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Catalytic domain of PDC-E2 contains epitopes recognized by antimitochondrial antibodies in primary biliary cirrhosis 被引量:13
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作者 Sandra Braun Christoph Berg +2 位作者 Sandra Buck Michael Gregor Reinhild Klein 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第8期973-981,共9页
AIM:To search for further immunodominant peptides of the pyruvate dehydrogenase complex E2-component (PDC-E2) recognized by antimitochondrial antibodies (AMA) in primary biliary cirrhosis (PBC). METHODS:Sera from 95 p... AIM:To search for further immunodominant peptides of the pyruvate dehydrogenase complex E2-component (PDC-E2) recognized by antimitochondrial antibodies (AMA) in primary biliary cirrhosis (PBC). METHODS:Sera from 95 patients with PBC were tested by enzyme-linked immunosorbent assay against 33 synthetic overlapping peptides (25 amino acids; aa) covering the entire length of the E2-subunit of PDC-E2. Furthermore,the inner lipoyl peptide 167-184 was used in an unlip oylated and a lipoylated form as well as coupled to ovalbumin. Sera from 11 AMA negative/ANA posit ive PBC patients,63 patients with other liver disorders and 22 healthy blood donors served as controls.RESULTS:Of the 95 PBC-sera,74% reacted with the peptide 475-499 and 58% with the pept ide 407-431 located within the catalytic domain of PDC-E2. Patients with other disorders or healthy controls were positive in only up to 18%. Antibodies to the unlipoylatedand lip oylated pept ide 167-184 within the inner lipoyl domain were found in only 5% and 11% of the PBC sera,respectively; using ovalbumin-coupled peptides,the incidence increased up to 57% (unlipoylated form). CONCLUSION:Peptides within the catalytic site of PDC-E2 rather than the previously reported lipoyl binding peptide 167-184 may represent major immunodomin ant epitopes recognized by AMA in PBC. 展开更多
关键词 Anti-M2 Epitope mapping E2-subunit Pyruvate dehydrogenase complex Inner lipoyl domain Active site Catalytic domain Primary biliary cirrhosis
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β-环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究 被引量:6
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作者 何品刚 方禹之 +2 位作者 铃木 嚴长 哲郎 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第6期893-895,共3页
β-环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究何品刚,方禹之,铃木,嚴长,哲郎(华东师范大学化学系,上海,200062)(东北大学药学部,仙台980,日本国)关键词硫辛酰-β-环糊精衍生物,自组单分子膜,... β-环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究何品刚,方禹之,铃木,嚴长,哲郎(华东师范大学化学系,上海,200062)(东北大学药学部,仙台980,日本国)关键词硫辛酰-β-环糊精衍生物,自组单分子膜,金电极近年来,为在分子水平上控制和... 展开更多
关键词 硫辛酰 环糊精 自组单分子膜 金电极
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捻转血矛线虫BLAODA蛋白单克隆抗体的制备及在诊断中的初步应用 被引量:3
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作者 卡力比夏提·艾木拉江 文兆海 +4 位作者 陆明敏 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期753-760,共8页
为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4... 为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4、2E3和5B4。将这4株杂交瘤细胞分别接种小鼠腹腔,制备腹水,用层析柱纯化抗体并建立双抗体夹心ELISA方法。结果显示:筛选出的1B2、1G4、2E3和5B4细胞株产生的抗体效价高、特异性强,其抗体亚型均为Ig G1型,轻链均为kappa型,纯化的小鼠腹水的效价均可达1∶2^(22);基于抗捻转血矛线虫BLAODA的单抗1B2、5B4建立了双抗体夹心ELISA检测方法,其敏感性为90.6%,特异性为90.6%。本研究获得了捻转血矛线虫抗BLAODA单克隆抗体并建立了双抗体夹心ELISA方法,为捻转血矛线虫诊断试剂盒的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 BLAODA蛋白 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
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硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力 被引量:2
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作者 黄涛 黄开勋 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第2期65-68,共4页
目的考察硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力。方法通过与125I-胰岛素对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的竞争结合,比较硫辛酰胰岛素(B29LA-ins)和天然猪胰岛素的受体结合能力。结果B29LA-ins与胰岛素受体的结合能力为天然猪胰岛素的4.8... 目的考察硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力。方法通过与125I-胰岛素对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的竞争结合,比较硫辛酰胰岛素(B29LA-ins)和天然猪胰岛素的受体结合能力。结果B29LA-ins与胰岛素受体的结合能力为天然猪胰岛素的4.8倍。结论硫辛酸对LysB29的修饰提高了胰岛素的受体结合能力,这可能是促使其体内作用时间延长的因素之一。 展开更多
关键词 硫辛酸 胰岛素 硫辛酰胰岛素 胰岛素受体 竞争结合
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外周血FASN、ACSL1、AceCS1检测对儿童孤独症的诊断分析 被引量:1
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作者 胡丁文 《内蒙古医学杂志》 2022年第4期389-391,395,共4页
目的探讨外周血脂肪酸合酶(FASN)、长链脂酰辅酶A合成酶1(ACSL1)、乙酰辅酶A合成酶1(AceCS1)检测对儿童孤独症的诊断分析。方法选择2016年4月至2018年4月我院收治的120例高度疑似孤独症患儿,所有患儿均接受全面神经精神检查及外周血FASN... 目的探讨外周血脂肪酸合酶(FASN)、长链脂酰辅酶A合成酶1(ACSL1)、乙酰辅酶A合成酶1(AceCS1)检测对儿童孤独症的诊断分析。方法选择2016年4月至2018年4月我院收治的120例高度疑似孤独症患儿,所有患儿均接受全面神经精神检查及外周血FASN、ACSL1、AceCS1检测。依据患儿是否发生孤独症分组,比较两组患儿FASN、ACSL1、AceCS1水平,分析外周血FASN、ACSL1、AceCS1检测对儿童孤独症的诊断价值。结果120例高度疑似孤独症患儿,依据儿童的行为特征,采集患儿病史,并行全面神经精神检查,确诊84例,占比70.00%(84/120);孤独症组FASN、ACSL1、AceCS1高于非孤独症组,差异有统计学意义(P<0.05);进行Logistic回归分析结果显示,外周血FASN、ACSL1、AceCS1高表达是儿童孤独症发生的影响因素(OR>1,P<0.05);绘制接受者操作特征曲线(ROC曲线)结果显示,血清FASN、ACSL1、AceCS1水平单独及联合检测诊断孤独症的曲线下面积(AUC)分别为0.792、0.784、0.754、0.853,其中联合诊断价值较高。结论外周血FASN、ACSL1、AceCS1的高表达可能参与孤独症的发生与发展,临床可通过联合检测三者水平变化为诊断孤独症提供依据。 展开更多
关键词 孤独症 脂肪酸合酶 长链脂酰辅酶A合成酶1 乙酰辅酶A合成酶1
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野油菜黄单胞菌中LipB-LipA是唯一的硫辛酰化途径 被引量:1
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作者 马建荣 刘安娜 +2 位作者 张文彬 毛雅慧 余永红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1729-1740,共12页
【目的】硫辛酸是细胞内重要的辅因子,参与多种基础代谢过程。野油菜黄单胞菌(Xcc)是十字花科植物黑腐病的病原菌,在全球范围内引起植物病害,引起重大经济损失。为此研究Xcc中硫辛酸的合成途径,为防治黑腐病提供新思路。【方法】利用大... 【目的】硫辛酸是细胞内重要的辅因子,参与多种基础代谢过程。野油菜黄单胞菌(Xcc)是十字花科植物黑腐病的病原菌,在全球范围内引起植物病害,引起重大经济损失。为此研究Xcc中硫辛酸的合成途径,为防治黑腐病提供新思路。【方法】利用大肠杆菌硫辛酸合成关键酶LipA和LipB序列,同源比对发现Xcc基因组中XC0713(XccLipA)和XC0712(XccLipB)具有较高的同源性。采用PCR方法分别扩增XccLipA和XccLipB基因,并连入表达载体pBAD24M后分别互补大肠杆菌突变株,并检测转化子生长表型。利用同源重组方法,获得替换突变株,分析其生长性状,并利用剪叶法检测替换突变株对寄主植物甘蓝的致病力。【结果】XcclipA和XcclipB能分别恢复大肠杆菌lipA和lipB突变株在基础培养上生长。XcclipA和XcclipB都是菌体生长的必需基因,不能直接被敲除。但导入pSRK-EclplA后,成功分别获得XcclipA和XcclipB敲除突变株。两种EclplA替换后的敲除突变株在基础培养上都不能生长,添加硫辛酸后能恢复生长表型。在丰富培养基上,XcclipB敲除突变株能正常生长,而XcclipA敲除突变株不能生长,添加硫辛酸后生长也能恢复。分别测定不同培养条件下生长曲线,也得到同样的结果。寄主植物侵染结果显示,与野生菌相比,XcclipA敲除突变株致病性几乎丧失,而XcclipB敲除突变株的致病性与野生菌无显著性差异。【结论】Xcc中lipA编码硫辛酸合成酶,lipB编码辛酰转移酶,两者都是必需基因。Xcc中LipB-LipA途径是唯一的硫辛酰化途径,而没有外源性的硫辛酸途径。lipA敲除后显著影响Xcc的致病性,可作为抗菌药物筛选的靶点。 展开更多
关键词 野油菜黄单胞菌 硫辛酸合成 硫辛酸合成酶LipA 致病性分析
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黄曲条跳甲线粒体源硫辛酸蛋白连接酶的序列分析及表达 被引量:1
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作者 贺华良 宾淑英 +2 位作者 廖泓之 吴仲真 林进添 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期351-355,共5页
采用转录组测序和荧光定量PCR等方法,分析了蔬菜害虫黄曲条跳甲lpl基因(Pslpl基因)的cDNA序列及基因表达情况.结果表明,Pslpl基因cDNA的开放阅读框为1 182 bp,编码393个氨基酸,N端含有13个氨基酸的线粒体信号肽.Pslpl基因在黄曲条跳甲... 采用转录组测序和荧光定量PCR等方法,分析了蔬菜害虫黄曲条跳甲lpl基因(Pslpl基因)的cDNA序列及基因表达情况.结果表明,Pslpl基因cDNA的开放阅读框为1 182 bp,编码393个氨基酸,N端含有13个氨基酸的线粒体信号肽.Pslpl基因在黄曲条跳甲雌、雄成虫的不同组织器官中都有表达,头部和中肠相对较高.雌、雄成虫之间对比分析发现,雄虫各组织器官Pslpl基因表达量均比雌虫对应组织器官中的表达量低,但在生殖系统中相反.Pslpl基因cDNA的鉴定和表达分析为研究黄曲条跳甲硫辛酸蛋白连接酶的功能及蛋白硫辛酸修饰奠定了前期基础. 展开更多
关键词 黄曲条跳甲:线粒体 硫辛酸蛋白连接酶 荧光定量PCR
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硫辛酰维格列汀对2型糖尿病(T2DM)大鼠降糖作用的研究
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作者 韩海林 董爱国 +6 位作者 潘瑞艳 周洪盼 曲俊生 王佳 李娜 陈丽丽 曲梅花 《青岛医药卫生》 2014年第1期9-11,共3页
目的观察硫辛酰维格列汀对2型糖尿病大鼠血糖的影响。方法选用雄性Wistar大鼠,高脂高糖饲料喂养4周后小剂量注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型,随机将大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、胰岛素糖尿病组、硫辛酰维格列汀糖尿病组。分... 目的观察硫辛酰维格列汀对2型糖尿病大鼠血糖的影响。方法选用雄性Wistar大鼠,高脂高糖饲料喂养4周后小剂量注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型,随机将大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、胰岛素糖尿病组、硫辛酰维格列汀糖尿病组。分别测定给药后0、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、24h的血糖变化。结果注射链脲佐菌素72h后造模大鼠血糖均明显高于注射前(P%0.05)和正常对照组(P〈0.05)。与正常对照组和糖尿病模型组相比,胰岛素糖尿病组在注射胰岛素后0.5~4h,血糖变化差异有统计学意义(P〈0.05);硫辛酰维格列汀糖尿病组在灌胃给药3~10h,血糖变化差异有统计学意义(P〈0.05)。结论硫辛酰维格列汀和胰岛素有不同程度的降血糖作用,相比胰岛素,硫辛酰维格列汀降糖作用更加持久。 展开更多
关键词 硫辛酰维格列汀 2型糖尿病 血糖
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