风险。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 即食食品 血清学分型 毒力基因 基因检测 食源性致病菌
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荧光免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速检测单增李斯特菌 被引量：18
6
作者 张赛 何小维 +2 位作者 刘晓云 彭运平 李文美 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2014年第11期229-234,共6页
为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法,本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备免疫磁珠;以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠IgG为标记抗体,抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗分别作为... 为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法,本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备免疫磁珠;以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠IgG为标记抗体,抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离与荧光免疫层析法相结合应用于单增李斯特菌的现场快速检测中。结果表明:荧光免疫层析试纸条对纯培养单增李斯特菌的检测限为4×105CFU/mL,联合检测方法10倍、100倍浓缩时,检测限分别为4×104CFU/mL和1×104CFU/mL。联合检测体系特异性较好,与实验室保存的10株细菌无交叉反应。人工污染样本检测限为1×104CFU/mL,同纯培养物相比检测灵敏度并没有降低。本方法的建立对于食品中单增李斯特菌的现场快速检测具有重要意义。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 抗体 免疫磁珠 荧光免疫层析 快速检测
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利用胶体金免疫层析技术快速定量检测单增李斯特菌方法的建立 被引量：16
7
作者 谢士嘉 王静 王振国 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2010年第2期126-129,共4页
〔目的〕建立胶体金免疫层析技术快速定量检测单增李斯特菌方法。〔方法〕利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立单增李斯特菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合标准曲线进行定量检测;在牛奶、橙汁、果冻等即食食品样... 〔目的〕建立胶体金免疫层析技术快速定量检测单增李斯特菌方法。〔方法〕利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立单增李斯特菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合标准曲线进行定量检测;在牛奶、橙汁、果冻等即食食品样品中添加单增李斯特菌模拟污染样品,评价该方法对半固体、液体等即食食品、可疑生物恐怖样品的检测能力。〔结果〕该法可在10min内完成定性和半定量检测,定量检测灵敏度为3.5×103cfu/ml,线性范围3.5×105～3.5×108cfu/ml,回收率在99%～101.7%之间。〔结论〕建立的检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地对样品中的单增李斯特菌进行定性、定量检测。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 胶体金 免疫层析 定量检测
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RT-PCR方法检测单核细胞增生李斯特活菌研究 被引量：12
8
作者 李善志 吴清平 +1 位作者 张菊梅 郭伟鹏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第6期641-643,共3页
目的：建立单核细胞增生李斯特活菌快速检测技术，解决PCR带来的假阳性问题。方法：采用以mRNA为基础的RT—PCR方法对单核细胞增生李斯特氏菌的hlyA基因进行检测，设计引物，扩增，并作了特异性和灵敏度比较。结果：该引物能较好地扩增... 目的：建立单核细胞增生李斯特活菌快速检测技术，解决PCR带来的假阳性问题。方法：采用以mRNA为基础的RT—PCR方法对单核细胞增生李斯特氏菌的hlyA基因进行检测，设计引物，扩增，并作了特异性和灵敏度比较。结果：该引物能较好地扩增单核细胞增生李斯特菌的特异性片断，而对其它的李斯特菌以及常见食源性致病菌无特异性扩增条带；检测的灵敏度纯菌可达到1×10^4cfu／ml，人工污染样品猪肉、虾肉和牛奶等培养12—16h，可达4．5cfu／ml（g）。结论：可以应用该方法对样品中单核细胞增生李斯特活菌进行检测，能较好地解决PCR检测所带来的假阳性问题。 展开更多
关键词 MRNA RT—PCR 单核细胞增生李斯特菌 活菌检测 hlyA基因
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即食食品中单增李斯特氏菌快速检测技术的研究进展 被引量：14
9
作者 尤祯丹 陈传君 +7 位作者 蒋玉涵 蒲春如 蒋艳 杜娟兰 张白玉 严立恒 颜其贵 韩国全 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第10期358-362,共5页
单核细胞增生李斯特氏菌引发的食品安全事件被广泛关注,它不仅会导致疾病的发生,严重时甚至还会引起感染者死亡,所以即食食品中单增李斯特菌的快速检测技术显得至关重要。本文阐述了不同地区的即食食品中单增李斯特菌的污染率,并综合分... 单核细胞增生李斯特氏菌引发的食品安全事件被广泛关注,它不仅会导致疾病的发生,严重时甚至还会引起感染者死亡,所以即食食品中单增李斯特菌的快速检测技术显得至关重要。本文阐述了不同地区的即食食品中单增李斯特菌的污染率,并综合分析了分子生物学方法、免疫学检测方法、生物传感器检测方法、光谱学检测方法等优缺点以及发展现状,为研发新型快检技术提供新思路。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 食品安全 快速检测技术 即食食品 污染
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肉及肉制品中单增李斯特菌的研究进展 被引量：14
10
作者 黄敏欣 赵文红 +1 位作者 白卫东 钱敏 《肉类工业》 2015年第3期45-49,共5页
单增李斯特菌是一种人畜共患致病菌,也是重要的食源性致病菌之一。单增李斯特菌对肉及肉制品污染严重,这将导致严峻的食品安全问题,严重威胁人类健康。综述了单增李斯特菌在肉及肉制品中的污染情况、肉及肉制品中单增李斯特菌的抑制因... 单增李斯特菌是一种人畜共患致病菌,也是重要的食源性致病菌之一。单增李斯特菌对肉及肉制品污染严重,这将导致严峻的食品安全问题,严重威胁人类健康。综述了单增李斯特菌在肉及肉制品中的污染情况、肉及肉制品中单增李斯特菌的抑制因素和检测方法,并对单增李斯特菌的亚致死状态的恢复和抗生素的耐受作用进行了展望。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 污染 抑制因素 检测方法
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单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测技术研究 被引量：13
11
作者 曹玮 王宁 +2 位作者 王晓英 刘宏生 郭云昌 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期662-666,共5页
目的建立快速检测单增李斯特菌的PCR-ELISA方法,将其应用于人工污染的食物样品检测。方法根据GenBank数据库资料,应用分子生物学软件DNAMAN6.0和Primer Premier5.0,以单增李斯特菌的致病基因hlyA为基础,选用PCR引物,应用地高辛标记试剂... 目的建立快速检测单增李斯特菌的PCR-ELISA方法,将其应用于人工污染的食物样品检测。方法根据GenBank数据库资料,应用分子生物学软件DNAMAN6.0和Primer Premier5.0,以单增李斯特菌的致病基因hlyA为基础,选用PCR引物,应用地高辛标记试剂盒,获得单增李斯特菌特异的地高辛标记片段。根据PCR目的片段序列,设计特异性捕获探针,建立了单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测方法。应用该方法对不同血清型的单增李斯特菌食品分离株进行了检测,并将PCR方法与PCR-ELISA方法对人工污染单增李斯特菌的牛奶样品的检测敏感性进行了比较。结果应用单增李斯特菌特异的PCR-ELISA方法完成检测约需6h。该方法对单增李斯特菌分离株检测的结果,与国家食源性疾病检测网的鉴定结果100%符合。经过12h的增菌培养,PCR-ELISA方法最低可从25ml样品中检出1CFU,检测敏感性为传统PCR方法的10～100倍。结论建立了单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测方法。该方法敏感性高、特异性强、可靠性好,对于提高食源性疾病预警、预测能力,增强检测的时效性和准确性,具有推广应用价值。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 食源性致病菌 PCR-ELISA 快速检测
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应用PCR快速检测单核细胞增生症李斯特菌的研究 被引量：9
12
作者 周晓辉 焦新安 +4 位作者 邓云飞 巢国祥 殷月兰 唐丽华 谈娟 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2003年第3期1-4,共4页
用聚合酶链式反应(PCR)扩增hly基因,检测单核细胞增生症李斯特菌的纯培养物及其模拟污染的生猪肉、水和牛奶。41株单核细胞增生症李斯特菌的PCR结果呈阳性,而其他李斯特菌,包括英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、西尔李斯特菌、威儿李斯特... 用聚合酶链式反应(PCR)扩增hly基因,检测单核细胞增生症李斯特菌的纯培养物及其模拟污染的生猪肉、水和牛奶。41株单核细胞增生症李斯特菌的PCR结果呈阳性,而其他李斯特菌,包括英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、西尔李斯特菌、威儿李斯特菌和格氏李斯特菌以及非李斯特菌均未出现特异性片段。这表明所扩增的hly基因3′末段850bp的DNA片段对单核细胞增生症李斯特菌具有较高的特异性。PCR对单核细胞增生症李斯特菌纯培养物的检测低限达10~5cfu·mL^(-1),对16hLEB增菌培养的模拟污染生猪肉、水和牛奶的增菌培养液用PCR捡测,结果检测生猪肉低限达400cfu·kg^(-1)、水和牛奶为400cfu·L^(-1)。整个检测过程只需24h。这表明PCR法对单核细胞增生症李斯特菌的鉴定具有特异性强、灵敏度高、速度快和易操作等优点。 展开更多
关键词 单核细胞增生症李斯特菌 快速检测 聚合酶链式反应 PCR引物 扩增条件 灵敏度试验
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PCR技术检测单核细胞增生李斯特氏菌研究进展 被引量：12
13
作者 徐伟 李素芳 刘军 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第1期95-99,112,共6页
单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是危害公共卫生和食品行业的一种重要人畜共患病致病菌。PCR技术是近年来被广泛地运用到食源性致病菌快速检测的分子生物学方法之一。就PCR技术检测单核细胞增生李斯特氏菌中的特异性鉴... 单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是危害公共卫生和食品行业的一种重要人畜共患病致病菌。PCR技术是近年来被广泛地运用到食源性致病菌快速检测的分子生物学方法之一。就PCR技术检测单核细胞增生李斯特氏菌中的特异性鉴别基因、模板DNA制备等关键因素及多重PCR、巢式PCR、反转录PCR与定量PCR等主要技术进行了综述。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 PCR检测 毒力基因 模板DNA制备 多重PCR 定量PCR
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单增李斯特菌的检测方法研究进展 被引量：12
14
作者 李云霞 陈雯雯 +3 位作者 顾晨荣 饶名祯 郭鲁申 赵渝 《上海师范大学学报（自然科学版）》 2015年第6期687-693,共7页
单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是全世界普遍公认一种重要的人畜共患食源性致病菌,其广泛存在于各种乳制品、蔬菜、肉类等食品中,对人的健康安全造成了极大的威胁.因此,如何有效地检测出单增李斯特菌的存在是食源性疾病预防与控... 单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是全世界普遍公认一种重要的人畜共患食源性致病菌,其广泛存在于各种乳制品、蔬菜、肉类等食品中,对人的健康安全造成了极大的威胁.因此,如何有效地检测出单增李斯特菌的存在是食源性疾病预防与控制的关键环节.介绍了单增李斯特菌的传统检测方法以及各种快速检测方法(免疫学方法、生物传感器、基于噬菌体检测方法和分子生物学方法). 展开更多
关键词 单增李斯特菌 食源性致病菌 检测
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猪肉中单核细胞增生李斯特菌的分离与耐药性研究 被引量：12
15
作者 石磊 王文燕 闫鹤 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第12期2826-2829,2908,共5页
了解猪肉中单核细胞增生李斯特菌的污染情况、血清型和耐药性现状。按照国标GB 4789.30-2010程序分离猪肉中单核细胞增生李斯特菌;多重PCR确定血清型;纸片扩散法检测单核细胞增生李斯特菌对抗生素的敏感性。研究结果表明273份猪肉样本中... 了解猪肉中单核细胞增生李斯特菌的污染情况、血清型和耐药性现状。按照国标GB 4789.30-2010程序分离猪肉中单核细胞增生李斯特菌;多重PCR确定血清型;纸片扩散法检测单核细胞增生李斯特菌对抗生素的敏感性。研究结果表明273份猪肉样本中有52(19.02%)个受单核细胞增生李斯特菌的污染,共检出78株该致病菌。33株(42.31%)、24株(30.71%)、16株(20.51%)、3株(3.85%)、2株(2.56%)分别被确定为血清型1/2a(或3a)、1/2b(或3b或7)、1/2c(或3c)、4a(或4c)和4b(或4d或4e)。所有菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培能、环丙沙星、左氧氟沙星、万古霉素都敏感,对四环素(20.51%)的耐药率最为严重。11.54%的菌株对临床治疗李斯特菌病的青霉素、庆大霉素、红霉素等抗生素出现耐药。tet(M)基因是单核细胞增生李斯特菌耐四环素的主要机制之一,接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药散播有直接关系。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 检测 血清型 耐药性 接合型转座子Tn916
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食品中单核细胞增生性李斯特氏菌PCR快速检测 被引量：10
16
作者 张辉 王兴龙 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期324-327,共4页
通过扩增hly基因建立检测单核细胞增生性李斯特氏菌(Lm)的PCR方法。该方法具有较强的特异性,35株经传统方法鉴定的菌株PCR结果均为阳性,而其他三种同属异种菌,包括英诺克李斯特氏菌、绵羊李斯特氏菌和威尔斯李斯特氏菌及非李斯特氏菌均... 通过扩增hly基因建立检测单核细胞增生性李斯特氏菌(Lm)的PCR方法。该方法具有较强的特异性,35株经传统方法鉴定的菌株PCR结果均为阳性,而其他三种同属异种菌,包括英诺克李斯特氏菌、绵羊李斯特氏菌和威尔斯李斯特氏菌及非李斯特氏菌均未扩增出特异性的片段。PCR方法对Lm纯培养物的最低检测限为7.3CFU/μl,对模拟污染的生猪肉和蔬菜的检测低限为4CFU/g,牛奶为4CFU/ml。应用该方法对285份食品样品检测,17份样品Lm呈阳性,结果与常规的分离培养方法完全一致。该种方法具有敏感、特异、快速及准确的优点,可用于食品中Lm的快速检测。 展开更多
关键词 食品 单核细胞增生性李斯特氏菌 聚合酶链式反应 检测
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单核细胞增生李斯特菌检测技术研究进展 被引量：12
17
作者 孙静娟 曾海娟 +5 位作者 丁承超 王广彬 翟绪昭 王淑娟 李杰 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期120-125,共6页
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是常见的食源性致病菌之一。目前,在众多单增李斯特菌的检测方法中应用较广的是免疫学检测法、分子学检测法。免疫学检测时间短,操作简单,但该方法依赖高特异性的抗体,会出现假阳性,还... 单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是常见的食源性致病菌之一。目前,在众多单增李斯特菌的检测方法中应用较广的是免疫学检测法、分子学检测法。免疫学检测时间短,操作简单,但该方法依赖高特异性的抗体,会出现假阳性,还需要进一步鉴定检测结果。分子学检测法克服了免疫学检测法不能在种的水平鉴定单增李斯特菌的缺点,省时省力,灵敏度高,但是分子学检测法需要丰富的操作经验,并且不适于现场大批量检测。新兴的代谢学检测法、光谱学检测法、生物传感器等也都有各自的优缺点。本文综合近年最新文献,就单增李斯特菌检测的最新方法、检测进展及未来发展趋势予以分析综述,以期为该菌的检测提供参考。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 检测方法 研究进展
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环介导等温扩增技术快速检测食品中的单增李斯特氏菌 被引量：12
18
作者 张体银 郑晶 +3 位作者 黄晓蓉 邵碧英 黄嫦娇 陈彬 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期200-204,共5页
采用环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测食品中的单增李斯特氏菌,并做特异性、敏感性和适用性试验。试验结果显示以单增李斯特氏菌hly基因保守区设计特异性引物,进行DNA等温扩增是可行的。3株单增李... 采用环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测食品中的单增李斯特氏菌,并做特异性、敏感性和适用性试验。试验结果显示以单增李斯特氏菌hly基因保守区设计特异性引物,进行DNA等温扩增是可行的。3株单增李斯特氏菌均扩增出特异性目的片段,而10株非单增李斯特氏菌均未产生目的片段。用环介导等温扩增法在65℃条件下,1h内可检出单增李斯特氏菌,其灵敏度达100cfu/mL,特异性为100%,无假阳性和假阴性出现。用该方法与国标方法分别检测50种样品中的单增李斯特氏菌,结果数据显示两种方法的符合率达100%,表明环介导等温扩增法具有高效、特异性强和敏感性高等特点,可满足大批量样品快速筛选的要求。 展开更多
关键词 环介导等温扩增(LAMP)技术 单增李斯特氏菌 快速检测 食品
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食品中3种致病李氏菌MPCR-DHPLC检测方法的建立 被引量：10
19
作者 王耀 曹际娟 +1 位作者 闫平平 曹远银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期158-162,共5页
应用复合PCR(multiplex PCR,MPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术建立食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的快速高通量检测方法。根据单核细胞增生李斯特... 应用复合PCR(multiplex PCR,MPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术建立食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的快速高通量检测方法。根据单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异基因序列分别设计引物,MPCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测。以94株参考菌株做特异性实验,并开展了重现性检测实验。MPCR-DHPLC方法同步检测到单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异性阳性吸收峰,未检测到李斯特菌属其他近源种和非近源种参考菌株的阳性吸收峰,且重现性良好。该方法具有很好的特异性,可以快速、准确、高通量地检测食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌,是食品微生物快速检测的新技术。 展开更多
关键词 复合PCR-变性高效液相色谱法(MPCR-DHPLC) 单核细胞增生李斯特菌 绵羊李斯特菌 英诺克李斯特菌 检测
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PCR在快速检测食品单核细胞增多性李斯特菌中的应用 被引量：11
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作者 谭炳乾 肖军 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第7期1558-1560,共3页
为应用PCR快速检测食品中的单核细胞增多性李斯特菌,设计合成了针对单核细胞增多性李斯特菌溶血素编码基因的特异性引物进行PCR扩增。结果表明,在单核细胞增多性李斯特菌中能扩增出348bp的预期片段,大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌和李斯... 为应用PCR快速检测食品中的单核细胞增多性李斯特菌,设计合成了针对单核细胞增多性李斯特菌溶血素编码基因的特异性引物进行PCR扩增。结果表明,在单核细胞增多性李斯特菌中能扩增出348bp的预期片段,大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌和李斯特属的绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌、西尔李斯特菌和格氏李斯特菌的扩增结果均为阴性。用该方法检测了81份食品样品,检测结果与分离鉴定方法一致,表明本方法可用于食品中单核细胞增多性李斯特菌的快速检测。检测样品中,单核细胞增多性李斯特菌污染率为8.6%,以禽肉类制品中的污染率最高。 展开更多
关键词 PCR 单核细胞增多性李斯特菌 hly 检测
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