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5种重要虫媒病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用 被引量：6
1
作者 石莹 田绿波 +3 位作者 樊学军 陈肖潇 常晓松 杨雨 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第21期3604-3607,共4页
目的建立森林脑炎、乙型脑炎、登革热、基孔肯雅和刚果-克里米亚出血热5种虫媒病毒的液相蛋白芯片检测方法,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。方法将病毒抗原包被微球,采用间接法原理,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化5种虫媒病毒... 目的建立森林脑炎、乙型脑炎、登革热、基孔肯雅和刚果-克里米亚出血热5种虫媒病毒的液相蛋白芯片检测方法,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。方法将病毒抗原包被微球,采用间接法原理,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化5种虫媒病毒液相蛋白芯片检测方法。对临床样本进行检测,评价液相蛋白芯片方法的敏感性、准确性。结果以病毒抗体和阳性血清建立的5种虫媒病毒液相蛋白芯片检测方法,病毒抗体及生物素标记二抗的孵育时间均为1 h,生物素标记羊抗兔/鼠/人Ig G的最佳稀释度为1∶100,能对5种虫媒病毒进行准确检测。该方法具有高通量、快速、敏感、特异等特点。结论本研究所建立的5种虫媒病毒液相蛋白芯片检测方法,可用于这5种虫媒病毒的同时筛查检测,适用于国境口岸对虫媒病毒进行筛查检测,能提高检测的效率,满足口岸检疫中快速检验的要求。 展开更多
关键词 森林脑炎病毒 乙型脑炎病毒 登革热病毒 基孔肯雅病毒 刚果-克里米亚出血热病毒 液相蛋白芯片 检测
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液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的应用比较 被引量：3
2
作者 崔金环 杨光 +3 位作者 陈姝 李鸣 梁彩红 曾劲伟 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第6期1050-1051,1054,共3页
[目的]比较液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的临床应用效果,并探讨液相蛋白芯片应用于临床检验的可行性。[方法]分别用液相与固相蛋白芯片方法检测45例临床送检样本的AFP、CA125、CA242及CEA,对两种方法的操作步骤、有效检测范围、... [目的]比较液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的临床应用效果,并探讨液相蛋白芯片应用于临床检验的可行性。[方法]分别用液相与固相蛋白芯片方法检测45例临床送检样本的AFP、CA125、CA242及CEA,对两种方法的操作步骤、有效检测范围、参考临界值及检测结果进行比较。[结果]与固相蛋白芯片相比,液相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的操作至少节省1h,标本用量节省80μl,线性范围至少增大1倍;两种方法检测AFP、CA125、CA242及CEA的参考临界值相同,阴阳性判断结果的符合率分别为97.78%(44/45)、86.67%(39/45)、88.89%(40/45)、86.67%(39/45)。统计学分析表明两种方法检测的阴阳性结果无明显差异。[结论]液相蛋白芯片检测多肿瘤标志物具有操作简便、标本用量少、线性范围广、准确度高的优点,可推广应用于临床检验。 展开更多
关键词 液相蛋白芯片 固相蛋白芯片 肿瘤标记物
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基于流式量子点微球技术的甲乙型流感病毒抗原检测方法的建立和初步应用分析
3
作者 夏成静 李宝花 +3 位作者 郭燕妳 周小合 张润玲 牛英波 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第1期126-130,共5页
目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪... 目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪上对已知浓度的甲乙型流感病毒抗原分别和同时进行检测,对检测条件进行优化,建立甲乙型流感病毒抗原联检方法,利用此方法对临床样本进行检测,与实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qPCR)进行比对,验证此方法的临床性能。结果建立了甲乙型流感病毒抗原联检方法,该方法的甲乙型流感病毒抗原的检出限分别为26.1 pg/ml和10.7 pg/ml,测量范围均为15.3~250000 pg/ml。对临床样本检测,与qPCR比对一致性良好,阳性符合率为57.4%,阴性符合率为100%,总符合率71.6%,并优于临床常用胶体金试剂(阳性符合率为56.49%,阴性符合率为99.75%)。结论此流式量子点微球多重检测方法可以用于甲乙型流感病毒抗原的联检,其灵敏度较高、特异度好、检测范围广,可以为呼吸道常见病毒多重检测打下良好基础,在临床上具有应用前景。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 乙型流感病毒 量子点编码微球 液相蛋白芯片
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通过网络药理学和蛋白芯片研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的潜在机制
4
作者 谢泽宇 许一笑 +2 位作者 郑梦圆 郑静茹 姚立 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期78-90,共13页
目的 通过网络药理学和蛋白芯片研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的潜在机制。方法 鳖甲煎口服液的化学成分、潜在靶点及肝纤维化相关基因均来自开放源数据库。然后,利用Autodock vina对目标蛋白和化合物进行分子对接。利用PyMOL对对接构象... 目的 通过网络药理学和蛋白芯片研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的潜在机制。方法 鳖甲煎口服液的化学成分、潜在靶点及肝纤维化相关基因均来自开放源数据库。然后,利用Autodock vina对目标蛋白和化合物进行分子对接。利用PyMOL对对接构象进行可视化。随后用蛋白芯片比较AngⅡ诱导的人肝星状细胞(HSC-LX2)和鳖甲煎口服液处理的HSC-LX2磷酸化蛋白(DEPs),以验证上述结果。结果 鳖甲煎口服液抗肝纤维化的网络药理学GO和KEGG通路富集分析结果表明,关键信号通路为PI3K/Akt、MAPK和Ras信号通路。分子对接的结论表明,活性物质(β-谷甾醇、槲皮素、山柰酚)对关键靶点(TNF、AKT1、IL6)具有较高的亲和力。同时网络药理学的结果与蛋白芯片的结果相吻合。结论 鳖甲煎口服液治疗肝纤维化主要抑制Ras信号通路的活性,进而抑制MAPK和PI3K/Akt信号通路,包括抑制TNF、AKT1和IL6。上述通路蛋白还与鳖甲煎口服液具有活血化瘀、软坚散结的作用有关。这些途径可作为肝纤维化的治疗靶点。 展开更多
关键词 鳖甲煎口服液 肝纤维化 机制 网络药理学 蛋白芯片
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液相蛋白芯片检测三种肿瘤标志物反应模式的建立及方法学评价
5
作者 陈玮 李妙艳 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第47期3-6,共4页
目的建立用液相蛋白芯片检测人血清三种肿瘤标志物的反应模式，并对其进行方法学评价。方法将癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和总前列腺特异性抗原（tPSA）的包被抗体分别交联于不同荧光编码的微球上，并自行制备生物素标记抗体和抗... 目的建立用液相蛋白芯片检测人血清三种肿瘤标志物的反应模式，并对其进行方法学评价。方法将癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和总前列腺特异性抗原（tPSA）的包被抗体分别交联于不同荧光编码的微球上，并自行制备生物素标记抗体和抗原标准品，建立双抗体夹心反应模式，评价液相蛋白芯片的检测范围、最低检测限、精密度等指标；将检测结果与化学发光免疫分析（CLIA）、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）进行相关性分析。结果CEA、AFP、tPSA的线性范围分别为0．063～200、0．052—66．6、0．008～10ng／ml；最低检测限分别为31．3、13．0、5．2pg／ml；批内变异系数（cv）为6．2％～9．1％，批间CV为7．5％-13．5％；检测100（109）份临床血清标本的灵敏度为96．2％～98．2％，特异度为97．7％～98．2％，准确度为97％-98％；液相蛋白芯片与CLIA及TRFIA结果均呈明显正相关，P均〈0．001。结论液相蛋白芯片检测多种肿瘤标志物具有线性范围广、灵敏度高、重复性好、操作简便、标本用量少等优点，具有临床应用潜力。 展开更多
关键词 液相蛋白芯片 肿瘤标志物 方法学评价
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蛋白质组学技术研究进展 被引量：10
6
作者 刘军莲 李勇枝 +4 位作者 高建义 盖玉清 王静 薛春美 辛冰牧 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期151-156,共6页
随着现代科学技术的飞速发展,现代生物学技术已经发展到后基因组时代,包括人类在内的几十种生物体基因组测序已经完成,生命科学研究的重点从结构基因组研究转移到后基因组时代——功能基因组的研究,蛋白质组学研究是功能基因组一个重要... 随着现代科学技术的飞速发展,现代生物学技术已经发展到后基因组时代,包括人类在内的几十种生物体基因组测序已经完成,生命科学研究的重点从结构基因组研究转移到后基因组时代——功能基因组的研究,蛋白质组学研究是功能基因组一个重要的组成部分。因此,与之相适应,蛋白质组学研究技术也是日新月异,层出不穷,除了最经典的二维凝胶电泳技术,多维液相色谱技术,同位素标记亲和标签技术相继发展起来,蛋白质芯片技术及噬菌体展示技术也得到了较为广泛的应用。本文针对蛋白质组学研究上述关键技术进行了综述。 展开更多
关键词 蛋白质组学 二维凝胶电泳 多维液像色谱 同位素标记亲和标签技术 蛋白质芯片 噬菌体展示技术
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基于蛋白芯片的慢性肾衰舌苔上清液中蛋白研究 被引量：5
7
作者 程亚伟 何磊 +6 位作者 廖萍 胡衡 金亚明 李福凤 王文静 郝一鸣 王忆勤 《世界科学技术-中医药现代化》 2011年第4期616-621,共6页
目的:通过比较慢性肾衰(CRF)患者与正常对照组人群舌苔上清液中蛋白表达谱的差异,筛选慢性肾衰舌苔蛋白标志物并建立预测模型,探讨其在慢性肾衰诊断中的意义。方法:对67例慢性肾衰患者和38例正常对照组人群舌苔上清液样本,运用SELDI-TOF... 目的:通过比较慢性肾衰(CRF)患者与正常对照组人群舌苔上清液中蛋白表达谱的差异,筛选慢性肾衰舌苔蛋白标志物并建立预测模型,探讨其在慢性肾衰诊断中的意义。方法:对67例慢性肾衰患者和38例正常对照组人群舌苔上清液样本,运用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术筛选慢性肾衰舌苔蛋白标志物,经生物信息学分析建立预测模型并进行验证。结果:①慢性肾衰组67例和正常对照组38例舌苔样本经SELDI-TOF-MS技术测定,质荷比1000～20000范围内共检测到242个蛋白峰,经生物信息学统计分析,有13个差异质谱峰有统计学意义(P<0.01),其中m/z 1092.68、m/z 1508.26等7个差异质谱峰在慢性肾衰组中呈高表达;m/z 13302.5、m/z 14330.7等6个差异质谱峰在慢性肾衰组中呈低表达。②利用层次聚类算法进行层次聚类分析和主成分分析(PCA),结果显示,慢性肾衰组与正常对照组样本之间区分较明显,但均存在部分重叠。③经生物信息学分析建立慢性肾衰预测模型,最终得到m/z 1049.61、m/z 1076.94、m/z 15295.7等7个差异质谱峰组成的生物标记物可以将慢性肾衰组和正常对照组样品较好的分类(最终预测模型的灵敏度为61.4%,特异度为57.3%,预测正确率为64.4%)。结论:该研究运用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术,初步筛选出了慢性肾衰舌苔蛋白标志物并建立了预测模型,为慢性肾衰的诊断研究提供客观依据。 展开更多
关键词 慢性肾功能衰竭(CRF) 舌苔上清液 蛋白芯片 SELDI-TOF-MS
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